楊華，余紅，郭以寶

(1、阜寧縣疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科，江蘇阜寧224400；2、阜寧縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇阜寧224400；3、阜寧縣人民醫(yī)院病理科，江蘇阜寧224400)

HR-HPV及其它病原微生物感染對宮頸癌及宮頸上皮細(xì)胞內(nèi)瘤變影響的探討

楊華1，余紅2，郭以寶3

(1、阜寧縣疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科，江蘇阜寧224400；2、阜寧縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇阜寧224400；3、阜寧縣人民醫(yī)院病理科，江蘇阜寧224400)

目的探討高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）及其它病原微生物感染對宮頸癌及宮頸上皮細(xì)胞內(nèi)瘤變（CIN）影響。方法選取經(jīng)病理活檢確診的宮頸癌患者29例，CINⅠ級84例，CINⅡ級63例，CINⅢ級32例，單純宮頸炎48例，對照組42例，進(jìn)行HR-HPV、支原體（CT）、解脲脲原體（Uu）、細(xì)菌性陰道?。˙V）檢測。結(jié)果HR-HPV、CT在宮頸癌組、CIN各級組與炎癥組和對照組相比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05；Uu、BV在宮頸癌組和CIN各組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞0.05，但與炎癥組和對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05。HR-HPV+CT、HR-HPV+Uu、HR-HPV+BV以及HR-HPV合并多重感染在宮頸癌組、CIN各級組間比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。且明顯呈遞減趨勢；而HR-HPV單獨(dú)感染在各組間比較也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05，但呈明顯遞增趨勢。結(jié)論CT、Uu、BV或其它病原微生物能增加宮頸感染HR-HPV的機(jī)會(huì)，從而增加了宮頸癌前病變及宮頸癌的發(fā)生率。

HR-HPV；CT；Uu；BV；宮頸癌；宮頸上皮細(xì)胞內(nèi)瘤變

宮頸癌是女性生殖道發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤，在全球范圍內(nèi)宮頸癌發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位[1]。而CIN則是宮頸癌的癌前病變，目前篩查仍是預(yù)防和控制宮頸癌的主要手段。目前普遍認(rèn)為宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多因素長期共同作用的結(jié)果，大家公認(rèn)的HR-HPV的感染與宮頸癌變及CIN的發(fā)生密切相關(guān)[2]，另外宮頸其它病原微生物的感染也與宮頸癌及CIN的發(fā)生有密切關(guān)系[3]。本實(shí)驗(yàn)主要探討HR-HPV、CT、Uu、BV感染對宮頸癌及CIN的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選擇2015年1月-2016年8月來我院就診的婦科門診和住院患者。經(jīng)病理活檢診斷的宮頸癌患者29例，年齡為36～59歲；CINⅠ級84例，年齡為27～56歲；CINⅡ級63例，年齡為26～62歲；CINⅢ級32例，年齡為30～59歲；單純宮頸炎48例，年齡為24～57歲；另外選擇宮頸光滑且清潔度Ⅰ-Ⅱ級42例，年齡為21～52歲。

1.2 方法經(jīng)病理明確診斷的患者和對照組均由專業(yè)的婦科醫(yī)生先用3支無菌的婦科專用的棉試子取宮頸分泌物，再用HPV檢驗(yàn)專用的毛刷在宮頸口沿順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)5圈采集宮頸上皮細(xì)胞，并及時(shí)送檢。所有對象在取標(biāo)本前均3d未使用任何藥物，24h內(nèi)無性生活，且均在非月經(jīng)期。HR-HPV、CT均采用實(shí)時(shí)熒光檢測，HR-HPV采用多重PCR方法進(jìn)行分型檢測，共檢測15個(gè)高危型別，試劑購自上海之江，儀器為上海宏石的SLAN-96S擴(kuò)增儀；Uu用培養(yǎng)法，試劑購自珠海益民生物工程技術(shù)有限公司；BV采用快速診斷試劑盒，試劑購自山東東甌生物工程有限公司。所有操作均嚴(yán)格按操作說明書操作，每次操作均做陽性和陰性對照。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法全部數(shù)據(jù)分析應(yīng)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HR-HPV在各組中感染情況及感染率HRHPV在宮頸癌組、CINⅢ級組、CINⅡ級組、CINⅠ級組感染與炎癥組和對照組相比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05；在宮頸癌組、CINⅢ級組、CINⅡ級組、CINⅠ級組之間相比較也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，且明顯呈遞減趨勢。而炎癥組與對照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CT在宮頸癌組、CINⅢ級組、CINⅡ級組、CINⅠ級組、炎癥組、對照組各組間均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05，而且也呈明顯遞減趨勢。Uu在宮頸癌組、CINⅢ級組、CINⅡ級組、CINⅠ級組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但與炎癥組和對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05，炎癥組和對照組比較也有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜0.05，炎癥組Uu的感染率最高。BV在各組中比較與Uu相同。見表1。

2.2 各組中HR-HPV合并其它病原微生物感染情況HR-HPV+CT、HR-HPV+Uu、HR-HPV+BV以及HR-HPV合并多重感染在各組間比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05。且明顯呈遞減趨勢；而HR-HPV單獨(dú)感染在宮頸癌組、CIN各級組間比較也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05，但呈明顯遞增趨勢。見表2。

表1 HR-HPV在各組中感染情況及感染率

表2 各組中HR-HPV合并其它病原微生物感染情況

3 討論

據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全球每年有近47萬新發(fā)宮頸癌病例，中國每年新發(fā)宮頸癌例數(shù)約占世界總發(fā)病數(shù)的28%。CIN是宮頸癌變發(fā)展中的前期階段，是宮頸癌演變過程中的典型步驟。宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展受多方面因素的共同影響，流行病學(xué)和生物學(xué)研究證實(shí)[4，5]，宮頸癌和CIN在一定程度上屬于感染性疾病之一，其發(fā)生發(fā)展是多種因素長期協(xié)同作用的結(jié)果。

目前已被證實(shí)HR-HPV感染可以導(dǎo)致宮頸癌及CIN的發(fā)生[6]。HR-HPV的感染大多是一過性的，其在正常婦女的生殖道中也有一定的感染率，本文中的對照組的感染率為17%。只有HR-HPV持續(xù)的長期的感染才有可能導(dǎo)致CIN或?qū)m頸癌。HR-HPV感染引起宮頸癌的可能機(jī)制為：HR-HPV感染宮頸上皮細(xì)胞后，以整合的方式存在于宮頸上皮細(xì)胞中，E2（HPV復(fù)制的早期表達(dá)蛋白）干擾細(xì)胞不能產(chǎn)生病毒調(diào)節(jié)蛋白，從而阻遏另外兩種表達(dá)蛋白（E6、E7）的展轉(zhuǎn)錄功能。E6、E7是參與細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要因子，它們使抑癌蛋白失活，使細(xì)胞凋亡受到干擾而停止，從而使得細(xì)胞無限制增值發(fā)生癌變[7]。本文從數(shù)據(jù)可以看出，宮頸癌患者的HR-HPV的感染率很高達(dá)90%，與王歡華等人的研究數(shù)據(jù)接近[8，9]，而且以與其它病原微生物合并感染為主。子宮頸上皮細(xì)胞內(nèi)瘤變隨著級別的升高，HR-HPV感染率也呈上升趨勢，與呂秀芳等人的觀點(diǎn)相同[10]，與其它病原微生物的合并感染率同樣也呈上升趨勢。

在宮頸癌和CIN的患者中，CT的感染率遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒有HR-HPV高，但它的感染趨勢與HR-HPV幾乎一樣。它是否也與HR-HPV相似，可能導(dǎo)致宮頸癌及CIN的發(fā)生，這方面的研究較少，目前研究較多的是與HR-HPV協(xié)同作用：CT與HR-HPV同時(shí)感染與增殖細(xì)胞核抗原(Ki-67)高表達(dá)相關(guān)聯(lián)，Ki-67被認(rèn)為是由CT和HPV介導(dǎo)的，促宮頸癌發(fā)生的因子[11]。

從數(shù)據(jù)上看，Uu和BV的感染似乎與宮頸癌和CIN的發(fā)生沒有相關(guān)性，而在感染組中的比例卻高于其它組。但在與HR-HPV混合感染時(shí)，宮頸癌和CIN的發(fā)生率高于CT+HR-HPV感染率。說明它們單一感染時(shí)發(fā)生宮頸癌和CIN的機(jī)會(huì)很小，但與HR-HPV混合感染時(shí)發(fā)生宮頸癌和CIN的機(jī)會(huì)大大提高。相關(guān)研究表明，宮頸癌合并HPV感染患者中，CT，Uu感染檢出率較高[12]。

宮頸癌相對于其它的惡性腫瘤，是唯一一種能夠有效預(yù)防、發(fā)現(xiàn)并早期治療的癌癥[13，14]，目前雖不能很清楚CT、Uu、BV或其它病原微生物能直接誘發(fā)宮頸癌，但它們能引起宮頸炎性病變，能大大地提高宮頸感染HR-HPV的機(jī)會(huì)，從而增加了宮頸癌前病變及宮頸癌的發(fā)生率。與史勤彩的相關(guān)報(bào)道相一致[15]。臨床應(yīng)加強(qiáng)對這些病原微生物的檢測，使之得到及時(shí)的治療，這樣可有效地阻斷宮頸癌前病變和宮頸癌的發(fā)生，提高廣大婦女同志的生活質(zhì)量。

[1]Ferlay J，Shin HR，Bray F，et al.Estimates of worldwide burden of cancer in 2008：GLOBOCAN 2008[J].Int J Cancer，2010，127(12)：2893-2917.

[2]梁東霞，張彥娜.宮頸癌與HPV關(guān)系的研究進(jìn)展[J].實(shí)用癌癥雜志，2010，25(2)：202-205.

[3]龍香娥，費(fèi)紅軍.病原微生物感染與宮頸癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J].山東醫(yī)藥，2011，51(47)：115-116.

[4]張艷青.生殖道感染與宮頸癌前病變及子宮癌的相關(guān)性分析[J].中國醫(yī)藥指南，2014，1(29)：175-176.

[5]覃燁，王紅麗，任彤，等.宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變與生殖道感染的相關(guān)性研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24，(4)：811-813.

[6]Shi JF，Canfell K，Lew JB，et al.The burden of cervical cancer in China：synthesis of the evidence[J].Int J Cancer，2012，130(3)：641-652.

[7]Hoor T，Monie A，Gravitt P，et al.Molecular epidemiology of human papillomavirus[J].J Formos Med Assoc，2008，107(3)：198-217.

[8]王歡華，陳麗，陳梅，等.高危型HPV監(jiān)測在宮頸上皮內(nèi)瘤變隨訪中的意義[J].中國婦幼保健，2012，27(6)：820-822.

[9]李劍，曲芃芃.HPV E6/E7 mRNA與HPV DNA檢測在宮頸癌早期篩查中的臨床價(jià)值[J].天津醫(yī)藥，2016，44(4)：466-469.

[10]呂秀芳，宋曉霞，賀慧，等.常見HR-HPV各型在子宮頸組織中致癌能力的評價(jià)[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2016，32(3)：272-277.

[11]耿力，顧芳穎，陸愛麗.子宮頸上皮癌變過程中Ki67表達(dá)和HPV感染的研究[J].中國婦產(chǎn)臨床雜志，2000，1(1)：79-50.

[12]蔡俐瓊，楊守華，王澤華，等.早期宮頸癌和癌前病變中微血管密度和微淋巴管密度的相關(guān)性研究[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2012，41(5)：537-540.

[13]王勛松，鄒學(xué)森，袁水斌.HPV與宮頸癌的關(guān)系及檢測方法的研究進(jìn)展[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2008，26(2)：166-168.

[14]張莉，張昱，許紅英.HPV16/18感染與Survivin、Caspase-3表達(dá)在宮頸癌變過程中的意義[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2008，26(2)：134-136.

[15]史勤彩.宮頸癌與生殖道感染及宮頸癌前病變的相關(guān)性分析[J].臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐，2016，1(6)：50-51.

Study on the Influence of High-risk Human Papilloma Virus and Other Pathogenic Microorganism Infection on Cervical Cancer and Cervical Intraepithelial Neoplasia

YANG Hua1，YU Hong2，GUO Yibao3.1.Funing County Center for Disease Control and Prevention，Jiangsu Funing 224400，China；2.Department of Clinical laboratory Funing people's hospital，Jiangsu Funing 224400，China；3.Department of Pathology Funing people's hospital，Jiangsu Funing 224400，China.

Objective To explore the influence of high-risk human papilloma virus(HR-HPV)and other pathogenic microorganism infection on cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia(CIN).Methods 29 cases with cervical cancer，84 cases with CINI，63 cases with CINII，32 cases with CINIII，48 cases with cervicitis and 42 cases with normal cervix were recruited and diagnosed by the pathological biopsy.HR-HPV，Chlamydia trachomatis(CT)，Ureaplama urealyticum(Uu)，Bacterial vaginosis(BV) were detected in all cases.Results HR-HPV and CT in cervical cancer group and CIN groups were significantly different than those in cervicitis and normal cervix groups with statistical significance(P＜0.05).Uu and BV in cervical cancer group were not statistically significant，compared with those in CIN group(P＞0.05)，but obvious significance was observed between those in cervicitis and normal cervix groups(P＜0.05).Additionally，the cases infected HR-HPV combined with CT(HR-HPV+CT)，Uu(HR-HPV+U-u)，Bv(HR-HPV+BV)and merging ultiple infections were compared in pairs groups with statistical significance(P＜0.05).The infection rate of multiple infections with HR-HPV showed a trend of increase according to cervical cancer and severity of CIN severity. The infection rate of HR-HPV was statistically significant between any two groups(P＜0.05)and also showed the significant increasing trend from CIN to cervical cancer.Conclusion CT，Uu，BV and other pathogenic microorganisms could massively elevate the risk of HR-HPV infection，leading to the increasing incidence of CIN and cervical cancer.

∶HR-HPV；CT；Uu；BV；Cervical cancer；Cervical intraepithelial neoplasia

R446.5，R737.33

A

1674-1129(2017)04-0486-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.010

2016-12-06；

2017-04-28)

楊華，女，1977年生，學(xué)士學(xué)位，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，副主任技師，從事微生物檢驗(yàn)與研究工作。