王東霞，王再興

自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞是表型為CD3-CD56+的淋巴細(xì)胞，主要功能是細(xì)胞毒性和產(chǎn)生細(xì)胞因子，在先天和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。細(xì)胞因子的失衡與多種自身免疫性疾病的發(fā)病有關(guān)，NK細(xì)胞可分泌多種細(xì)胞因子，如干擾素（IFN）-γ、腫瘤壞死因子（TNF）-ɑ、白細(xì)胞介素（IL）-22和IL-17。同時，一些細(xì)胞因子如IL-15、IL-18、IL-12和IL-23能誘導(dǎo)NK細(xì)胞產(chǎn)生更多的細(xì)胞因子[1,2]。NK細(xì)胞主要有CD56bright和CD56dim兩個亞群，它們的表型和功能有很大不同。CD56brightNK細(xì)胞比CD56dimNK細(xì)胞細(xì)胞毒性更小，但可產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子。CD56brightNK細(xì)胞優(yōu)先遷移到次級淋巴器官和慢性炎癥部位，而CD56dimNK細(xì)胞優(yōu)先遷移到急性炎癥部位[3]。自然殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體（killer Ig-like receptor，KIR）表達(dá)于NK細(xì)胞和某些T淋巴細(xì)胞亞群，為免疫球蛋白超家族成員。KIR 包括抑制型和激活型受體，其通過識別表達(dá)于靶細(xì)胞上的人類白細(xì)胞抗原Ⅰ（human leucocyte antigen，HLA-Ⅰ）類分子，調(diào)節(jié)NK 細(xì)胞的細(xì)胞毒性，在自身免疫性疾病發(fā)病過程中起重要的作用[4]。NK細(xì)胞在自身免疫性疾病中的作用與NK細(xì)胞亞群、不同組織的微環(huán)境和相應(yīng)疾病的不同階段有關(guān)。

1 NK細(xì)胞與銀屑病

銀屑病是常見的慢性炎性皮膚病，免疫細(xì)胞和炎性細(xì)胞因子通過影響角質(zhì)形成細(xì)胞的功能在銀屑病發(fā)病過程中起作用。研究發(fā)現(xiàn)，銀屑病患者皮損處有NK細(xì)胞浸潤，其分泌的細(xì)胞因子血清水平發(fā)生改變在銀屑病發(fā)病中起重要作用。目前關(guān)于NK細(xì)胞在銀屑病發(fā)病中作用的研究結(jié)果是有爭議的。

功能受損的NK細(xì)胞可通過多種機(jī)制導(dǎo)致銀屑病慢性炎癥的發(fā)生。作為先天免疫系統(tǒng)的一部分，炎癥部位的NK細(xì)胞有免疫調(diào)節(jié)作用，具有殺死未成熟樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）和促進(jìn)DC成熟的能力，能影響隨后的適應(yīng)性免疫應(yīng)答。Dunphy 等[5]發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞細(xì)胞毒性的降低可導(dǎo)致DC的功能改變，從而引起有害的適應(yīng)性免疫應(yīng)答。研究發(fā)現(xiàn)銀屑病患者血液循環(huán)中NK細(xì)胞數(shù)目、細(xì)胞毒性和生成細(xì)胞因子的功能發(fā)生改變。銀屑病皮損面積和嚴(yán)重度指數(shù)（psoriasis area and severity index，PASI）評分較高的銀屑病患者皮損處NK細(xì)胞增多，其生成的細(xì)胞因子可以促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖并加重局部炎癥反應(yīng)程度[6]。銀屑病皮損中，CD3-CD56+NK細(xì)胞為5%～8%，大部分屬于CD56brightNK細(xì)胞亞群[3]。銀屑病患者循環(huán)中的NK細(xì)胞遷移到皮損的炎癥部位，致使外周血中NK殺傷細(xì)胞數(shù)目減少[7]。Luci 等[8]認(rèn)為銀屑病患者NK細(xì)胞細(xì)胞毒性與健康個體相比沒有差異；Dunphy等[5]認(rèn)為銀屑病患者NK細(xì)胞細(xì)胞毒性是降低的。Batista等[9]認(rèn)為銀屑病患者體內(nèi)活化的NK細(xì)胞生成的IFN-γ增多，致使局部炎癥反應(yīng)加重。然而，最近一項研究發(fā)現(xiàn)，患者體內(nèi)NK細(xì)胞產(chǎn)生的主要炎性細(xì)胞因子IFN-γ的水平比同一研究組健康受試者低[5]。研究證實，Th1和Th17細(xì)胞與銀屑病發(fā)病相關(guān)，且IL-17起關(guān)鍵作用[10]。NK細(xì)胞是IFN-γ的重要早期來源，這種細(xì)胞因子在許多炎性疾病中發(fā)揮作用，并促進(jìn)Th1細(xì)胞極化，抑制Th17細(xì)胞分化。NK細(xì)胞生成IFN-γ的減少可以導(dǎo)致更多有害Th17細(xì)胞生成，從而引起異常炎癥的發(fā)生。NK細(xì)胞還可以殺死過度激活的巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞，包括自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞[11,12]。這表明NK細(xì)胞通過裂解這些潛在的破壞性免疫細(xì)胞，在免疫應(yīng)答反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。因此，在異常炎癥的情況下（如銀屑病中所見），NK細(xì)胞功能反應(yīng)降低能導(dǎo)致免疫應(yīng)答失調(diào)，使活化的免疫細(xì)胞存活時間延長，從而導(dǎo)致慢性炎癥的發(fā)生。

銀屑病與遺傳因素有很大相關(guān)性，在遺傳水平上也發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞參與銀屑病的證據(jù)。長期以來人們已經(jīng)認(rèn)識到HLA Ⅰ類家族的作用，NK細(xì)胞表面的KIR與HLAⅠ類分子相互作用調(diào)節(jié)NK細(xì)胞活性[13]。有報道認(rèn)為KIR基因與銀屑病遺傳易感性之間有關(guān)聯(lián)[14]，但其結(jié)果尚有爭議。Chang等[15]認(rèn)為KIR和銀屑病遺傳易感性之間無聯(lián)系。

2 NK細(xì)胞與斑禿

斑禿（alopecia areata，AA）是常見于兒童和青年人的自身免疫性皮膚病。在生長階段，正常毛囊實際上是從免疫系統(tǒng)中分離出的免疫赦免（immune-privileged，IP）位點[16]。正常情況下，上皮內(nèi)相互作用的T淋巴細(xì)胞和朗格漢斯細(xì)胞在人類頭發(fā)的遠(yuǎn)端產(chǎn)生有效的免疫屏障。毛囊上皮細(xì)胞不表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物（major histocompatibility complex，MHC）Ⅰ類和Ⅱ類分子，毛囊區(qū)域存在大量負(fù)性調(diào)節(jié)細(xì)胞因子和神經(jīng)肽是IP形成的主要機(jī)制[17]。大量研究證實，AA患者發(fā)生IP的喪失導(dǎo)致毛發(fā)脫失[18-20]。AA患者皮損處增加的NK細(xì)胞活性構(gòu)成IP區(qū)域喪失的關(guān)鍵因素，通過下調(diào)IFN-γ驅(qū)動的炎癥反應(yīng)恢復(fù)毛囊的IP可能是未來治療AA的有效策略。

自 然 殺 傷2組 成 員D（natural killer group 2，member D，NKG2D）在許多免疫細(xì)胞上表達(dá)（包括NK細(xì)胞和不同的T淋巴細(xì)胞亞群），是免疫系統(tǒng)的有效激活受體。NKG2D通過識別靶細(xì)胞上的MHCⅠ類抗原發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[21]。正常頭皮中不存在表達(dá)NKG2D的CD56+NK細(xì)胞，但萎縮性AA病變中有較多表達(dá)NKG2D的CD56+NK細(xì)胞[22]。同時，近端外根鞘、真皮乳頭和AA毛囊的結(jié)締組織鞘中NKG2D的活化配體主要組織相容性復(fù)合物Ⅰ類分子相關(guān)蛋白A（major histocompatibility complex class I chain-related proteins A，MICA）和UL16結(jié)合蛋白3（UL16 binding protein 3，ULBP3）以非常高的水平表達(dá)[22,23]。AA的人源化小鼠模型也證明NKG2D+NK細(xì)胞以及NKG2D活化配體如MICA和ULBP3在原發(fā)性AA發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用[24]。這意味著AA患者皮損中MICA和ULBP3的上調(diào)使毛囊對NKG2D+NK細(xì)胞攻擊的易感性增加，從而促進(jìn)毛囊生長期終止和AA進(jìn)展。

此外，NK細(xì)胞是生成IFN-γ的主要細(xì)胞，IFN-γ在AA進(jìn)展中起關(guān)鍵作用，可促進(jìn)NK細(xì)胞激活從而抑制IP的發(fā)生[25,26]。除了激活NK細(xì)胞的信號，NK細(xì)胞活性抑制因子——遷移抑制因子（migration inhibitory factor，MIF）在AA患者IP區(qū)域毛囊中的表達(dá)減少或缺失[16]。

一項研究顯示編碼NK細(xì)胞受體NKG2D的活化配體與UL16結(jié)合蛋白基因簇有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)，該研究進(jìn)一步證明結(jié)合蛋白在AA患者毛囊真皮鞘中的表達(dá)上調(diào)[27]。這些結(jié)果表明，AA患者中NK主要在毛囊的微環(huán)境中起作用。

3 NK細(xì)胞與尋常性天皰瘡

尋常性天皰瘡（pemphigus vulgaris，PV）是一種自身免疫性大皰性皮膚病，主要由引起表皮細(xì)胞棘層松解的抗橋粒芯糖蛋白3（desmoglein 3，Dsg3）自身抗體介導(dǎo)[28]。一項研究發(fā)現(xiàn)PV患者的NK細(xì)胞數(shù)目與健康對照者的相似[29]。然而，Takahashi等[30]發(fā)現(xiàn)PV患者與健康對照者相比，外周血中NK細(xì)胞的百分比和絕對數(shù)顯著增高，這些細(xì)胞大部分處于激活狀態(tài)。盡管細(xì)胞毒性沒有差異，但來自PV患者的NK細(xì)胞編碼IL-12受體β2、穿孔素和粒酶B的mRNA水平降低，且患者的IL-12信號傳導(dǎo)水平下降。這些研究結(jié)果提示外周血中NK細(xì)胞水平不一定能反映皮損嚴(yán)重程度。

Stern等[31]證實了PV患者體內(nèi)部分表達(dá)離體HLA-DR和共刺激分子B7同系物3（B7 homologue 3，B7-H3）的NK細(xì)胞處于活化狀態(tài)。Dsg3存在的狀態(tài)下NK細(xì)胞與自體CD4+T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)時，T淋巴細(xì)胞增殖，證明來自PV患者的NK細(xì)胞有抗原提呈作用。然而，研究沒有提供支持NK細(xì)胞的抗原攝取和加工的相關(guān)數(shù)據(jù)。因此，外源肽“外部”能識別NK細(xì)胞表達(dá)的HLA-DR分子，而沒有經(jīng)后者的任何加工。來自活動期PV患者的共培養(yǎng)物的上清液含有高水平的IL-6，IL-8和IFN-γ，這可能證明NK細(xì)胞刺激T淋巴細(xì)胞生成這些細(xì)胞因子，盡管NK細(xì)胞能生成相同的細(xì)胞因子[31]。

總之，PV患者外周血NK細(xì)胞被激活后，通過促進(jìn)Th2反應(yīng)[26]、炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生[25]或兩者相互作用而促進(jìn)疾病的發(fā)展。目前的研究尚無法確認(rèn)NK細(xì)胞參與了PV的發(fā)病，特別是關(guān)于外周血NK細(xì)胞功能障礙是其原因還是后果的問題。近年來越來越多地認(rèn)為NK細(xì)胞是一組參與先天免疫和適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)的免疫細(xì)胞。NK細(xì)胞在皮膚病中的作用引起人們越來越多的關(guān)注，特別是由IL-22和IL-17決定的那些自身免疫性皮膚?。ㄈ玢y屑病、AA、PV）。許多細(xì)節(jié)仍不清楚，致力于探索NK細(xì)胞及其亞群在這些皮膚病發(fā)病機(jī)制中的作用，將對皮膚疾病的診療具有重要意義。