劉 冰,武文平,韓 冰,申方臣,劉建瑞,佟 瑞

(秦皇島市中醫(yī)醫(yī)院，河北 秦皇島066000)

CIK細胞干預非小細胞肺癌的臨床觀察

劉 冰,武文平,韓 冰,申方臣,劉建瑞,佟 瑞*

(秦皇島市中醫(yī)醫(yī)院，河北 秦皇島066000)

目的 觀察CIK細胞治療中晚期非小細胞肺癌的臨床療效。方法 54例患者分成兩組，研究組28例(化療+CIK治療)，對照組26例(單純化療)，觀察兩組患者治療前后的臨床療效、毒性反應、生活質量、生存分析、免疫功能等指標，并進行統(tǒng)計學分析。結果 研究組有效率(RR)和疾病控制率(DCR)分別為35.7%與78.6%，高于對照組30.8%與69.2%，但差異無統(tǒng)計學意(P>0.05)；研究組KPS評分提高率為46.4%(13/28)，明顯高于對照組23.1%(6/26)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；研究組在CIK細胞治療前后及與對照組治療后相比，外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+絕對計數明顯增加，差異有統(tǒng)計學意(P<0.05)；CIK細胞治療期間，患者無明顯毒副反應。結論 CIK細胞治療可改善非小細胞肺癌患者的生活質量，提高患者免疫功能，且無明顯毒副反應。

非小細胞肺癌；CIK細胞；臨床療效

非小細胞肺癌( non-small cell lung cancer，NSCLC) 是我國常見惡性腫瘤之一，占肺癌總數的80%左右，大部分患者確診時已屬晚期，失去手術治療的機會，生存率低，生存期短[1]。放療和化療雖仍是目前治療中晚期非小細胞肺癌的主要手段，療效被臨床所肯定，但其毒副作用較大，對機體的免疫功能有一定的損傷[2]，影響患者的生存質量[3,4]。腫瘤的生物免疫治療抗瘤活性高、毒副作用小，已廣泛應用于臨床。CIK細胞( cytokine-induced killer cells，細胞因子誘導的殺傷細胞)具有在體外可以大量擴增、對腫瘤細胞直接殺傷作用以及能調節(jié)宿主免疫功能等優(yōu)勢，被認為是新一代抗腫瘤過繼免疫治療的首選方案[5]。本研究選取河北省秦皇島市中醫(yī)院腫瘤科中晚期非小細胞肺癌患者28例進行CIK治療，并與26例對照組進行療效對比分析，旨在研究探討CIK治療中晚期非小細胞肺癌的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 研究對象的納入標準

納入標準：所有患者均經組織病理學或細胞學檢查證實確診；預計生存期≥3個月，KPS≥60分；全身狀況良好，無嚴重的重要臟器損害，無不可控制的感染；無嚴重過敏體質及哺乳期和妊娠期患者；所有患者均為自愿接受CIK細胞治療，并簽署治療知情同意書。

1.2 一般資料及分組

收集2014年3月至2015年12月我院腫瘤科符合納入標準的中晚期非小細胞肺癌患者共54例，其中男30例，女24例，年齡39-76歲，中位年齡52.5歲。其中臨床分期IIB期4例，IIIA期11例，IIIB期15例，IV期24例。組織學分型腺癌18例，鱗癌23例，混合癌8例，大細胞癌5例。所有患者均對本次研究知情同意，并根據是否接受CIK細胞治療分為研究組28例與對照組26例。兩組患者一般資料比較具有均衡性，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.3 CIK細胞制備及治療方法

研究組患者在化療結束72 h后，于清晨安靜狀態(tài)下肝素鈉抗凝管抽取外周血50-100 ml，送至我院生物治療中心實驗室進行單個核細胞(PBMC)分離、純化后，加入細胞培養(yǎng)液(所用CIK培養(yǎng)試劑均購自北京五康生物公司)并置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內培養(yǎng)擴增。至14天左右，當CIK細胞總數達到5×109個以上，檢測細胞內毒素、細菌、真菌、支原體等指標均為陰性且臺盼藍染色計算細胞活率大于95%后，收集CIK細胞凍存?zhèn)溆?。研究組患者在化療結束72 h后開始CIK細胞回輸治療。無菌操作下，將復蘇的CIK細胞用生理鹽水洗滌2-3次，加入20%人血白蛋白5 ml，再重懸于200 ml生理鹽水?；颊呙咳蛰斠淮危看渭毎麛盗?×109左右，連續(xù)輸5天為一個療程，每次細胞發(fā)出后確保2 h內回輸完畢。對照組僅接受常規(guī)化療方案。

1.4 觀察指標

1.4.1 療效評價 所有患者均在接受2個療程以上治療后進行療效評價。按照實體瘤療效評價標準(RECIST)分為完全緩解(complete remission，CR)、部分緩解(partial remission，PR)、穩(wěn)定( stable disease，SD)和進展(progressive disease，PD)。有效率(response rate，RR)=(CR+PR)/總例數×100%，疾病控制率(disease control rate，DCR)=(CR+PR+SD)/總例數×100%。

1.4.2 安全性評價 對比觀察CIK細胞回輸過程中及回輸后患者有無不良反應，如發(fā)熱等。并在一個療程完成后分別檢測2組患者的血常規(guī)、肝腎功能等指標。

1.4.3 生活質量評價 應用卡氏評分(KPS)對比觀察研究組(CIK治療組)與單純化療組患者生活質量改善情況。

1.4.4 生存分析 對比分析研究組與對照組的無進展生存期(PFS)。PFS指從納入研究開始到疾病出現(xiàn)進展或死亡時間。

1.4.5 免疫指標 應用流式細胞儀檢測2組患者治療前后的T細胞亞群改變，并對比分析。

1.5 統(tǒng)計學分析

2 結果

2.1 臨床療效評價

兩組患者在治療2個療程后進行臨床療效評價，研究組有效率(RR)和疾病控制率(DCR)分別為35.7%與78.6%；對照組為30.8%與69.2%。經統(tǒng)計學分析，兩組有效率與疾病控制率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，詳細比較見表1。

表1 研究組與對照組臨床療效對比

2.2 安全性分析

兩組患者的主要毒性反應為骨髓抑制及胃腸道反應，表現(xiàn)為中性粒細胞減低、食欲下降、乏力、惡心、嘔吐等，研究組與對照組無明顯毒性反應差異。CIK細胞治療組的患者常見不良反應主要是發(fā)熱，研究組28例患者在治療期間出現(xiàn)發(fā)熱3例(10.7%)，但體溫均<38℃，經過對癥處理后恢復正常。兩組患者均在一個療程結束后抽取靜脈血檢測血常規(guī)、肝腎功能，無明顯異常。

2.3 生活質量評價

研究組KPS評分提高10分及以上者13例，穩(wěn)定10例，下降5例，提高率為46.4%(13/28)，明顯高于對照組23.1%(6/26)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。同時對比治療后兩組患者的精神狀態(tài)、睡眠質量、乏力、疼痛等指標改善情況，研究組改善情況均顯著高于對照組，結果表明CIK細胞治療可以提高和改善患者的生活質量。

2.4 生存分析

研究組和對照組患者中位PFS分別為6.8個月和6.2個月。研究組的PFS略長于對照組，但兩組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)

2.5 免疫指標變化

流失細胞儀檢測結果顯示，開始CIK細胞治療前兩組間T淋巴細胞亞群水平無顯著差異(P>0.05)。研究期間，對照組進行化療后T淋巴細胞亞群水平無明顯變化(P>0.05)。研究組在CIK細胞治療前后及與對照組治療后相比，T細胞亞群有明顯變化，表現(xiàn)為外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+絕對計數明顯增加，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。CD8+絕對計數無明顯變化(P>0.05)，見表2。

表2 兩組患者CIK治療前后T細胞亞群變化

注：對照組僅單純化療，研究組為化療+CIK治療；與對照組相比，*P<0.05

3 討論

非小細胞肺癌(NSCLC)以高發(fā)病率、高死亡率、低生存期[6]為特點，對患者的身體、心理和社會均造成嚴重打擊。因NSCLC發(fā)現(xiàn)確診已多為中晚期，故目前針對NSCLC患者的治療主要是放化療，但毒副反應嚴重。生物治療是繼手術、放療、化療后的第四種治療模式[7]，近年來越來越受到人們的重視。CIK細胞目前被認為是新一代的抗腫瘤過繼細胞免疫治療的首選方案[8]。CIK細胞是將人體外周血單個核細胞(PBMC)在體外用IL-2、抗CD3單抗、IFN-γ等多種細胞因子誘導培養(yǎng)增殖后獲得的異質性細胞群，同時具有T淋巴細胞抗瘤生物活性和NK細胞的非MHC限制性殺瘤特點[9,10]。CIK細胞體外培養(yǎng)增殖速度快、殺瘤活性高、具有提高機體抗腫瘤免疫應答、降低腫瘤負荷、防止腫瘤復發(fā)等功能。其作用機制主要是CIK細胞被抗原或細胞因子刺激后，胞內絲裂原活化蛋白激酶/細胞外調節(jié)蛋白激酶(MAPK/ERK)通路和信號傳導及轉錄激活因子(STAT)通路被激活后可分泌IL-2、IFN-γ 、TNF-α等多種細胞因子，可直接抑制腫瘤細胞增殖，并可通過調節(jié)Tregs細胞等增強機體免疫功能間接殺傷腫瘤細胞[11-13]；其次CIK細胞表面的NCR3等受體可與腫瘤細胞表面相應抗原分子結合，CIK細胞活化后胞外分泌毒性顆粒，穿透、裂解腫瘤細胞，從而發(fā)揮殺傷作用[14-16]。

本研究從兩組(研究組與對照組)的近期臨床療效、安全性、生活質量及免疫指標變化等方面進行對比分析，結果顯示研究組(化療+CIK治療)的臨床有效率及疾病控制率均高于對照組；研究組的KPS評分顯著高于對照組(P<0.05)，表明CIK治療可明顯改善患者的生活質量；研究組在CIK細胞治療后T細胞亞群有明顯改變，外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+絕對計數明顯增加，表明CIK治療可提高改善患者的免疫功能，且治療期間并無明顯毒副作用。這與國內外相關研究報道結果相符[17,18]。

基于本次研究，對于中晚期的NSCLC患者，可采用化療聯(lián)合CIK治療方案，改善患者的生活質量，具有良好的臨床應用前景。

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河北省秦皇島市科技局科研計劃項目(201401A121)

1007-4287(2017)07-1155-03

R734.2

A

2016-06-26)

*通訊作者