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·實(shí)驗(yàn)研究·

鼻康片對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者外周血T細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子的影響

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目的探討鼻康片對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者外周血T細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子的影響。方法前瞻性收集我院收治的變應(yīng)性鼻炎患者100例，根據(jù)完全隨機(jī)數(shù)字表原則，將患者分為觀察組和對(duì)照組，每組各50例。觀察組給予鼻康片聯(lián)合氯雷他定片治療，對(duì)照組僅給予氯雷他定片治療。觀察兩組患者治療前后外周血Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞、IL-2、IL-4、IFN-γ、過敏性鼻結(jié)膜炎生活質(zhì)量(RQLQ)。結(jié)果兩組患者治療前Th1、Th17、Treg、IL-2和RQLQ等差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與對(duì)照組比較，觀察組患者治療后Th1顯著升高 (14.38±1.89 vs.11.48±1.44%,P=0.000)；Th17顯著降低 (1.34±0.28 vs.1.61±0.29%,P=0.000)；Treg顯著升高(3.48±0.75 vs.2.72±0.52%,P=0.000)；IL-2顯著升高(45.38±9.83 vs.34.38±10.83 pg/ml,P=0.000)；RQLQ評(píng)分顯著降低(17.38±5.84 vs.20.32±6.48,P=0.019)。兩組患者治療前后Th2、IL-4和IFN-γ均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論鼻康片有助于糾正變應(yīng)性鼻炎患者外周血T細(xì)胞亞群失衡，改善患者生存質(zhì)量。

變應(yīng)性鼻炎；T細(xì)胞亞群；細(xì)胞因子；鼻康片

變應(yīng)性鼻炎是一種慢性炎癥性疾病，主要由Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)介導(dǎo)，與免疫球蛋白E水平升高有關(guān)[1，2]。隨著研究的進(jìn)展，目前越來(lái)越多的研究證實(shí)多種免疫細(xì)胞參與了變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病過程。2014年我國(guó)學(xué)者研究顯示變應(yīng)性鼻炎模型小鼠Th1、Th2平衡功能失調(diào)[3]。隨著研究的進(jìn)一步深入，學(xué)者進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)變應(yīng)性鼻炎患者外周血中Th17/Treg細(xì)胞一樣存在功能失調(diào)[4，5]。目前研究已肯定Th1、Th2、Th17和Treg在變應(yīng)性鼻炎患者中的作用。鼻康片具有清熱解毒、疏風(fēng)消腫和利咽通竅等功能，適用于各種急慢性鼻炎、鼻竇炎、變應(yīng)性鼻炎等。2013年我國(guó)學(xué)者黃水仙在變應(yīng)性鼻炎模型小鼠中發(fā)現(xiàn)鼻康片有助于糾正小鼠Th1、Th2平衡失調(diào)，進(jìn)而改善小鼠癥狀[6]。然而，目前關(guān)于鼻康片對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者外周血Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞的影響和臨床療效尚不清楚，因此有必要進(jìn)行進(jìn)一步研究。

資料與方法

1 一般資料

自2014年1月～2016年6月，收集我院收治的變應(yīng)性鼻炎患者，納入標(biāo)準(zhǔn)：①變應(yīng)性鼻炎“根據(jù)2004年中華醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉科分會(huì)蘭州會(huì)議制定的變應(yīng)性鼻炎的診治原則和推薦方案”[7]：①具有鼻癢、噴嚏、鼻分泌物和鼻塞4項(xiàng)癥狀中至少3項(xiàng)；②鼻腔黏膜蒼白、水腫、充血、腫脹等，發(fā)作時(shí)鼻分泌物涂片或結(jié)膜刮片嗜酸性粒細(xì)胞檢查陽(yáng)性或變應(yīng)性皮膚試驗(yàn)陽(yáng)性，變應(yīng)原點(diǎn)刺液由丹麥ALK公司提供，包括粉塵螨、屋塵螨、熱帶螨、貓毛、狗毛、花粉(雞足草、酥油草、梯牧草、毒麥、牧場(chǎng)草、懸鈴樹、白楊、柳樹、榆樹)、德國(guó)小蠊、艾草、豚草、真菌、牛奶、花生、蘋果和蝦。所有患者均接受上述檢查；②年齡在18～65歲之間；③同意參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①系統(tǒng)性紅斑狼瘡等免疫系統(tǒng)性疾??；②肺部疾??；③肝腎等臟器功能不全；④既往心肌梗死等重大心血管疾??；⑤甲狀腺功能不全；⑥免疫抑制；⑦半年內(nèi)曾使用免疫調(diào)節(jié)劑；⑧惡性腫瘤；⑨其他重大疾病。研究期間，根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)，共納入變應(yīng)性鼻炎患者100例，根據(jù)完全隨機(jī)數(shù)字表原則，將患者按1∶1隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組各50例。觀察組男性23例，女性27例，年齡范圍為18～64歲，平均為42.57±9.92歲，身體體重指數(shù)范圍為19.8～32.8kg/m2，平均身體體重指數(shù)為24.84±3.27kg/ m2，病程范圍為3～28月，平均為15.49±4.39月；對(duì)照組男性21例，女性29例，年齡范圍為19～65歲，平均為42.88±10.28歲，身體體重指數(shù)范圍為19.4～ 32.9kg/m2，平均身體體重指數(shù)為25.07±3.48kg/m2，病程范圍為4～31月，平均為15.88±4.41月；兩組患者就診時(shí)性別、年齡、身體體重指數(shù)和病程等差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究中所有患者均知情同意并簽署知情同意書，本研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

2 治療方法

觀察組給予鼻康片（貴州安康制藥有限公司，批號(hào)：Z20027541，0.35g/片，4片/次，3次/日，療程為2周）聯(lián)合氯雷他定(開瑞坦，上海先靈葆雅制藥有限公司，批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字：H10970410，10mg/次，1次/日，總療程為2周)治療。對(duì)照組僅給予氯雷他定治療，方法同觀察組。脫落標(biāo)準(zhǔn)：①研究期間上呼吸道感染；②研究期間失訪、不配合治療、放棄治療或轉(zhuǎn)院；③因其他疾病需要合并用藥。研究期間，無(wú)患者脫落，無(wú)合并用藥。

3 觀察指標(biāo)

包括兩組患者治療前后外周血Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞、IL-2、IL-4、IFN-γ、過敏性鼻結(jié)膜炎生活質(zhì)量(RQLQ)。①外周血Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞檢測(cè)：使用美國(guó)Beckman coulter公司生產(chǎn)的Epics XL型流式細(xì)胞儀檢測(cè)患者靜脈血中Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞，簡(jiǎn)要步驟：清晨空腹條件下，抽取肘靜脈血5ml，3000r/min離心后取上層血清加入乙二胺四乙酸二鈉試管中，抽取100μl血清與相對(duì)應(yīng)的鼠抗人單克隆抗體混勻，避光反應(yīng)30min后即刻進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)。②IL-2、IL-4、IFN-γ檢測(cè)：使用江蘇菲亞生物科技有限公司提供的Elisa試劑盒檢測(cè)患者血清中IL-2、IL-4、IFN-γ；③RQLQ檢測(cè)：根據(jù)RQLQ評(píng)分[8]，由同一醫(yī)師對(duì)患者進(jìn)行評(píng)分。

4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P＜0.05表示差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組患者Th1等計(jì)量資料之間的差異采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；兩組患者性別等計(jì)數(shù)資料之間的差異采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

結(jié)果

1 兩組患者Th1和Th2細(xì)胞水平比較

兩組患者治療前Th1差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與對(duì)照組比較，觀察組患者治療后Th1顯著升高（14.38±1.89 vs 11.48±1.44%，P=0.000)。兩組患者治療前后Th2差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組患者Th1和Th2細(xì)胞水平比較

2 兩組患者Th17和Treg細(xì)胞水平比較

兩組患者治療前Th17和Treg差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與對(duì)照組比較，治療后Th17顯著降低(1.34±0.28 vs.1.61±0.29%，P=0.000)；Treg顯著升高（3.48±0.75 vs.2.72±0.52%，P=0.000)，見表2。

表2 兩組患者Th17和Treg細(xì)胞水平比較

3 兩組患者IL-2、IL-4、IFN-γ水平比較

兩組患者治療前后IL-4和IFN-γ差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。兩組患者治療前IL-2差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與對(duì)照組比較，治療后IL-2顯著升高（45.38±9.83 vs.34.38±10.83pg/ml，P=0.000），見表3。

表3 兩組患者IL-2、IL-4、IFN-γ水平比較

4 兩組患者RQLQ比較

兩組患者治療前RQLQ評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(25.82±8.49 vs.24.26±7.51，P=0.333)。與對(duì)照組比較，治療后RQLQ評(píng)分顯著降低（17.38±5.84 vs.20.32±6.48，P=0.019)，見圖1。

圖1 兩組患者RQLQ比較

討論

變應(yīng)性鼻炎是一種變態(tài)反應(yīng)性疾病，目前已經(jīng)公認(rèn)Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞及其細(xì)胞因子在變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生和發(fā)展中起到關(guān)鍵作用[9]。鼻康片具有清熱解毒、疏風(fēng)消腫和利咽通竅等功能，在動(dòng)物研究中顯示鼻康片可以調(diào)節(jié)變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型小鼠Th1和Th2，促進(jìn)其恢復(fù)正常[6]。然而目前缺乏臨床研究，因此我們?cè)O(shè)計(jì)了本研究觀察鼻康片對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者RQLQ評(píng)分的影響，并分析其對(duì)外周血T細(xì)胞亞群和細(xì)胞因子的影響，為鼻康片對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者臨床療效和具體機(jī)制進(jìn)行探討。本研究顯示鼻康片可以顯著提高患者Th1、Treg和IL-2水平，降低Th17和RQLQ評(píng)分(P＜0.05)。RQLQ是專門針對(duì)變應(yīng)性鼻炎的評(píng)分，其得分越低，表明患者臨床癥狀改善越明顯，生活質(zhì)量越高，有Juniper[8]1997年提出。結(jié)合本研究表明鼻康片有助于改善變應(yīng)性鼻炎患者生存質(zhì)量。目前，研究已證實(shí)變應(yīng)性鼻炎患者Th1/Th2降低，主要原因是Th1水平明顯下降，而Th2水平無(wú)明顯變化，進(jìn)而表現(xiàn)為Th2占優(yōu)勢(shì)[10]。Th2可分泌IL-4等細(xì)胞因子，是變應(yīng)性鼻炎患者中關(guān)鍵炎性因子之一[11，12]。另外，IL-4可以促進(jìn)IgE的增加，而目前研究同樣已證實(shí)IgE增加在變應(yīng)性鼻炎中的作用[13，14]。結(jié)合本研究可表明鼻康片可以提高Th1水平，使Th1和Th2細(xì)胞免疫向Th1漂移，進(jìn)而減少IL-4和IgE的生成，最終改善患者生活質(zhì)量。然而本研究中IL-4水平經(jīng)治療后均明顯下降，但兩組差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具體原因尚不清楚。而Th17分泌的IL-17可以通過激活促炎因子、增強(qiáng)Th2細(xì)胞功能[15]。另外IL-17還可以通過促進(jìn)中性粒細(xì)胞的增殖和增強(qiáng)樹突狀細(xì)胞的功能，從而介導(dǎo)變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生，在兒童變應(yīng)性鼻炎的患者中，可以發(fā)現(xiàn)Th17水平升高明顯[16]。結(jié)合本研究表明鼻康片可以通過降低變應(yīng)性鼻炎患者Th17水平，從而達(dá)到改善患者臨床癥狀的目的。而Treg細(xì)胞是一種負(fù)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，可以通過分泌IL-10等介導(dǎo)機(jī)體的免疫耐受和抑制，IL-10可以抑制IgE等炎性因子的產(chǎn)生，是炎性細(xì)胞和炎性因子的抑制劑[17-19]。結(jié)合本研究表明鼻康片可以通過提高變應(yīng)性鼻炎患者Treg細(xì)胞，進(jìn)而抑制局部變態(tài)反應(yīng)。鼻康片改善變應(yīng)性鼻炎患者免疫功能，降低局部變態(tài)性反應(yīng)的機(jī)制尚不清楚。但2014年沈琴等[20]在干燥性鼻炎患者中同樣表明鼻康片可以較好地改善患者臨床癥狀。

綜上所述，鼻康片有助于糾正變應(yīng)性鼻炎患者外周血T細(xì)胞亞群失衡，改善患者生存質(zhì)量。

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（收稿:2017-05-04 修回：2017-05-24）

The effect of Bikang tablets on T lymphocyte subsets and cytokines in peripheral blood of patients with allergic rhinitis

ZHANG Tian,YU Guodong,XING Yang,REN Shaoda
Department of Otolaryngology,Affiliated Hospital of Guizhou Medical University,Guiyang,Guizhou, 550002,China

ObjectiveTo investigate the effect of Bikang tablets on T lymphocyte subsets and cytokines in peripheral blood of patients with allergic rhinitis.Methods100 cases of patients with allergic rhinitis admitted to our hospital were prospectively collected in this study.According to the principle of complete random number table,the patients were divided into the observation group and the control group with 50 cases in each group.The observation group were given Bikang tablets combined with Loratadin, while the control group only

the treatment of Loratadine.Th1,Th2,Th17 and Treg,IL-2,IL-4,IFN-γ in peripheral bloodand Rhinoconjunctivitis quality of life questionnaire (RQLQ)of both group before and after the treatment were observed.ResultsThere were no significant differences between the two groups in Th1,Th17,Treg,IL-2 and RQLQ before the treatment between the two groups(P＞0.05).However,when compared with the control group,patients in the observation group got a significantly higher level of Th1 after the treatment(14.38±1.89 vs.11.48±1.44%,P=0.000);a lower level of Th17 (1.34±0.28 vs.1.61±0.29%,P=0.000);an elevated level of Treg(3.48±0.75 vs.2.72±0.52%,P=0.000);an increase in IL-2(45.38±9.83 vs.34.38±10.83 pg/ml,P=0.000);and a decrease in RQLQ(17.38±5.84 vs.20.32±6.48,P=0.019).There were no statistical differences between the two groups in Th2,IL-4 and IFN-γ before and after the treatment(P＞0.05).ConclusionBikang tablets is helpful to correct the imbalance of T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with allergic rhinitis,and to improve the quality of life.

allergic rhinitis;T cell subsets;cytokines;Bikang tablets

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2017.03.006

1 貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科（貴陽(yáng)，550002）

2 山東省聊城市人民醫(yī)院普通外科

張?zhí)铮敝魅吾t(yī)師.Email:zhangtian061210@163.com