趙可惠 尼瑪次仁 頓珠次仁 王 靜 張 藝

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥學(xué)院，四川 成都 611137;2.西藏藏醫(yī)學(xué)院，西藏 拉薩 850000)

*通訊作者

藏藥抗缺氧含片提高缺氧耐受力功能實(shí)驗(yàn)研究

趙可惠1尼瑪次仁2*頓珠次仁2王 靜1張 藝1

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥學(xué)院，四川 成都 611137;2.西藏藏醫(yī)學(xué)院，西藏 拉薩 850000)

目的：觀察不同提取方式的抗缺氧含片對提高小鼠缺氧耐受力功能的影響。方法根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中的3個(gè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評價(jià)抗缺氧含片的耐缺氧功效。結(jié)果抗缺氧含片具有提高小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間，及提高小鼠急性腦缺血性缺氧喘氣時(shí)間的作用。結(jié)論抗缺氧含片具有提高缺氧耐受力的功能。

抗缺氧含片；缺氧耐受力；功能試驗(yàn)

抗缺氧含片是以紅景天為主要原料制成的保健食品。紅景天是景天科(Crassulaceae)紅景天屬(Rhodiola L.)植物，大多數(shù)生長在海拔2500～5000m的高山環(huán)境，其根莖熬水、泡酒在民間多用于消除疲勞、抵御嚴(yán)寒[1]。藏醫(yī)經(jīng)典著作《四部醫(yī)典》記載紅景天“性平、清熱、滋補(bǔ)元?dú)狻⒗麣怵B(yǎng)血、能補(bǔ)腎、主周身乏力”。紅景天中的重要成分紅景天苷[(4-羥基-苯基) -β-D-吡喃葡萄糖苷]被證實(shí)具有抗衰老、抗疲勞、抗缺氧及心、腦、肝、腎、神經(jīng)系統(tǒng)等的保護(hù)作用[2]。目前在提高缺氧耐受力的保健食品中，大部分以紅景天為主要原料藥材。課題組以藏醫(yī)名家尼瑪次仁的臨床經(jīng)驗(yàn)保健食品處方為基礎(chǔ)，對西藏藏醫(yī)學(xué)院提供的抗缺氧含片提取工藝A組(水提)和抗缺氧含片提取工藝B組(原藥)，按照《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》要求，開展提高缺氧耐受力功能評價(jià)實(shí)驗(yàn)。為抗缺氧含片取得國家保健食品批準(zhǔn)文號、豐富保健食品種類提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品：受試藥物抗缺氧含片提取工藝A組及提取工藝B組，由西藏藏醫(yī)學(xué)院提供。陽性藥物為大株紅景天膠囊，由江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司提供，國藥準(zhǔn)字：Z20040023，30粒/盒，批號150402。

1.2 動(dòng)物：清潔級雄性昆明小鼠，體質(zhì)量18～22g由四川省成都達(dá)碩生物科技有限公司提供，生產(chǎn)許可證號為SCXK(川)2015-030。飼料由同一單位提供。

1.3 儀器：LQ-A6002電子天平，瑞安市安特稱重設(shè)備有限公司；Sartorius BP121s電子天平，北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司(精確度0.0001g)。

1.4 試劑：亞硝酸鈉(成都市科龍化工試劑廠)，鈉石灰(北京德爾利鈉石灰廠)；凡士林。

1.5 劑量選擇：動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為8組：空白對照組；陽性藥物組(0.912 g/kg·BW，約相當(dāng)于人體推薦量的12倍)；提取工藝A、B的高、中、低劑量組(劑量分別為6.6 g/kg·BW，3.3 g/kg·BW，1.65 g/kg·BW，約相當(dāng)于人體推薦量的24倍、12倍、6倍)；提取工藝B高、中、低劑量組(劑量分別為6.6 g/kg·BW，3.3 g/kg·BW，1.65 g/kg·BW，約相當(dāng)于臨床用量的12倍、6倍、3倍)，每組10只。灌胃1次/d，灌胃量為20mL/kg·BW，連續(xù)給藥7天d，每3天稱量1次體重。

1.6 試驗(yàn)方法

1.6.1 常壓耐缺氧試驗(yàn)：于末次灌胃后1h，將各組小鼠分別放入盛有10g鈉石灰的250mL磨口瓶內(nèi)(每瓶1只)，用凡士林封瓶口，蓋嚴(yán)，使之不漏氣，立即計(jì)時(shí)，以呼吸停止為指標(biāo)，記錄小鼠因缺氧而死亡的時(shí)間。

1.6.2 亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)：于末次灌胃給藥后1h，各組動(dòng)物按20 mL/kg·BW腹腔注射2%(m/v)亞銷酸鈉溶液，立即計(jì)時(shí)，記錄動(dòng)物存活時(shí)間。

1.6.3 急性腦缺血缺氧試驗(yàn)：于末次灌胃給藥后1h，動(dòng)物用乙醚淺麻醉后，用剪刀自頸部斷頭，立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止時(shí)間

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法： 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS 19.0軟件處理。采用單因素方分析比較組間差異，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，若組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且方差齊用Dunnett法進(jìn)行兩兩比較；若方差不齊，用Dunnett’s T3法進(jìn)行兩兩比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 常壓耐缺氧試驗(yàn)： 結(jié)果如表1所示，試驗(yàn)前后動(dòng)物體質(zhì)量無顯著差異(P>0.05)。與空白對照組相比各實(shí)驗(yàn)組存活時(shí)間延長有顯著差異(P<0.05)。

表1 抗缺氧含片小鼠常壓耐缺氧試驗(yàn)結(jié)果

2.2 亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)：結(jié)果如表2所示，試驗(yàn)前后動(dòng)物體質(zhì)量無顯著差異(P> 0.05)。與空白對照組相比各實(shí)驗(yàn)組存活時(shí)間延長除B中劑量組有顯著差異(P<0.05)外，其余組別均無顯著差異(P>0.05)。

表2 抗缺氧含片小鼠亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)結(jié)果

2.3 急性腦缺血缺氧試驗(yàn)：結(jié)果如表3所示，試驗(yàn)前后動(dòng)物體質(zhì)量無顯著差異(P>0.05)。與空白對照組相比各實(shí)驗(yàn)組存活時(shí)間延長有顯著差異(P<0.05)。

表3 抗缺氧含片小鼠急性腦缺血缺氧試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

本實(shí)驗(yàn)的受試品是2種不同提取方式制成的抗缺氧含片，在常壓缺氧試驗(yàn)及急性腦缺血性缺氧試驗(yàn)中，受試品各組與空白組相比，差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)中，只有B組中劑量P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在已得到的試驗(yàn)結(jié)果中，B組優(yōu)于A組，B組的高劑量及中劑量效果最優(yōu)，故B組小鼠推薦劑量為3.3～6.6 g/kg。

根據(jù)保健食品評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[3]，3項(xiàng)提高缺氧耐受力功能試驗(yàn)有2項(xiàng)結(jié)果為陽性，表明該2種受試品具有提高缺氧耐受力功能的作用。

[1]劉明成,張得鈞.紅景天藥理作用研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2013,9(6):65-69.

[2] 韓雪嬌,郭娜,朱美宣,等.紅景天苷藥理作用及其作用機(jī)理研究進(jìn)展[J].中國生化藥物雜志,2015,35:171-175.

[3] 中華人民共和國衛(wèi)生部.保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范[Z].2003.

R291.4

B

1006-6810(2017)05-0062-03

2017年2月18日收稿