賈培松，羅 影，賈文捷，努爾孜亞·亞力買買提，李婭婭，王振津，郝敬喆，魏 鵬

(1.新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/農(nóng)業(yè)部西北荒漠綠洲作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，烏魯木齊 830091；2.溫泉縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，新疆溫泉 836200)

0 引 言

【研究意義】阿魏蘑(Pleurotuseryngii)是新疆當(dāng)?shù)貙?duì)生長在傘形花科阿魏屬植物根莖部的側(cè)耳屬野生菌的統(tǒng)稱[1-2]，是一種食、藥用價(jià)值都很高的珍稀食用菌，其子實(shí)體肥大潔白、味道鮮美、營養(yǎng)豐富，深受廣大消費(fèi)者青睞，素有“天山神菇”、“草原上的牛肝菌”之美稱[3-4]。在我國，野生阿魏蘑僅分布在新疆境內(nèi)準(zhǔn)噶爾盆地邊緣的戈壁阿魏灘上，分布量稀少[5-6]。目前，國內(nèi)多年生產(chǎn)的栽培菌株均來自新疆野生子實(shí)體的分離[7-8]，但新疆作為阿魏蘑野生資源的主產(chǎn)地，至今尚無可靠的優(yōu)良品種，目前栽培品種主要引自內(nèi)地，而近年國內(nèi)栽培的阿魏蘑也存在菌株混亂、種性不穩(wěn)定、菌種退化等問題[9]。因此，大量收集野生阿魏蘑資源，進(jìn)行野生阿魏蘑菌株重要農(nóng)藝性狀鑒定和評(píng)價(jià)研究，對(duì)阿魏蘑優(yōu)良品種選育和推廣具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】1983年人工馴化栽培阿魏蘑成功，20世紀(jì)90年代開始規(guī)?；耘啵诖似陂g，曹玉清、牟川靜、陳忠純等最先在野生阿魏蘑菌株馴化方面做了大量研究工作，以新疆野生阿魏蘑菌株為材料先后馴化和培育了多個(gè)阿魏蘑品種在各地推廣[10-13]。近年，國內(nèi)阿魏蘑品種多以前期馴化栽培品種為材料進(jìn)行品種選育工作，品種農(nóng)藝性狀比較試驗(yàn)也多為市場上流通的品種間的比較。王波等[14]通過拮抗、菌絲體生長和出菇比較評(píng)價(jià)等方法對(duì)從國內(nèi)收集的8個(gè)白靈側(cè)耳菌種進(jìn)行分類，根據(jù)拮抗試驗(yàn)將8個(gè)菌株劃分為4個(gè)類群，根據(jù)子實(shí)體形態(tài)特征可明顯地劃分為2類。王振河等[15]對(duì)外引進(jìn)31個(gè)白靈菇栽培菌株進(jìn)行拮抗試驗(yàn)、菌絲生長速度測定、生長勢比較、平板出菇試驗(yàn)和栽培試驗(yàn)，將31個(gè)栽培菌株分成柱狀、馬蹄狀和手掌狀3大類?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】野生阿魏蘑資源是新疆特有食用菌資源，近年，項(xiàng)目組對(duì)環(huán)準(zhǔn)噶爾盆地的阿魏灘進(jìn)行了野生阿魏蘑資源的大量采集，保存了大量野生資源菌種。通過對(duì)阿魏蘑資源的遺傳多樣性研究，表明野生阿魏蘑資源具有豐富的遺傳多樣性，具有十分良好的馴化潛力[16-18]。近年來，國內(nèi)栽培的阿魏蘑已存在菌種退化等問題，亟待選育新的優(yōu)良品種。因此，研究以野生阿魏蘑菌株為材料，開展阿魏蘑菌株主要農(nóng)藝性狀的評(píng)價(jià)研究，將對(duì)阿魏蘑優(yōu)良品種選育和推廣具有重要意義?！緮M解決的關(guān)鍵問題】通過阿魏蘑菌株的栽培出菇試驗(yàn)，對(duì)野生阿魏蘑菌株進(jìn)行主要農(nóng)藝性狀鑒定和評(píng)價(jià)，明確試驗(yàn)菌株的主要農(nóng)藝特征，篩選出具有較好選育潛力的野生菌株，為阿魏蘑優(yōu)良品種選育提供基礎(chǔ)材料和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 菌株

Pl.x0002株為阿魏蘑栽培菌株，作為對(duì)照菌株，經(jīng)子實(shí)體組織分離純化獲得，為第四代母種；26株為野生菌株，經(jīng)子實(shí)體組織分離純化獲得，均為第四代母種，保存于新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所。表1

表1 阿魏蘑供試菌株
Table 1 Tested strains of P. eryngii

編號(hào)No．生態(tài)型Ecotype來源Origin編號(hào)No．生態(tài)型Ecotype來源OriginPl．x0002栽培菌株青河縣Pl．x0033野生菌株裕民縣Pl．x0017野生菌株青河縣Pl．x0073野生菌株裕民縣Pl．x0018野生菌株青河縣Pl．x0075野生菌株裕民縣Pl．x0019野生菌株青河縣Pl．x0083野生菌株裕民縣Pl．x0020野生菌株青河縣Pl．x0061野生菌株石河子市Pl．x0008野生菌株托里縣Pl．x0064野生菌株石河子市Pl．x0009野生菌株托里縣Pl．x0067野生菌株石河子市Pl．x0051野生菌株托里縣Pl．x0068野生菌株石河子市Pl．x0052野生菌株托里縣Pl．x0069野生菌株石河子市Pl．x0071野生菌株托里縣Pl．x0070野生菌株石河子市Pl．x0024野生菌株裕民縣Pl．x0042野生菌株富蘊(yùn)縣Pl．x0025野生菌株裕民縣Pl．x0044野生菌株富蘊(yùn)縣Pl．x0026野生菌株裕民縣Pl．x0047野生菌株富蘊(yùn)縣Pl．x0028野生菌株裕民縣

1.1.2 供試培養(yǎng)基

(1)PDA(Potato Dextrose Agar)培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂粉20 g，補(bǔ)水至1 000 mL，pH自然(約為7.0)；115 ℃高壓蒸汽滅菌30 min。

(2)棉籽殼培養(yǎng)基：棉籽殼 77.4%，麩皮 20%，白砂糖 1%，石膏粉 1%，過磷酸鈣 0.3%，尿素 0.3%，pH值調(diào)至6～7。

1.2 方 法

1.2.1 菌絲培養(yǎng)特征

取出保藏的阿魏蘑菌種接種至PDA培養(yǎng)基平板上活化7～10 d，使用打孔器沿菌落邊緣取相同菌齡直徑為5 mm的菌餅接種至PDA平板中央，于25℃暗培養(yǎng)。每天觀察菌絲生長情況，定期統(tǒng)計(jì)菌絲培養(yǎng)特征，包括：菌絲長速、菌絲濃密度、氣生菌絲濃度和菌絲長勢等指標(biāo)。采用“十字”交叉法測量菌落直徑，計(jì)算菌絲生長速度，每種菌株設(shè)3個(gè)重復(fù)。

1.2.2 棉籽殼培養(yǎng)基上菌絲培養(yǎng)

依據(jù)培養(yǎng)料配方，按量稱取新鮮無霉變的棉籽殼，預(yù)濕，然后按量拌入其他輔料，含水量調(diào)至60%，pH值調(diào)至6～7，充分拌勻后裝袋(菌袋規(guī)格為13 cm×30 cm×0.04 cm的聚丙烯塑料袋，每袋培養(yǎng)料干重約0.15 kg)。裝好的菌袋于121℃高壓蒸汽滅菌2.5 h，冷卻至30℃以下?lián)専峤臃N，采用固體種接種方式。接種好的菌袋于溫度25℃，濕度60%的培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)。待菌絲長滿后，再培養(yǎng)5～7 d，進(jìn)行出菇管理。

1.2.3 阿魏蘑栽培出菇

將已長滿菌絲體的菌袋置于零下15℃冰箱中進(jìn)行低溫刺激20 d，然后將其轉(zhuǎn)入出菇房中進(jìn)行出菇試驗(yàn)，出菇房溫度控制在9～14℃，濕度控制在85%～95%。定期觀察出菇情況，對(duì)阿魏蘑菌株出菇情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采集正常出菇的菌株的子實(shí)體，立即進(jìn)行形態(tài)指標(biāo)測定，主要測定指標(biāo)包括：子實(shí)體重量、形狀、菌蓋大小、菌肉厚度、菌柄長度及菌褶形態(tài)等。每個(gè)菌株設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10袋。

1.3 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用Excel 2010，SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、單因素方差分析(AVNOA)與相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 阿魏蘑菌株菌絲培養(yǎng)特征對(duì)比

研究表明，各菌株菌絲顏色基本均為白色，無明顯差異。在PDA平板上，各菌株菌絲長速差異顯著，對(duì)照菌株P(guān)l.x0002的菌絲長速為5.24 mm/d，有3個(gè)菌株菌絲長速明顯高于對(duì)照菌株，占總數(shù)的11.11%，分別是Pl.x0025、Pl.x0042和Pl.x0071，菌絲長速分別為6.62、6.16和6.54 mm/d；有14個(gè)菌株的菌絲長速與對(duì)照菌株差異不顯著，菌絲長速為4.84～5.63 mm/d，占總數(shù)的51.85%；有9個(gè)菌株菌絲長速明顯低于對(duì)照菌株，菌絲長速為1.62～4.40 mm/d。各菌株在菌絲濃密、氣生菌絲和菌絲長勢方面差異顯著，但與菌絲長速的相關(guān)性分析顯示，無明顯相關(guān)性。以上結(jié)果表明，新疆野生阿魏蘑菌株具有較豐富的遺傳多樣性，具有較好的選育潛力。表1，表2，圖1

圖1 阿魏蘑菌株菌絲生長速度
Fig.1 The growth rate of P. eryngii mycelium

表2 阿魏蘑菌株菌絲培養(yǎng)特征描述
Table 2 The description of culture characteristics of P. eryngii

編號(hào)No．菌絲長速Growthrate(mm/d)菌絲濃密度Mycelialdensity氣生菌絲Aerialhyphae菌絲長勢GrowthvigorPl．x0002524e++++++Pl．x0017505fe+++++++++Pl．x0018492dfe+++++++Pl．x0019524e+++++++++Pl．x0020532e++++++++Pl．x0008375c+++++Pl．x0009279b+++Pl．x0051488dfe+++++++++++Pl．x0052440cdf++++++Pl．x0071654g++++++Pl．x0024484dfe+++++++++Pl．x0025662g+++++++++Pl．x0026485dfe+++++++++Pl．x0028294b+++++++++Pl．x0033162a++++++++Pl．x0073400c++++++++++Pl．x0075563ef+++++++++Pl．x0083530e++++++++++Pl．x0061510fe++++++Pl．x0064440cdf++++++++Pl．x0067506fe+++++++++Pl．x0068513fe+++++++Pl．x0069421cd+++++++Pl．x0070535e+++++++++Pl．x0042616fg++++++++++++Pl．x0044548ef+++++++++Pl．x0047386c+++++++

注：*菌絲長速后面的小寫字母代表顯著性差異(P=0.05)

Note:*The lower case letters behind the hypha growth rate represent significant differences(P=0.05)

2.2 阿魏蘑菌株子實(shí)體形態(tài)特征對(duì)比

研究表明，正常出菇的菌株有16株，占試驗(yàn)總數(shù)的59.26%，出畸形菇的菌株有3株，占試驗(yàn)總數(shù)的11.11%，不能出菇的菌株有8株，占試驗(yàn)總數(shù)的29.63%。正常出菇的子實(shí)體中，菇型以掌形為主，共有13株阿魏蘑子實(shí)體菇型為掌形，占總數(shù)的81.25%，有3株為馬蹄形。各阿魏蘑菌株在子實(shí)體菌蓋長、寬、厚度特征方面差異十分顯著。各阿魏蘑菌株在子實(shí)體菌柄長、直徑特征方面差異較顯著。表3，表4，圖2

表3 阿魏蘑菌株出菇統(tǒng)計(jì)
Table 3 The statistics of cultivation test for P. eryngii strains

出菇情況Mushroom統(tǒng)計(jì)數(shù)量Number(strain)比例Rate(%)出菇正常Normal165926畸形Malformation31111未出菇Fail82963

表4 阿魏蘑菌株子實(shí)體特征
Table 4 The description of fruit body characteristics for P. eryngii

編號(hào)No．菇型Type菌蓋 Pileus菌柄 Stipe長Length(mm)寬Width(mm)厚度Thickness(mm)著生方式Position柄長Length(mm)柄直徑Diameter(mm)Pl．x0002掌形66．5856．5620．35側(cè)生17．1515．98Pl．x0017馬蹄形57．0040．0018．67中生27．0020．33Pl．x0008掌形84．3760．1724．51側(cè)生36．0234．72Pl．x0009掌形80．2484．5222．47側(cè)生41．6739．88Pl．x0052掌形72．6075．0523．30側(cè)生40．3337．67Pl．x0071掌形75．6457．0520．67側(cè)生40．4725．83Pl．x0024掌形49．7445．2221．04側(cè)生19．0524．35Pl．x0028馬蹄形72．0070．0031．33中生35．0034．00Pl．x0073掌形59．4750．4520．37側(cè)生17．6216．54Pl．x0075掌形80．0055．0023．11側(cè)生35．3331．67Pl．x0083掌形82．0854．0622．30側(cè)生22．3120．13Pl．x0061掌形99．0056．0025．67側(cè)生36．7030．33Pl．x0064掌形78．5061．9419．58側(cè)生10．8510．00Pl．x0068馬蹄形66．3850．8919．19中生15．6035．18Pl．x0069掌形75．9262．1621．31側(cè)生23．5021．70Pl．x0047掌形89．0461．4629．62側(cè)生12．5036．81

圖2 阿魏蘑菌株子實(shí)體特征
Fig.2 The fruit body characteristics for P. eryngii

2.3 阿魏蘑菌株產(chǎn)量對(duì)比

研究表明，野生阿魏蘑菌株的生物學(xué)效率差異很大，在11.50%～55.99%不等，平均生物學(xué)效率為31.49%。對(duì)照菌株P(guān)l.c0002菌株的生物學(xué)效率為38.83%，只有Pl.x0047菌株的生物學(xué)效率明顯高于對(duì)照菌株，呈現(xiàn)極顯著差異，其生物學(xué)效率為55.99%；有5個(gè)菌株生物學(xué)效率與對(duì)照菌株相當(dāng)，差異不顯著，分別為Pl.x0009、Pl.x0028、Pl.x0052、Pl.x0061和Pl.x0083，生物學(xué)效率分別為39.43%、38.13%、39.54%、35.48%和37.49%；有9個(gè)菌株的生物學(xué)效率明顯低于對(duì)照菌株，并呈現(xiàn)極顯著差異。以上結(jié)果表明，菌株P(guān)l.x0052具有很好的豐產(chǎn)性，具有很好的馴化潛力，菌株P(guān)l.x0009、Pl.x0028、Pl.x0047、Pl.x0061和Pl.x0083豐產(chǎn)性與對(duì)照相當(dāng)，可以作為進(jìn)一步人工篩選的材料。表5

表5 阿魏蘑菌株的生物學(xué)效率
Table 5 The biological efficiency of P. eryngii strains

編號(hào)No．單菇重Weight(g)生物學(xué)效率Biologicalefficiency(%)顯著性差異 SignificantdifferenceP=0．05P=0．01Pl．x000258．2438．83fgFPl．x001717．2511．50aAPl．x000848．3232．21deDEPl．x000959．1539．43gFPl．x005259．3139．54gFPl．x007145．8030．53cdDPl．x002435．5223．68bBCPl．x002857．2038．13fgFPl．x007330．4820．32bBPl．x007543．4228．95cdDPl．x008356．2437．49fgFPl．x006153．2235．48efEFPl．x006419．8113．21aAPl．x006846．8431．22dDEPl．x006940．9227．28cCDPl．x004783．9855．99hG

注：* 小寫字母和大寫字母分別代表P=0.05和P=0.01水平上的顯著性差異

Note: * The lowercase and uppercase letters were represented significant differences atP=0.05 andP=0.01 levels respectively

2.4阿魏蘑菌株單菇重量與子實(shí)體特征相關(guān)性

鑒于阿魏蘑菌株的產(chǎn)量僅取一潮菇數(shù)據(jù)，而一潮菇就一個(gè)子實(shí)體，因此，對(duì)阿魏蘑菌株的單菇種(產(chǎn)量)與其子實(shí)體特征進(jìn)行了相關(guān)性分析，研究表明，根據(jù)相關(guān)性系數(shù)R值平方，阿魏蘑單菇重與子實(shí)體特征的相關(guān)性大小依次為，菌蓋厚度>菌柄直徑>菌柄長度>菌蓋長度>菌蓋寬度，因此，阿魏蘑菌株的單菇重與子實(shí)體菌蓋厚度和菌柄直徑的相關(guān)性較強(qiáng)，這與阿魏蘑優(yōu)良品種常規(guī)選育的目標(biāo)十分相符。圖3～7

圖3 單菇重量與菌蓋長度相關(guān)性
Fig.3 The correlation of weight andpileuslength

圖4 單菇重量與菌蓋寬度相關(guān)性
Fig.4 The correlation of weight and pileus width

圖5 單菇重量與菌蓋厚度相關(guān)性
Fig.5 The correlation of weight andpileustheckness

圖6 單菇重量與菌柄長度相關(guān)性
Fig.6 The correlation of weight and stipe length

圖7 單菇重量與菌柄直徑相關(guān)性
Fig.7 The correlation of weight and stipe diameter

3 討 論

27個(gè)阿魏蘑菌株菌絲培養(yǎng)特征試驗(yàn)結(jié)果顯示，各試驗(yàn)菌株菌絲長速差異顯著，有3個(gè)菌株菌絲長速明顯高于對(duì)照菌株，僅占總數(shù)的11.11%，有14個(gè)菌株的菌絲長速與對(duì)照菌株相當(dāng)，差異不顯著，占總數(shù)的51.85%。各菌株在菌絲濃密度、氣生菌絲和菌絲長勢方面差異顯著，但與菌絲長速的相關(guān)性分析顯示，無明顯相關(guān)性。阿魏蘑菌株栽培出菇試驗(yàn)結(jié)果表明，正常出菇的菌株有16株，占試驗(yàn)總數(shù)的59.26%。正常出菇的子實(shí)體中，菇型以掌形為主，共有13株，占總數(shù)的81.25%。阿魏蘑菌株在子實(shí)體菌蓋長、寬、厚度，菌柄長、直徑等特征方面差異十分顯著。阿魏蘑菌株產(chǎn)量對(duì)比分析結(jié)果表明，野生阿魏蘑菌株的生物學(xué)效率差異十分顯著，在11.50%～55.99%不等，平均生物學(xué)效率為31.49%。對(duì)照菌株P(guān)l.x0002的生物學(xué)效率為38.83%，只有Pl.x0047菌株的生物學(xué)效率(55.99%)顯著高于對(duì)照菌株，產(chǎn)量增幅54.59%，具有很好的選育潛力。Pl.x0009、Pl.x0028、Pl.x0052、Pl.x0061和Pl.x0083等5個(gè)菌株生物學(xué)效率與對(duì)照菌株相當(dāng)，差異不顯著。鑒于阿魏蘑菌株的產(chǎn)量僅取一潮菇數(shù)據(jù)，而一潮菇就一個(gè)子實(shí)體，因此，對(duì)阿魏蘑菌株的單菇種(產(chǎn)量)與其子實(shí)體特征進(jìn)行了相關(guān)性分析，結(jié)果顯示相關(guān)性大小依次為，菌蓋厚度>菌柄直徑>菌柄長度>菌蓋長度>菌蓋寬度。以上結(jié)果表明，菌株P(guān)l.x0047具有很好的農(nóng)藝性狀特征，具有很好的馴化潛力，菌株P(guān)l.x0009、Pl.x0028、Pl.x0052、Pl.x0061和Pl.x0083豐產(chǎn)性與對(duì)照相當(dāng)，可以作為進(jìn)一步人工選育的基礎(chǔ)材料。由于試驗(yàn)菌株均為阿魏蘑野生菌株，其品質(zhì)特性尚不穩(wěn)定，因此，非常有必要對(duì)其豐產(chǎn)性、特異性和穩(wěn)定性進(jìn)行進(jìn)一步檢測和試驗(yàn)。

4 結(jié) 論

阿魏蘑主栽品種Pl.x0002在菌絲培養(yǎng)特征、子實(shí)體特性、豐產(chǎn)性等方面仍表現(xiàn)出較好的品種特性，仍適宜在實(shí)際生產(chǎn)中繼續(xù)栽培。通過阿魏蘑菌株主要農(nóng)藝性狀對(duì)比試驗(yàn)，野生阿魏蘑菌株P(guān)l.x0047在豐產(chǎn)性和子實(shí)體特性方面均優(yōu)于對(duì)照菌株P(guān)l.x0002，豐產(chǎn)性上與對(duì)照菌株呈現(xiàn)極顯著差異，產(chǎn)量增幅達(dá)54.59%，因此，具有很好的馴化潛力。Pl.x0009、Pl.x0028、Pl.x0052、Pl.x0061和Pl.x0083菌株在豐產(chǎn)性上與對(duì)照菌株P(guān)l.x0002相當(dāng)，差異不顯著，但在子實(shí)體其他特征方面具有一定差異性，可作為進(jìn)一步人工選育的基礎(chǔ)材料。

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