余清源　劉捷

【摘要】 目的：探討分析手足口病（HFMD）繼發(fā)細(xì)菌感染患兒檢測降鈣素原、超敏C反應(yīng)蛋白及白細(xì)胞介素-6的臨床意義。方法：選取2016年1月-2017年4月本院收治的HFMD初診患兒100例，根據(jù)其有無細(xì)菌感染分為對照組和研究組，對照組為HFMD未并發(fā)感染組，研究組為HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染患兒，對比分析檢測兩組的降鈣素原（PCT）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）及白細(xì)胞介素-6（IL-6）。結(jié)果：研究組患兒的hs-CRP和IL-6水平均高于對照組（P<0.05），但兩組PCT比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；研究組PCT、hs-CRP和IL-6的陽性檢出率均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；對研究組PCT、hs-CRP和IL-6診斷的ROC曲線下面積（AUC）分別為0.912、0.764和0.833，臨界值為0.062 ng/mL、10.490 mg/L和15.870 pg/mL，診斷的特異度為95.5%、79.9%和72.1%，靈敏度為82.1%、73.9%和85.1%。PCT的特異度最高，診斷價(jià)值最大，IL-6的靈敏度最高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：在對HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染患兒的診斷中，HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染患兒PCT、hs-CRP和IL-6水平均增高，根據(jù)ROC曲線顯示PCT的特異度最高，診斷價(jià)值最大，IL-6的靈敏度最高，三個(gè)指標(biāo)均可以作為診斷標(biāo)準(zhǔn)，值得推廣和應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 手足口?。?繼發(fā)細(xì)菌感染； 降鈣素原； 超敏C反應(yīng)蛋白； 白細(xì)胞介素-6； 臨床意義

Clinical Significance of Procalcitonin，Hypersensitivity C Reactive Protein and Interleukin-6 in Children with Hand Foot Mouth Disease Secondary to Bacterial Infection/YU Qingyuan，LIU Jie.//Medical Innovation of China，2017，14（35）：009-013

【Abstract】 Objective：To investigate the clinical significance of procalcitonin，high sensitivity C reactive protein and interleukin-6 in children with HFMD secondary to bacterial infection.Method：From January 2016 to April 2017 in our hospital diagnosed 100 cases of children with HFMD secondary to bacterial infection were divided into the control group and the study group，the control group was HFMD without secondary to bacterial infection group，the study group was HFMD secondary to bacterial infection，procalcitonin（PCT），high sensitive C reactive protein（hs-CRP） and interleukin-6（IL-6） of two groups were detected and analyzed.Result：IL-6 and hs-CRP of the study group were higher than those of the control group（P<0.05），but there was no significant difference of PCT between two groups（P>0.05）.The positive rate of PCT，hs-CRP and IL-6 of the study group were significantly higher than those of the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.The diagnosis of ROC area under the curve（AUC） of PCT，hs-CRP and IL-6 in the study group were 0.912，0.764 and 0.833，the critical value were 0.062 ng/mL，10.490 mg/L and 15.870 pg/mL，the specificity were 95.5%，79.9% and 72.1%，the diagnostic sensitivity were 82.1%，73.9% and 85.1%.PCT had the highest specificity and diagnostic value of maximum，the sensitivity of IL-6 was the highest，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：In the diagnosis of HFMD in children with secondary bacterial infection，PCT，hs-CRP and IL-6 levels increase，according to the ROC curve of PCT showes the highest specificity and diagnostic value of maximum sensitivity of IL-6 is the highest，three indexes can be used as diagnostic criteria，is worthy of promotion and application.endprint

【Key words】 HFMD； Secondary bacterial infection； Procalcitonin； High sensitivity C reactive protein； Interleukin-6； Clinical significance

First-authors address：Wuhan University School of Basic Medical Sciences，Wuhan 430000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.35.003

手足口?。℉FMD）常見于5歲以下的嬰幼兒，主要由腸道病毒71型（EV71）和柯薩奇病毒引起，處于這個(gè)年齡段的嬰幼兒由于免疫力比較低下，所以很容易出現(xiàn)細(xì)菌感染。從臨床癥狀上無法判斷其是否存在細(xì)菌感染，臨床上常用的方法是對細(xì)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)來檢測細(xì)菌感染，但是這種檢測方法存在的最大缺點(diǎn)是檢測的結(jié)果報(bào)告需要3～5 d，時(shí)程太長，缺乏靈敏度，這樣會(huì)影響到對患兒的快速診斷和治療[1]。目前，對血清降鈣素原（PCT）進(jìn)行檢測可以作為診斷其是否具有細(xì)菌感染的依據(jù)，PCT是一種前肽降鈣素[2]。除了PCT可以作為檢測細(xì)菌感染的指標(biāo)外，白細(xì)胞介素-6（IL-6）和超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）也可以作為是否存在細(xì)菌感染的檢測指標(biāo)。本研究對HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染患兒聯(lián)合檢測PCT、hs-CRP及IL-6的臨床意義進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月-2017年4月本院收治的HFMD初診患兒100例作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合HFMD診療指南標(biāo)準(zhǔn)（2010年版）[3]；年齡小于12周歲；患者均進(jìn)行病原體和血清的培養(yǎng)，確診是否存在細(xì)菌感染；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：并發(fā)有其他自身免疫性疾病的患兒；有消化道和呼吸道感染病史的患兒；入院前用過糖皮質(zhì)激藥物和免疫抑制劑的患兒；不配合檢測的患兒[4]。兩組患者均知情同意本研究，并經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。依據(jù)其是否感染細(xì)菌分為對照組和研究組，每組50例。對照組，男27例，女23例，年齡7個(gè)月～8歲，平均（3.94±0.85）歲，住院時(shí)間4～9 d，平均（6.13±0.34）d。研究組，男26例，女24例，年齡8個(gè)月～7歲，平均（3.17±0.81）歲，住院時(shí)間5～9 d，平均（7.01±0.25）d。兩組患兒性別、年齡和住院時(shí)間等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 兩組患兒均在入院后空腹?fàn)顟B(tài)下使用抗生素治療之前靜脈采血3 mL，然后放置于真空的分離膠管內(nèi)，取血清檢測患兒的PCT、hs-CRP和IL-6。（1）PCT：把采集的血氧標(biāo)本依據(jù)3500 r/min進(jìn)行離心，時(shí)間為10 min，采用的是自動(dòng)平衡離心機(jī)（北京雷伯爾LDZS-2），離心結(jié)束后，在全自動(dòng)免疫的熒光分（miniVIDAS法國生物梅里埃）的屏幕上，選擇Status S Green，并選擇A或B倉位[5]。選擇好倉位后輸入位置1，并且按Assay到Select Assay，然后選擇PCT，這時(shí)需要輸入標(biāo)本的號碼，并且回車轉(zhuǎn)入到下一個(gè)位置，放入PCT的試劑條，并把離心好以后的200 μL標(biāo)本血清放入相對應(yīng)的試劑條孔里面。這時(shí)就可以按開始鍵，開始自動(dòng)檢測，檢測時(shí)間需要20 min，并且要將檢測數(shù)據(jù)打印出來，進(jìn)行記錄[6]。（2）IL-6：將血液標(biāo)本在常溫下離心10 min 3000 r/min，然后選取上清液1 mL放入-80 ℃進(jìn)行冰凍保存，等待檢測。檢測時(shí)需要采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）用試劑盒來對血清IL-6進(jìn)行檢測，試劑盒的使用要依照說明書來進(jìn)行[7]。

（3）hs-CRP：把采集的血清標(biāo)本用免疫速率散射比濁法來進(jìn)行檢測，使用的是特定蛋白分析儀以及配套的試劑盒（IMMAUE800 貝克曼公司生產(chǎn)），然后對檢測結(jié)果進(jìn)行記錄。

1.3 觀察指標(biāo) 通過檢測患兒血清的PCT、

hs-CRP及IL-6，對比分析兩組患者的PCT、hs-CRP

和IL-6水平以及陽性檢出率，并分析PCT、

hs-CRP和IL-6對診斷HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染的價(jià)值。PCT≥0.50 ng/mL為陽性；hs-CRP>8.00 mg/L為陽性；IL-6>10.00 pg/mL為陽性。使用ROC曲線評估各個(gè)指標(biāo)診斷細(xì)菌感染的效果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，非正態(tài)分布計(jì)量資料用中位數(shù)四分位數(shù)間距[M（P25，P75）]表示，比較采用Mann-Whitney U 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒的PCT、hs-CRP和IL-6水平比較 研究組患兒的IL-6和hs-CRP水平均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但兩組PCT比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2 兩組患者的PCT、hs-CRP和IL-6陽性檢測率對比 研究組患者的hs-CRP、PCT和IL-6的陽性檢測率均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.3 PCT、hs-CRP和IL-6對HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染的診斷價(jià)值 PCT的曲線下面積最大，特異度最高，IL-6的靈敏度最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見圖1和表3。

3 討論

HFMD是由病毒通過多種途徑進(jìn)行傳播而引起的，主要有腸道病毒71（EV71）和柯薩奇病毒A16（CVA16），是一種兒童急性傳染性疾病，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱以及手足口等部位出現(xiàn)皮疹等[8]。多見于嬰幼兒，大多數(shù)患兒癥狀比較輕，均為自限性疾病，經(jīng)過治療后一般均可痊愈。但是還有少部分病癥比較嚴(yán)重的患兒，自身的免疫力和抵抗力比較低，會(huì)出現(xiàn)繼發(fā)性的細(xì)菌感染，如皮膚黏膜和呼吸道感染等，會(huì)影響到疾病的恢復(fù)，并且延長了病程[9]。目前，針對手足口疾病的治療缺少有效的治療手段和特異性疫苗，所以在治療中主要是抗病毒和加強(qiáng)免疫力，對于繼發(fā)細(xì)菌感染的患兒進(jìn)行抗感染治療[10]。早期判斷患兒是否存在繼發(fā)細(xì)菌性感染很重要，臨床上比較常見的是采用實(shí)驗(yàn)室的指標(biāo)CRP和白細(xì)胞數(shù)（WBC）為標(biāo)準(zhǔn)，采用病原菌培養(yǎng)進(jìn)行鑒定，但是存在很多缺點(diǎn)，這種細(xì)菌培養(yǎng)的周期比較長，并且不同的實(shí)驗(yàn)室對陽性率的培養(yǎng)存在很大的差異，靈敏度也不高，會(huì)影響到患兒的診斷和治療[11]。所以隨著科技的發(fā)展，很多實(shí)驗(yàn)室都通過檢測患者血清中的因子與感染情況進(jìn)行診斷。本研究就采用聯(lián)合PCT、hs-CRP及IL-6的檢測對HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染患兒進(jìn)行診斷。endprint

細(xì)菌感染患兒的特征一般是體溫升高、白細(xì)胞計(jì)算增加，hs-CRP和中性粒細(xì)胞所占比例均會(huì)升高，在很多臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)了患兒的白細(xì)胞計(jì)數(shù)的正常范圍比較寬，很多患兒的白細(xì)胞計(jì)數(shù)雖然比較低，但是升高后也不會(huì)超出正常的范圍值[12]。白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響因素有很多，如高溫、情緒和寒冷等，在沒有出現(xiàn)細(xì)菌感染的情況下，出現(xiàn)高熱也會(huì)導(dǎo)致患者體內(nèi)白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高。所以體溫以及白細(xì)胞計(jì)數(shù)的升高很多時(shí)候是由于高溫以及其他應(yīng)激因素產(chǎn)生的，不能作為判斷是否存在細(xì)菌感染的依據(jù)[13]。C反應(yīng)蛋白是一種急性時(shí)反應(yīng)相蛋白，主要發(fā)生在微生物入侵或者機(jī)體發(fā)生組織損傷時(shí)出現(xiàn)的炎癥，從而產(chǎn)生刺激而促使肝細(xì)胞合成的。hs-CRP和

C反應(yīng)蛋白其實(shí)屬于同一種物質(zhì)，只不過hs-CRP的敏感性進(jìn)行檢測時(shí)用的方法不同[14]。hs-CRP也是一種急性時(shí)反應(yīng)相蛋白，是非特異性的炎癥指標(biāo)，在患者發(fā)生細(xì)菌感染時(shí)會(huì)對肺巨噬細(xì)胞以及單核細(xì)胞進(jìn)行激活，由此釋放一些炎性細(xì)胞因子，然后使機(jī)體內(nèi)的免疫功能和抗感染的免疫反應(yīng)均出現(xiàn)了很大的變化，促使了巨噬細(xì)胞對細(xì)胞粘附分子以及細(xì)胞因子的表達(dá)，實(shí)現(xiàn)對hs-CRP的誘導(dǎo)合成，從而hs-CRP的水平就出現(xiàn)了升高的趨勢 [15]。除此以外，hs-CRP水平升高的情況還會(huì)在患者出現(xiàn)手術(shù)、創(chuàng)傷、心肌梗死、應(yīng)激、腫瘤浸潤等，單一的對其進(jìn)行檢測，可能不能提供一些有價(jià)值的相關(guān)信息。本研究是通過對hs-CRP和PCT、IL-6的聯(lián)合檢測，對是否存在細(xì)菌感染是具有一定價(jià)值的。PCT作為新型的一種炎性指標(biāo)，是由氨基酸116種組成的，糖蛋白的分子量為12 796 d，屬于降鈣素的前肽物質(zhì)。PCT分布于人體內(nèi)的甲狀腺濾泡旁邊的細(xì)胞內(nèi)，并且是無激素活性的前肽物質(zhì)，當(dāng)沒有發(fā)生感染的時(shí)候，它在人體的含量是非常少的，并且也就表達(dá)與肺中樞以及甲狀腺的分泌細(xì)胞內(nèi)[16]。但是當(dāng)發(fā)生細(xì)菌感染后，它就會(huì)實(shí)現(xiàn)對身體的各種組織進(jìn)行誘導(dǎo)，達(dá)到很多類型的細(xì)胞都連續(xù)性的進(jìn)行釋放，如腸道和非組織的淋巴細(xì)胞、肝臟內(nèi)的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞、神經(jīng)內(nèi)分泌的細(xì)胞等。PCT水平在發(fā)生細(xì)菌感染后4 h會(huì)出現(xiàn)迅速升高，6～8 h會(huì)到達(dá)最高峰，但是在之后的24 h內(nèi)會(huì)保持持續(xù)穩(wěn)定的升高。PCT的升高除對細(xì)菌感染有敏感性外，對晚發(fā)型以及早發(fā)型的敗血癥也有很高的特異度和靈敏性[17]。IL-6可以實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)人體內(nèi)的很多細(xì)胞的生長以及分化，并且對急性期的反應(yīng)、造血功能以及免疫應(yīng)答都可以實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)，主要是由T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和B細(xì)胞等產(chǎn)生的。IL-6是一種重要的炎性調(diào)節(jié)和遞質(zhì)因子，在機(jī)體內(nèi)對免疫反應(yīng)和抗感染會(huì)起到很好的作用，對抗病毒具有重要的意義。IL-6水平一般在患兒機(jī)體出現(xiàn)細(xì)菌感染后的幾個(gè)小時(shí)內(nèi)達(dá)到最高峰，可以作為細(xì)菌感染診斷標(biāo)準(zhǔn)之一[18]。本研究結(jié)果表明，HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染患兒的hs-CRP和IL-6水平均明顯高于未感染細(xì)菌的HFMD患兒，從此得出研究組患兒因?yàn)榇嬖诶^發(fā)細(xì)菌感染，所以機(jī)體就會(huì)發(fā)生對細(xì)菌感染的一種免疫反應(yīng)，來維持正常生理功能實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定，所以IL-6和hs-CRP的水平均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），并且研究組患兒PCT、hs-CRP和IL-6的陽性檢出率均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

ROC曲線是可以準(zhǔn)確地對某診斷實(shí)驗(yàn)和分析方法的特異度和靈敏度進(jìn)行反映的，曲線下面積跟實(shí)驗(yàn)的價(jià)值成正比，曲線下面積越大，也就證明試驗(yàn)的診斷價(jià)值就越大[19]。通過研究表明，對研究組患兒進(jìn)行的hs-CRP、PCT和IL-6進(jìn)行診斷的ROC曲線中顯示，患兒的PCT、hs-CRP和IL-6的曲線下面積（AUC）分別為0.912、0.764和0.833，臨界值分別為0.062 ng/mL、10.490 mg/L和15.870 pg/mL，診斷的特異度為95.5%、79.9%和72.1%，診斷的靈敏度為82.1%、73.9%和85.1%。由此可見，對診斷HFMD繼發(fā)細(xì)菌感染患兒的PCT、hs-CRP和IL-6指標(biāo)中，IL-6的靈敏度是最高的，PCT的特異度最高，診斷的價(jià)值最大，這三個(gè)指標(biāo)在診斷中均有一定的價(jià)值[20]。

綜上所述，聯(lián)合PCT、hs-CRP及IL-6的檢測，具有很大的診斷價(jià)值，快速簡單，并且結(jié)果可靠，是對HFMD患兒是否繼發(fā)細(xì)菌感染的可靠診斷指標(biāo)，值得推廣和應(yīng)用。

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