劉 婕 劉賢勇 蔡建平 林昆華 索 勛**

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，北京 100193； 2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，甘肅蘭州 730046)

1674年列文虎克(Antonie van Leeuwenhoek)首先在兔膽管中發(fā)現(xiàn)斯氏艾美耳球蟲Eimeriasteidai卵囊，1875年Schneider以德國動物學(xué)家Theodor Eimer之名建立艾美耳屬(GenusEimeria)，但直到1891年法國著名獸醫(yī)學(xué)家、現(xiàn)代獸醫(yī)寄生蟲學(xué)主要奠基人阿爾瑟德·瑞利(Louis-Joseph Alcide Railliet)等首先報(bào)道罹病雞盲腸中存在大量柔嫩艾美耳球蟲(Eimeriatenella，當(dāng)時(shí)稱Coccidiumtenellum，1913年由Railliet重新命名為現(xiàn)名)卵囊(Railliet，1913)，才將艾美耳球蟲與雞的嚴(yán)重消化道損傷聯(lián)系起來(Chapman, 2014)。此后Railliet等對家養(yǎng)雞和鵪鶉等的一系列調(diào)查及Harold B. Fantham、Walter T. Johnson、Edward E. Tyzzer等球蟲學(xué)先驅(qū)們對球蟲生活史、球蟲感染的宿主特異性和致病性、雞球蟲種的分類及流行調(diào)查系列研究，使人們充分認(rèn)識到球蟲病對養(yǎng)雞生產(chǎn)的重大危害。

1904年北洋馬醫(yī)學(xué)堂建立，以實(shí)驗(yàn)科學(xué)為主要理論基礎(chǔ)的西方現(xiàn)代獸醫(yī)學(xué)正式傳入中國，開始了病原生物學(xué)教學(xué)和研究的萌芽(李青山，2015)。1936年7月，中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會成立，但是由于人力、物力、財(cái)力不足及戰(zhàn)爭環(huán)境的影響，科研工作受到了極大地制約，第二年學(xué)會工作就陷入了停滯狀態(tài)。新中國成立后，百業(yè)待興，1950年起，熊大仕等畜牧獸醫(yī)界人士在北京發(fā)起恢復(fù)學(xué)會的活動，科研工作在動蕩中艱難進(jìn)行(http://www.caav.org.cn/showNewsXHJSDetail.asp?nsId=13)。自70年代末，孔繁瑤開始組織開展獸醫(yī)寄生蟲培訓(xùn)班，介紹國際寄生蟲學(xué)進(jìn)展，極大地推動了我國寄生蟲學(xué)的發(fā)展。1986年，孔繁瑤等獸醫(yī)寄生蟲學(xué)家在廣西南寧創(chuàng)立了中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會寄生蟲學(xué)分會，獸醫(yī)寄生蟲學(xué)方面的研究工作進(jìn)入了一個(gè)新的局面。

第二次世界大戰(zhàn)結(jié)束后，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步與發(fā)展，禽類養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)入迅速發(fā)展階段，開始步入機(jī)械化(趙義斌，1991)，50年代末在我國北京、上海等主要城市周邊開始出現(xiàn)集約化養(yǎng)雞生產(chǎn)，雖然只是處于萌芽階段，但是有雞的地方，就有雞球蟲的存在(索勛，1998)，伴隨著集約化養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展，雞球蟲病的暴發(fā)與蔓延也隨之而來。1951年廖延雄等發(fā)表的《南昌數(shù)種重要的家禽內(nèi)寄生蟲病》，對雞球蟲病的流行情況及藥物防治進(jìn)行論述，是我國雞球蟲病流行調(diào)查的首次報(bào)道。20世紀(jì)60年代初，熊大仕帶領(lǐng)學(xué)生在國內(nèi)開展雞球蟲病及其防治的研究，但由于文革時(shí)期帶來的一些限制因素，80年代才將研究的內(nèi)容整理成文、發(fā)表見刊。改革開放后，隨著我國經(jīng)濟(jì)建設(shè)的快速發(fā)展，集約化養(yǎng)雞生產(chǎn)日新月異，至1990年全國肉雞出欄量達(dá)到21億(劉春芳等，2011),雞球蟲病研究也如雨后春筍般迅速展開?？追爆?、許綬泰、汪志楷、蔣金書、林昆華、張勤、楊振中、史天衛(wèi)、段嘉樹、謝明權(quán)等獸醫(yī)寄生蟲學(xué)家先后組織與帶領(lǐng)研究生和研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了雞球蟲病的流行病學(xué)、藥物防治和藥物研制、抗藥性評價(jià)、免疫預(yù)防、雞胚和細(xì)胞培養(yǎng)、早熟選育等系列研究，取得了一系列進(jìn)展。我國學(xué)者仿制合成了氯苯胍、氯羥吡啶、二硝托胺、尼卡巴嗪、地克珠利、馬杜霉素等抗球蟲藥物，研制生產(chǎn)了海南霉素和雞球蟲病早熟致弱活卵囊疫苗，成功主辦第二屆亞洲球蟲病國際大會和第十屆世界球蟲病大會。至今，我國學(xué)者在國際學(xué)術(shù)期刊年發(fā)表球蟲病研究論文已近PubMed收錄該領(lǐng)域年發(fā)表論文數(shù)的40%，成為國際球蟲病研究的主力軍。

目前，美國農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)研究中心動物寄生蟲病研究所寄生蟲學(xué)家、美國科學(xué)院院士Jitender P. Dubey博士正著手組織編寫《家畜、寵物和人的球蟲病》專著，旨在分析過去28年間即1990年至今的球蟲病的研究概況，本文作者索勛受邀參與編寫中國雞球蟲病研究一章。而到2018年為止，國內(nèi)中文期刊已發(fā)表的雞球蟲研究、診療或報(bào)道相關(guān)文獻(xiàn)高達(dá)3 600余篇(數(shù)據(jù)來自中國知網(wǎng))，數(shù)目龐大、內(nèi)容繁多，發(fā)表時(shí)間的年限跨度長。所以，不僅是1990年以后的研究對分析本領(lǐng)域的研究發(fā)展具有參考價(jià)值，1990年以前的早期研究同樣是我國雞球蟲研究發(fā)展進(jìn)程中不可忽視的重要一筆。因此，本文選取1990年作為時(shí)間截點(diǎn)，對以“雞球蟲”為主題在“中國知網(wǎng)”和“萬方數(shù)據(jù)庫”中進(jìn)行檢索并對查找的文獻(xiàn)逐一遴選研究性文章，歸納我國雞球蟲研究的早期發(fā)展概況。從發(fā)表文獻(xiàn)的時(shí)間來看(圖1)，盡管我國對雞球蟲及雞球蟲病的研究到目前為止有近70年的歷史，但可以說，我國雞球蟲病研究真正起步始于1980年代，查明病原、明確流行特點(diǎn)、仿制藥物合成工藝、藥效評價(jià)等是當(dāng)時(shí)主要的研究內(nèi)容。

圖1 1951—1990年國內(nèi)主要期刊歷年發(fā)表雞球蟲病研究文章數(shù)量Fig.1 The number of articles about coccidiosis research published in major domestic journals from 1951 to 1990

1 研究技術(shù)

在早期雞球蟲研究中，觀察描述是基本方法，尤其是在蟲種分布的調(diào)查方面，通過對雞球蟲卵囊、裂殖體等不同發(fā)育階段蟲體的形態(tài)特征(王善志, 1980)與寄生部位的描述(林昆華等, 1981；張寶祥等, 1986)等鑒定蟲種及流行情況，無疑這些結(jié)果的準(zhǔn)確性存在較大誤差。伴隨著許多技術(shù)與學(xué)科的發(fā)展，實(shí)驗(yàn)寄生蟲學(xué)在60年代以后逐步興起(索勛等，2003)，在描述寄生蟲學(xué)的基礎(chǔ)上，實(shí)驗(yàn)技術(shù)成為研究雞球蟲形態(tài)、發(fā)育及致病性等方面的重要手段。

研究雞球蟲最基本的一點(diǎn)就是要明確蟲種，種等分類學(xué)的問題搞不清，治療等相關(guān)研究就無法開展。而在自然狀態(tài)下，雞球蟲病往往是混合感染，通過單卵囊分離感染(林維慶等，1980；陳建斌等，1988)獲得純種為種的鑒定提供了一個(gè)有效的方法。此外，還引進(jìn)和建立起一系列球蟲學(xué)研究的基本技術(shù)，比如：改良韋氏法純化卵囊以減少雜質(zhì)，提高收獲量(朱冠等, 1987)，用更簡便、成本更低的方法收取大量純凈的裂殖子(Xieetal., 1990)，尋求適宜濃度的胰酶和雞膽汁實(shí)現(xiàn)子孢子的體外脫囊(趙開元，1985)。隨著生物技術(shù)的崛起，特別是在19世紀(jì)70年代以后，獸醫(yī)寄生蟲的研究有了新面貌(李祥瑞等，1992)。其他技術(shù)逐漸滲透，如利用切片技術(shù)觀察球蟲的內(nèi)生性發(fā)育(張振嵐等, 1990)，利用電鏡技術(shù)觀察卵囊的脫囊過程(朱冠等, 1990)以及人們逐漸認(rèn)識到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在原蟲研究中的重要性(李觀娣，1984)。

2 流行病學(xué)

80年代，養(yǎng)雞業(yè)的集約化程度越來越高，規(guī)模不斷擴(kuò)大(趙義斌，1991)，雞球蟲病也在養(yǎng)雞業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展中更加受到養(yǎng)殖戶及科研工作者的重視。認(rèn)識雞球蟲病的流行病學(xué)特點(diǎn)對雞球蟲病防治至關(guān)重要。早在1959年，在對雞內(nèi)寄生蟲調(diào)查時(shí)就涉及到雞球蟲的形態(tài)描述(何承德，1959)，到1990年，可查到的發(fā)表于國內(nèi)主要期刊的相關(guān)報(bào)道共有17篇,多是對某一地區(qū)雞球蟲種類進(jìn)行初步調(diào)查。

當(dāng)時(shí)，在世界范圍內(nèi)，對雞球蟲蟲種數(shù)目的認(rèn)定并不統(tǒng)一，根據(jù)Becker(1959)的論述，有8種雞球蟲，加上Edgar等(1964)發(fā)現(xiàn)的新種，可達(dá)13種之多。當(dāng)時(shí)大部分學(xué)者公認(rèn)有以下9種：柔嫩艾美耳球蟲Eimeriatenella、堆型艾美耳球蟲E.acervulina、早熟艾美耳球蟲E.praecox、毒害艾美耳球蟲E.necatrix、巨型艾美耳球蟲E.maxima、布氏艾美耳球蟲E.bruntti、和緩艾美耳球蟲E.mitis、哈氏艾美耳球蟲E.hagani、變位艾美耳球蟲E.mivati(林昆華等，1981)(哈氏艾美耳球蟲和變位艾美耳球蟲現(xiàn)已認(rèn)為是無效種)。明確蟲種是重點(diǎn)，并且這在任何時(shí)候的流行病學(xué)調(diào)查中都是首要且基本的任務(wù)。80年代以前，我國并沒有整理出流行于我國的雞球蟲病系統(tǒng)資料，所以80年代及以后所進(jìn)行的雞球蟲流行病學(xué)在當(dāng)時(shí)對研究區(qū)系分布具有不可替代的重要參考價(jià)值。

2.1 蟲種鑒定

蟲種鑒定的依據(jù)主要包括4個(gè)方面：卵囊形態(tài)特征(表1)、最短潛在期、最短孢子化時(shí)間以及蟲體寄生部位。卵囊的形態(tài)學(xué)觀察主要包括卵囊的顏色、大小、形狀，有無卵膜孔和殘?bào)w，以及極體的形狀、數(shù)目及位置(林昆華等, 1981；白啟, 1981；廖麗芳等, 1984；朱冠等, 1986)。由于當(dāng)時(shí)計(jì)算機(jī)等電子設(shè)備的使用并未在我國普及，科研工作者均是通過光學(xué)顯微鏡觀察后手繪作圖。潛在期與最短孢子化時(shí)間的測定可能由于地方株不同、培養(yǎng)的溫度等環(huán)境因素不同以及感染宿主的個(gè)體差異等原因，不同文獻(xiàn)中所報(bào)道的均有不同。對于寄生部位的觀察則是將感染球蟲后一定時(shí)間的雞剖殺，取腸道，觀察腸道病變，刮取腸黏膜，抹片鏡檢，確定蟲體的寄生部位以及腸道病變部位與特征。

表1 卵囊形態(tài)特征Tab.1 Morphological characteristics of oocysts of chicken coccidia

圖2 雞球蟲卵囊形態(tài)Fig.2 The shape of chicken coccidian oocysts參考文獻(xiàn)(林昆華等，1981；郭媛華，1983；黃德生，1986)繪制。a.巨型艾美耳球蟲; b.布氏艾美耳球蟲; c.柔嫩艾美爾球蟲; d.毒害艾美耳球蟲; e.早熟艾美耳球蟲; f.堆型艾美耳球蟲; g.和緩艾美耳球蟲。Reference: Lin et al.,1981；Guo,1983；Huang,1986. a. E. maxima; b. E. brunette; c. E. tenella; d. E. necatrix; e. E. praecox; f. E. acervulina; g. E. mitis.

2.2 流行特點(diǎn)

只有當(dāng)外界環(huán)境中的球蟲卵囊完成孢子化后才具備感染能力，而溫度與濕度影響著卵囊的孢子化速度與壽命，最適孢子化的環(huán)境溫度是20～32 ℃，濕度為40%～90%(趙公舜，1988)。影響雞球蟲病流行情況的因素有很多，季節(jié)和地區(qū)的氣候條件、地理差異、雞的品種與日齡等都與之密切相關(guān)(李超等，2018)。

3 病例診斷

早期雞球蟲病診斷主要是通過對患雞的臨床癥狀觀察、病理剖檢以及結(jié)合鏡檢觀察球蟲卵囊的形態(tài)特征來實(shí)現(xiàn)的(表2)。在當(dāng)時(shí)，解決實(shí)際生產(chǎn)問題是根本目的——通過對養(yǎng)雞場的自然病例進(jìn)行分析來尋找病因及診療對策。臨床上，往往還需要研究人員對可能出現(xiàn)混淆的相似病癥，比如雛雞壞死性腸炎，做出鑒別診斷(何維明等, 1981)。

4 藥物研制與藥效評價(jià)

雞球蟲病每年給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,所以對于雞球蟲病的防治問題一直以來都是相關(guān)研究者關(guān)注的重點(diǎn)。自1939年Levine首先發(fā)現(xiàn)磺胺類藥物的抗球蟲作用后(Levine，1939)，世界各大主要制藥集團(tuán)(公司)也先后投入大量人力和財(cái)力進(jìn)行抗球蟲藥開發(fā)，至1988年發(fā)現(xiàn)森杜拉霉素(Seduramycin)并推向市場的50年間，先后研制開發(fā)了40多種抗球蟲藥物(鄒瑩，1988)，其中30多種藥物廣泛商業(yè)化應(yīng)用，藥物預(yù)防成為防治雞球蟲病的主要手段。自50年代末，雞球蟲抗藥性被發(fā)現(xiàn)以來，科研工作者更加致力于新藥的開發(fā)，但是耐藥性發(fā)展迅速，新型抗球蟲藥物使用3～4年或更短時(shí)間就會產(chǎn)生耐藥蟲株(趙開元等, 1985)，所以研制新藥是確保有效防治雞球蟲病效力的重要工作。不同藥物在國際與國內(nèi)開始使用的時(shí)間以及耐藥性出現(xiàn)的時(shí)間均有不同，在宿主體內(nèi)發(fā)揮作用的高峰期也有差異(表3)。

表2 雞球蟲病診斷Tab.2 Diagnosis of chicken coccidiosis

主要參考文獻(xiàn)(趙永福等，1987；索勛，1998；梁長鈞，1990)整理。

Reference:Zhaoetal.，1987；Suo，1998；Liang，1990.

4.1 化學(xué)合成類藥物

磺胺類與硝基呋喃類藥物是我國早期一直使用的雞球蟲病防治藥物，而非專門的抗球蟲制劑，70年代時(shí)有報(bào)道稱在北京地區(qū)雞球蟲對呋喃西林已經(jīng)出現(xiàn)了較強(qiáng)的耐藥性。我國抗球蟲藥物的研制始于1977年，華北農(nóng)業(yè)大學(xué)(今中國農(nóng)業(yè)大學(xué))研制出了第一個(gè)國產(chǎn)抗球蟲病的新藥——球痢靈，同年，氯苯胍也在我國首次合成，上海農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所對其研究發(fā)現(xiàn)，30 ppm對防治雞球蟲病即有顯著療效，但是80年代初，某些地區(qū)就已經(jīng)顯示出它的抗藥性。改革開放后，隨著我國養(yǎng)雞業(yè)的快速發(fā)展，大量跨國制藥集團(tuán)(公司)的專用抗球蟲藥物逐步進(jìn)入中國市場，我國獸醫(yī)寄生蟲學(xué)工作者在承擔(dān)這些藥物的抗球蟲效果評價(jià)之同時(shí)，與藥物化學(xué)、有機(jī)合成等學(xué)科專業(yè)人員合作，開始進(jìn)行非專利藥物的仿制合成工藝研究，先后研制開發(fā)出氯苯胍、氨丙啉等的合成工藝(上海農(nóng)科學(xué)院畜牧所雞球蟲病防治研究組，1979；楊振中等, 1983；沈瑞洲等, 1984)。但同樣，在開始使用該藥物時(shí)防治雞球蟲病效果優(yōu)良，反復(fù)使用后，1987年在廣東就已發(fā)現(xiàn)抗藥蟲株(陳漢忠，1990)。相對于其他一些抗球蟲藥，尼卡巴嗪抗藥性產(chǎn)生緩慢，它是國際上最早研制成功的抗球蟲藥，從1955年問世，一直到80年代在國內(nèi)外都可以稱得上是比較理想的抗球蟲藥(史天衛(wèi)等, 1985)。自使用抗球蟲藥物進(jìn)行雞球蟲病防治以來，抗藥性一直都是不容忽視的問題，球蟲對某種藥物的抗藥性一旦產(chǎn)生，其防治效果就會下降甚至失去存在的價(jià)值。

4.2 聚醚類抗生素

抗生素是微生物的次級代謝產(chǎn)物，曾名為“抗菌素”。1974年，Westley首次將分子中含有多個(gè)環(huán)狀醚鍵的抗生素命名為聚醚類抗生素(閻曉菊等, 1987)。它具有離子載體的性質(zhì)，將陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)透過細(xì)胞膜，破壞球蟲細(xì)胞膜內(nèi)外滲透壓，使得蟲體腫脹死亡從而起到抗球蟲作用(于詠蘭等, 2000)。早期作為抗球蟲藥物的聚醚類抗生素有莫能菌素、鹽霉素、拉沙里菌素等。

4.3 中草藥

中草藥在我國已有數(shù)千年的歷史，使用中草藥或中草藥提取物來防治雞球蟲病是我國特有的防治方法。其成本低廉、藥源豐富，可就地取材，更重要的是，它們毒副作用小、不易產(chǎn)生抗藥性，更加安全可靠。早在1978年，就有人嘗試用蟾酥、雷公藤、辣蓼、穿心蓮來防治包括雞球蟲病在內(nèi)的雞病，將雷公藤、辣蓼、穿心蓮直接做草料喂雞、蟾酥煎煮做飲水，再結(jié)合傳統(tǒng)的針刺療法，發(fā)現(xiàn)在臨床上可取得很好的防治效果(諶澄光，1978)。此外，青蒿(朱印生，1981)、苦參、常山、仙鶴草、地榆等在臨床上也都已取得滿意的療效(董華富, 1984)。

其中，青蒿藥用在我國已有數(shù)千年的歷史，主治瘧疾(云南地區(qū)五二三協(xié)作組，1978)。早在一千多年前東晉葛洪所著《肘后備急方》中，就有青蒿抗瘧的記載(王滿元，2012)；屠呦呦等科研工作者在傳統(tǒng)中藥—“草根樹皮一鍋湯”的基礎(chǔ)上對青蒿經(jīng)過精制、提取等一系列操作得到其有效成分—青蒿素，這是將傳統(tǒng)中藥與現(xiàn)代科學(xué)理論和方法相結(jié)合的產(chǎn)物(Tu, 2011; 李連達(dá)等，2015)，對治療瘧疾有杰出貢獻(xiàn)。而在非瘧疾病中，它同樣發(fā)揮著重要作用，有實(shí)驗(yàn)表明青蒿素及其合劑(北京市門頭溝區(qū)獸醫(yī)站，1983)、衍生物(丁璟昌，1984)對防治雞球蟲病有顯著療效。青蒿素僅從青蒿中提取或合成得到(韓福杰，1989)，中國擁有世界上超過80%的青蒿素資源(王滿元，2012)，它的出現(xiàn)展現(xiàn)了中國“古為今用”的科學(xué)力量。

表3 早期使用的幾種抗球蟲藥物Tab.3 Use of several anticoccidial drugs in early time

b.主要參考文獻(xiàn)(朱模忠, 1984；樊生超，1990；常曉輝等，2011)。

Mainly refer to(Zhu, 1984；Fan，1990；Changetal.，2011).

5 免疫預(yù)防

自專用抗球蟲藥物出現(xiàn)以來，到19世紀(jì)80年代，世界范圍內(nèi)出現(xiàn)的抗球蟲藥物種類已達(dá)40～50種之多。藥物防治在養(yǎng)雞業(yè)中一直是控制雞球蟲病的主要手段，但是由于藥物費(fèi)用昂貴，以及反復(fù)使用同種藥物易產(chǎn)生耐藥性蟲株等問題，免疫預(yù)防逐漸受到科研工作者的關(guān)注。過去人們就發(fā)現(xiàn)，在防治過程中，相對于完全抑制卵囊產(chǎn)生的抗球蟲藥物，允許產(chǎn)生少量卵囊的抗球蟲藥物更可取，因?yàn)樯倭柯涯掖碳に拗鳟a(chǎn)生免疫保護(hù)在實(shí)際生產(chǎn)中具有重要意義(柯新明等，1990)。

5.1 免疫機(jī)制

我國對雞球蟲免疫的研究起步較晚，早期對于雞球蟲病免疫應(yīng)答機(jī)制的認(rèn)識多是參考國外文獻(xiàn)，并對其進(jìn)行整理、發(fā)表綜述。雞球蟲要完成復(fù)雜的生活史需要經(jīng)歷多種發(fā)育階段，所以，宿主在病原刺激下所激發(fā)的免疫應(yīng)答具有多樣性(王宗儀，1985)。體液免疫、細(xì)胞免疫、局部免疫是雞球蟲免疫的3種重要方式。體液免疫主要通過刺激腔上囊B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IgG、IgM、IgA等抗體來實(shí)現(xiàn)，細(xì)胞免疫主要通過刺激胸腺的T淋巴細(xì)胞分化、增殖識別抗原來實(shí)現(xiàn)。其中，細(xì)胞免疫居主導(dǎo)地位，體液免疫居次要地位(晉希民, 1981)。1977年，Davis發(fā)現(xiàn)腸道內(nèi)含有不同于血清中的IgA在子孢子入侵時(shí)發(fā)揮抵抗作用，這種IgA是黏膜免疫產(chǎn)生的分泌型IgA(SIgA)，是參與局部免疫反應(yīng)的主要物質(zhì)(樊生超, 1990)。

5.2 球蟲病疫苗的研制

早在30年代人們就發(fā)現(xiàn)，成功抵抗雞球蟲感染后的雞可以獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫力(王省良，1990)，所以運(yùn)用有活力的正常毒力株球蟲卵囊可以使雞產(chǎn)生良好的免疫保護(hù)。王宗儀(1988)用柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊以不同計(jì)量一次和多次感染雛雞進(jìn)行免疫實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)逐漸增大劑量反復(fù)感染雛雞可以使其獲得更牢固的免疫力，但是大劑量的活毒卵囊對宿主會造成一定損傷。所以，雖然毒力株可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫保護(hù)，但是存在極大的安全隱患。

Long(1965)首次報(bào)道通過雞胚接種獲得柔嫩艾美耳球蟲，并于1974年發(fā)現(xiàn)通過在雞胚上傳代可以獲得致病力減弱、繁殖力下降而免疫原性良好的蟲株(Long,1974)。1978年，上海農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所楊振中等運(yùn)用同樣的方法選擇柔嫩艾美耳球蟲蟲株，通過10年的研究，研制出了柔嫩艾美耳球蟲弱毒蟲苗，并對其安全性、保存期和免疫期以及田間免疫觀察進(jìn)行了報(bào)道(楊振中等, 1985； 1986；陳金偉等, 1988)，發(fā)現(xiàn)其免疫保護(hù)效果良好。但是弱毒疫苗仍是活疫苗，在相關(guān)免疫試驗(yàn)中仍存在對宿主致死的現(xiàn)象(樊其林等, 1986；賴大煦等, 1988)。此外，是否會出現(xiàn)毒力返強(qiáng)也是科學(xué)家們所擔(dān)心的另一個(gè)問題，因此，滅活疫苗及亞單位疫苗的研制成為科學(xué)家研究的新方向。但是受到分子生物學(xué)技術(shù)等方面的限制，這些工作在早期雞球蟲研究中還處于空白(王省良，1990)。

6 營養(yǎng)性飼料添加劑

早期關(guān)于雞球蟲研究的文獻(xiàn)中關(guān)于飼料添加劑的報(bào)道為數(shù)不多，主要是綜述類文章。有些學(xué)者將氨基酸、礦物質(zhì)、維生素這些飼料中本身就存在的物質(zhì)稱為補(bǔ)充物，只有像抗生素這種飼料中原先沒有的成分才稱為添加劑(徐維墉，1986)。但有些學(xué)者則把這兩者歸為營養(yǎng)性與非營養(yǎng)性添加劑(周毓平，1988)?？股睾突瘜W(xué)合成藥物等作為飼料添加劑時(shí)同樣是為了防治雞球蟲病，但是由于藥殘和耐藥性的問題，一些藥物如今已被禁止再做添加劑使用。一些研究者試圖尋找其他飼料添加劑來代替抗球蟲藥物的使用。所以，我們這里想要著重闡述的是營養(yǎng)性添加劑的使用。

氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位，飼料中適當(dāng)?shù)奶砑拥鞍彼?、賴氨酸、色氨酸以補(bǔ)充雞體自身合成的不足，可促進(jìn)其生長與抗病能力；維生素調(diào)節(jié)著機(jī)體的新陳代謝，維生素A、C、D、E、K、H等均是飼料中常用的添加成分。有實(shí)驗(yàn)表明，在飼料中添加維生素和微量元素會對雞的增重起促進(jìn)作用，增強(qiáng)雞的抗病能力(陳宙，1984)。此外，還有將植物或其加工品作為補(bǔ)充添加劑，其實(shí)就是將中藥作為飼料添加劑，這在我國古代就有記載(張克家，1986)。它們在生產(chǎn)與防治上都能起到一定作用，更重要的是，植物作為一種天然成分，給動物本身帶來的傷害小而可控。飼料添加劑種類多樣，合理規(guī)范的使用飼料添加劑在任何時(shí)候都是保證養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的要素之一。

7 結(jié)語

從早期發(fā)表文章的數(shù)量與研究內(nèi)容來看，我國對雞球蟲的研究起步晚于西方國家，并且由于資金不足、設(shè)備落后、人才短缺等原因以及一些社會因素，難以達(dá)到國際水平。從研究內(nèi)容來看，雞球蟲種類的調(diào)查等病原學(xué)研究取得了一定的進(jìn)展，利用觀察描述的方法研究雞球蟲的區(qū)系分布為球蟲病防治等研究工作的開展奠定了一定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)技術(shù)的掌握與藥物研制的水平雖然不及西方，但一直在緊跟前沿，奮力追趕；生物技術(shù)的滲入豐富了實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段，化學(xué)藥物的更新保證了藥物防治效力；單卵囊分離、卵囊純化等基本球蟲實(shí)驗(yàn)操作不斷優(yōu)化；仿制合成的一系列國產(chǎn)抗球蟲藥物及球蟲早熟活疫苗的成功研制為球蟲病的防治帶來了福音。但是，當(dāng)時(shí)分子與免疫層面的寄生蟲學(xué)研究還未深入開展，PCR、基因工程等分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用還處于空白。90年代以后，免疫診斷等新的診斷技術(shù)出現(xiàn)，雞球蟲免疫保護(hù)機(jī)理及入侵的分子機(jī)制等分子水平方面的研究進(jìn)一步發(fā)展，核酸疫苗、活載體疫苗等多種新型雞球蟲疫苗也取得了一定的成就；我國對雞球蟲的研究在不斷向前推進(jìn)。

致歉在中文數(shù)據(jù)庫中查找1990年以前所發(fā)表的雞球蟲病相關(guān)文章，由于檢索主題詞的差異，在不同數(shù)據(jù)庫中獲取的文章數(shù)目有所不同，整理后大致有250余篇，有些年代久遠(yuǎn)的文章難以獲取。由于文章數(shù)目多，以及有些研究工作可能開展于1990年以前，但文章卻發(fā)表于1990年之后等原因造成查找缺漏、對文獻(xiàn)整理不到位，致使并不能將所有研究及作者一一提及，在此深表歉意。但不可否認(rèn)，他們?yōu)殡u球蟲病研究做出了杰出貢獻(xiàn)、為推動雞球蟲研究工作起到了不可忽視的重要作用。