徐蕙 侯曉燕

革蘭染色法在陰道分泌物真菌檢測中的應(yīng)用研究

徐蕙 侯曉燕

目的探究陰道分泌物真菌檢測中應(yīng)用革蘭染色法的效果。方法選取我院收治的陰道炎患者130例作為研究對象，將其隨機(jī)分為觀察組（65例）和對照組（65例）。對照組采用生理鹽水檢驗，觀察組采用革蘭染色法檢驗。分析兩組真菌檢驗數(shù)據(jù)，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果觀察組的檢驗結(jié)果優(yōu)于對照組，組間數(shù)據(jù)對比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05）。結(jié)論革蘭染色法檢測陰道分泌物真菌，檢測的陽性率高，效果較好。

革蘭染色法；陰道分泌物；真菌檢測；應(yīng)用研究

女性疾病已經(jīng)成為一種較為普遍的病癥，陰道炎是其中病癥之一，引起婦科疾病的主要原因是由于各種致病菌的感染。常見的病癥臨床變現(xiàn)為陰道瘙癢、陰道分泌物異常、外部灼痛感，疾病嚴(yán)重的會影響性生活[1]。檢測陰道炎方法居多，常用一種既方便又快速的，被稱為陰道分泌物涂片的方法。雖然得出結(jié)果的效率高，但是比較容易受到影響，所以增加了發(fā)現(xiàn)分泌物的真菌感染難度，因此導(dǎo)致檢驗結(jié)果檢出的真菌率低、敏感性低，會出現(xiàn)漏診、誤診的現(xiàn)象，使患者的病情得不到及時治療[2]。正因此現(xiàn)象的產(chǎn)生，在臨床上治療陰道炎患者的關(guān)鍵性是選取合適的檢驗方法，并作為課題進(jìn)行研究。近幾年來，隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展迅速，醫(yī)療技術(shù)不斷進(jìn)步，在研究陰道分泌物的檢驗方面也有了新的突破。經(jīng)過大量研究表明，一種方法既能夠提高陰道分泌物真菌的檢出率又可以提高敏感性的是革蘭染色法，而且還可以提供安全有效的數(shù)據(jù)，作為臨床上婦科疾病的診斷依據(jù)，效果良好[3]。我院選取了陰道炎患者，研究革蘭染色法在陰道分泌物真菌檢驗中的應(yīng)用，開展了本次實(shí)驗。現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2015年8月—2016年8月收治的陰道炎患者130例作為研究對象。所有患者必須符合陰道炎癥狀的診斷，并且實(shí)驗是在患者和患者的家屬知情同意的情況下完成的。將130例患者隨機(jī)分成兩組，觀察組（65例）與對照組（65例）。觀察組患者的平均年齡為（41.7±5.3）歲，住院時間5～15天；對照組患者的平均年齡為（41.1±5.6）歲，住院時間4～15天。兩組患者的一般資料對比，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 對照組 采用生理鹽水的方法檢驗：用無菌的棉拭子在生理鹽水中浸潤，然后將其放入陰道中，獲取陰道分泌物之后均勻涂抹在載玻片上進(jìn)行鏡檢。

1.2.2 觀察組 采用革蘭染色的方法檢驗：同對照組將無菌的棉拭子在革蘭中浸潤，然后放入陰道中，獲取陰道分泌物后均勻涂抹在載玻片上，首先進(jìn)行過火固定，然后開始染色（初染、媒染、脫色、復(fù)色），最后在油鏡下檢驗。初染：滴數(shù)滴草酸結(jié)晶紫到載玻片上，搖勻至覆蓋標(biāo)本，染色1 min后用大量清水沖洗；媒染：接著上一步在得到的標(biāo)本上滴加數(shù)滴碘液直至標(biāo)本被完全覆蓋，染色1 min后用大量清水沖洗，把多余的水分用吸水紙吸掉；脫色：用媒染得到的標(biāo)本滴入酒精脫色液，晃動使載玻片充分脫色，1 min后大量清水沖洗，把多余的水分用吸水紙吸掉；復(fù)染：將脫色得到的標(biāo)本加沙黃染色液至完全覆蓋，靜置15 s后，用大量清水沖洗，把多余的水分用吸水紙吸掉，干燥后鏡檢。

1.3 評價療效標(biāo)準(zhǔn)

本實(shí)驗有兩種實(shí)驗結(jié)果，一種為陽性，另一種為陰性。陽性結(jié)果為：出現(xiàn)孢子或真菌菌體；反之為陰性。并將兩種方案的陽性率進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)比較。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以（n，%）表示，采用χ2檢驗，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組的檢驗結(jié)果優(yōu)于對照組，組間數(shù)據(jù)對比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

3 討論

從生態(tài)系統(tǒng)方面來講，女性陰道也屬于一個生態(tài)系統(tǒng)，是一個復(fù)雜的微生物生態(tài)系統(tǒng)，原因是多種微生物存在于女性陰道中，生態(tài)系統(tǒng)處于一種平衡的動態(tài)之中，這些微生物也不例外[4]。不過隨著女性年齡、妊娠的改變，處于平衡狀態(tài)的微生物會發(fā)生比例的變化。正常的陰道pH值范圍在4.0～4.5之間，健康的菌群中乳酸桿菌是優(yōu)勢菌，比例達(dá)到陰道微生物的90%以上。但是由于后期使用抗生素期限過長，并且自身的免疫力不足等因素會引起乳酸菌的大量死亡，一旦出現(xiàn)此現(xiàn)象，會引起菌群比例失調(diào)，真菌繁殖會增快，進(jìn)而引起陰道炎[5]。真菌性感染引起婦女陰道的發(fā)病率高，而且假陰性的主要主觀因素是由于真菌的數(shù)量少或者孢子的形態(tài)變化比較大，因此誤導(dǎo)檢驗者難以正確辨別光滑念珠菌、熱帶念珠菌等變異性較多的真菌[6]。近年來，隨著抗菌藥物的大量使用以及濫用，造成細(xì)菌的多重耐藥性以及繼發(fā)的雙重感染，因此導(dǎo)致臨床治療的困難難度大大增加。在醫(yī)生沒有給出明確的治療方法時，不能憑著自己的經(jīng)驗用藥，且隨便加大用藥量，否則會導(dǎo)致失調(diào)的菌群失調(diào)加重，影響治療效果。

表1 兩組患者真菌檢驗結(jié)果比較 [n（%）]

諸多學(xué)者針對以上現(xiàn)象提出治療方法，設(shè)置陰道分泌物的常規(guī)檢查方法，即為革蘭染色法。雖然革蘭染色法步驟比生理鹽水法繁瑣，但是革蘭染色法可以同時檢查多項目，尤其是對淋球菌、加德納菌及其他條件致病菌檢測的敏感性高[7-8]。臨床上推廣應(yīng)用染色法，可以提高檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，并且把醫(yī)生濫用抗生素的可能性降低，同時為醫(yī)生合理有效地診療提供必需的實(shí)驗室依據(jù)，既可以及時解決患者的痛苦，不僅緩解了患者的家庭關(guān)系，還可以受益于社會和經(jīng)濟(jì)效益。上述介紹到嚴(yán)重性的婦科病會影響夫妻間的生活，運(yùn)用染色法可以降低誤診率，明確診斷，減少診療時間，為患者減輕痛苦。為了防止漏診，對于用生理鹽水直接鏡檢的可疑標(biāo)本理應(yīng)再次進(jìn)行革蘭染色法檢測。本次研究結(jié)果表明：觀察組的檢驗結(jié)果優(yōu)于對照組，組間數(shù)據(jù)對比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，觀察組應(yīng)用革蘭染色法應(yīng)在陰道分泌物真菌檢驗的效果優(yōu)于對照組，在臨床檢驗應(yīng)用上值得推廣。本研究存在的不足之處在于：觀察對象量小，隨訪時間短，不能夠作為有力的依據(jù)，需要進(jìn)一步觀察。

[1]吳瑞民，李朝獻(xiàn)，李妤蓉．5種快速方法檢測真菌孢子的比較[J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，36（9）：1257-1258．

[2]余算．基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)對滴蟲性、真菌性陰道炎最適檢驗方案的臨床觀察 [J]．中國微生態(tài)學(xué)雜志，2014，26（11）：1338-1341．

[3]張秋菊，趙德華，賈莉婷，等．31 848例陰道分泌物檢查結(jié)果分析 [J]．中國婦幼保健，2014，29（18）：2886-2888．

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[8]彭芬，劉行超，曾桂芬．唾液酸酶法檢測對細(xì)菌性陰道病的診斷價值 [J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（2）：197-198．

Study on the Application of Gram Staining Method in Fungal Examination of Vaginal Discharge

XU Hui HOU Xiaoyan Department of Clinical Laboratory, Zaozhuang Maternal and Child Health Care Hospital, Zaozhuang Shandong 277100, China

ObjectiveTo explore the effect of Gram staining method in fungal detection of vaginal secretions.Methods130 cases of vaginitis patients in our hospital were selected as the research objects, and they were randomly divided into observation group (65 cases) and control group (65 cases). The control group was examined by physiological saline,the observation group was examined by Gram staining method. Fungal examination data of two groups were analyzed, and statistical analysis was conducted.ResultsThe results of the observation group were better than those of the control group, and the difference between the two groups was statistically significant (P＜0.05).ConclusionThe detection of vaginal fungal leather blue staining method, the positive detection rate is high, the effect is significant.

Gram staining method; vaginal discharge; fungi detection;application study

R711

A

1674-9308（2017）25-0036-03

10．3969/j．issn．1674-9308．2017．25．019

棗莊市婦幼保健院檢驗科，山東 棗莊 277100