熊丹 汪鳳鳳

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·腫瘤診治·

纖維支氣管鏡刷檢結(jié)合液基細(xì)胞學(xué)檢查在肺癌診斷中的價(jià)值

熊丹 汪鳳鳳

目的 探討液基細(xì)胞學(xué)檢查(liquid based cytology test,LCT)在肺癌支氣管鏡刷檢檢查中的應(yīng)用價(jià)值。方法 分析我院353例肺癌患者，對(duì)比氣管鏡刷檢傳統(tǒng)涂片細(xì)胞學(xué)檢查和刷檢液基細(xì)胞學(xué)檢查和組織學(xué)檢查，進(jìn)行分型歸納，計(jì)算敏感度和分型符合率。結(jié)果 液基細(xì)胞學(xué)診斷肺癌的敏感度為73.65%，傳統(tǒng)涂片診斷肺癌的敏感度為60.34%,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。纖支鏡刷檢液基細(xì)胞學(xué)診斷肺癌分型與組織學(xué)活檢病理有較高的一致性。其中鱗癌68.82%,腺癌84.69%,小細(xì)胞癌70.75%,大細(xì)胞癌75%;均優(yōu)于傳統(tǒng)涂片。結(jié)論 將液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)運(yùn)用于纖維支氣管鏡刷檢細(xì)胞學(xué)檢查可以提高支氣管刷檢診斷肺癌的陽性率, 而且與肺癌組織學(xué)分型的符合率較高。

纖維支氣管鏡檢查在肺癌的診斷中作用重大，大多數(shù)中央型肺癌在支氣管鏡下可發(fā)現(xiàn)，支氣管鏡檢查陽性率高。部分周圍型肺癌也可通過遠(yuǎn)端刷檢取得病理。組織活檢與刷檢同步進(jìn)行可提高陽性率[1]。纖維支氣管鏡刷檢運(yùn)用普遍，但傳統(tǒng)制片技術(shù)診斷率不高，液基細(xì)胞學(xué)檢查是采用液基薄層細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)并進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分類診斷，最早應(yīng)用于宮頸癌細(xì)胞學(xué)檢查, 并使宮頸病變的檢出率有了顯著提高,目前已替代了傳統(tǒng)宮頸涂片[2]。常規(guī)涂片由于血液、粘液、炎癥等因素影響,常使樣本模糊,存在假陰性可能。液基細(xì)胞檢查提高了細(xì)胞樣本的檢測(cè)質(zhì)量，可以明顯提高癌變細(xì)胞的檢測(cè)率[3]。現(xiàn)將支氣管鏡刷檢同時(shí)進(jìn)行液基細(xì)胞學(xué)檢查和傳統(tǒng)涂片細(xì)胞學(xué)檢查，并與組織病理學(xué)檢查結(jié)果對(duì)照，進(jìn)行比較，探討該方法在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

資料與方法

一、材料

選取2012年01月01日-2015年01月01日期間在靖江市人民醫(yī)院就診經(jīng)組織病理學(xué)(氣管鏡活檢或手術(shù)病理 )確診肺癌的353例患者，行纖維支氣管鏡檢查包括活檢及刷檢。其中男性216例，女性137例，年齡38歲-76歲。鱗癌186例，腺癌83例，小細(xì)胞癌6例，大細(xì)胞癌3例。

二、方法

通過纖維支氣管鏡刷檢常規(guī)涂片2張, 將采樣刷頭插入裝有保存液的瓶中,然后往保存液瓶中加入消化液, 充分搖勻、震蕩,靜置30分鐘, 離心收集細(xì)胞, 由湖北孝感亞光膜式離心制片機(jī)制片, HE染色。將細(xì)胞學(xué)診斷分為陰性，陽性。陽性者對(duì)瘤細(xì)胞按如下作出分型:鱗癌, 腺癌,小細(xì)胞癌，大細(xì)胞癌。對(duì)分型不清的腫瘤細(xì)胞及難以判斷瘤細(xì)胞來源的可通過免疫細(xì)胞化學(xué)方法鑒別診斷。所有液基涂片標(biāo)本與傳統(tǒng)涂片對(duì)比。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPPS19.0軟件，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、 各種癌細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)

①鱗癌細(xì)胞：多單個(gè)散在，大小形狀不等，可呈圓形、多邊形、梭形，特點(diǎn)是胞質(zhì)一般呈嗜酸性，有的明顯角化，核圓形或不規(guī)則形，染色質(zhì)均勻分布，常深染如墨水狀，核仁不明顯。(見圖1、2)。

圖1 鱗癌 傳統(tǒng)涂片，HE染色×400

②腺癌細(xì)胞：常聚集成實(shí)性團(tuán)，或有一定排列的腺樣結(jié)構(gòu)，細(xì)胞大小規(guī)律，胞質(zhì)豐富，多呈嗜堿性，有的可見粘液空泡，細(xì)胞核多呈圓形，位于細(xì)胞中央或偏一側(cè)，可互相重疊，染色質(zhì)較細(xì)，核仁較顯著。(見圖3、4)。

圖2 鱗癌 液基細(xì)胞學(xué)制片 HE染色×400

圖3 腺癌 傳統(tǒng)涂片，HE染色×400

圖4 腺癌 液基細(xì)胞學(xué)制片 HE染色×400

③小細(xì)胞癌細(xì)胞：多松散聚集成堆，細(xì)胞小，胞質(zhì)稀少如裸核狀，核深染，呈圓形或雀麥形，有的呈短梭形或帶棱角。(見圖5、6)。

④大細(xì)胞癌細(xì)胞：多聚集成堆，或松散排列，細(xì)胞較大，呈圓形或多角鑲嵌狀，核圓形，位于細(xì)胞中央，可見明顯核仁，但無鱗癌及腺癌的任何特征。

二、353例組織病理學(xué)確診的患者中刷檢液基細(xì)胞學(xué)診斷為癌的260例, 傳統(tǒng)涂片診斷為癌的213例。液基細(xì)胞學(xué)的敏感度為73.65%，傳統(tǒng)涂片的敏感度為60.34%,液基細(xì)胞學(xué)與傳統(tǒng)涂片的敏感度的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.15，P<0.01)。(見表1)。

圖5 小細(xì)胞癌 傳統(tǒng)涂片HE染色×400

圖6 小細(xì)胞癌液基細(xì)胞學(xué)制片 HE染色×400

總計(jì)陽性陰性敏感度χ2P液基制片3532609373.65%傳統(tǒng)涂片35321314060.34%14.15<0.01

三、刷檢液基細(xì)胞學(xué)與傳統(tǒng)涂片對(duì)各型肺癌診斷一致性的比較。

與組織學(xué)比較，刷檢液基細(xì)胞學(xué)診斷符合率為鱗癌68.82%,腺癌84.69%,小細(xì)胞癌70.75%,大細(xì)胞癌75%;傳統(tǒng)涂片診斷符合率為鱗癌57.53%,腺癌62.24%，小細(xì)胞癌69.23%。刷檢液基細(xì)胞學(xué)與組織學(xué)活檢有較高的一致性。其中液基細(xì)胞學(xué)在腺癌分型診斷率最高，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)涂片(χ2=12.669，P<0.01)；液基細(xì)胞學(xué)在鱗癌分型診斷率與傳統(tǒng)涂片對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.096，P=0.024)；液基細(xì)胞學(xué)在大細(xì)胞癌分型診斷率與傳統(tǒng)涂片對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.8，P=0.028)；液基細(xì)胞學(xué)在小細(xì)胞癌分型診斷率與傳統(tǒng)涂片對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.037，P=0.848)。(見表2)。

表2 液基細(xì)胞學(xué)與傳統(tǒng)涂片對(duì)肺癌診斷分型一致性的比較

討 論

液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)稱LCT，是近年來應(yīng)用于臨床細(xì)胞病理學(xué)診斷的一項(xiàng)新技術(shù)，是一種將脫落細(xì)胞保存在液體中，并通過特殊設(shè)備將細(xì)胞均勻分散貼附在載玻片上制成涂片的技術(shù)。利用全自動(dòng)設(shè)備將細(xì)胞涂成均勻的薄層標(biāo)本，大大減少阻礙視線的血液、粘液和炎細(xì)胞的數(shù)量，從而制成細(xì)胞分散的薄層樣本。在宮頸等婦科標(biāo)本中廣泛應(yīng)用并取得了較好的效果。纖維支氣管鏡檢查是臨床上最常用的診斷肺癌的方法，刷檢傳統(tǒng)涂片法發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的陽性率低，采用LCT 技術(shù)檢查能最大限度的收集腫瘤細(xì)胞并保持細(xì)胞的完整性，同時(shí)將紅細(xì)胞破壞、炎細(xì)胞及粘液溶解，提高了制片質(zhì)量，使腫瘤細(xì)胞容易被發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞圖像清晰可見，核仁等細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰易見，三維立體感突出[4-5]，從而腫瘤細(xì)胞檢出陽性率提高，明顯高于刷檢普通涂片。液基細(xì)胞學(xué)與傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)評(píng)價(jià)方法保持一致，并且保持了生物特性、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的一致性?？偨Y(jié)來說，與傳統(tǒng)涂片相比，LCT有以下優(yōu)點(diǎn)：①細(xì)胞平鋪均勻，細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好，三維立體突出，不容易變形，細(xì)胞量充足。②涂片質(zhì)量高，涂片背景清晰厚薄均勻，紅細(xì)胞大多破壞消失，黏液絲溶解，炎細(xì)胞減少，異常細(xì)胞易被發(fā)現(xiàn)。我們的結(jié)果顯示其靈敏度高于傳統(tǒng)方法，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。刷檢液基細(xì)胞學(xué)診斷有一定比例的假陰性，這主要是因?yàn)闅夤茜R下不能直視的遠(yuǎn)端腫瘤病灶只能采取盲刷，極有可能刷不到腫瘤細(xì)胞[1]。文獻(xiàn)報(bào)道[6-7]刷檢液基細(xì)胞學(xué)檢查在對(duì)肺癌分型的診斷方面亦有優(yōu)勢(shì)，尤其是腺癌。與本組實(shí)驗(yàn)結(jié)論相同。其主要原因在于腺癌細(xì)胞在傳統(tǒng)涂片中和因炎癥等因素刺激增生的正常細(xì)胞, 以及肺內(nèi)組織吞噬細(xì)胞等，很難鑒別，但在液基制片中由于三維立體感明顯，可見腺管狀、乳頭狀排列而易診斷。液基制片中細(xì)胞顯示清晰，背景干凈，對(duì)比性強(qiáng)，即使單個(gè)鱗癌細(xì)胞也易發(fā)現(xiàn)，并且易于分型[8]。

綜述所述，纖維支氣管鏡刷檢液基細(xì)胞學(xué)檢查不僅提高了刷檢的陽性率，而且分型診斷亦有較高的準(zhǔn)確率，值得推廣應(yīng)用于肺癌的診斷。

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214500 江蘇 靖江，靖江市人民醫(yī)院呼吸科

2016-04-28]