湯英賢 李玉珍 徐令清 溫偉洪 陳凌娟 李介華

2016年某院血培養(yǎng)情況及耐藥性分析

湯英賢 李玉珍 徐令清 溫偉洪 陳凌娟 李介華

目的了解2016年清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院血培養(yǎng)常見病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供依據(jù)。方法使用BD BACTECTM FX全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)對(duì)10 889份臨床采集的血液進(jìn)行培養(yǎng)，陽(yáng)性標(biāo)本采用BD Phoenix 100全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行鑒定及藥敏分析，耐藥性分析采用WHONET 5.6軟件統(tǒng)計(jì)。結(jié)果10 889份血培養(yǎng)標(biāo)本中檢測(cè)陽(yáng)性為952份，總陽(yáng)性率8.74%；剔除同一患者多次培養(yǎng)重復(fù)分離株，陽(yáng)性標(biāo)本為542份，其中革蘭陽(yáng)性菌183株，革蘭陰性菌321株，真菌38株。常見的病原菌依次為大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、和銅綠假單胞菌。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)美羅培南、亞胺培南和復(fù)方新諾明的敏感性為100%；耐藥性排名前四位的抗生素分別為氨芐西林、哌拉西林、四環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦；銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的敏感性均大于90%；金黃色葡萄球菌對(duì)阿莫西林/克拉維酸、利奈唑胺、替考拉寧、萬(wàn)古霉素的敏感性均為100%，對(duì)氨芐西林菌耐藥性為100%、青霉素G耐藥性為97.9%；糞腸球菌屬對(duì)替考拉寧、萬(wàn)古霉素和利奈唑胺敏感性為100%。結(jié)論該院血培養(yǎng)陽(yáng)性率及耐藥率均比較高，血流感染病原菌以腸桿菌科細(xì)菌為主，凝固酶陰性的葡萄球菌占比也比較高，馬爾尼菲青霉菌感染應(yīng)引起重視，臨床應(yīng)高度重視血培養(yǎng)檢查，加強(qiáng)抗生素的早期、合理使用，減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

血培養(yǎng)；病原菌；耐藥性

血流感染包括菌血癥和敗血癥，是致病菌或條件致病菌侵入血液中生長(zhǎng)繁殖并釋放毒素和代謝產(chǎn)物而引起的急性重癥感染性疾病，其發(fā)病率和致死率均較高[1]。早期及時(shí)有效的抗菌治療，對(duì)于降低發(fā)病率、病死率具有極為重要的價(jià)值。因而進(jìn)行血培養(yǎng)標(biāo)本分析及研究其耐藥情況，有助于初始治療時(shí)選用恰當(dāng)?shù)目股?。血培養(yǎng)是判斷患者血流感染的金標(biāo)準(zhǔn)[2]。本研究對(duì)清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院2016年臨床采集的10 889份血培養(yǎng)標(biāo)本中分離的542份菌株進(jìn)行分析，為臨床早期、合理使用抗生素提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源收集 2016年全年清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院門診與住院患者送檢的10 889份血培養(yǎng)標(biāo)本。

1.2 儀器與試劑使用BD BACTECTM FX全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)及配套血培養(yǎng)瓶。細(xì)菌鑒定藥敏采用BD全自動(dòng)快速生物質(zhì)譜檢測(cè)系統(tǒng)IVD MALDI Biotyper和BD Phoenix 100全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏檢測(cè)系統(tǒng)及3種獨(dú)立的鑒定藥敏復(fù)合板條，即革蘭陽(yáng)性鑒定藥敏復(fù)合板條、革蘭陰性鑒定藥敏復(fù)合板條和鏈球菌鑒定藥敏復(fù)合板條。真菌鑒定采用梅里埃診斷產(chǎn)品（上海）有限公司產(chǎn)品 API20CAux。藥敏紙片為英國(guó)Oxoid公司產(chǎn)品。培養(yǎng)基選用鄭州安圖生物工程股份有限公司生產(chǎn)。

1.3 質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922，金黃色葡萄球菌ATCC29213，銅綠假單胞菌ATCC27853和糞腸球菌ATCC29212均購(gòu)自衛(wèi)生部臨檢中心。

1.4 檢查方法參照《血培養(yǎng)檢測(cè)規(guī)范化操作》[3]進(jìn)行標(biāo)本的正確采集，成人8～10 ml分別注入美國(guó)BD公司配套成人樹脂需氧瓶和厭氧瓶，兒童1～3 ml注入兒童樹脂培養(yǎng)瓶。放入BD BACTECTM FX全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。陽(yáng)性報(bào)警后立即取出，分別接種于血平板、巧克力平板和沙保氏平板，若為厭氧瓶報(bào)陽(yáng)分別轉(zhuǎn)種相應(yīng)平板做需氧和厭氧培養(yǎng)。35 ℃培養(yǎng)24 h后，根據(jù)革蘭染色結(jié)果選用相應(yīng)的鑒定藥敏復(fù)合板條進(jìn)行細(xì)菌的鑒定藥敏試驗(yàn)。細(xì)菌菌譜及耐藥性分析采用 WHONET 5.6軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分布10 889份血培養(yǎng)標(biāo)本中檢測(cè)陽(yáng)性為952份，總陽(yáng)性率8.74%。剔除同一患者多次培養(yǎng)重復(fù)分離株，陽(yáng)性為 542份菌株，其中革蘭陽(yáng)性菌183株，占33.76%；革蘭陰性菌321株，占59.23%；真菌38株，占7.01%，其中馬爾尼菲青霉菌占2.58%，專性厭氧菌占0.92%。由表1可以看出，常見的病原菌依次為大腸埃希菌（32.10%）、凝固酶陰性葡萄球菌（11.62%）、金黃色葡萄球菌（9.23%）、肺炎克雷伯菌（9.04%）和銅綠假單胞菌（4.98%）。

表1 542株病原菌的種類及構(gòu)成比

2.2 革蘭陰性菌耐藥性分析由表2可知，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)美羅培南、亞胺培南和復(fù)方新諾明的敏感性為100%，耐藥性排名前四位的抗生素分別為氨芐西林、哌拉西林、四環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦，銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的敏感性均大于90%。

2.3 革蘭陽(yáng)性菌耐藥性分析金黃色葡萄球菌對(duì)阿莫西林/克拉維酸、利奈唑胺、替考拉寧、萬(wàn)古霉素的敏感性均為100%，對(duì)氨芐西林菌耐藥性為100%、青霉素G耐藥性為97.9%；凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)氨芐西林和青霉素G有較高的耐藥性，而對(duì)利奈唑胺、替考拉寧和萬(wàn)古霉素的敏感性均為100%；腸球菌屬對(duì)氨芐西林、利奈唑胺、青霉素G、替考拉寧、萬(wàn)古霉素敏感性均為100%。

表2 革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性(%)

表3 革蘭陽(yáng)性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性(%)

2.4 真菌耐藥性分析見表4。

表4 真菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性(%)

3 討論

血流感染是一種嚴(yán)重的全身感染性疾病，可引起患者發(fā)熱、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）、休克等嚴(yán)重后果[4]，如果診治不及時(shí)可威脅患者生命，病死率較高。本研究結(jié)果顯示，2016年該院血培養(yǎng)分離病原菌以革蘭陰性菌為主，分離排名前五位的病原菌分別為大腸埃希菌（32.10%）、凝固酶陰性葡萄球菌（11.62%）、金黃色葡萄球菌（9.23%）、肺炎克雷伯菌（9.04%）和銅綠假單胞菌（4.98%）。血培養(yǎng)病原菌譜與國(guó)內(nèi)的一些監(jiān)測(cè)報(bào)道大致相似[5]。凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率也比較高，此類菌群常常作為污染菌但有時(shí)也可成為致病菌，為導(dǎo)管相關(guān)性血流感染的病原菌。對(duì)于血培養(yǎng)檢測(cè)出的病原菌是否為真正的致病菌，還需要結(jié)合患者具體的臨床治療和病原菌進(jìn)行綜合分析。

根據(jù)藥敏結(jié)果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)美羅培南、亞胺培南和復(fù)方新諾明的敏感性為100%；耐藥性排名前四位抗生素分別為氨芐西林、哌拉西林、四環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦，但隨著碳青霉烯類藥物的廣泛使用，其他標(biāo)本類別中已發(fā)現(xiàn)碳青霉烯類藥物耐藥的腸桿科細(xì)菌。本研究培養(yǎng)出的革蘭陽(yáng)性菌主要為凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和糞腸球菌，而金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率遠(yuǎn)低于2011年CHINET中國(guó)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)血培養(yǎng)檢出率的 42.5%和68.0%[5]。金黃色葡萄球菌屬對(duì)阿莫西林/克拉維酸、萬(wàn)古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的敏感性為100%，但據(jù)報(bào)道在日本、美國(guó)等已發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥的葡萄球菌[6]。對(duì)氨芐西林和青霉素G的耐藥性均高于95%以上，給臨床經(jīng)驗(yàn)用藥提供參考。腸球菌屬主要是糞腸球菌，目前還未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥的腸球菌屬。

研究中還出現(xiàn)了本市的第1例布魯菌感染病例，為感染性發(fā)熱就診患者，至今已陸續(xù)發(fā)現(xiàn)本菌感染病例，疾病防控方面應(yīng)引起重視。布魯菌是一類人畜共患感染性疾病的病原菌，臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)熱、關(guān)節(jié)痛、全身乏力，通過(guò)空氣傳播比接觸傳播更為重要。目前，厭氧培養(yǎng)技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中普遍得到開展，本研究還發(fā)現(xiàn)5例專性厭氧菌血流感染病例，其在臨床非常普遍，可發(fā)生于人體的各個(gè)部位，遍及臨床各科。據(jù)統(tǒng)計(jì)[7]，約60%的臨床感染均有厭氧菌參與。因此，臨床對(duì)于感染標(biāo)本應(yīng)重視厭氧菌的檢出情況，尤其對(duì)于疑似為感染而常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)的陰性病例，應(yīng)嚴(yán)格進(jìn)行厭氧菌的分離培養(yǎng)與鑒定。

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，侵入性治療等技術(shù)的開展和抗菌藥物的廣泛使用，血流感染率呈不斷上升趨勢(shì)，因此臨床應(yīng)嚴(yán)格按照血培養(yǎng)檢測(cè)規(guī)范化操作執(zhí)行，加強(qiáng)抗生素的早期、合理使用，減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

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10.12010/j.issn.1673-5846.2017.11.005

清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東清遠(yuǎn) 511500

湯英賢（1984.6-），本科學(xué)歷，主管檢驗(yàn)師。研究方向：主要從事微生物方面研究。E-mail：224841975@qq.com