胡守明

摘要：為了確診一例犬乳腺腫瘤的種類，試驗應(yīng)用石蠟切片制作技術(shù)、蘇木精-伊紅染色（HE），對腫瘤組織進行了病理組織學(xué)的研究。結(jié)果顯示，腫瘤組織內(nèi)有不同分化程度的典型癌巢出現(xiàn)，巢癌間可見大量炎性細胞浸潤，癌腔內(nèi)可見脫落的角化細胞，癌巢中棘細胞呈同心圓狀排列，細胞嗜酸性增強，核濃縮及角質(zhì)化程度增大，中心形成透明的強嗜酸性的角質(zhì)化癌珠。經(jīng)過病理組織學(xué)研究確診該腫瘤為發(fā)生在乳腺組織的鱗狀細胞癌。

關(guān)鍵詞：犬；鱗狀細胞癌；病理組織學(xué)

中圖分類號：S858.292 文獻標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2018）01-0007-02

近年來，隨著人們生活水平的提高，人們對精神生活的追求也越來越高，犬等寵物也在不斷進入各個家庭，隨著犬?dāng)?shù)量的增多各種疾病也在不斷出現(xiàn)。其中腫瘤性疾病是危害寵物健康的重要疾病。腫瘤按照嚴(yán)重程度可以分為良性腫瘤與惡性腫瘤，常見的有乳腺癌、纖維瘤、眼瞼腺增生、脂肪瘤、淋巴瘤、皮下鱗狀細胞癌、腹腔惡性黑色素瘤、膀胱瘤、肝癌、骨肉瘤等[1]。1998年的馬克·莫里斯基金會的動物健康調(diào)查的報道顯示，超過2 000名被采訪者闡述腫瘤是導(dǎo)致犬死亡的主要原因，而且全世界寵物腫瘤疾病的患病率還在逐漸上升[2]。在國內(nèi)腫瘤排行中，乳腺腫瘤、皮膚腫瘤、肛周瘤、睪丸腫瘤、陰道腫瘤的發(fā)病率排行在前5位。在國外，皮膚腫瘤的發(fā)生率排在了第一位，乳腺腫瘤排在第二位[3]。乳腺腫瘤的發(fā)生率在寵物犬中發(fā)病率較高，且各個階段均可發(fā)生，尤其以老年母犬為主，9～11歲的老齡母犬發(fā)病率最高。La等[4]調(diào)查表明，乳腺腫瘤占犬類腫瘤發(fā)病率的13.4%，有41.7%發(fā)生在子宮未摘除的母犬，而且乳腺腫瘤的最常發(fā)部位為最后一對乳腺，發(fā)病率為49.53%，其中乳腺癌又占到乳腺腫瘤的50%左右[5]。其發(fā)病原因主要是由于最后一對乳腺較為發(fā)達，乳腺的實質(zhì)、間質(zhì)及脂肪組織十分豐富，進而造成了疾病的多發(fā)[3，4]。腫瘤在動物機體的發(fā)病原因非常復(fù)雜，可受遺傳、內(nèi)外環(huán)境等因素的影響。在遺傳因素中，基因突變在引起犬乳腺腫瘤的形成和發(fā)展中起主要作用，而且動物的類別、年齡、性別和機體的差異性均可引起腫瘤的發(fā)生[6]。腫瘤的發(fā)生機理是細胞生長異常、分化失控的結(jié)果，各種病因?qū)е铝思毎蚪Y(jié)構(gòu)的改變或調(diào)控的失常。目前關(guān)于癌變機理的學(xué)說主要有基因突變學(xué)說、基因表達失調(diào)學(xué)說和癌基因?qū)W說。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個動態(tài)的變化過程，在機體本身以及各種環(huán)境因素的共同作用下，使正常的細胞形態(tài)或性質(zhì)發(fā)生變化，最終產(chǎn)生腫瘤。2017年8寧夏某動物醫(yī)院接診到一例乳腺下長有一增生物的患犬，為了確診增生物的類型，手術(shù)摘除后進行了病理組織學(xué)的研究。

1 材料與方法

1.1 病料

從病犬乳腺內(nèi)摘除的增生物。

1.2 設(shè)備和儀器

手術(shù)刀、手術(shù)剪、鑷子、托盤、標(biāo)本缸、恒溫箱、溫度計、石蠟、石蠟切片機、水浴鍋、燒杯、數(shù)碼顯微鏡、烘片機、載玻片、蓋玻片、染色缸、染色架等。

1.3 試劑

甘油、蛋清、10%福爾馬林溶液、無水乙醇、二甲苯、石蠟、蘇木精染色液、伊紅、鹽酸、中性樹膠等。

1.4 方法

1.4.1 病犬的臨床檢查及增生物的摘除 觀察病犬臨床表現(xiàn)，測量體溫、體重，取病犬左后腿靜脈全血進行生化分析。B超檢查，對發(fā)現(xiàn)的乳腺增生物進行摘除。

1.4.2 乳腺增生物的病理組織學(xué)觀察 將乳腺增生組織用10%福爾馬林固定7 d后，制作石蠟切片，HE染色，光學(xué)顯微鏡觀察。

2 結(jié)果與分析

2.1 病犬的臨床檢查及增生物的摘除

該寵物犬8歲，重7.2 kg，寵物犬的主人觀察到該犬左側(cè)第四乳房腫脹，乳頭下有腫塊，表面皮膚發(fā)紅，有出血現(xiàn)象，因此送到銀川愛康動物醫(yī)院進行診療。該犬的心率、呼吸、食欲、排糞、排尿狀態(tài)無明顯異常，體溫38.2 ℃，經(jīng)B超檢查發(fā)現(xiàn)該犬左側(cè)第一乳頭下方及左側(cè)第四乳頭下方均有增生物，觸之較硬，隨即進行全血生物分析。生化分析結(jié)果顯示該犬各項指標(biāo)均正常，隨后進行了犬的全身麻醉，手術(shù)摘除增生物（圖1）。增生物位于犬第一和第四乳腺皮下乳腺組織內(nèi)，還沒有突破皮膚生長。第一乳腺皮下組織內(nèi)組織塊大小約為5 cm×4 cm；第四乳腺皮下組織內(nèi)組織塊大小約為12 cm×8 cm，淡紅色，無包膜，外觀菜花樣，實質(zhì)呈浸潤生長，與乳腺組織融合，無明顯界限；增生物質(zhì)脆，切面有出血。

2.2 增生物的病理組織學(xué)觀察

經(jīng)過顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)增生物為惡性腫瘤—鱗狀細胞癌。鏡下可見腫瘤由間質(zhì)和實質(zhì)組成，實質(zhì)沒有明顯的層次，間質(zhì)的紅色粗大的膠原蛋白束間有大小不等、分化程度不同的圓形、索狀的癌巢（圖2）；有的癌巢實心，有的空心，癌巢的細胞層次不一致，分化程度較高的癌巢中央可清楚的見到透明的和呈紅色角質(zhì)化的物質(zhì)（圖3）；癌巢之間可見炎性細胞的浸潤，沒有明顯的出血現(xiàn)象。

腫瘤實質(zhì)細胞主要由棘細胞樣細胞構(gòu)成，核密集，有的核裂解，并可見不同分化時期的鱗狀細胞癌的癌巢。癌巢中分化程度高的棘細胞形成同心圓的形狀，癌巢中的細胞嗜酸性明顯增強，細胞核濃縮染色加深，而且角化程度明顯增大，中心形成了透明的強嗜酸性的角質(zhì)化癌珠。

3 討論

結(jié)合病犬的臨床癥狀、B超檢查結(jié)果和增生物的病理組織學(xué)觀察結(jié)果，最終確診該犬乳腺部位所生長的增生物為腫瘤，該腫瘤類型為鱗狀細胞癌。

鱗狀細胞癌（Squamous cell carcinoma， SCC）簡稱鱗癌，又名表皮樣癌，是起源于皮膚或黏膜棘細胞的惡性腫瘤，是一類常見的惡性腫瘤，該病的癌組織生長速度較快，而且呈乳頭狀生長，破潰的癌組織可形成潰瘍面。該病的發(fā)生往往可基于常見的某些皮膚病發(fā)生，例如慢性潰瘍性疾病、皮炎、尋常性狼瘡病、慢性盤狀紅斑狼瘡病、載膜白斑病、燒傷疤痕癥狀等，惡性程度較基底細胞癌高。磷狀細胞癌可通過淋巴通路進行轉(zhuǎn)移，進而引起其他部位也發(fā)生癌變的現(xiàn)象，因此該病的危害對于患犬來說是非常嚴(yán)重的[7]。臨床上依據(jù)癌細胞的分化程度，常常把鱗狀細胞癌分為三個等級：高分化鱗癌（I級）、中分化鱗癌（II級）和低分化鱗癌[8]。發(fā)生病變的高分化鱗狀細胞癌組織可出現(xiàn)癌巢中心完全角化現(xiàn)象，可以形成癌珠。癌珠中心的角化物部分呈現(xiàn)層狀結(jié)構(gòu)，角化物周圍依次為基底細胞樣癌細胞、棘細胞樣癌細胞、扁平癌細胞；發(fā)生病變的中分化鱗狀細胞癌組織可出現(xiàn)中等細胞分化，癌巢中心有少量的角質(zhì)化現(xiàn)象；病變的低分化鱗狀細胞癌組織在癌巢內(nèi)不出現(xiàn)角質(zhì)化和無癌珠形成的病理特征[9，10]。通過觀察患犬腫瘤組織切片可見有不同分化程度的典型癌巢出現(xiàn)，癌巢間可見較多炎性細胞浸潤，癌腔中可見脫落的角化細胞，癌巢中的棘細胞呈同心圓狀排列，而且癌巢中的細胞嗜酸性明顯增強，核濃縮染色加深、角化程度也明顯增大，癌巢中心形成了透明的強嗜酸性的角質(zhì)化癌珠。因此該犬病理特征為高級分化鱗狀細胞癌。

乳腺鱗狀細胞癌在老年犬發(fā)病率較高，對于麻醉技術(shù)要求及麻醉設(shè)備要求更高，因此對于麻醉師和主治醫(yī)師來說進行疾病的治療具有很大的難度。雖然在臨床診斷過程中，超聲斷層掃描和X射線檢查等操作能夠快速的對患犬所得疾病進行確診，但是診斷費用較高，大多數(shù)家庭很難接受。對于病理組織學(xué)診斷，雖然組織切片的制作過程較為復(fù)雜，但是可以從根本上進行良性和惡性腫瘤的診斷，為疾病的發(fā)生機理研究做鋪墊，并且便于手術(shù)后疾病治療工作的開展。

參考文獻：

[1] 俞 鵬.長沙地區(qū)犬腫瘤病的調(diào)查與分析[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（24）：33-34.

[2] WITHROW S，VAIL D，RODNEY P.Withrow and MacEwen's Small Animal Clinical Oncology[M].Oxford：Elsevier LTD，2007.5.

[3] 嚴(yán)杜建.犬腫瘤的研究概況[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2016（2）：142-145.

[4] LA G M，GIAMMANCO M. Breast cancer and obesity[J].Panminerva Medica，2001，43（2）：123-133.

[5] 楊 帆，胡長敏，丁明星.7例犬乳腺腫瘤的病理組織學(xué)分析[J].畜牧與獸醫(yī)，2012（S2）：122-125.

[6] 徐樹明，楊曉棠，宋利平，等.乳腺鱗狀細胞癌影像學(xué)及臨床特征探討[J].腫瘤研究與臨床，2011，23（9）：595-597.

[7] 馬永軍，陳生明.牛皮膚鱗狀細胞癌的病理組織學(xué)診斷[J].養(yǎng)殖與飼料，2011（3）：50-51.

[8] 馮愛娟，劉 耘，楊太成.鱗狀細胞癌研究進展[J].廣東醫(yī)學(xué)，2004，25（12）：1474-1475.

[9] 張文校，鄭春妹，陳 琳.一例犬乳房鱗狀細胞癌的診治[J].福建畜牧獸醫(yī)，2014（2）：42-43.

[10] 劉 韜，石錦江，耿 毅，等.一例犬鱗狀上皮細胞癌病理學(xué)診斷[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013（4）：34-35.endprint