顧青峰

小細(xì)胞肺癌患者血清趨化因子的表達(dá)及對(duì)術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的影響

顧青峰

目的檢測(cè)小細(xì)胞肺癌 (SCLC)患者血清巨噬細(xì)胞炎癥蛋白3α (MIP-3α)水平，并分析在術(shù)后早期復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移中的意義，探討不同因素對(duì)患者術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的影響。方法選擇本院2013年9月—2015年2月收治的SCLC患者100例，為觀察組，選擇同期體檢健康人員20例作為對(duì)照組。觀察組患者根據(jù)術(shù)后是否轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)，未發(fā)生轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)56例，為觀察組1，轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)44例，為觀察組2。檢測(cè)對(duì)照組及觀察組患者術(shù)前及術(shù)后30d，90d，180d血清MIP-3α水平。記錄術(shù)中指標(biāo)，分析相關(guān)因素對(duì)患者復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的影響。結(jié)果觀察組術(shù)前血清MIP-3α為(98.65±9.30)pg/mL，高于對(duì)照組(23.74±6.85)pg/mL，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組術(shù)后血清MIP-3α均低于術(shù)前，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組2術(shù)后180d血清MIP-3α為(69.47±7.82)pg/mL，高于觀察組1(61.08±8.14)pg/mL，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組2術(shù)后MIP-3α高水平發(fā)生率為65.91%(29/44)，高于觀察組1患者術(shù)后21.43%(12/56)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論MIP-3α在SCLC患者血清中的濃度顯著增加，術(shù)后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，與術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，可作為患者術(shù)后早期復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移檢測(cè)指標(biāo)。

巨噬細(xì)胞炎癥蛋白3α；小細(xì)胞肺癌；復(fù)發(fā)；影響因素

小細(xì)胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC)約占所有肺癌的10%-25%，其中手術(shù)是臨床治療SCLC的重要方法之一，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是手術(shù)治療失敗的最常見(jiàn)危險(xiǎn)因素[1]。近年來(lái)有研究[2]認(rèn)為，升高的炎癥細(xì)胞因子是多種癌癥的復(fù)發(fā)危險(xiǎn)因素。巨噬細(xì)胞炎癥蛋白3α (Macrophage Inflammatory Protein-3, MIP-3α)，也叫做CCL20，是已知唯一與CC趨化因子受體6(CCR6)相互作用的細(xì)胞因子[3]。有報(bào)道[4]MIP-3α在結(jié)腸癌、胰腺癌、前列腺癌、鼻咽癌以及肝癌中呈現(xiàn)高表達(dá)，認(rèn)為MIP-3α與腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移相關(guān)。目前尚無(wú)血清MIP-3α水平與小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后相關(guān)性的研究，本研究旨在檢測(cè)SCLC患者血清MIP-3α水平，并分析在術(shù)后早期復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移中的意義，探討不同因素對(duì)患者術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的影響。

資料與方法

一、一般資料

選擇本院2013年9月—2015年2月收治的SCLC患者100例，為觀察組，所有患者均經(jīng)病理組織學(xué)確診，行胸腔鏡下肺癌根治術(shù)。選擇同期體檢健康人員20例作為對(duì)照組。觀察組患者男性55例，女性45例，年齡(59.47±8.30)歲(40歲-73歲)，燕麥細(xì)胞型39例、中間細(xì)胞型33例和混合細(xì)胞型28例；對(duì)照組男性13例，女性7例，年齡(59.64±8.95)歲(42歲-71歲)，兩組研究對(duì)象性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，觀察組患者根據(jù)術(shù)后是否轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)，未發(fā)生轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)患者56例，為觀察組1，轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)44例，為觀察組2。排除病例為其他組織惡性腫瘤，嚴(yán)重炎癥反應(yīng)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)通過(guò)，并取得患者知情同意，隨訪至術(shù)后兩年。

二、 方法和指標(biāo)

1 手術(shù)步驟：所有患者采用雙腔氣管插管和單肺通氣，常規(guī)全身麻醉。采用胸腔鏡手術(shù)步驟，分別在腋中線第7或第8肋間，腋前線第4或第5肋間，以及肩胛下線第8或第9肋間做切口。標(biāo)準(zhǔn)模式肺癌根治步驟，以標(biāo)本袋收集樣本。不切斷肌肉(背闊肌及前鋸肌)和肋骨[5]。術(shù)中記錄出血量(QOH)及手術(shù)時(shí)間(TOP)，術(shù)后隨訪兩年。

2 主要指標(biāo)：收集患者術(shù)前及術(shù)后30，90，180天清晨血標(biāo)本。同樣收集健康人血標(biāo)本。3000g 離心10min分離血清，-80°C儲(chǔ)存。采用酶聯(lián)免疫吸附試法測(cè)定血清MIP-3α水平，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

同時(shí)收集臨床相關(guān)指標(biāo)以及術(shù)中指標(biāo)，分析年齡、性別、輔助性化療、血清MIP-3α水平、QOH以及TOP等，與小細(xì)胞肺癌早期復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。

3 試劑與儀器：全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀Microlab Star (Hamilton Bonaduz);人巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-3α酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(RayBiotech) KA-100型臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件, 計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)，并進(jìn)行比例風(fēng)險(xiǎn)回歸，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、對(duì)照組和觀察組術(shù)前血清MIP-3α結(jié)果比較

觀察組術(shù)前血清MIP-3α為(98.65±9.30)pg/mL，高于對(duì)照組(23.74±6.85)pg/mL，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

二、觀察組患者基本臨床資料、手術(shù)狀況及化療結(jié)果比較

兩組研究對(duì)象基本臨床資料、手術(shù)狀況及化療比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。(見(jiàn)表1)。

三、觀察組患者術(shù)前和術(shù)后不同時(shí)間血清MIP-3α結(jié)果比較

兩組術(shù)后血清MIP-3α均低于術(shù)前，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組2術(shù)后180d血清MIP-3α為(69.47±7.82)pg/mL，高于觀察組1(61.08±8.14)pg/mL，且兩組均高于術(shù)后30d和90d，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

取術(shù)后180d患者M(jìn)IP-3α中位數(shù)，將患者分為MIP-3α高水平和低水平，觀察組2術(shù)后MIP-3α高水平為65.91%(29/44)，高于觀察組1患者術(shù)后21.43%(12/56)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。(見(jiàn)表2)。

四、術(shù)后患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)相關(guān)影響因素COX 回歸分析結(jié)果

將性別、年齡、TOP、QOH、化療及MIP-3α作為自變量，并分別賦值，術(shù)后患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)為因變量，進(jìn)行COX 回歸分析，術(shù)后患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)與MIP-3α相關(guān)，P<0.05。(見(jiàn)表3)。

表2 觀察組患者術(shù)前和術(shù)后不同時(shí)間血清MIP-3α結(jié)果比較

△與觀察組1比較，▲與術(shù)前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表3 術(shù)后患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)相關(guān)影響因素COX 回歸分析結(jié)果

討 論

手術(shù)治療SCLC的重要方法，初始治療效果常較好，但腫瘤容易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后，也是SCLC患者死亡的主要原因。近年來(lái)研究[6]發(fā)現(xiàn)趨化因子參與了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。趨化因子也稱化學(xué)趨化性細(xì)胞因子，主要由組織細(xì)胞和炎性細(xì)胞產(chǎn)生，根據(jù)N末端保守的半胱氨酸的排列方式分為 CXC、CC、C和CX3C四類亞族。MIP-3α是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的CC 趨化因子家族的新成員，由CCL20基因編碼，相對(duì)分子質(zhì)量為 9000。主要表達(dá)于肺臟、肝臟、淋巴結(jié)、外周血細(xì)胞及多種腫瘤細(xì)胞[7]。MIP-3α生理?xiàng)l件下表達(dá)較低，在炎癥性疾病中，對(duì)炎癥細(xì)胞有激活、趨化和遷移作用。MIP-3α與 Th17 表面高表達(dá)的CCR6結(jié)合成趨化軸，向抗原出現(xiàn)的組織部位定向遷移，誘導(dǎo)白細(xì)胞移動(dòng)到炎性反應(yīng)部位，并發(fā)揮炎癥放大作用，經(jīng)強(qiáng)烈的促炎信號(hào)誘發(fā)其表達(dá)升高，加重炎癥反應(yīng)程度[8-9]。本次研究結(jié)果顯示，SCLC患者血清MIP-3α顯著高于正常人群。近年來(lái)研究[10]發(fā)現(xiàn)，MIP-3α不僅與局部炎性細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)，還與許多惡性腫瘤進(jìn)展、血管生成、轉(zhuǎn)移或侵襲能力及預(yù)后密切相關(guān)。機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤細(xì)胞免疫監(jiān)視失控導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。在免疫系統(tǒng)中，樹(shù)突狀細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞，MIP-3α的配體 CCR6 主要分布于未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞、記憶B和T細(xì)胞，通過(guò)MIP-3α與 CCR6的結(jié)合及時(shí)啟動(dòng)免疫應(yīng)答以清除病原體，在介導(dǎo)肝癌、胰腺癌等多種類型癌癥中促進(jìn)腫瘤的增殖、侵襲、播散及轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用[11-12]。

有研究[13]報(bào)道SCLC術(shù)后一年復(fù)發(fā)率為50%。本次研究結(jié)果顯示，患者性別、年齡、TOP、QOH、化療對(duì)患者術(shù)后復(fù)發(fā)無(wú)相關(guān)性，需要進(jìn)一步增加樣本量進(jìn)行研究。但患者術(shù)后血清MIP-3α呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，術(shù)后復(fù)發(fā)患者血清MIP-3α明顯升高，且呈現(xiàn)高表達(dá)(P<0.05)。MIP-3α一方面刺激機(jī)體發(fā)生適當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)，參與免疫抑癌反應(yīng)，另一方面介導(dǎo)病理學(xué)組織損傷，促進(jìn)了腫瘤的侵襲、 轉(zhuǎn)移。有研究認(rèn)為，MIP-3α通過(guò)MIP-3α/CCR6軸，經(jīng)不同的跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與了致癌、血管形成以及浸潤(rùn)，增加了SCLC的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，影響了肺癌患者的預(yù)后[14-15]。

綜上所述，MIP-3α在SCLC患者血清中的濃度顯著增加，術(shù)后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，與術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，可作為患者術(shù)后早期復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移檢測(cè)指標(biāo)。

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Expressionofserumchemokinesforpatientswithsmallcellcarcinomaanditseffectonpostoperativerecurrenceormetastasis

GUQing-feng

HebeiYixianHospital,Baoding,Hebei074200,China

ObjectiveTo measure the levels of macrophage inflammatory protein-3 (MIP-3α) in patients with small cell lung cancer (SCLC), and to analyze the significance of early postoperative recurrence and metastasis by exploring the influence of different factors on the postoperative recurrence or metastasis.Methods100 SCLC patients in our hospital from September 2013 to February 2015 were selected as the observation group and 20 healthy subjects were selected as the control group. According to their postoperative metastasis or recurrence in the observation group, 56 patients without metastasis or recurrence were as the observation group 1, and 44 patients with metastasis or recurrence were as the observation group 2. The levels of serum MIP-3α were measured in the control group and the observation group before and 30d, 90d and 180d after operation. The intraoperative parameters were recorded and the related factors were analyzed for the effect of recurrence and metastasis.ResultsThe serum MIP-3α of the observation group before operation was (98.65±9.30) pg/m, which was higher than that of the control group (23.74±6.85) pg/mL (P<0.05). The serum levels of MIP-3α of the observation group were lower than those before operation (P<0.05). The serum MIP-3α of the observation group 2 was (69.47±7.82) pg/mL180 days after operation, which was higher than that of the observation group 1 (61.08±8.14) pg/mL (P<0.05). The incidence of higher MIP-3α in the observation group 2 was 65.91% (29/44), which was higher than that in the observation group 1 21.43% (12/56) (P<0.05).ConclusionThe concentration of MIP-3α increases significantly in patients with SCLC, and it decreases after operation and positively correlates with postoperative recurrence or metastasis. It could be used as an index for early recurrence and metastasis.

macrophage inflammatory protein-3; small cell lung cancer; recurrence; influencing factors

2017-04-06]

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.11.037

074200 河北 易縣，易縣醫(yī)院 外一科