唐倩倩，王云飛，聶勇戰(zhàn)，顧政一#（.新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所，烏魯木齊80004；2.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，烏魯木齊800；.腫瘤生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西安7002）

貝母素乙對(duì)5種腫瘤細(xì)胞的化療增敏作用研究Δ

唐倩倩1，2＊，王云飛1，聶勇戰(zhàn)3，顧政一1#（1.新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所，烏魯木齊830004；2.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，烏魯木齊830011；3.腫瘤生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西安710032）

目的：研究貝母素乙對(duì)5種腫瘤細(xì)胞的化療增敏作用。方法：以人食管癌Eca-109細(xì)胞、人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞、人肝癌HepG2細(xì)胞、人宮頸癌HeLa細(xì)胞為研究對(duì)象，采用MTT法檢測(cè)最大無毒濃度（20 μg/mL）的貝母素乙與不同質(zhì)量濃度梯度（0.026～2.1、0.026～2.1、0.125～2.0、0.125～2.0、0.062 5～0.10 μg/mL）的阿霉素共同作用于上述5種腫瘤細(xì)胞72 h后的細(xì)胞生長抑制率，并計(jì)算半數(shù)抑制濃度（IC50）；采用結(jié)晶紫染色法觀察最大無毒濃度的貝母素乙與低質(zhì)量濃度（0.02、0.005、0.04、0.02、0.01 μg/mL）的阿霉素共同作用于上述腫瘤細(xì)胞7 d后的細(xì)胞增殖情況，并設(shè)溶劑對(duì)照和貝母素乙、阿霉素單用對(duì)照。結(jié)果：與阿霉素單用比較，貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后可不同程度提高5種腫瘤細(xì)胞的生長抑制率，大部分差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）；IC50值均明顯減小，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。與溶劑對(duì)照比較，貝母素乙單用或阿霉素單用7 d對(duì)5種腫瘤細(xì)胞的增殖均無明顯影響，而貝母素乙和阿霉素聯(lián)用7 d均能明顯抑制5種腫瘤細(xì)胞的增殖。結(jié)論：貝母素乙可不同程度地增強(qiáng)上述5種腫瘤細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性，具有一定的化療增敏作用。

貝母素乙；阿霉素；化療增敏劑；食管癌；乳腺癌；肺癌；肝癌；宮頸癌

現(xiàn)今，惡性腫瘤的發(fā)病率較高且有升高趨勢(shì)，對(duì)于大部分不適合手術(shù)切除的實(shí)體腫瘤，化療常作為首選治療方法。然而，長期化療會(huì)導(dǎo)致耐藥的發(fā)生，耐藥現(xiàn)象已被證實(shí)是化療失敗的最主要原因[1]。因此，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，降低化療藥物的毒性尤為重要。

化療增敏劑泛指一類劑量微小、與化療藥物共同作用于腫瘤細(xì)胞后可使化療效果有明顯提高的藥物[2]。其在低濃度時(shí)或者藥物自身無明顯抗腫瘤活性，且自身毒副作用較小[2]。由于化療藥物在對(duì)腫瘤細(xì)胞有細(xì)胞毒性作用的同時(shí)也會(huì)對(duì)人體正常細(xì)胞有一定的損傷，所以尋找低毒和不良反應(yīng)少的化療增敏劑對(duì)提高化療治療效果具有重要意義。

伊貝母為百合科植物新疆貝母（Fritillaria walujew-ii Regel）的干燥鱗莖，是新疆豐富的藥用植物資源，也是中藥以及維藥中常用的藥用植物，具有止咳、祛痰、鎮(zhèn)痛、抗炎等功效，被收載于2015年版《中國藥典》（一部）中[3]。貝母素乙（Peiminine）是從伊貝母中提取、分離的生物堿類化合物，具有鎮(zhèn)咳、祛痰及抗炎的活性[4]。筆者前期研究表明，貝母素乙可提高阿霉素（Adriamycin）對(duì)胃癌的化療敏感性，使蛋白激酶B磷酸化表達(dá)和細(xì)胞周期蛋白D1表達(dá)降低，且可逆轉(zhuǎn)胃癌的多藥耐藥[5-6]。本試驗(yàn)將進(jìn)一步探究貝母素乙對(duì)其他5種腫瘤細(xì)胞的化療增敏作用，觀察貝母素乙是否可以增強(qiáng)人食管癌Eca-109細(xì)胞、人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞、人肝癌HepG2細(xì)胞、人宮頸癌HeLa細(xì)胞對(duì)化療藥物阿霉素的敏感性。

1 材料

1.1 儀器

BY-400C-1型醫(yī)用離心機(jī)（北京白洋醫(yī)療器械有限公司，最高轉(zhuǎn)速：5 000 r/min）；HERA Cell-150i型二氧化碳（CO2）培養(yǎng)箱和Varioskan Tlash型酶標(biāo)儀（美國Thermo公司）；RE-501型電子恒溫水浴鍋（上海光創(chuàng)科學(xué)儀器設(shè)備）；BCM-1300A型超凈工作臺(tái)（蘇州凈化設(shè)備儀器廠）；CKX31型倒置顯微鏡（Olympus公司）；ZW-A型微量振蕩器（常州國華電子有限公司）。

1.2 藥品與試劑

貝母素乙（新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所提取，批號(hào)：20140911，相對(duì)分子量：429.635 22，純度：＞95%）；阿霉素（大連美侖生物有限公司，批號(hào)：25316-40-9，純度：98%）；結(jié)晶紫（碧云天生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：C0121）；MTT（上海恒遠(yuǎn)生物科技公司，批號(hào)：298-93-1）；青鏈霉素雙抗、1640細(xì)胞培養(yǎng)基和DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基（美國Hyclone公司，批號(hào)：SV30010、AZG192448、AC10215860）；二甲基亞砜（DMSO）和胰酶消化液（美國Gibco公司，批號(hào)：D2650、25200-072）；胎牛血清（以色列BI公司，批號(hào)：04-001-1ACS）。

1.3 細(xì)胞

人食管癌Eca-109細(xì)胞、人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞、人肝癌HepG2細(xì)胞、人宮頸癌HeLa細(xì)胞均由腫瘤生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。

2 方法

2.1 溶液的制備

貝母素乙溶液用DMSO配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。阿霉素用生理鹽水配制，質(zhì)量濃度為2 mg/mL，現(xiàn)用現(xiàn)配。

2.2 細(xì)胞的培養(yǎng)

將細(xì)胞接種于5 cm×5 cm培養(yǎng)瓶中，加入培養(yǎng)基5 mL（Eca-109、A549細(xì)胞使用1640培養(yǎng)液，MCF-7、HepG2、HeLa細(xì)胞使用DMEM培養(yǎng)液，培養(yǎng)液中均含10%胎牛血清以及1%青鏈霉素雙抗），置于37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)。

2.3 MTT法檢測(cè)貝母素乙對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性

收集處于對(duì)數(shù)生長期的5種腫瘤細(xì)胞，以每孔3×103個(gè)細(xì)胞接種于96孔板中，在37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)24 h。細(xì)胞貼壁后，分別加入質(zhì)量濃度為5、10、20、40、80 μg/mL的貝母素乙溶液200 μL，每個(gè)質(zhì)量濃度設(shè)4個(gè)復(fù)孔，每個(gè)質(zhì)量濃度設(shè)加入同體積且不含藥物的DMSO作為溶劑對(duì)照組。放置于恒溫培養(yǎng)箱，孵育72 h后，每孔加入MTT（5.0 mg/mL）20 μL孵育4 h，使活細(xì)胞與MTT結(jié)合形成藍(lán)紫色結(jié)晶物。吸棄孔內(nèi)上清液，每孔加入150 μL的DMSO，振蕩10 min，使用酶標(biāo)儀在490 nm波長處測(cè)定溶解后結(jié)晶物的吸光度值。按照公式計(jì)算細(xì)胞存活率：細(xì)胞存活率（%）＝加藥組的吸光度值/溶劑對(duì)照組的吸光度值×100%。

2.4 MTT法檢測(cè)貝母素乙和阿霉素聯(lián)用對(duì)細(xì)胞增殖的影響

收集處于對(duì)數(shù)生長期的5種腫瘤細(xì)胞，以每孔3×103個(gè)細(xì)胞接種于96孔板中，在37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)24 h，細(xì)胞貼壁后，加藥處理。每種細(xì)胞分為3組進(jìn)行試驗(yàn)：（1）對(duì)照組（阿霉素單用）。加入不同質(zhì)量濃度梯度的阿霉素，其中Eca-109、MCF-7細(xì)胞中加入質(zhì)量濃度為0.026、0.078、0.233、0.70、2.1 μg/mL的阿霉素，A549、HepG2細(xì)胞中加入質(zhì)量濃度為0.125、0.25、0.50、1.0、2.0 μg/mL的阿霉素，HeLa細(xì)胞中加入質(zhì)量濃度為0.062 5、0.125、0.25、0.50、1.0 μg/mL的阿霉素）。（2）試驗(yàn)組（貝母素乙和阿霉素聯(lián)用）。加入最大無毒濃度（20 μg/mL）的貝母素乙以及與對(duì)照組相同質(zhì)量濃度梯度的阿霉素。（3）溶劑對(duì)照組。加入同體積且不含藥物的DMSO。按“2.3”項(xiàng)下方法檢測(cè)并按公式計(jì)算細(xì)胞生長抑制率：生長抑制率（%）＝（1－加藥組的吸光度值/溶劑對(duì)照組的吸光度值）×100%。根據(jù)所得結(jié)果繪制對(duì)照組與試驗(yàn)組的藥物濃度抑制曲線（橫坐標(biāo)為藥物濃度，縱坐標(biāo)為生長抑制率），計(jì)算半數(shù)抑制濃度（IC50）。

2.5 結(jié)晶紫染色法檢測(cè)貝母素乙和阿霉素聯(lián)用對(duì)細(xì)胞增殖的影響

收集處于對(duì)數(shù)生長期的5種腫瘤細(xì)胞，以每孔8×103個(gè)細(xì)胞接種于24孔板中[7]，在37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)24 h，細(xì)胞貼壁后，加藥處理。每種細(xì)胞分為4組進(jìn)行試驗(yàn)：（1）貝母素乙單用組，加入質(zhì)量濃度為20μg/mL的貝母素乙；（2）阿霉素單用組，加入相應(yīng)低質(zhì)量濃度的阿霉素（Eca-109、MCF-7、A549、HepG2、HeLa細(xì)胞各加入0.02、0.005、0.04、0.02、0.01 μg/mL阿霉素，由預(yù)試驗(yàn)結(jié)果確定）；（3）貝母素乙和阿霉素聯(lián)用組，分別加入與單用組相同質(zhì)量濃度的貝母素乙和阿霉素；（4）溶劑對(duì)照組，加入同體積且不含藥物的DMSO。放置于恒溫培養(yǎng)箱，孵育7 d后，小心吸棄培養(yǎng)液，磷酸鹽緩沖液洗滌2次，加入甲醇1 mL固定15 min。棄固定液，洗凈甲醇，加入結(jié)晶紫染色20 min。自來水沖洗洗去結(jié)晶紫染色液，置于空氣中干燥，觀察各組細(xì)胞染色情況。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以x±s表示。組間均數(shù)差異采用單因素方差分析進(jìn)行比較，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)比較兩組間的差異。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 貝母素乙對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性

結(jié)果顯示，貝母素乙僅在高質(zhì)量濃度（80 μg/mL）時(shí)對(duì)5種腫瘤細(xì)胞有細(xì)胞毒性作用。以細(xì)胞存活率＞90%為標(biāo)準(zhǔn)，綜合考慮確定貝母素乙對(duì)Eca-109、MCF-7、A549、HepG2、HeLa細(xì)胞的最大無毒濃度為20 μg/mL。不同質(zhì)量濃度的貝母素乙對(duì)5種腫瘤細(xì)胞存活率的影響見表1。

表1 不同質(zhì)量濃度的貝母素乙對(duì)5種腫瘤細(xì)胞存活率的影響（±s，n＝4，%%）Tab 1Effect of peiminine with different mass concentrations on the survival rate of 5 kinds of cancer cells（±s，n＝4，%%）

表1 不同質(zhì)量濃度的貝母素乙對(duì)5種腫瘤細(xì)胞存活率的影響（±s，n＝4，%%）Tab 1Effect of peiminine with different mass concentrations on the survival rate of 5 kinds of cancer cells（±s，n＝4，%%）

細(xì)胞Eca-109 MCF-7 A549 HepG2 HeLa貝母素乙質(zhì)量濃度，μg/mL 5 98.34±4.08 102.87±2.90 100.93±6.35 100.99±7.80 96.46±2.49 10 96.62±2.49 99.49±4.78 98.49±3.28 95.14±8.77 94.09±4.01 20 90.93±2.28 95.54±3.56 96.75±6.87 91.61±6.47 86.92±5.39 40 81.72±5.60 93.15±3.38 90.63±7.09 87.36±5.18 82.22±9.26 80 77.94±3.26 80.56±7.06 85.35±5.12 85.06±4.56 72.81±6.01

3.2 貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后細(xì)胞生長抑制率

與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組5種腫瘤細(xì)胞明顯喪失細(xì)胞活力，大部分細(xì)胞生長抑制率均明顯提高，IC50值明顯減小，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。這表明貝母素乙可不同程度地增強(qiáng)Eca-109、MCF-7、A549、HepG2、HeLa細(xì)胞對(duì)阿霉素的化療敏感性。貝母素乙和阿霉素聯(lián)用對(duì)Eca-109、MCF-7、A549、HepG2、HeLa細(xì)胞生長抑制率的影響見表2、表3、表4，IC50的測(cè)定結(jié)果見表5。

3.3 貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后細(xì)胞增殖染色情況

由結(jié)晶紫染色情況可以看出，與溶劑對(duì)照組比較，貝母素乙單用組的5種腫瘤細(xì)胞的紫色結(jié)晶程度無明顯差異，阿霉素單用組的5種腫瘤細(xì)胞的紫色結(jié)晶程度略微減輕，貝母素乙和阿霉素聯(lián)用組的5種腫瘤細(xì)胞的紫色結(jié)晶程度明顯減輕。由此表明，最大無毒濃度（20μg/mL）的貝母素乙和阿霉素聯(lián)用可明顯抑制Eca-109、MCF-7、A549、HepG2、HeLa細(xì)胞的增殖。各組腫瘤細(xì)胞的增殖染色情況見圖1。

表2 貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后Eca-109、MCF-7細(xì)胞的生長抑制率（±s，n＝4，%%）Tab 2Growth inhibition rate of Eca-109，MCF-7cellsafterthecombinationuseof peiminine and adriamycin（±s，n＝4，%%）

表2 貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后Eca-109、MCF-7細(xì)胞的生長抑制率（±s，n＝4，%%）Tab 2Growth inhibition rate of Eca-109，MCF-7cellsafterthecombinationuseof peiminine and adriamycin（±s，n＝4，%%）

注：與對(duì)照組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01Note：vs.control group，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

阿霉素質(zhì)量濃度，μg/mL 2.1 81.02±4.65 91.74±3.49＊80.28±5.66 93.31±3.55＊＊細(xì)胞Eca-109組別對(duì)照組試驗(yàn)組對(duì)照組試驗(yàn)組MCF-7 0.026 6.83±3.36 20.70±3.18＊＊10.81±3.17 35.88±5.55＊＊0.078 28.09±2.24 37.45±3.12＊29.02±2.99 58.43±8.58＊＊0.233 39.05±4.20 50.17±4.74＊50.40±8.24 74.93±6.80＊＊0.70 68.67±2.64 79.38±5.41＊66.67±5.18 86.76±4.77＊＊

表3 貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后A549、HepG2細(xì)胞的生長抑制率（±s，n＝4，%%）Tab 3Growth inhibition rate of A549，HepG2 cellsafterthecombinationuseof peiminine and adriamycin（±s，n＝4，%%）

表3 貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后A549、HepG2細(xì)胞的生長抑制率（±s，n＝4，%%）Tab 3Growth inhibition rate of A549，HepG2 cellsafterthecombinationuseof peiminine and adriamycin（±s，n＝4，%%）

注：與對(duì)照組比較，＊P＜0.05Note：vs.control group，＊P＜0.05

2.0 89.32±3.23 92.55±2.32 87.62±5.84 95.41±2.59細(xì)胞A549阿霉素質(zhì)量濃度，μg/mL HepG2組別對(duì)照組試驗(yàn)組對(duì)照組試驗(yàn)組0.125 35.86±9.76 51.13±6.28＊31.82±3.23 33.39±2.87 0.25 45.66±10.24 61.15±4.08＊42.79±7.54 57.38±4.91＊0.50 56.83±4.08 66.59±6.27＊56.13±5.94 72.31±7.29＊1.0 71.75±2.66 82.21±5.45＊75.47±3.34 84.23±3.67＊

表4 貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后Hela細(xì)胞的生長抑制率（±s，n＝4，%%）Tab 4Growth inhibition rate of Hela cells afterthecombinationuseofpeiminine and adriamycin（±s，n＝4，%%）

表4 貝母素乙和阿霉素聯(lián)用后Hela細(xì)胞的生長抑制率（±s，n＝4，%%）Tab 4Growth inhibition rate of Hela cells afterthecombinationuseofpeiminine and adriamycin（±s，n＝4，%%）

注：與對(duì)照組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01Note：vs.control group，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

1.0 87.66±4.02 91.93±4.28細(xì)胞HeLa組別對(duì)照組試驗(yàn)組阿霉素質(zhì)量濃度，μg/mL 0.062 5 34.27±8.91 51.34±7.43＊0.125 36.36±6.26 58.81±3.33＊＊0.25 42.15±6.68 78.67±3.54＊＊0.50 73.39±6.61 85.46±5.83＊

表5 阿霉素單用及其和貝母素乙聯(lián)用對(duì)5種腫瘤細(xì)胞的IC50測(cè)定結(jié)果（±s，n＝4，μg/mL）Tab 5The IC50determination results of single useofadriamycinanditscombination use with peiminine to 5 kinds of cancer cells（±s，n＝4，μg/mL）

表5 阿霉素單用及其和貝母素乙聯(lián)用對(duì)5種腫瘤細(xì)胞的IC50測(cè)定結(jié)果（±s，n＝4，μg/mL）Tab 5The IC50determination results of single useofadriamycinanditscombination use with peiminine to 5 kinds of cancer cells（±s，n＝4，μg/mL）

細(xì)胞Eca-109 MCF-7阿霉素單用0.37±0.06 0.32±0.23貝母素乙和阿霉素聯(lián)用0.16±0.04＊0.16±0.05＊＊

圖1 各組腫瘤細(xì)胞的增殖染色情況Fig 1Proliferation staining situation of cancer cells in each group

4 討論

研究發(fā)現(xiàn)，部分中藥提取物和單體有化療增敏作用，這類藥物大都作用靶點(diǎn)多樣、毒性低、可保護(hù)臟器和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、耐受性好，具有一定臨床應(yīng)用價(jià)值，在全球范圍內(nèi)越來越受到關(guān)注和青睞。臨床療效以及安全性評(píng)估結(jié)果顯示，艾迪注射液聯(lián)合TP方案治療非小細(xì)胞肺癌有較好的治療效果，且毒副反應(yīng)小，可有效提高患者的生存質(zhì)量以及免疫功能[8]。有大量的數(shù)據(jù)顯示，具有生物活性的天然產(chǎn)物可作為化療增敏劑[9]。例如：楊梅黃酮在體內(nèi)外均可增強(qiáng)食管癌對(duì)5-氟尿嘧啶的化療敏感性[10]；山竹子素可提高頭頸部鱗癌對(duì)順鉑的化療敏感性[11]；茶多酚可通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡增強(qiáng)宮頸癌的化療敏感性[12]。除此之外，姜黃素、槲皮素、藻藍(lán)蛋白、甲基蓮心堿、銀杏葉多糖、白藜蘆醇、康萊特注射液、葡萄籽多酚等也可作為化療增敏劑，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，降低化療藥物的毒副作用。

阿霉素作為抗腫瘤抗生素，能明顯抑制DNA以及RNA的合成，可嵌入DNA從而抑制核酸的合成。同時(shí)，阿霉素屬于細(xì)胞周期非特異性藥物，具有廣譜抗腫瘤的特點(diǎn)。臨床上阿霉素及其衍生物廣泛應(yīng)用于治療肺癌、乳腺癌、急性淋巴細(xì)胞性白血病、胃癌、卵巢癌等的化療以及聯(lián)合化療方案[13]。雖然阿霉素對(duì)腫瘤細(xì)胞有較好的細(xì)胞毒性作用，但其對(duì)腦、心以及腎等臟器會(huì)造成損傷，且毒副作用需要很長時(shí)間才能被發(fā)現(xiàn)，因此嚴(yán)重影響了阿霉素在臨床的應(yīng)用[14]。同時(shí)，阿霉素的廣泛應(yīng)用使其化療敏感性降低，耐藥性增強(qiáng)，導(dǎo)致治療失敗率上升[15]。目前已有研究表明，中藥單體可增強(qiáng)阿霉素的化療敏感性，如新藤黃酸可使乳腺癌細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性增強(qiáng)，抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖[16]。

MTT法又稱作MTT比色法，常用于檢測(cè)細(xì)胞存活、細(xì)胞生長情況。MTT法已廣泛應(yīng)用于抗腫瘤藥物的篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)、腫瘤放射敏感性測(cè)定、生物活性因子的活性檢測(cè)等[17]。結(jié)晶紫是一種堿性染料，可以和細(xì)胞核中的DNA結(jié)合，把細(xì)胞核染成深紫色[18]。在細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用結(jié)晶紫染色法判斷腫瘤細(xì)胞的增殖情況。本研究采用這兩種方法考察細(xì)胞活力與增殖情況。

本研究結(jié)果提示，貝母素乙可不同程度地增強(qiáng)本文5種腫瘤細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性，具有一定的化療增敏作用，具有成為新型化療增敏劑的潛力。然而，貝母素乙化療增敏機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

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Study on the Effect of Peiminine on Increasing the Chemosensitivity of 5 Kinds of Cancer Cells

TANG Qianqian1，2，WANG Yunfei1，NIE Yongzhan3，GU Zhengyi1（1.Xinjiang Uygur Autonomous Region Institute of Material Medical，Urumqi 830004，China；2.College of Pharmacy，Xinjiang Medical University，Urumqi 830011，China；3.State Key Laboratory of Cancer Biology，Xi’an 710032，China）

OBJECTIVE：To study the effect of peiminine on increasing the chemosensitivity of 5 kinds of cancer cells.METHODS：Using human esophageal cancer Eca-109 cell，human breast cancer MCF-7 cell，human small cell lung cancer A549 cell，human hepatoma HepG2 cell and human cervical cancer HeLa cell as objects，MTT colorimetric method was used to detect the growth inhibition rate of above-mentioned 5 kinds of cancer cells after treated by peiminine with maximal non-toxic mass concentration（20 μg/mL）and adriamycin with different gradient mass concentrations（0.026-2.1，0.026-2.1，0.125-2.0，0.125-2.0，0.062 5-0.10 μg/mL）for 72 h.The half inhibitory concentration（IC50）was calculated.Crystal violet staining method was adopted to observe the proliferation of above-mentioned cancer cells after treated by peiminine with maximal non-toxic mass concentration and adriamycin with low mass concentrations（0.02，0.005，0.04，0.02，0.01 μg/mL）for 7 d.Solvent control，single use of peiminine and adriamycin control were conducted.RESULTS：Compared with single use of adriamycin，the combination use of peiminine and adriamycin can improve the growth inhibition rate of 5 kinds of cancer cells to certain degree，most of the differences were statistically significant（P＜0.05 or P＜0.01）；and IC50was obviously decreased，with statistical significances（P＜0.05 or P＜0.01）.Compared with solvent control，single use of peiminine or adriamycin had no obvious effects on the proliferation of above-mentioned cancer cells in 7 d，and the combination use of peiminine and adriamycin can obviously inhibit the proliferation of above-mentioned cancer cells in 7 d.CONCLUSIONS：Peiminine can enhance the sensitivity of above-mentioned-mentioned 5 kinds of cancer cells to certain degree，showing certain chemosensitivity increasing effect.

Peiminine；Adriamycin；Chemosensitizers；Esophageal cancer；Breast cancer；Lung cancer；Liver cancer；Cervical cancer

R965.1

A

1001-0408（2017）34-4796-05

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.34.11

新疆維吾爾自治區(qū)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室專項(xiàng)資金資助項(xiàng)目（No.2014KL006）；新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.2017D01B43）

＊碩士研究生。研究方向：新藥和新劑型研究與開發(fā)。電話：0991-2828537。E-mail：tangqianqian0916@163.com

#通信作者：研究員，博士生導(dǎo)師。研究方向：新藥研究與開發(fā)。電話：0991-2828537。E-mail：zhengyi087@126.com

2017-05-09

2017-07-14）

（編輯：鄒麗娟）