范 澤，王安琪，孫金輝，程鎮(zhèn)燕，白東清，喬秀亭，張寶龍，翟勝利

( 1.天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院，天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300384；2.天津現(xiàn)代晨輝科技集團(tuán)有限公司，天津市水族動(dòng)物功能性飼料企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 301800 )

在現(xiàn)階段的水產(chǎn)飼料工業(yè)中，淀粉在漁用配合飼料中的應(yīng)用研究日趨活躍。飼料中添加適宜水平的淀粉不僅有助于飼料顆粒成形，而且有利于飼料蛋白質(zhì)的節(jié)約，飼料成本的降低及魚體氮排放的減少[1]。但魚類對(duì)淀粉等大分子碳水化合物利用能力仍受到體內(nèi)胰島素受體數(shù)量不足、己糖激酶缺乏及葡萄糖激酶活性較低[2-3]，飼料中淀粉水平和淀粉的復(fù)雜性等因素的限制，因此如何提高魚類對(duì)飼料中淀粉的利用能力成為決定淀粉在水產(chǎn)飼料業(yè)中應(yīng)用前景的重要課題。

天然淀粉不溶于水，被膜性差，缺乏乳化力，耐藥性、機(jī)械性及對(duì)淀粉酶不敏感等缺憾制約了天然淀粉廣泛應(yīng)用[4]，因此在水產(chǎn)飼料業(yè)應(yīng)用中天然淀粉的直接利用率十分有限。不同來(lái)源天然淀粉的顆粒結(jié)構(gòu)及直鏈淀粉與支鏈淀粉的含量及比例決定其可利用性[5-6]。已有研究表明，相較于谷類淀粉，薯類淀粉的直/支鏈淀粉比相對(duì)較低，即含有更多利于魚類消化吸收的支鏈淀粉[1]。在鯉魚(Cyprinuscarpio)飼料中分別添加玉米淀粉[7]和木薯淀粉[8]后發(fā)現(xiàn)，鯉魚對(duì)直/支鏈淀粉比相對(duì)較低的木薯淀粉利用能力更強(qiáng)，表現(xiàn)出更好的生長(zhǎng)狀態(tài)及消化能力。因此深入的探討薯類淀粉在魚類飼料中應(yīng)用潛力具有重要意義。此外，針對(duì)同一種天然淀粉，通過(guò)變性不僅可以改變淀粉本身原有的性質(zhì)使其擁有新的功能特性，同時(shí)也可以提高魚類對(duì)其的利用能力。董蘭芳等[9]發(fā)現(xiàn)糊化玉米淀粉對(duì)卵形鯧鲹(Trachinotusovatus)的促生長(zhǎng)效果優(yōu)于葡萄糖、蔗糖、玉米淀粉和糊精，其質(zhì)量日增加達(dá)2.19 g/d，飼料效率和蛋白效率分別為0.82和1.88。高梅[10]發(fā)現(xiàn)攝食20%糊化淀粉飼料的南方鲇(Silurusmeridionalis)生長(zhǎng)性能及飼料利用率均最高，但當(dāng)糊化淀粉水平超過(guò)20%時(shí)，南方鲇生長(zhǎng)性能急劇下降。

已有的研究發(fā)現(xiàn)，木薯淀粉添加水平為10%～20%時(shí)，對(duì)鯉魚的促生長(zhǎng)效果較好[9]，但關(guān)于鯉魚飼料中木薯淀粉的研究?jī)H見(jiàn)于添加水平方面的探究，對(duì)其變性淀粉利用能力的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。因此，筆者選擇木薯淀粉、預(yù)糊化木薯淀粉和木薯醋酸酯淀粉為淀粉源，通過(guò)研究木薯淀粉及其變性淀粉鯉魚生長(zhǎng)、腸道消化能力及糖代謝關(guān)鍵酶活性的影響，以期為鯉魚人工配合飼料的研制開(kāi)發(fā)奠定理論依據(jù)和實(shí)踐基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)在天津天祥水產(chǎn)有限責(zé)任公司的養(yǎng)殖池塘進(jìn)行。試驗(yàn)用鯉魚為天津市換新水產(chǎn)良種場(chǎng)同期繁殖的魚種，試驗(yàn)前進(jìn)行消毒處理，置于3 m×3 m×3 m網(wǎng)箱中暫養(yǎng)一周，期間投喂普通淡水魚飼料(32%蛋白，天津天祥水產(chǎn)有限公司生產(chǎn))。 養(yǎng)殖試驗(yàn)在養(yǎng)殖池塘中搭建的1 m×1 m×1.5 m的沉性暫養(yǎng)網(wǎng)箱中進(jìn)行，試驗(yàn)持續(xù)8周。

1.2 試驗(yàn)飼料的準(zhǔn)備

木薯淀粉及其變性淀粉購(gòu)自廣東省東莞東美食品有限公司，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)符合NY/T 875—2012 《食用木薯淀粉》一級(jí)要求[11]，其水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分的含量(干質(zhì)量)分別為12.3%(<14.0%)、0.13%(<0.3%)、0.11%(<0.2%)和0.17%(<0.30%)。

試驗(yàn)飼料以木薯淀粉、預(yù)糊化木薯淀粉和木薯醋酸酯淀粉為糖源，配制3種等蛋白、等能飼料，飼料中糖的添加水平均為20%。各飼料原料均通過(guò)粉碎機(jī)，過(guò)60 目篩，先將粉狀原料混合均勻，再添加豆油，充分混合后使用天祥水產(chǎn)有限公司提供的江蘇牧羊集團(tuán)牧羊MUZLM V4型飼料制粒機(jī)制成直徑為3.00 mm的沉性顆粒飼料，各組試驗(yàn)飼料的組成與營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 試驗(yàn)分組及管理

暫養(yǎng)期結(jié)束后挑選健康、規(guī)格較為一致的個(gè)體[初始體質(zhì)量(55.73±3.55) g]作為試驗(yàn)用魚進(jìn)行分組。設(shè)原木薯淀粉、預(yù)糊化木薯淀粉、木薯醋酸酯淀粉3個(gè)不同木薯淀粉的配合飼料試驗(yàn)組，每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)60尾魚。

采用固定投喂的方法進(jìn)行投喂，日投喂量為魚體質(zhì)量的4%，日投喂4次(8：00，11：00，14：00，17：00)[12]。養(yǎng)殖系統(tǒng)兩周清洗一次。試驗(yàn)期間水溫為28～32 ℃，pH值為7.8±0.2，溶解氧>6.0 mg/L，氨氮質(zhì)量濃度<0.52 mg/L，亞硝酸氮質(zhì)量濃度<0.08 mg/L。

1.4 樣品采集

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，試驗(yàn)魚禁食24 h，然后計(jì)數(shù)，并稱量質(zhì)量；從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取15尾魚，稱量質(zhì)量后測(cè)體長(zhǎng)，計(jì)算肥滿度。采取尾部靜脈抽血方法，每3尾魚的血液為一個(gè)樣本，注入2 mL的離心管中，4 ℃，4500 r/min離心15 min，取上層血清備用，后于冰盤上解剖，取肝胰臟以及腸道(根據(jù)畢冰等[13]對(duì)鯉魚消化道的研究，將腸道分為前腸、中腸及后腸)，迅速轉(zhuǎn)入低溫冰箱內(nèi)-80 ℃保存，以用于消化酶活力及糖代謝關(guān)鍵酶活性的測(cè)定，并測(cè)量其肝臟質(zhì)量，以確定其肝體比。

表1 試驗(yàn)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)組成 %

1.預(yù)混料為每千克飼料提供：VA 6000 IU，VB19 mg，VB29 mg，VB645 mg，VB120.03 mg，VD32000 IU，VE 60mg，VK310 mg，葉酸 3 mg，D-泛酸 30 mg，煙酸 45 mg，肌醇80 mg，VC 90 mg，膽堿 2000 mg，Cu 30 mg，F(xiàn)e 140 mg，Mn 15 mg，Zn 40 mg，I 0.50 mg，Se 0.30 mg，Co 0.25 mg，Mg 100 mg，Na 100 mg.2. 能量值為計(jì)算所得.表中為干物質(zhì)百分比.

1.5 指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 飼料營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

飼料樣品分別用常壓恒溫烘干法(GB/T 5009.3—2010)、杜馬斯燃燒法(GB/T 24318—2009)和索氏抽提法(GB/T 5009.6—2010)測(cè)水分、蛋白質(zhì)及粗脂肪含量。

1.5.2 粗酶液的制備

肝胰臟、前腸、中腸及后腸在冰生理鹽水中漂洗，除去血液，用濾紙?jiān)嚫?，用移液管移?倍于組織塊質(zhì)量的預(yù)冷勻漿介質(zhì)(0.85%生理鹽水)，在勻漿器中進(jìn)行勻漿，4 ℃，4500 r/min離心15 min，取上清液備用。

1.5.3 生化指標(biāo)檢測(cè)

酶活力檢測(cè)均采用商業(yè)試劑盒(南京建成生物工程研究所)，每個(gè)樣品每種酶活力均重復(fù)測(cè)定3次。蛋白酶采用福林酚法測(cè)定。脂肪酶的測(cè)定采用比濁法。淀粉酶采用碘—淀粉比色法進(jìn)行測(cè)定。用于血清生化指標(biāo)及肝胰臟糖代謝關(guān)鍵酶活性測(cè)定的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒均由上海酶聯(lián)生物科技有限公司生產(chǎn)。肝糖原的測(cè)定用堿消化法，試劑盒均由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)(A043)。

1.6 計(jì)算與統(tǒng)計(jì)分析

質(zhì)量增加率/%=(m2-m1)/m1×100%

特定生長(zhǎng)率/%·d-1=(lnm2-lnm1)/t×100%

飼料系數(shù)=m3/m4

肝體比/%=m5/m×100%

蛋白質(zhì)效率/%=[m4/(m3×p)]×100%

肥滿度=m2/L3×100

式中，m1為初始體質(zhì)量(g)，m2為終末體質(zhì)量(g)，t為養(yǎng)殖天數(shù)(d)，m3為飼料攝取量(g)，m4為魚體凈增量(g)，m5為肝胰臟質(zhì)量(g)，m為魚體總質(zhì)量(g)，p為飼料中蛋白質(zhì)含量，L為終末體長(zhǎng)(cm)。

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)單因素方差分析，差異顯著時(shí)進(jìn)行鄧肯多重比較，P<0.05為差異顯著。數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚生長(zhǎng)性能、飼料利用及形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響

木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚生長(zhǎng)性能、飼料利用及形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響見(jiàn)表2。就生長(zhǎng)性能及飼料利用而言，預(yù)糊化木薯淀粉組的鯉魚以375.84%的質(zhì)量增加率，3.78%/d的特定生長(zhǎng)率，1.16的飼料系數(shù)及3.01%的蛋白質(zhì)效率表現(xiàn)出更為良好的生長(zhǎng)及飼料利用能力，但上述指標(biāo)與原木薯淀粉組及木薯醋酸酯淀粉組并無(wú)顯著差異(P>0.05)。就形態(tài)學(xué)指標(biāo)而言，肝體比及肥滿度分別以預(yù)糊化木薯淀粉組的1.19%及2.64為最大，而肝糖原含量以預(yù)糊化木薯淀粉組的6.37 mg/g為最小，但與其他兩組并無(wú)顯著差異(P>0.05)。各淀粉組間的存活率并未受到飼料中淀粉源變化的影響(P>0.05)。

2.2 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚腸道消化酶活性的影響

2.2.1 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚腸道中蛋白酶活性的影響

不同淀粉組鯉魚前腸、中腸及后腸的蛋白酶活性均有顯著差異(P<0.05)(表3)。預(yù)糊化木薯淀粉組的前腸蛋白酶活性(207.86 U/g)最高，顯著高于原木薯淀粉組(181.03 U/g)和木薯醋酸酯淀粉組(159.88 U/g)(P<0.05)；木薯醋酸酯淀粉組魚體中腸的蛋白酶活性(233.88 U/g)最高，顯著高于原木薯淀粉組(162.82 U/g)和預(yù)糊化木薯淀粉組(155.45 U/g)(P<0.05)；后腸蛋白酶活性以預(yù)糊化木薯淀粉組(90.10 U/g)最高，且顯著高于木薯醋酸酯淀粉組(71.89 U/g)(P<0.05)。

2.2.2 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚腸道中淀粉酶活性的影響

不同淀粉組鯉魚前腸、中腸及后腸的淀粉酶活性均有顯著差異(P<0.05)(表4)。攝食不同淀粉組的飼料，鯉魚魚體前腸、中腸及后腸的淀粉酶活性的順序?yàn)轭A(yù)糊化木薯淀粉組>木薯醋酸酯淀粉組>原木薯淀粉組，且預(yù)糊化木薯淀粉組均顯著高于其他兩組(P<0.05)。

表2 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚生長(zhǎng)性能、飼料利用及形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，下表同.

表3 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚腸道中蛋白酶活性的影響 U/g

2.2.3 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚腸道中脂肪酶活性的影響

不同淀粉組鯉魚前腸的脂肪酶活性存在顯著差異(P<0.05)，預(yù)糊化木薯淀粉組的前腸脂肪酶活性最高，顯著高于原木薯淀粉組和木薯醋酸酯淀粉組(P<0.05)；攝食不同淀粉組的飼料，鯉魚魚體中腸及后腸的脂肪酶酶活性并無(wú)顯著差異(P>0.05)，但均以原木薯淀粉組為最低(表5)。

2.3 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚血清生化指標(biāo)的影響

各淀粉組血清生化指標(biāo)中，預(yù)糊化木薯淀粉組血糖濃度(8.55 mmol/L)最低，且顯著低于原木薯淀粉組(P<0.05)；胰島素濃度(28.47 mmol/L)最高，且顯著高于原木薯淀粉組(P<0.05)；木薯醋酸酯淀粉組生長(zhǎng)激素質(zhì)量濃度(21.70 μg/L)最高，且顯著高于原木薯淀粉組(P<0.05)；木薯醋酸酯淀粉組胰島素生長(zhǎng)因子質(zhì)量濃度(16.92 μg/L)最低，且顯著低于其他兩組(P<0.05)；攝食不同淀粉組飼料的鯉魚，胰高血糖素質(zhì)量濃度無(wú)顯著差異(P>0.05)(表6)。

2.4 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚肝胰臟糖代謝關(guān)鍵酶活性的影響

各淀粉組肝胰臟中4種糖代謝關(guān)鍵酶活性見(jiàn)表7。在調(diào)控糖酵解的關(guān)鍵酶中，6-磷酸果糖-1-激酶活性以預(yù)糊化木薯淀粉組(299.60 U/g)為最高，顯著高于其他兩組(P<0.05)；丙酮酸激酶活性也以預(yù)糊化木薯淀粉組(349.47 U/g)為最高，但與其他各組無(wú)顯著差異(P>0.05)。在調(diào)控糖異生的關(guān)鍵酶中，原木薯淀粉組鯉魚的葡萄糖-6-磷酸酶活性(10.42 U/g)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性(9.95 U/g)均為最高，顯著高于其他兩組(P<0.05)。

表4 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚腸道中淀粉酶活性的影響 U/mg

表5 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚腸道中脂肪酶活性的影響 U/mg

表6 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚血清生化指標(biāo)的影響

表7 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚糖代謝關(guān)鍵酶活性的影響 U/g

3 討 論

3.1 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚生長(zhǎng)性能、飼料利用及形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響

對(duì)于同一種淀粉，魚類的生長(zhǎng)性能除受淀粉添加水平影響外，同時(shí)也受飼料中淀粉變性方式的影響。本研究中所用的鯉魚試驗(yàn)飼料是在飼料基礎(chǔ)組分中等比例加入3種不同木薯淀粉，保證各處理組淀粉水平一致，因此可認(rèn)為飼料中不同的淀粉是造成鯉魚生長(zhǎng)差異的主要原因。本研究中鯉魚質(zhì)量增加率、特定生長(zhǎng)率、蛋白質(zhì)效率和飼料系數(shù)均以預(yù)糊化木薯淀粉組為最優(yōu)，其次為木薯醋酸酯淀粉組，最低為原木薯淀粉組，說(shuō)明鯉魚對(duì)預(yù)糊化木薯淀粉的利用率最高，而對(duì)原木薯淀粉的利用率最低。已有的研究發(fā)現(xiàn)，魚類對(duì)預(yù)糊化淀粉的利用要優(yōu)于未經(jīng)處理的生淀粉，如吳小易等[14]對(duì)黃鰭鯛(Sparuslatus)幼魚、付世建等[15]對(duì)南方鲇研究均已證實(shí)糊化玉米淀粉較玉米淀粉擁有更高的消化率。在淀粉預(yù)糊化過(guò)程中，由于水分子破壞了淀粉顆粒的晶體結(jié)構(gòu)，改變其凝膠力，使之潤(rùn)漲溶于水中，因此魚體攝入后更易被淀粉酶作用，利于魚體消化吸收[16]。

作為肝臟或者內(nèi)臟中脂肪或者糖原蓄積的表觀指標(biāo)[17]，肝體比以預(yù)糊化淀粉組顯著高于木薯醋酸酯淀粉組和原木薯淀粉組；而衡量生長(zhǎng)和攝食強(qiáng)度等健康狀況的肥滿度[18]，以預(yù)糊化淀粉組為最大，這與孫金輝等[8]對(duì)鯉魚的研究結(jié)果相符，這可能與飼料中淀粉種類及飼料加工工藝有關(guān)，需今后進(jìn)一步探索研究。

3.2 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚腸道消化酶活性的影響

消化是淀粉用于生長(zhǎng)的第一限制因素。魚類消化酶主要包含蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等幾種，這些酶的活性反映了魚類的消化能力，影響魚類對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪及碳水化合物的吸收利用和對(duì)能量的獲得效率[19]。鯉魚屬典型的無(wú)胃魚類，其消化系統(tǒng)主要為肝胰腺和腸道，且其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收主要在腸道中進(jìn)行[20]。本研究發(fā)現(xiàn)，鯉魚在攝食兩種變性淀粉為主要淀粉源的飼料后前腸、中腸及后腸中淀粉酶活性均高于原木薯淀粉組，且均在預(yù)糊化木薯淀粉組得到了顯著提高，表現(xiàn)出了一致的規(guī)律性。但值得注意的是淀粉源的變化對(duì)蛋白酶和脂肪酶的影響卻無(wú)明顯的規(guī)律性，研究發(fā)現(xiàn)前腸和后腸中蛋白酶活性均在預(yù)糊化木薯淀粉組飼料組顯著提高，而中腸則在木薯醋酸酯顯著提高；前腸脂肪酶活性在預(yù)糊化木薯淀粉組飼料組顯著提高，而中腸和后腸脂肪酶活性則未受到淀粉源變化的顯著影響。上述結(jié)果揭示鯉魚對(duì)預(yù)糊化淀粉利用能力相對(duì)優(yōu)于醋酸酯淀粉。預(yù)糊化淀粉是完全糊化淀粉通過(guò)高溫迅速干燥脫水得到的淀粉顆粒，其特點(diǎn)為氫鍵斷開(kāi)、多孔狀、無(wú)明顯結(jié)晶且不易形成復(fù)合物，而醋酸酯淀粉在形成過(guò)程中具空間位阻作用的乙?；?如醋酸及醋酸衍生物)與淀粉分子上的羥基發(fā)生反應(yīng)削弱了氫鍵的締合，使醋酸酯淀粉具有耐酸、耐堿、熱穩(wěn)定性高等特性[21]，而這些特性均會(huì)降低淀粉酶對(duì)醋酸酯淀粉的水解能力，因此預(yù)糊化淀粉表現(xiàn)出對(duì)淀粉酶更強(qiáng)的敏感性[22]，推測(cè)在各處理組淀粉水平一致的條件下，正是由于預(yù)糊化淀粉的上述優(yōu)越性使鯉魚腸道中淀粉酶活性表現(xiàn)出更為明顯的誘導(dǎo)性升高[23]。此外，這種變化還會(huì)引起使其他消化酶活性產(chǎn)生相應(yīng)變化，如本研究中鯉魚在攝食預(yù)糊化木薯淀粉組飼料后前腸和后腸的蛋白酶活性和前腸脂肪酶活性均有顯著提高，也從側(cè)面印證了預(yù)糊化木薯淀粉作為飼料淀粉源能夠促進(jìn)飼料糖對(duì)蛋白質(zhì)的節(jié)約作用，而董蘭芳[9]用含糊化玉米淀粉的飼料飼喂卵形鯧鲹發(fā)現(xiàn)，魚體肝臟蛋白酶活性顯著降低，而脂肪酶顯著升高，上述差異說(shuō)明魚類消化酶活性受食性、生長(zhǎng)階段、環(huán)境因子以及營(yíng)養(yǎng)成分添加水平等各方面因素的影響，且淀粉對(duì)不同消化腺的刺激作用也不同。

3.3 木薯淀粉及其變性淀粉對(duì)鯉魚血清生化指標(biāo)及肝胰臟糖代謝關(guān)鍵酶活性的影響

鯉魚對(duì)淀粉等大分子糖類需要在腸道中消化降解成葡萄糖后才能被吸收，因此在一定程度上攝食后血糖水平反映了鯉魚對(duì)淀粉的消化吸收速率[24]。本研究測(cè)定的是養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后停食處理超過(guò)24 h的血糖水平，此時(shí)血糖水平依次為原木薯淀粉組>木薯醋酸酯淀粉組>預(yù)糊化木薯淀粉組。相對(duì)于原木薯淀粉，預(yù)糊化木薯淀粉與木薯醋酸酯淀粉結(jié)構(gòu)相對(duì)松散，加之對(duì)淀粉酶的敏感性相對(duì)較強(qiáng)，能夠被較快地分解利用，使得血糖濃度出現(xiàn)峰值的時(shí)間較早，因此魚體是否有充足的時(shí)間作出適應(yīng)血糖變化的糖代謝調(diào)節(jié)和相關(guān)激素調(diào)節(jié)，成為魚體能否有效利用淀粉的關(guān)鍵因素。和其他動(dòng)物一樣，糖酵解也是魚類最主要的葡萄糖代謝途徑，在這個(gè)過(guò)程中存在3個(gè)關(guān)鍵限速酶對(duì)糖酵解過(guò)程進(jìn)行調(diào)控，即己糖激酶、6-磷酸果糖-1-激酶及丙酮酸激酶。其中6-磷酸果糖-1-激酶為糖酵解中最為關(guān)鍵的限速酶，而丙酮酸激酶催化糖酵解的最后一步，將磷酸丙酮酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸。在Shikata等[25]的研究中發(fā)現(xiàn)，鯉魚在攝食含30%淀粉或葡萄糖的飼料后，肝胰臟6-磷酸果糖-1-激酶活性提升顯著，而攝食含30%半乳糖的飼料后，6-磷酸果糖-1-激酶活性降低。Cheng等[26]在其研究中發(fā)現(xiàn)，飼料中玉米淀粉水平的升高可誘導(dǎo)鯉魚肝胰臟丙酮酸激酶活性升高。本研究發(fā)現(xiàn)在調(diào)控糖酵解的關(guān)鍵酶中，預(yù)糊化木薯淀粉組的6-磷酸果糖-1-激酶和丙酮酸激酶活性最高，且其6-磷酸果糖-1-激酶活性顯著高于其他兩組；在糖代謝相關(guān)的激素中，具有降血糖作用的胰島素及類胰島素生長(zhǎng)因子濃度均在預(yù)糊化木薯淀粉組達(dá)到最高，而能夠抑制葡萄糖利用的胰高血糖素和生長(zhǎng)激素均在預(yù)糊化木薯淀粉組降至最低，說(shuō)明攝食預(yù)糊化木薯淀粉后所產(chǎn)生的高血糖水平能夠在一定程度上誘導(dǎo)分泌糖酵解酶及降血糖激素，促進(jìn)鯉魚肝臟糖酵解作用。

作為補(bǔ)充或恢復(fù)肝臟糖原儲(chǔ)備的重要途徑，糖異生也是維持葡萄糖穩(wěn)態(tài)的重要環(huán)節(jié)。本研究中鯉魚肝胰臟糖異生關(guān)鍵酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶和葡萄糖-6-磷酸酶活性均受到飼料添加預(yù)糊化木薯淀粉及木薯醋酸酯淀粉的顯著抑制，這與聶琴等[27]對(duì)大菱鲆(Scophthalmusmaximus)的研究結(jié)果一致。同時(shí)鯉魚肝胰臟糖原水平也以預(yù)糊化木薯淀粉組及木薯醋酸酯淀粉組相對(duì)較低，揭示魚體內(nèi)可能擁有較為完善的糖異生調(diào)控機(jī)制。

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