劉紅佶 李翔 李祥玉 李華宏 楊鳳嬌 田夢瑤 王泰

補(bǔ)腎活血中藥對(duì)SD大鼠慢性高眼壓模型初級(jí)視皮質(zhì)PI3K/AKt通路凋亡相關(guān)因子BAX及BCL-2的影響

劉紅佶 李翔 李祥玉 李華宏 楊鳳嬌 田夢瑤 王泰

目的觀察補(bǔ)腎活血中藥對(duì)SD大鼠慢性高眼壓(elevated intraocular pressure,EIOP)模型初級(jí)視皮質(zhì)(primary visual cortex,PVC)B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2相關(guān)x基因(bcl-associated X protein,Bax)的干預(yù)作用,探討其作用機(jī)理。方法30只SD大鼠隨機(jī)分為3組(對(duì)照組、給藥組、模型組)。模型組和給藥組采用烙閉上鞏膜靜脈法建立SD大鼠慢性EIOP模型,連續(xù)灌胃8周后處死大鼠,予TONO-PEN筆式眼壓計(jì)測量大鼠眼壓、免疫組化檢測PVC Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)及電鏡下觀察PVC神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果給藥組與模型組大鼠眼壓在造模后即刻直至造模后8周與造模前相比均升高,說明慢性EIOP模型造模成功;造模后8周眼壓與造模后即刻相比,給藥組有降低趨勢,模型組無明顯變化。免疫組化檢測顯示給藥組Bcl-2蛋白陽性表達(dá)最多,其總面積、積分光密度及平均黑度較對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;模型組Bcl-2蛋白表達(dá)最少,總面積、積分光密度及平均黑度較對(duì)照組及給藥組低。模型組Bax蛋白陽性表達(dá)最多,其總面積、積分光密度及平均黑度較給藥組與對(duì)照組高,給藥組與對(duì)照組無明顯差別。給藥組PVC超微結(jié)構(gòu)較模型組明顯改善。結(jié)論補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)能促進(jìn)EIOP SD大鼠初級(jí)視皮質(zhì)神經(jīng)元損傷的修復(fù),其機(jī)制可能通過作用于PI3K/AKt通路,增強(qiáng)Bcl-2表達(dá)、下調(diào)Bax表達(dá)、改善神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及降低眼壓有關(guān)。

青光眼; 視功能保護(hù); 初級(jí)視皮質(zhì); Bcl-2; Bax; 補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)

青光眼是目前世界第二位的不可逆性致盲眼病,其發(fā)病率和致盲率均在不斷上升。在我國,目前至少有500萬名青光眼患者,其中雙目失明患者有79萬人,占盲人總數(shù)的50%[1,2]。2013年,全球40～80歲的青光眼患者約為6430萬,預(yù)計(jì)2020年將增加到7600萬,而2040年將增加到1億1180萬[3]。既往認(rèn)為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cells,RGCs)丟失是導(dǎo)致青光眼視功能損害主要原因,新近研究表明青光眼是自RGCs到PVC整個(gè)視路均存在形態(tài)和功能改變的神經(jīng)退行性病變[4,5]。因此,青光眼視功能保護(hù)研究應(yīng)深入到視神經(jīng)顱內(nèi)段更廣闊的范疇。

PVC是視覺的最高中樞,青光眼患者尸檢證明與活體影像學(xué)表明青光眼病程及嚴(yán)重程度與PVC損害呈正相關(guān)關(guān)系[6,7],但中醫(yī)中藥的干預(yù)除我們前期研究外無相關(guān)報(bào)道[8,9]。本實(shí)驗(yàn)采用烙閉上鞏膜靜脈法[10]制作眼壓穩(wěn)定、持久的SD大鼠EIOP模型,通過觀察補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)對(duì)慢性EIOP模型SD大鼠眼壓、PVC Bcl-2、Bax表達(dá)及神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響,探討其保護(hù)視功能的作用機(jī)理,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)分組

標(biāo)準(zhǔn)1級(jí)8～12周齡SD大鼠30只(雌雄不拘,體重約160～200g,大鼠及飼料均由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。納入標(biāo)準(zhǔn):①無外眼疾病;②雙眼瞳孔直接對(duì)光反射和間接對(duì)光反射正常;③無歪頸)。SD大鼠購回后,適應(yīng)性喂養(yǎng)3天,進(jìn)行眼壓測量,正常眼壓區(qū)間估計(jì),取平均眼壓在9～18mmHg者,隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、給藥組。

1.2 藥物及試劑

復(fù)方丹參片、杞菊地黃丸(北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠);Bax抗體、Bcl-2抗體(武漢博士德生物工程有限公司);3%戊巴比妥鈉(上海化學(xué)試劑廠);0.25%氯霉素眼液(天津市萬嘉制藥有限公司);75%消毒酒精(成都市蓉康醫(yī)療保健實(shí)業(yè)有限公司);碘伏(杭州楊馳醫(yī)療用品有限公司);0.5%鹽酸丙美卡因滴眼液(Alcon公司);0.5%鹽酸金霉素眼膏(蕪湖三億信成制藥有限公司);3%戊二醛組織固定液(成都中醫(yī)藥大學(xué)病理教研室);FAA固定液(成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院病理科)。

2 方法

2.1 模型建立

模型組和給藥組進(jìn)行單眼(右眼)造模,左眼不做處理。方法如下:(1)0.25%氯霉素眼液滴右眼3天,每日2次;(2)75%酒精浸泡消毒器械備用,予1.5ml/kg麻醉量給大鼠腹腔注射3%戊巴比妥鈉;(3)固定大鼠,予碘伏棉簽在眼瞼及其周圍消毒3次,0.25%氯霉素滴眼液沖洗術(shù)眼結(jié)膜囊,用0.5%鹽酸丙美卡因滴眼液行術(shù)眼表面麻醉,鋪巾;(4)在眼科顯微鏡下進(jìn)行以下操作:拉開術(shù)眼眼瞼,暴露角膜上方球結(jié)膜,距上方角鞏膜緣約1～2mm處剪開球結(jié)膜,分離筋膜后可在角鞏膜緣后3～4mm見到4～5只暗紅色、粗大的樹枝狀血管,壓迫血管,可見近角膜緣段血管明顯怒張,而遠(yuǎn)角膜緣段血管卻血流消失;(5)選擇位于10點(diǎn)、12點(diǎn)和1點(diǎn)處血管,并使用眼科手術(shù)止血器對(duì)其進(jìn)行烙閉(烙閉成功標(biāo)志:血管立即收縮,遠(yuǎn)端血流中斷);(6)術(shù)后用生理鹽水沖洗術(shù)眼結(jié)膜囊,整復(fù)球結(jié)膜,涂鹽酸金霉素眼膏于術(shù)眼預(yù)防感染,注意保暖,待大鼠麻醉恢復(fù)之后送回籠子。造模后,予術(shù)眼滴用0.25%氯霉素眼液2次/日,鹽酸金霉素眼膏1次/晚,連續(xù)使用5天。該造模方法應(yīng)用于模型組與給藥組,而對(duì)照組僅僅打開結(jié)膜囊未行燒灼上鞏膜靜脈處理,為假烙閉,余操作相同。因?yàn)楣辔?、麻醉等原因?qū)е?只大鼠死亡。

2.2 給藥方法

每日16:00～18:00給大鼠灌胃1次,連續(xù)8周,方法如下:模型組及對(duì)照組每日予3ml生理鹽水灌胃;給藥組每日予(0.96g/kg體重的復(fù)方丹參片、3.0g原生藥/kg體重的杞菊地黃丸)3ml混懸液灌胃,相當(dāng)于20倍成人劑量,每2周稱體重1次,據(jù)體重調(diào)整給藥量。

2.3 IOP測量

造模前,連續(xù)測量3天IOP,取平均值作為正常IOP,造模后即刻、2w、4w、6w、8w各測1次IOP。IOP測量時(shí)間為2:00 pm～5:00 pm,待測眼鹽酸丙美卡因滴眼液表面麻醉后,用TONO-PEN筆式眼壓計(jì)測量,每回連測3次,取平均值作為該次測定的眼壓值。

2.4 免疫組化檢測

給藥8周后用頸椎脫臼法處死大鼠,開顱完整剝離腦組織,立即放入復(fù)合固定液中,同時(shí)將該固定液注入大腦縱裂中部。固定72小時(shí)后,參照《大鼠腦立體定位圖譜》[11],取左側(cè)枕葉17區(qū)腦組織(PVC),標(biāo)本逐級(jí)酒精脫水,二甲苯透明,石蠟包埋,做10μm連續(xù)切片,烘干備用,Bcl-2及Bax免疫組化染色:Bcl-2及Bax呈細(xì)顆粒狀、細(xì)絲狀棕黃色著色,尋找Bcl-2、Bax陽性物質(zhì)最豐富區(qū)域(即“熱點(diǎn)”區(qū),染色顏色最深或染色面積最多的區(qū)域),每張切片選取5個(gè)200倍視野的陽性細(xì)胞熱點(diǎn)區(qū),用Mias-2000型圖形圖像分析儀測量PVC部位Bcl-2或Bax陽性染色總面積、積分光密度與平均黑度,求取每張切片5個(gè)視野的染色面積總和、積分光密度總和與平均黑度均值。

2.5 電鏡下PVC超微結(jié)構(gòu)觀察

各組隨機(jī)選取1只SD大鼠,麻醉、固定、斷頭取腦,將初級(jí)視皮質(zhì)17區(qū)切成2mm 3小塊,放入3%戊二醛組織固定液,4℃冰箱內(nèi)固定2h,1%鋨酸后固定30min,觀察初級(jí)視皮質(zhì)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)。由四川大學(xué)華西醫(yī)學(xué)中心電鏡室完成。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP SD大鼠IOP的影響

表1顯示,造模前各組大鼠IOP比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);造模后即刻與造模前相比,對(duì)照組IOP無明顯變化(P>0.05),給藥組、模型組IOP較造模前明顯升高(P<0.01),這說明造模成功;造模后8周與造模后即刻相比,給藥組IOP明顯下降(P<0.01),模型組IOP無明顯變化(P>0.05)。

表1 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP SD大鼠IOP的影響(單位:mmHg)

注：與造模前比較△P<0.01;與對(duì)照組比較▲P<0.01;與造模后即刻比較☆P<0.01

3.2 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)EIOP大鼠PVC神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的影響

圖1顯示,對(duì)照組:細(xì)胞核(nucleus,N)圓形或卵圓形,胞漿中細(xì)胞器豐富,核膜完整;模型組:細(xì)胞核輪廓極不規(guī)則,核膜清晰可見,核內(nèi)染色質(zhì)固縮,殘存線粒體(mitochondrion,Mi)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(Endoplasmic reticulum,ER)變形、空泡化、破裂,胞漿空泡化;給藥組:部分細(xì)胞核形態(tài)欠規(guī)則,核膜清晰可見,核內(nèi)染色質(zhì)呈聚集趨勢,線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度腫脹、變形,胞漿中細(xì)胞器減少。

圖1 PVC神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)電鏡觀察(×1200)注: 1A:對(duì)照組;1B:模型組;1C:給藥組

3.3 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP大鼠初級(jí)視皮質(zhì)Bcl-2蛋白表達(dá)的影響

表2及圖2顯示,各組以給藥組Bcl-2蛋白表達(dá)最多,其總面積、積分光密度及平均黑度值最高;對(duì)照組Bcl-2蛋白表達(dá)與給藥組無明顯差異(P>0.05);模型組Bcl-2蛋白表達(dá)相較對(duì)照組及給藥組均明顯偏低,其總面積、積分光密度及平均黑度值均低于對(duì)照組及給藥組(P<0.05或P<0.01)。

3.4 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP大鼠初級(jí)視皮質(zhì)BAX蛋白表達(dá)的影響

表3及圖3顯示,各組以模型組Bax蛋白表達(dá)最多,其陽性染色總面積、積分光密度及平均黑度相較對(duì)照組及給藥組均明顯偏高(P<0.05),而對(duì)照組及給藥組Bax蛋白表達(dá)無明顯差異(P>0.05)。

表2 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP大鼠初級(jí)視皮質(zhì)Bcl-2蛋白表達(dá)的影響

注：與對(duì)照組比較▲P<0.01,△P<0.05;與給藥組比較★P<0.01

圖2 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP大鼠初級(jí)視皮質(zhì)Bcl-2蛋白表達(dá)的影響(×200)注: 2A:對(duì)照組;2B:模型組;2C:給藥組

表3 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP大鼠初級(jí)視皮質(zhì)BAX蛋白表達(dá)的影響

注：與對(duì)照組比較▲P<0.01;與給藥組比較★P<0.01,△P<0.05

圖3 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP大鼠初級(jí)視皮質(zhì)Bax蛋白表達(dá)的影響(×200)注: 3A:對(duì)照組;3B:模型組;3C:給藥組

3.5 補(bǔ)腎活血中藥對(duì)慢性EIOP大鼠初級(jí)視皮質(zhì)Bcl-2/Bax的影響

表4顯示,對(duì)照組及給藥組Bcl-2/Bax比率均比模型較高(P<0.05);對(duì)照組Bcl-2/Bax較給藥組無明顯差異(P<0.05)。

4 討論

近年來,PI3K/Akt信號(hào)通路(磷脂酰肌醇3激酶/絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,phosphatidylinositol 3-kinase pathway/protein kinase B,PI-3K/Akt)已成為凋亡基因調(diào)控?zé)狳c(diǎn),且PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)神經(jīng)元存活的作用已得到許多研究的證實(shí)[12-14],但具體作用機(jī)理仍不清楚。PI3K/Akt信號(hào)通路的主要成員Bcl-2及Bax已被證實(shí)在RGCs及視神經(jīng)損傷中起著重要作用,Bcl-2由Bcl-2基因編碼,是最早發(fā)現(xiàn)的抑制細(xì)胞凋亡的蛋白,其定位在線粒體膜、核外膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)外膜的整合蛋白,是一種重要的抑制細(xì)胞凋亡的基因,而Bax是Bcl-2家族中最具有促進(jìn)死亡特征的基因。Bcl-2與Bax基因表達(dá)水平的高低與凋亡調(diào)控直接相關(guān),細(xì)胞內(nèi)Bax表達(dá)升高時(shí),細(xì)胞對(duì)死亡信號(hào)敏感,并加速細(xì)胞凋亡;當(dāng)Bcl-2高表達(dá)時(shí),Bax-Bax分開,Bcl-2可與Bax形成異源性二聚體,即中和了Bax-Bax促凋亡的作用,從而抑制細(xì)胞凋亡[15,16]。李翔[17]等觀察到慢性EIOP模型大鼠RGCs Bcl-2較空白組明顯降低、Bax較空白組明顯升高。Isenmann[18]等在視神經(jīng)擠壓傷實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn),Bcl-2蛋白在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中呈低水平表達(dá),而Bax蛋白在損傷后表達(dá)明顯增高,認(rèn)為視神經(jīng)損傷后,Bax的增加與Bcl-2低水平表達(dá)導(dǎo)致了RGCs凋亡。以上研究均證明Bax、Bcl-2與青光眼病理損害相關(guān)的RGCs凋亡存在密切聯(lián)系,但其研究部位只局限于RGCs、視神經(jīng)層次。

指標(biāo)眼數(shù)總面積積分光密度對(duì)照組81．35±0．491．34±0．33模型組70．64±0．10▲★0．68±0．16▲★給藥組71．29±0．471．22±0．20F14．2877．176P0．0000．005

注：與對(duì)照組比較▲P<0.01;與給藥組比較★P<0.01

本研究檢測各組SD大鼠8周的眼壓變化情況、PVC Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)水平,計(jì)算各組Bcl-2/Bax比率,并觀察PVC神經(jīng)元電鏡超微結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)烙閉上鞏膜靜脈法制造的慢性EIOP模型可引起SD大鼠眼壓升高、PVC Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)、Bax蛋白表達(dá)上升、Bcl-2/Bax比率降低、PVC神經(jīng)元電鏡超微結(jié)構(gòu)異常,補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)可促使SD大鼠慢性EIOP模型眼壓下降、PVC Bcl-2蛋白表達(dá)上升、Bax蛋白表達(dá)、Bcl-2/Bax比率下降及PVC神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改善,說明補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)也可能是通過作用于PI3K/AKt通路在慢性EIOP SD大鼠視皮質(zhì)受損過程中發(fā)揮視功能保護(hù)作用。

前期研究也表明補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)對(duì)SD大鼠慢性EIOP模型視網(wǎng)膜、視神經(jīng)、LGN均有一定的保護(hù)作用:可抑制視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層(retinal nerve fiber layer,RNFL)和視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層(retinal ganglion cells layer,RGCL)變薄、改善RGCs超微結(jié)構(gòu),防止RGCs與RNFL損害[19,20],有助于多焦視網(wǎng)膜電圖(multifocal electroretinogram,mfERG)總波及1、2、3、4環(huán)P1波反應(yīng)密度、總波P1波峰潛時(shí)、2環(huán)及3環(huán)N1波反應(yīng)密度,3環(huán)、4環(huán)N1波峰潛時(shí)的恢復(fù)[21];上調(diào)RGCs抗凋亡基因Bcl-2、抑制凋亡促進(jìn)基因Bax[17];提高視神經(jīng)纖維髓鞘總面積、平均光密度值及積分光密度值,改善視神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)[22];改善LGN神經(jīng)元細(xì)胞密度、神經(jīng)元剖面積密度、有髓纖維密度、尼氏小體積分光密度等[23]。臨床也證實(shí)補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)可改善原發(fā)性青光眼術(shù)后眼壓已控制患者的視野、P-VEP及RNFL厚度等指標(biāo),從而保護(hù)青光眼患者視神經(jīng)和視功能[24,25]。

本實(shí)驗(yàn)通過研究補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)對(duì)PI3K/AKt信號(hào)通路的影響,發(fā)現(xiàn)在慢性高眼壓的影響下,初級(jí)視皮質(zhì)抗凋亡基因Bcl-2表達(dá)明顯減少,促凋亡基因Bax表達(dá)明顯增多?？赡蹷cl-2蛋白表達(dá)增多,通過異源二聚體形成抑制了Bax轉(zhuǎn)位與Bax二聚體形成,從而抑制Bax表達(dá)。隨著Bax-Bax二聚體減少,即阻斷了細(xì)胞凋亡的信號(hào)途徑,從而抑制細(xì)胞凋亡。多項(xiàng)研究表明青光眼與帕金森、阿爾茨海默氏病、肌萎縮側(cè)索硬化癥等常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病具有相同的發(fā)病機(jī)制,即“跨突觸或跨神經(jīng)元變性”[26-29]?？缟窠?jīng)元變性是指一組神經(jīng)元受到損害后,不僅受損的神經(jīng)元會(huì)發(fā)生改變,其通路遠(yuǎn)端與受損神經(jīng)元突觸聯(lián)系的靶神經(jīng)元接受的傳入沖動(dòng)減少,活性降低,亦出現(xiàn)退行性改變[19]。即初級(jí)視皮質(zhì)的受損也許會(huì)削弱對(duì)其下級(jí)神經(jīng)元RGCs的下行營養(yǎng)支持而加重RGCs病變,故補(bǔ)腎活血中藥(杞菊地黃丸合復(fù)方丹參片)可能通過提高慢性高眼壓模型促使SD大鼠慢性EIOP模型眼壓下降、PVC Bcl-2蛋白表達(dá)上升、Bax蛋白表達(dá)、Bcl-2/Bax比率下降及PVC神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改善而保護(hù)受損視皮質(zhì),從而減輕PVC的下級(jí)神經(jīng)元RGCs損害,而發(fā)揮保護(hù)視功能作用。

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InfluenceofBuShenHuoXueonprimaryvisualcortex'Bcl-2andBaxofPI3K/AKtpathwayinSDratmodelofchronicelevatedintraocularpressure

LIUHong-ji,LIXiang,LIXiang-yu,LIHua-hong,YANGfeng-jiao,TIANmeng-yao,WANGTai

(ChengduUniversityofTCM,Chengdu,Sichuan,610072)

ObjectiveTo observe the effect traditional Chinese medicine(TCM)of BuShenHuoXue(QijuDihuang pills and DaShen tablets)on the expression of primary visual cortex's Bcl-2 and Bax in the SD rat model of chronic EIOP,and preliminarily explore its mechanism.Methods30 SD rats were randomly and equally divided into 3 groups:control group,model group and treatment group.By unilaterally cauterizing 3 episcleral vessels,the rat model of chronic EIOP was established on model group and treatment group.After given TCM drugs of BuShenHuoXue and normal saline for 8 weeks respectively,the rats were put to death.The intraocular pressure(IOP)of SD rats were measured by handheld tonometer(TONO-PEN),the protein expression of PVC's Bcl-2,Bax were detected by Immuno-histochemistry,Electron microscopy were performed to observe the ultrastructure of PVC's neurons.ResultsIOP in treatment groups and model group from models building until 8 weeks postoperation were higher compared with pre-operation,indcated that the EIOP model was successfully established.There was obviously decrease in treatment group between 8 weeks postoperation and models building,While model group was not obvious change.8 weeks postoperation,Immuno-histochemistry analysis on PVC showed that the positive expression on Bcl-2 protein of treatment group was highest,it's total area,integrated optical density and average density had not obvious difference compared with control group.while model group 's Bcl-2 positive expression(total area,integrated optical density and average density)were slower than treatment group and control group.the positive expression on Bax of model group was highest,it's total area,integrated optical density and average density were higher than treatment group and control group.treatment group had not obvious difference than control group.PVC's ultrastructure of neurons in treatment group was significantly improved compared model group.

ConclusionTCM of BuShenHuoXue(QijuDihuang pills and DaShen tablets)can promote the repairment of neurons cell of PVC in the rat model of chronic EIOP,its mechanism may be through the effect on PI3K/AKt pathway,enhance the expression of Bcl-2,dwonregulate the expression of Bax,improve ultrastructure of neurons cell and reducing IOP.

Glaucoma; Visual function protection; Primary visual cortex; Bcl-2; Bax; TCM of BuShenHuoXue(QijuDihuang pills and DaShen tablets)

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(NO:81373695)-補(bǔ)腎活血法調(diào)控青光眼RGCs PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究

610072,四川成都,成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院

李翔,E-mail:jeannelxiang@126.com

10.3969/j.issn.1674-9006.2017.04.004

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