漆明偉 , 楊 新 , 方 瑞 , 王鎖開 , 胡 敏

(1.農(nóng)業(yè)微生物學國家重點實驗室華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院， 湖北武漢430070；2.湖南省張家界市桑植縣畜牧水產(chǎn)局， 湖南張家界427100)

湖北地區(qū)山羊球蟲感染調查與蟲種形態(tài)學觀察

漆明偉1, 楊 新1, 方 瑞1, 王鎖開2, 胡 敏1

(1.農(nóng)業(yè)微生物學國家重點實驗室華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院， 湖北武漢430070；2.湖南省張家界市桑植縣畜牧水產(chǎn)局， 湖南張家界427100)

從湖北省9個地區(qū)采集山羊糞便668份，采用飽和食鹽水漂浮法和改良麥克馬斯特蟲卵計數(shù)法對采集的樣品進行了球蟲感染率和感染強度的分析，對山羊球蟲種類進行了形態(tài)學鑒定。湖北地區(qū)山羊球蟲總感染率為72.60%，母山羊和公山羊的球蟲感染率分別為64.22%和60.06%。大于1歲、6月齡到1歲和小于6月齡山羊的球蟲感染率分別為54.70%、62.87%和68.36%，不同性別和不同年齡段山羊的球蟲感染率的統(tǒng)計學差異均不顯著。天門、咸寧和恩施3個地區(qū)的平均OPG(每克糞便卵囊數(shù))分別為2 808、1 107和910。本調查共鑒定出8種羊球蟲，即阿氏艾美耳球蟲(E.arloingi)、艾麗艾美耳球蟲(E.alijevi)、克氏艾美耳球蟲(E.christenseni)、羊艾美耳球蟲(E.caprovina)、山羊艾美耳球蟲(E.caprina)、家山羊艾美耳球蟲(E.hirci)、約奇艾美耳球蟲(E.jolchijevi)和雅氏艾美耳球蟲(E.ninakohlyakimovea)。湖北省地區(qū)山羊球蟲當中的優(yōu)勢蟲種是阿氏艾美耳球蟲(E.arloingi)、艾麗艾美耳球蟲(E.alijevi)和克氏艾美耳球蟲(E.christenseni)。

山羊 ； 球蟲 ； 調查 ； 優(yōu)勢蟲種

山羊球蟲病是由寄生在山羊腸上皮細胞中的艾美耳屬球蟲引起的一種原蟲病?；佳蛑饕憩F(xiàn)為消瘦，貧血，腹瀉，生長緩慢等。嚴重感染時，可以導致羔羊死亡[1]。近年來，國內(nèi)已有較多關于山羊球蟲病和山羊球蟲種類鑒定方面的報道[2-8]。為了查清湖北地區(qū)山羊球蟲的感染情況和山羊球蟲種類，并找到該地區(qū)的優(yōu)勢蟲種，進行了本次研究。

1 材料

1.1 糞便樣品 從湖北省9個地區(qū)用直腸取糞法共采集山羊糞便樣品668份，分別裝入干凈PE手套內(nèi)，標記好性別和年齡信息，帶回實驗室，儲存于4 ℃冰箱待檢。

1.2 主要儀器設備 正置顯微鏡、高速臺式冷凍離心機、4 ℃冰箱、恒溫培養(yǎng)箱和改良麥克馬斯特計數(shù)板等。

1.3 主要試劑 飽和食鹽溶液、2.5%重鉻酸鉀溶液等。

2 方法

2.1 糞便中蟲卵的檢查 采用飽和食鹽水漂浮法檢查，計算感染率。

2.2 卵囊計數(shù) 用改良麥克馬斯特計數(shù)法對選取的陽性樣品進行卵囊計數(shù)，計算感染強度。

2.3 卵囊的分離培養(yǎng) 將各個地區(qū)的陽性樣品分別集中，稱重，按照m ∶v=1∶8～10的比例加入蒸餾水，充分研磨。用60目、120目和260目的銅篩過濾3次，濾液靜置過夜，棄掉2/3的上清液，剩余濾液以3 500 r/min離心10 min，棄上清，沉淀加入適量2.5%重鉻酸鉀溶液，置于27 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至孢子化。

2.4 孢子化卵囊的形態(tài)學鑒定 根據(jù)汪明[8]的報道進行。

2.5 數(shù)據(jù)分析 用GraphPad Prism 5軟件的T test分析法對山羊球蟲感染率進行分析。

2.6 優(yōu)勢蟲種的確定 在對孢子化球蟲卵囊進行形態(tài)學鑒定時，每個地區(qū)分別鑒定10～15張蓋玻片1×1cm正方形內(nèi)的孢子化卵囊，計算各種球蟲所占百分比，百分比最高的3種球蟲定為該地區(qū)的優(yōu)勢蟲種。

3 結果

湖北部分地區(qū)山羊球蟲感染率較高，最高達到83.79%，但不同性別和年齡段的山羊球蟲感染率差異均不顯著。天門、咸寧和恩施3個地區(qū)的平均OPG分別為2 808、1 107和910。

表1 湖北省9個地區(qū)不同性別和年齡段的山羊球蟲感染情況

本研究共鑒定出8種球蟲，其主要形態(tài)學特征如下：艾麗艾美耳球蟲(N=143)：小型蟲體，卵囊近似圓形，沒有極帽，平均大小14.63×13.41 μm，形狀指數(shù)為1.09，卵膜孔不明顯，斯氏體明顯。

羊艾美耳球蟲(N=36)：中型蟲體，卵囊呈短橢圓形或亞球形，無極帽，平均大小26.83×19.51 μm，形狀指數(shù)為1.38，卵膜孔比山羊艾美耳球蟲的寬且大，孢子囊比山羊艾美耳球蟲的粗而短。

阿氏艾美耳球蟲(N=178)：中型蟲體，卵囊呈橢圓形且兩側較為平直，有極帽，平均大小29.27×19.51 μm，形狀指數(shù)為1.50。

雅氏艾美耳球蟲(N=61)：小型蟲體，短橢圓形或近似亞球形，無極帽，平均大小19.51×14.63 μm，形狀指數(shù)為1.33，卵膜孔不明顯。

克氏艾美耳球蟲(N=116)：大型蟲體，卵囊為典型的卵圓形，有極帽，平均大小41.46×26.83 μm，形狀指數(shù)為1.55。

山羊艾美耳球蟲(N=70)：中型蟲體，卵囊呈卵圓形或橢圓形，無極帽，平均大小29.27×19.51 μm，形狀指數(shù)為1.50，孢子囊呈長卵圓形或尖卵圓形。

家山羊艾美耳球蟲(N=67)：中型蟲體，卵囊呈較寬的橢圓形或亞球形，有極帽，平均大小24.39×18.29 μm，形狀指數(shù)為1.33。

約奇艾美耳球蟲(N=9)：大型蟲體卵囊呈典型的罐狀，有極帽，平均大小29.27×21.95 μm，形狀指數(shù)為1.33，卵膜孔較寬，斯氏體明顯。

從表2可以看出，阿氏艾美耳球蟲、艾麗艾美耳球蟲和克氏艾美耳球蟲出現(xiàn)的頻率最高，分別占鑒定總數(shù)的26.18%、21.03%和20.00%，在8種球蟲中所占比例最高。據(jù)此可以初步斷定，湖北地區(qū)山羊的優(yōu)勢球蟲種類是阿氏艾美耳球蟲、艾麗艾美耳球蟲和克氏艾美耳球蟲。

表2 湖北省不同地區(qū)山羊艾美耳球蟲中的優(yōu)勢蟲種

4 討論

國內(nèi)有關山羊球蟲感染的報道中，江淮地區(qū)的山羊球蟲感染率低于本研究的結果[6]，而重慶、廣西、河南和福建等地的山羊球蟲感染率高于本研究的結果。同時，這些地區(qū)報道的山羊球蟲種類也多于本研究鑒定的球蟲種類[2-3,5,7]。本研究的結果顯示，湖北地區(qū)山羊的球蟲感染率隨著年齡的增大而呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，這與陶立[3]、張玲[4]和林琳[7]的報道相一致。但衛(wèi)九鍵[5]調查河南、安徽和重慶部分地區(qū)的山羊球蟲感染情況時發(fā)現(xiàn)，在這幾個地區(qū)，球蟲感染率最高的山羊集中在6～12月齡，在小于6月齡和大于12月齡的山羊中，其他年齡段，球蟲感染率則較低。本調查的結果顯示，湖北地區(qū)不同年齡段山羊的球蟲感染率的統(tǒng)計學差異均不顯著，這與陶立[3]和林琳[7]的結果不一致。

本研究調查發(fā)現(xiàn)，湖北各地區(qū)的山羊球蟲感染情況有較大差異。這可能是由于這些地區(qū)的地勢、氣候和降雨量等有明顯差異所致[9-10]。同時，依托其地勢和牧草資源方面的優(yōu)勢，天門等地的山羊養(yǎng)殖業(yè)起步早，發(fā)展快，這也為山羊球蟲病的流行創(chuàng)造了條件。

與人們對禽類、牛和兔等動物的球蟲病的重視程度相比，山羊球蟲病一直被廣大山羊養(yǎng)殖者嚴重忽視[11]。本次的調查結果顯示，湖北地區(qū)山羊的球蟲感染率比較高，部分地區(qū)的感染強度較大。因此，廣大山羊養(yǎng)殖者應該對山羊球蟲病給予足夠的重視，并采取有力措施防治山羊球蟲病，以免導致巨大經(jīng)濟損失。

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Investigation on the infection and morphological observation of Coccidia in Goats of Hubei District

QI Ming-wei1， YANG Xin1， FANG Rui1， WANG Suo-kai2， HU Min1

(1.State key Laboratory of Agricultural Microbiology/College of Veterinary Medicine Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China； 2.Bureau of animal husbandry and fishery of Sangzhi county, Zhangjajie 427100, China)

668 samples were collected from 9 different places ofHubei district, floatation technique using saturated sodium chloride solution and modified McMaster technique were used to analyze the prevalence and intensity of infection, and then the morphological identification of the sporulated oocysts was performed. The overall infection rate was 72.60%. The infection rate among male goats and female goats was 64.22% and 60.06%, respectively. The infection rates between age groups of more than one year old, within 6 months and 1 year old and less than 6 months were 54.70%, 62.87% and 68.36%, respectively. No significant differences were observed either in different sex groups or different age groups. The OPG from Tianmen, Xianning and Enshi was 2808, 1107 and 910, respectively. Eight eimeria species were found in the fecal samples, namelyE.arloingi,E.alijevi,E.christenseni,E.caprovina,E.caprina,E.hirci,E.ninakohlyakimoveaandE.jolchijevi. The predominant eimeria species of goats in Hubei district areE. arloingi,E. alijevi,E. christenseni.

goats; coccidia; investigation; predominant species

HU Min

2017-02-13

國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201303037)

漆明偉(1990-)，男，碩士，研究方向為反芻動物寄生蟲病防控，E-mail：1426939785@qq．com

胡敏，E-mail：mhu@mail.hzau.edu.cn

S827.7

A

0529-6005(2017)07-0007-03