劉穎芬，辛乃宏，李炳乾，張?jiān)茲桑娯?，蔡祥焜，喬秋爽，鄭立新，*

（1.中鹽工程技術(shù)研究院有限公司，天津300450；2.中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院綜合檢測中心，北京100121）

雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)的研究

劉穎芬1，辛乃宏1，李炳乾1，張?jiān)茲?，鐘貞2，蔡祥焜2，喬秋爽2，鄭立新2，*

（1.中鹽工程技術(shù)研究院有限公司，天津300450；2.中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院綜合檢測中心，北京100121）

評(píng)價(jià)雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。選用雌性ICR小鼠，試驗(yàn)分為4個(gè)免疫組，分別進(jìn)行，每組設(shè)置低、中、高劑量及對(duì)照組。低、中、高劑量分別為0.083、0.167、0.5 g/kg·BW，對(duì)照組喂服植物油，試驗(yàn)周期30 d。結(jié)果：在細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能、單核-巨噬細(xì)胞功能3個(gè)方面有增強(qiáng)免疫力功能。結(jié)果表明：雨生紅球藻蝦青素有增強(qiáng)小鼠免疫力功能。

雨生紅球藻；蝦青素；免疫調(diào)節(jié)

Abstract：To study the effect of astaxanthin on immune regulation in mice.Female ICR mice were selected and divided into 4 groups.Each group was divided into different dose gavage（Low dose=0.083 g/kg·BW，medium dose=0.167 g/kg·BW，high doses=0.5 g/kg·BW，controlgroupwasfedwithvegetableoil），andthetestperiodwas 30d.Conclusionshowedthat：astaxanthinfromHaematococcuspluvialiscouldenhanceimmunefunctionofmice.

Key words：Haematococcus pluvialis；astaxanthin；immune regulation

雨生紅球藻（Haematococcus pluvialis），屬團(tuán)藻目，紅球藻科。當(dāng)前，雨生紅球藻被公認(rèn)為自然界中生產(chǎn)天然蝦青素的最好生物[1]。蝦青素（Astaxanthin）是一種酮基類胡蘿卜素，天然蝦青素比角黃素、β-胡蘿卜素和玉米黃素能更有效地阻止不飽和脂肪酸甲酯的過度氧化[2]，被譽(yù)為“超級(jí)維生素 E”、“超級(jí)抗氧化劑”[3]。有研究表明：蝦青素具有抗氧化[4]、增強(qiáng)免疫[5-7]、保護(hù)視力和中樞神經(jīng)系統(tǒng)[8-9]、預(yù)防心血管疾病[10]、抑制腫瘤[11-13]、拮抗小鼠DNA損傷[14]等功能。隨著蝦青素消費(fèi)市場的不斷擴(kuò)展，已有機(jī)構(gòu)圍繞其預(yù)防與治療疾病潛在機(jī)理開展探索性研究[15-16]。本試驗(yàn)旨在依據(jù)我國《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范（2003版）》的免疫學(xué)相關(guān)指標(biāo)規(guī)定，通過雨生紅球藻蝦青素對(duì)雌性ICR小鼠細(xì)胞免疫、體液免疫、單核-巨噬細(xì)胞以及NK細(xì)胞活性指標(biāo)的影響，探究其增強(qiáng)小鼠免疫力的作用，為今后雨生紅球藻蝦青素的免疫活性研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 試驗(yàn)材料

雨生紅球藻蝦青素（蝦青素含量為1%）：中鹽工程技術(shù)研究院有限公司。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)雌性ICR小鼠，240只，體重18 g～22 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證號(hào)：SCXK（京）2012-0001。

1.1.3 試驗(yàn)試劑

YAC-1細(xì)胞：中國科學(xué)研究院；文齊氏試劑：天津市現(xiàn)代高科技研究院中山研究所；刀豆蛋白A（ConA）：美國sigma公司。

1.2 儀器與設(shè)備

恒溫水浴鍋（HH-2型）：常州中捷實(shí)驗(yàn)儀器制造有限公司；酶標(biāo)儀（Multiskan MK3型）：雷勃公司ThermoLabsystems。

1.3 方法

1.3.1 劑量選擇和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

本實(shí)驗(yàn)分為低、中、高劑量3個(gè)劑量，分別為0.083、0.167、0.5 g/kg·BW，陰性對(duì)照組灌胃植物油，灌胃量均為10 mL/kg·BW。喂服采用灌胃方法，連續(xù)喂服30 d。240只SPF級(jí)ICR小鼠，分別進(jìn)行4組免疫實(shí)驗(yàn)：免疫一組60只（每只體重18 g～22 g），隨機(jī)分為低、中、高劑量及對(duì)照組，每組15只，進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)、半數(shù)溶血值測定和抗體生成細(xì)胞檢測；免疫二組60只（每只體重18 g～22 g），隨機(jī)分為低、中、高劑量及對(duì)照組，每組15只，進(jìn)行碳廓清試驗(yàn)；免疫三組 60 只（每只體重 18 g～22 g），隨機(jī)分為低、中、高劑量及對(duì)照組，每組15只，進(jìn)行巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力試驗(yàn)；免疫四組60只（每只體重18 g～22 g）隨機(jī)分為低、中、高劑量及對(duì)照組，每組15只，進(jìn)行ConA誘導(dǎo)小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)和NK活性測定試驗(yàn)。

1.3.2 細(xì)胞免疫功能測定

1.3.2.1 遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（足跖增厚法，DTH）

取新鮮的脫纖維羊血，生理鹽水洗滌3次，每只鼠腹腔注射2%壓積SRBC 0.2 mL，致敏后4 d，測量左后足跖部厚度，同一部位測量3次，取平均值。然后在測量部位皮下注射20%SRBC 20 μL，24 h后測量左后足跖部厚度，同一部位測量3次，取平均值，以攻擊前后足跖厚度的差值（足跖腫脹度）來表示DTH的程度。

1.3.2.2 ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（MTT法）

無菌取脾，制成單細(xì)胞懸液，用Hank’s液沖洗，3次后計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度致5×106個(gè)/mL。將細(xì)胞懸液分兩孔加入24孔板中，每孔1 mL，其中一孔中加入75 μL ConA液，將孔板置于5%CO2，37℃培養(yǎng)68 h后，每孔輕輕吸取上清液0.7 mL，加入0.7 mL不含小牛血清的RPMI1640 培養(yǎng)液，同時(shí)加入 MTT（5 mg/mL）50 μL/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4 h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入1 mL酸性異丙醇，移入96孔板中，在酶標(biāo)儀上進(jìn)行測定，波長為570 nm。淋巴細(xì)胞的增殖能力用加ConA孔的光密度值減去不加ConA孔的光密度值表示。

1.3.3 體液免疫功能測定

1.3.3.1 抗體生成細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)（Jerme改良玻片法）

取新鮮羊血，每只鼠腹腔注射2%（用生理鹽水配制）壓積SRBC 0.2 mL，致敏后4 d處死小鼠，取全脾，制成細(xì)胞懸液，定容在8 mL Hank’s。將瓊脂糖加熱溶解后，與等量雙倍Hank’s液混合，分裝小試管，每管0.5 mL，再向管內(nèi)加10%（用SA緩沖液配制）壓積SRBC 50 μL，脾細(xì)胞懸液 20 μL，迅速混勻，傾倒至已刷瓊脂糖薄層的玻片上；待瓊脂凝固后，將玻片放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育1.5 h，然后用SA緩沖液稀釋的補(bǔ)體（1∶8）放入玻片架凹槽內(nèi)，繼續(xù)孵育1.5 h，計(jì)數(shù)溶血空斑數(shù)。

1.3.3.2 血清溶血素半數(shù)溶血值（HC50）的測定

取新鮮羊血，每只鼠腹腔注射2%（用生理鹽水配制）壓積SRBC 0.2 mL，致敏后4 d，摘除眼球取血于1.5 mL離心管內(nèi)，放置約1 h后離心，取血清。用SA緩沖液稀釋300倍，取0.1 mL置96孔板內(nèi)，依次加入10%SRBC 0.05 mL，補(bǔ)體0.1 mL（按1∶8用SA緩沖液稀釋），置于37℃恒溫水浴保溫30 min后，冰浴。離心取上清液0.05 mL，加文齊氏試劑0.15 mL，同時(shí)取10%，用SA緩沖液配制）壓積SRBC 0.012 5 mL，加文齊氏試劑至0.2 mL于至另一96孔板，充分混勻。靜置10 min，在540 nm波長下，用酶標(biāo)儀分別測定各孔光密度值。溶血素的量以半數(shù)溶血值（HC50）表示，按以下公式計(jì)算：

樣品HC50=（樣品光密度值/SRBC半數(shù)溶血時(shí)的光密度值）×稀釋倍數(shù)

1.3.4 單核-巨噬細(xì)胞功能測定

1.3.4.1 小鼠碳廓清試驗(yàn)

小鼠尾靜脈注射1∶3用生理鹽水稀釋的印度墨汁，注入后立即計(jì)時(shí)。分別2 min和10 min后，從眼內(nèi)靜脈取血20 μL，加到2 mL 0.1%Na2CO3溶液中，用酶標(biāo)儀在600 nm波長處測定OD值，以Na2CO3溶液作空白對(duì)照。小鼠稱重，取肝臟、脾臟稱重。根據(jù)動(dòng)物體重、肝重和脾重計(jì)算吞噬指數(shù)，按以下公式計(jì)算：

式中：OD1為2 min時(shí)測定的吸光度值；OD2為10 min時(shí)測定的吸光度值；t1為2 min；t2為10 min。

1.3.4.2 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)（半體內(nèi)法）

小鼠腹腔注射5%壓積雞紅細(xì)胞懸液1 mL。2.5 h后，頸椎脫臼處死動(dòng)物，腹腔注射生理鹽水2 mL。取腹腔洗液1 mL，平均分滴于2片載玻片上，放入墊有濕紗布的搪瓷盒內(nèi)，37℃孵箱孵育30 min。孵畢，生理鹽水漂洗，晾干。以1∶1丙酮甲醇溶液固定（1∶1配制，體積比），4%Giemsa-磷酸鹽沖液染色3 min，蒸餾水漂洗晾干。油鏡下計(jì)數(shù)，每張片計(jì)數(shù)100個(gè)，按以下公式計(jì)算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。

吞噬率/%=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/計(jì)數(shù)的巨噬細(xì)胞數(shù)×100

吞噬指數(shù)=被吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)/計(jì)數(shù)的巨噬細(xì)胞數(shù)

1.3.5 NK細(xì)胞活性測定（乳酸脫氫酶LDH測定法）

實(shí)驗(yàn)前24 h將靶細(xì)胞YAC-1進(jìn)行傳代培養(yǎng)，Hank’s洗3次，用含胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度致4×105個(gè)/mL。小鼠頸椎脫臼處死，無菌取脾，制成脾細(xì)胞懸液，Hank’s液沖洗3次，離心，再用2 mL含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基重懸，計(jì)數(shù)調(diào)整細(xì)胞濃度致2×107個(gè)/mL。取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各100 μL，加入U(xiǎn)型96孔培養(yǎng)板中，靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100 μL，靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和1%NP40各100 μL，上述均設(shè)3個(gè)平行孔，37℃，5%CO2培養(yǎng)4 h，96孔培養(yǎng)板離心，每孔吸取上清100 μL置平底96孔培養(yǎng)板，加入LDH基質(zhì)液100 μL，避光反應(yīng)10 min，然后每孔加入1 mol/L的HCL溶液30 μL終止反應(yīng)，在酶標(biāo)儀492 nm處測OD值。NK活性按下式計(jì)算：

NK活性/%=（反應(yīng)孔OD-自然釋放孔OD）/（最大釋放孔OD-自然釋放孔OD）×100

2 結(jié)果與分析

2.1 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響

雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響見表1、表2。

表1 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）的影響（±SD）Table 1 The effect of astaxanthinon delayed type hypersensitivity in mice（±SD）

表1 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）的影響（±SD）Table 1 The effect of astaxanthinon delayed type hypersensitivity in mice（±SD）

劑量組/（g/kg·BW）動(dòng)物數(shù)足趾腫脹/mmP值對(duì)照 15 0.66±0.28 0.083 15 0.70±0.38 0.979 0.167 15 0.72±0.39 0.952 0.500 15 0.87±0.33 0.277

表2 雨生紅球藻蝦青素對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的影響（±SD）Table 2 The effect of astaxanthinon lymphocyte transforming which inducing by the ConA in mice（±SD）

表2 雨生紅球藻蝦青素對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的影響（±SD）Table 2 The effect of astaxanthinon lymphocyte transforming which inducing by the ConA in mice（±SD）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

劑量組/（g/kg·BW）動(dòng)物數(shù)淋巴細(xì)胞增殖能力（OD差值） P值對(duì)照 15 0.078±0.068 0.083 15 0.160±0.087* 0.044 0.167 15 0.180±0.131* 0.037 0.500 15 0.210±0.138** 0.009

由表1可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的雨生紅球藻蝦青素30 d，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，足趾腫脹度在各劑量組與對(duì)照組比較無顯著性差異（P＞0.05）。由表2可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的雨生紅球藻蝦青素30 d，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其淋巴細(xì)胞增殖能力在低、中、高劑量組與對(duì)照組比較有顯著性差異（低、中劑量P＜0.05，高劑量P＜0.01），判定細(xì)胞免疫功能陽性。

2.2 雨生紅球藻蝦青素對(duì)體液免疫的影響

雨生紅球藻蝦青素對(duì)體液免疫的影響見表3、表4。

表3 雨生紅球藻蝦青素對(duì)抗體生成細(xì)胞數(shù)的影響（±SD）Table 3 The effect of astaxanthinon on antibody forming cells（±SD）

表3 雨生紅球藻蝦青素對(duì)抗體生成細(xì)胞數(shù)的影響（±SD）Table 3 The effect of astaxanthinon on antibody forming cells（±SD）

劑量組/（g/kg·BW）動(dòng)物數(shù)溶血空斑數(shù)（×103全脾） P值對(duì)照 15 101.33±30.34 0.083 15 119.93±26.68 0.244 0.167 15 127.80±35.54 0.058 0.500 15 128.27±30.24 0.053

表4 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠半數(shù)溶血值（HC50）的影響（±SD）Table 4 The effect of astaxanthinon HC50in mice（±SD）

表4 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠半數(shù)溶血值（HC50）的影響（±SD）Table 4 The effect of astaxanthinon HC50in mice（±SD）

注：與對(duì)照組比較，**P＜0.01。

劑量組/（g/kg·BW）動(dòng)物數(shù)HC50P值對(duì)照 15 139.29±81.69 0.083 15 213.69±67.18** 0.007 0.167 15 252.02±30.79** 0.000 0.500 15 220.49±76.90** 0.002

由表3可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的雨生紅球藻蝦青素30 d，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其抗體生成細(xì)胞數(shù)在各劑量組與對(duì)照組間比較無顯著性差異（P＞0.05）。由表4可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的雨生紅球藻蝦青素30 d，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其半數(shù)溶血值（HC50）在低、中、高劑量組與對(duì)照組間比較有顯著性差異（P＜0.01），判定體液免疫功能陽性。

2.3 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響

雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響見表5、表6。

由表5可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的雨生紅球藻蝦青素30 d，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其碳廓清功能在各劑量與對(duì)照組間比較無顯著性差異（P＞0.05）。由表6可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的雨生紅球藻蝦青素30 d，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其吞噬率在高劑量組與對(duì)照組間比較有顯著性差異（P＜0.01），吞噬指數(shù)在中、高劑量組與對(duì)照組間比較有顯著性差異（P＜0.01），判定單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能陽性。

表5 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞碳廓清能力的影響（±SD）Table 5 The effect of astaxanthin on carbon clearance ability of mice mononuclear macrophage（±SD）

表5 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞碳廓清能力的影響（±SD）Table 5 The effect of astaxanthin on carbon clearance ability of mice mononuclear macrophage（±SD）

劑量組/（g/kg·BW）動(dòng)物數(shù)吞噬指數(shù)aP值對(duì)照 15 6.33±0.98 0.083 15 7.25±1.43 0.063 0.167 15 7.06±0.81 0.177 0.500 15 6.86±1.06 0.418

表6 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響（±SD）Table 6 The effect of astaxanthin on phagocytosis of chicken red blood cells and macrophages in mice（±SD）

表6 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響（±SD）Table 6 The effect of astaxanthin on phagocytosis of chicken red blood cells and macrophages in mice（±SD）

注：與對(duì)照組比較，**P＜0.01。

劑量組/（g/kg·BW）動(dòng)物數(shù) 吞噬率/% P1值 吞噬指數(shù)a P2值對(duì)照 15 9.47±3.54 0.13±0.06 0.083 15 9.13±2.47 0.883 0.08±0.05 0.219 0.167 15 13.20±7.09 0.157 0.27±0.14** 0.002 0.500 15 21.73±6.12** 0.000 0.37±0.17** 0.000

2.4 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響

雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響見表7。

表7 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響（±SD）Table 7 The effect of astaxanthin on NK cell activity in mice（±SD）

表7 雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響（±SD）Table 7 The effect of astaxanthin on NK cell activity in mice（±SD）

注：與對(duì)照組比較，**P＜0.01。

劑量組/（g/kg·BW）動(dòng)物數(shù)NK細(xì)胞活性/%P值對(duì)照 15 56.70±9.93 0.083 15 52.96±5.99 0.604 0.167 15 67.43±16.58 0.078 0.500 15 71.83±9.24** 0.001

由表7可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的雨生紅球藻蝦青素30 d，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，NK細(xì)胞活性在高劑量組與對(duì)照組間比較有顯著性差異（P＜0.01）。

3 討論

雨生紅球藻（Haematococcus pluvialis）是衛(wèi)生部2010年第17號(hào)公布的新食品原料，其富含的天然蝦青素具有抗氧化和增強(qiáng)免疫力的作用。國外已利用該功能將蝦青素作為藥物預(yù)防氧化性組織損傷和配制保健食品[17]。近年來蝦青素的免疫功能正引起學(xué)者的廣泛關(guān)注，國內(nèi)對(duì)蝦青素的需求量也越來越大，其被廣泛開發(fā)應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品及飼料等的生產(chǎn)[18]。

依據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》[19]（2003年版），在細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能、單核-巨噬細(xì)胞功能、NK細(xì)胞活性4項(xiàng)中任2項(xiàng)呈陽性，則可判定受試樣品具有增強(qiáng)免疫力功能作用；認(rèn)為雨生紅球藻蝦青素有增強(qiáng)免疫力功能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：淋巴細(xì)胞增殖能力在3個(gè)劑量組與對(duì)照組比較均有顯著性差異（低、中劑量 P＜0.05，高劑量 P＜0.01），判定細(xì)胞免疫功能陽性；半數(shù)溶血值（HC50）在3個(gè)劑量組與對(duì)照組間比較均有顯著性差異（P＜0.01），判定體液免疫功能陽性；小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力其吞噬率在高劑量組與對(duì)照組間比較有顯著性差異（P＜0.01），吞噬指數(shù)在中、高劑量組與對(duì)照組間比較有顯著性差異（P＜0.01），判定單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能陽性；NK細(xì)胞活性在高劑量組與對(duì)照組間比較有顯著性差異（P＜0.01）。因此可認(rèn)定雨生紅球藻蝦青素對(duì)小鼠的免疫功能有顯著的提高作用。

目前對(duì)于雨生紅球藻蝦青素的研究大多集中在其增強(qiáng)免疫力和抗氧化的作用上，通過本研究進(jìn)一步證明了雨生紅球藻蝦青素增強(qiáng)免疫力的功效，且研究效果與前人得出一致的結(jié)論，為下一步進(jìn)行增強(qiáng)免疫力的機(jī)理研究提供了參考。

[1]高桂玲,成家楊,馬炯,等.雨生紅球藻和蝦青素的研究[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2014,38(2):297-304

[2]Jorgensen K,Skibsted L.Carotenoid scavenging radicals.Effect of carotenoid structure and oxygen partialpressure on antioxidativeactivity[J].Z LebensmUntersForsch,1993,196:423

[3]Shimidzu N,Goto M,Miki W.Carotenoids as sin-glet oxygen quenchers in marine organisms[J].Fisheries Science,1996,62(1):134

[4]曹秀明,祁小倩,王珊珊,等.蝦青素對(duì)活性氧所致海馬神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用[J].中國海洋藥物雜志,2012,31(6):45-49

[5]Tso M,Lam T T.Method of retarding and amelioration central nervous system and eye damage.5527533[P].1996-06-18

[6]陳立武,曾維銓.蝦青素抗肝腫瘤生長的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2012,9(4):21-23

[7]裴凌鵬.蝦青素體內(nèi)抗腫瘤及其免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].上海中醫(yī)藥雜志,2009,43(6):68-69

[8]Murillo E.Hypercholesterolemic effect of canthaxanthin and astaxanthin in rats[J].ArchivosLatinoamericanos de Nutricion,1992,42(4):409-413

[9]石煥琦,張曉梅.蝦青素在眼科疾病及全身疾病的應(yīng)用進(jìn)展[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2013,22(9):1017-1019

[10]Guerin M,Huntley M E,OlaizolaM.Haematococcusastaxanthin:applications for human health and nutrition[J].Trends Biotechnol,2003,21(5):210-216

[11]Snodderly DM.Evidence for portection against age-related macular degeneration by carotenoids and an-tioxidantvitamins[J].Amer J Clinical Nutr,1995,62(S):1448S

[12]海璇雋,凌雪萍,盧英華,等.蝦青素對(duì)正常小鼠與衰老模型大鼠免疫指標(biāo)的影響[J].廈門大學(xué)學(xué)報(bào),2013,52(5):703-709

[13]項(xiàng)榮,丁棟博,李杰,等,蝦青素抑癌作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2013(25):1011-1015

[14]閆建國,周亞莉,邢雪琨,等.蝦青素對(duì)辛硫磷所致小鼠DNA損傷的拮抗作用[J].環(huán)境與健康雜志,2013,30(2):132-134

[15]宋立人,王錦鴻,阿不都熱依木.卡地爾,等.中華本草:維吾爾藥卷[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2005:145-150

[16]王遠(yuǎn)志.蝦青素對(duì)人癌細(xì)胞體外增殖影響的比較研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2008,15(6):51-53

[17]張樣娥.基于代謝分析的蝦青素發(fā)酵條件優(yōu)化[D].武漢:華中科技大學(xué),2008:8-9

[18]王菊芳,吳振強(qiáng),梁世中,等.蝦青素的生理功能及其應(yīng)用[J].食品與發(fā)酵工業(yè),1999,26(2):66-69

[19]中華人民共和國衛(wèi)生部.保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范[M].北京:中華人民共和國衛(wèi)生部,2003

Study of Astaxanthin from Haematococcus pluvialis on Immune Regulation Function in Mice

LIU Ying-fen1，XIN Nai-hong1，LI Bing-qian1，ZHANG Yun-ze1，ZHONG Zhen2，CAI Xiang-kun2，QIAO Qiu-shuang2，ZHENG Li-xin2，*
（1.Salt Research Institute，CNSIC，Tianjin 300450，China；2.Chinese Academy of Inspection and Quarantine，Beijing 100121，China）

2017-03-03

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.20.038

劉穎芬（1983—），女（漢），工程師，碩士，研究方向：海洋生物及食品營養(yǎng)。

*通信作者：鄭立新（1980—），女，工程師，碩士，研究方向：保健食品功能。