朱愛蘭 江芳華 魏建威

福州市女性人乳頭瘤病毒檢測結(jié)果分析

朱愛蘭 江芳華 魏建威

目的調(diào)查福州市女性宮頸感染人乳頭瘤病毒（HPV）現(xiàn)狀以及HPV亞型的分布情況。方法對2 784例就診女性采用核酸分子快速導流雜交基因芯片的方法進行HPV及其亞型檢測。結(jié)果2 784例女性中HPV陽性760例，感染率27．30%；排在前5位的HPV高危亞型依次是 HPV52（23．95%）、HPV16（15．13%）、HPV58（14．08%）、HPV53（11．71%）、HPV68（11．32%）。HPV 單一感染 558 例（73．42%），二重感染143例（18．82%），三重感染43例（5．66%），四重感染11例（1．45%），五重感染4例（0．53%）六重感染0例（0%），七重感染1例（0．13%）。結(jié)論本地區(qū) HPV 感染以 HPV52、HPV16、HPV58亞型為主。HPV分型檢測及流行病學調(diào)查對指導本地區(qū)女性健康檢查、治療有重要意義。

人乳頭瘤病毒；基因芯片；HPV亞型

人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一類雙鏈閉合環(huán)狀無包膜的DNA病毒，能夠特異感染人體的皮膚以及黏膜[1]。HPV易感部位是女性的宮頸。HPV分為高危型、低危型兩大類。HPV高危型包括15種亞型 （HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68），低危型包括6種亞型（HPV6、11、42、43、44、CP8304）。有報道顯示，患宮頸癌的概率在感染單一HPV亞型時增加19.9倍，而在感染多重HPV亞型時增加31.8倍[2]。HPV多重亞型感染是能夠促進宮頸病變發(fā)展的一個重要原因。因此，HPV感染的分型檢測能積極有效指導臨床防治宮頸癌。本研究對我院檢驗科收集的2 784份宮頸細胞刷片標本進行了HPV的21種亞型檢測，旨在通過了解福州市女性就診人群HPV感染及亞型分布情況，對該市女性人群的宮頸癌防治具有重要指導意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象

收集2015年1月1日—2016年12年31日在我院婦科、產(chǎn)科門診就診的患者宮頸刷片標本2 784份，患者年齡21～70歲。所有患者均為初次進行HPV檢測。

1.2 試劑與儀器

博日的LITTLE GENIUS的PCR擴增儀；凱普生物化學有限公司的分子雜交儀和HPV分型檢測試劑盒。

1.3 實驗方法

1.3.1 標本采集 標本采用專用的宮頸刷沿患者宮頸口內(nèi)同一方向旋轉(zhuǎn)3～5圈，將采集了標本的宮頸刷放入裝有細胞保存液的保存管中，旋緊保存管的管蓋，作好標記送實驗室檢測。

1.3.2 DNA分離提取 采用凱普基因組提取試劑盒進行HPV病毒DNA分離提取。

1.3.3 檢測步驟 按照試劑盒說明書將提取好的HPV病毒DNA進行PCR擴增，然后導流雜交及結(jié)果判讀。檢測的21種基因型包括15種高危型（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68）和 6 種低危型（HPV6、11、42、43、44、CP8304）。

1.4 統(tǒng)計學處理

計算HPV不同基因型的感染率。通過SPSS 16.0軟件，應用行×列表資料的χ2檢驗，P＜0.05認為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 2 784例年齡分組的檢測結(jié)果

實驗將篩查女性分為5個年齡段分析，21～30歲、31～40歲、41～50歲、51～60歲、≥61歲。各年齡組HPV感染陽性率分別為37.47%，30.02%，29.64%，33.50%，41.18%。見表1。

通過SPSS 16.0軟件，應用行×列表資料的χ2檢驗，對各年齡組的感染率進行比較，結(jié)果顯示P＜0.05，認為各年齡組感染率差別具有統(tǒng)計學意義。

2.2 2 784例HPV基因分型的檢測結(jié)果

2 784例標本中共篩查出HPV陽性標本760例，陽性率為27.30%。760例高危型中前五位的依次是HPV52（23.95%）、HPV16（15.13%）、HPV58（14.08%）、HPV53（11.71%）、HPV68（11.32%）。HPV基因型單一感染558例（73.42%），二重感染143例（18.82%），三重感染43例（5.66%），四重感染11例（1.45%），五重感染4例（0.53%）六重感染0例（0%），七重感染1例（0.13%），見表2～4。

3 討論

宮頸癌是女性惡性腫瘤中發(fā)病率居第二位的惡性腫瘤，嚴重威脅著女性健康。而宮頸癌發(fā)生的重要原因是高危型HPV的持續(xù)感染，以及多重HPV感染[3]。有研究顯示，在國內(nèi)與宮頸癌的發(fā)病密切相關(guān)的HPV高危型是HPV16、HPV18、HPV45、HPV31、HPV33型，其中HPV16、HPV18兩型最常見[4-5]。因此檢測HPV的感染，及早發(fā)現(xiàn)HPV感染類型，并且進行有針對性的預防接種，能夠在一定程度上減少宮頸癌的發(fā)生。

不同國家和地區(qū)，不同的檢測方法以及不同受檢人群HPV感染率及感染亞型分布均存在差異，因此HPV感染具有較強的地域性[6-7]。因此，對本地區(qū)女性進行HPV檢測和篩查，從而了解本地區(qū)不同年齡階段女性HPV感染的主要類型，并且有針對性的對本地區(qū)各年齡階段女性HPV感染的主要基因型進行疫苗接種，可降低本地區(qū)成年女性宮頸癌的發(fā)病率。

表1 各年齡HPV檢出數(shù)

表2 HPV高危型檢出數(shù)

表3 HPV低危型檢出數(shù)

表4 HPV感染檢測結(jié)果

本研究結(jié)果顯示，2 784例標本經(jīng)HPV基因分型檢測共篩查出HPV陽性760例，HPV感染率為27.30%，與文獻報道的HPV人群感染率為20%～46%一致[8]。本研究共檢測出21種HPV基因型。對各年齡組的感染率進行比較，結(jié)果P＜0.05，認為各年齡組感染率差別具有統(tǒng)計學意義。即認為HPV感染率在各年齡組之間有差異，21～30歲組為第一個感染高峰期，感染率為37.47%。這與番云華[8]報道的感染高峰在31～40歲年齡段不一致。21～30歲組為本研究第一個感染高峰期，原因一可能因為21～30歲組婦女為性活躍人群，導致感染率相對較高；原因二可能因為21～30歲組婦女個人衛(wèi)生習慣缺乏及健康意識淡薄；原因三年紀越輕的女性，由于宮頸還不夠成熟，更容易感染HPV；原因四可能與檢測人群和地域有關(guān)。研究表明[9]，在30歲之前感染HPV，可能由于機體免疫力比較強，一般感染的HPV在短期內(nèi)會自動消失，但是有再次感染的可能。61歲以上組為第二個感染高峰期，感染率為41.18%，原因一可能是此階段婦女機體抵抗力下降，因此更容易感染HPV病毒；原因二是61歲以上組（老年人）很少來醫(yī)院做常規(guī)體檢，表1顯示61歲以上組篩查HPV的人數(shù)僅51人，低于其他年齡組檢查人數(shù)，來醫(yī)院就診時患者已經(jīng)出現(xiàn)比較嚴重的臨床癥狀，這也可能是其感染率高的一個原因。

本研究還顯示，福州地區(qū)人群中感染最多的亞型依次是HPV52（23.95%）、HPV16（15.13%）、HPV58（14.08%）、HPV53（11.71%）、HPV68（11.32%）。在HPV陽性患者中，單一亞型感染者共558例，占陽性患者的73.42%（558/760），2種亞型混合感染者占18.82%（143/760），3種亞型感染者占5.66%（43/760），4種亞型感染者占1.45%（11/760），5種亞型感染者占0.53%（4/760），6種亞型感染者占0%（0/760），7種亞型感染者占0.13%（1/760）。本地區(qū)顯示在感染HPV的女性中，HPV亞型的占前三位的是HPV52（23.95%）、HPV16（15.13%）、HPV58（14.08%）。因此對于本研究HPV亞型高檢出率HPV52、HPV16、HPV58，應該注意及時的預防。

低危型HPV與尖銳濕疣等有關(guān)，一般不會誘發(fā)宮頸癌。HPV低危型檢出率分別為：HPV6（4.74%）、11（3.55%）、42（0.92%）、43（0%）、44（1.71%）、CP8304（9.08%）。本研究低危型檢出率較低。

隨著HPV檢查的普及，在本地區(qū)對成年女性開展大規(guī)模HPV病毒的21種分型檢測的篩查，并且針對患者檢出的HPV感染的主要類型進行疫苗接種，可減少本地區(qū)女性宮頸癌的患病率。同時大規(guī)模HPV病毒分型檢測的篩查，對早期發(fā)現(xiàn)及防治宮頸癌具有重要指導價值。

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Results Analysis of Fuzhou Women Human Papilloma Virus Test

ZHU Ailan JIANG Fanghua WEI Jianwei Department Clinical Laboratory, The Second Affiliated Hospital of Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou Fujian 350001, China

ObjectiveTo investigate the current status of HPV and the distribution of HPV subtypes in women in fuzhou.Methods2 784 cases of clinic women adopt the method of nucleic acids rapid diversion hybrid gene chip detection of HPV and its subtype.ResultsIn 2 784 cases of women, there were 760 cases of HPV positive. infection rate was 27.30%;The top 5 ranking of HPV high-risk subtypes were: HPV52 (23.95%),HPV16 (15.13%), HPV58 (14.08%), HPV53 (11.71%), HPV68 (11.32%).Single HPV infection in 558 cases (73.42%), double infection in 143 cases(18.82%), triple infection in 43 cases (5.66%), four heavy infection in 11 cases (1.45%), and five heavy infection in 4 cases (0.53%), six infection in 0 cases (0%), infection of seven heavy infection, 1 case (0.13%).ConclusionThe region is mainly HPV52 and HPV16, HPV58 subtype infection. HPV typing and epidemiological investigation are helpful to guide women's health screening and treatment in this area.

human papilloma virus; gene chip; HPV subtypes

R181

A

1674-9316（2017）20-0002-04

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．20．002

福建省福州市福建中醫(yī)藥大學附屬第二人民醫(yī)院檢驗科，福建 福州 350001