師秀娟
(新疆博湖縣疾病預防控制中心,新疆 博湖 841400)
沙門菌種類多樣,分別對人、動物、人與動物致病。據(jù)研究統(tǒng)計世界上細菌性食物中毒中,由沙門菌引起的中毒最多,其引起人體食物中毒的來源主要是肉類,蛋類、家禽、奶類食品也可引起[1-5]。沙門菌抗原結(jié)構(gòu)較復雜,通常分為菌體抗原、表面抗原、鞭毛抗原等。本研究比較沙門菌檢驗中不同培養(yǎng)基的檢出效果,具體報道如下。
1.1 一般資料:采集2017年6月~10月市場上180例樣品牛、羊肉,各類90份,分別進行三種不同平板培養(yǎng)基分離培養(yǎng),A組接種SS瓊脂平板,B組接種HE瓊脂平板,C組接種NLD瓊脂平板。SS瓊脂平板:牛膽鹽8.5 g、牛肉侵出粉5.0 g、枸櫞酸鐵1.0 g、枸櫞酸鈉8.5 g、中性紅0.025 g、硫代硫酸鈉8.5 g、乳糖10.0 g、胨5.0 g、煌綠0.00033 g、瓊脂16.0 g、1000 mL蒸餾水。HE瓊脂平板:牛肉侵出粉3.0 g、氯化鈉5.0 g、蔗糖12.0 g、乳糖12.0 g、蛋白胨12.0 g、水楊素2.0 g、酸性復紅0.1 g、檸檬酸鐵納0.8 g、膽鹽20.0 g、溴麝香草酚蘭0.064 g、硫代硫酸鈉6.8 g、去氧膽酸鈉2.0 g、瓊脂15.0 g、1000 mL蒸餾水。XLD瓊脂平板:牛肉侵出粉3.0 g、蔗糖7.5 g、木糖3.75 g、乳糖7.5 g、硫代硫酸鈉6.8 g、去氧膽酸鈉2.5 g、氯化鈉5.0 g、L-賴氨酸5.0 g、林檬酸鐵鈉0.8 g、苯酚紅0.08 g、瓊脂15.0 g、1000 mL蒸餾水。制法均同常規(guī)。
1.2 方法:按照中華人民共和國衛(wèi)生部中國國家標準化管理委員會標準進行操作和鑒定,用緩沖蛋白陳水(BPW)潤濕15支無菌棉簽均勻涂抹180例樣品牛、羊肉,然后分別放入BPW前增菌液,在(36±1) ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 h,加入四硫磺酸鈉煌綠增菌液和亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,繼續(xù)培養(yǎng)18~24 h,取出樣品接種環(huán)增菌液中一環(huán),劃線分別接種于A、B、C三組培養(yǎng)18~24 h,觀察三組平板上菌落生長及特征。
1.3 檢驗評價:培養(yǎng)基平板上出現(xiàn)無色透明菌落,有黑色中心表明呈陽性,出現(xiàn)可疑假陽性需要生化、MID細菌以及血清學鑒定。
1.4 統(tǒng)計學方法:本研究中所得數(shù)據(jù)采用SPSS19.0進行分析,計數(shù)資料采用百分率(%)表示,使用χ2檢驗,當P<0.05時,差異有統(tǒng)計學意義。
假陽性是培養(yǎng)基平板上除沙門菌落出現(xiàn)的其他菌落,是對其他菌落抑制能力實驗的重要指標。實驗結(jié)果顯示,三組均出現(xiàn)可疑菌落,A組假陽性10份,出現(xiàn)概率為5.55%,B組假陽性17份,出現(xiàn)概率為9.44%,C組假陽性13份,出現(xiàn)概率為7.22%,差異顯著有統(tǒng)計學意義(P<0.05);陽性檢出A組41份,出現(xiàn)概率為22.77%,B組27份,出現(xiàn)概率為15.00%,C組18份,出現(xiàn)概率為10.00%,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。得出SS瓊脂平板抑菌能力高于HE瓊脂平板和XLD瓊脂平板,檢出率SS瓊脂平板效果也最好。
隨著社會的發(fā)展,醫(yī)學的進步,推動著沙門菌鑒定技術(shù)的進一步完善。沙門菌病是一種人畜共患的疾病,是一種常見的食物源性致病菌,其鑒定方法主要是依據(jù)形態(tài)生理生化特征、形態(tài)學特征、抗原特征、培養(yǎng)特征、噬菌體特征等。感染沙門菌的人以及帶菌者的糞便污染食品,會導致人發(fā)生食物中毒。其癥狀有惡心、頭痛、腹瀉、腹痛、嘔吐、畏寒、乏力、發(fā)熱、嗜睡等,持續(xù)時間一般為2~3 d。對此應采取以下防范措施:不喝未經(jīng)處理的水;就餐、便后清洗雙手;接觸每種食物后仔細清洗道具避免感染其他食物;使用微波爐時要使食物內(nèi)外溫度一致(>165 ℃)。沙門菌在水中繁殖較困難,其最易繁殖溫度為37 ℃,20 ℃以上即可大量繁殖。
通過沙門菌檢驗效果表明,平板分離培養(yǎng)基操作簡單,節(jié)省物資,還能增強沙門菌的生長能力,但由于選擇性的檢出效果各培養(yǎng)基不盡相同,不同菌落鑒別也需改變,在實際運用的時候,沒有具體的標準。一般來說,所有的沙門菌不可能由一種培養(yǎng)基檢驗決定,所以實際檢驗中,通常為兩種及兩種以上培養(yǎng)基分離培養(yǎng),增強檢出率,提高檢驗的科學性。
本研究中采用牛、羊肉做實驗樣品,結(jié)果顯示SS瓊脂平板檢出率最高,具有強選擇性,HE瓊脂平板與XLD瓊脂平板具有中選擇性,檢驗應該采用SS瓊脂平板對比HE瓊脂平板或XLD瓊脂平板,提高檢驗沙門菌的科學性。