施靜靜 陳濤 劉毅 金泉偉 王婧蕾 徐杰

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DEC1、LXRβ在動脈硬化性腦梗死患者血清中的水平及其臨床意義

施靜靜 陳濤 劉毅 金泉偉 王婧蕾 徐杰

目的 探討分化型胚胎軟骨發(fā)育基因1(differentiation type embryonic cartilage development genes 1, DEC1)、肝X受體β(Liver X receptor β, LXRβ)在動脈硬化性腦梗死患者血清中的水平及其臨床意義。方法 選擇2013年3月～2015年12月本院的60例急性腦梗死患者為研究對象，選擇2013年3月～2015年12月健康人群60例為對照組，檢測入組對象血清DEC1、LXRβ水平。結果 腦梗死組血清DEC1水平高于對照組(P<0.01)，腦梗死組血清LXRβ水平低于對照組(P<0.01)。隨著腦梗死患者病情的加重，血清DEC1水平呈不斷升高趨勢(P<0.05)；隨著患者功能障礙程度的加重，血清DEC1水平不斷升高(P<0.05)。隨著急性腦梗死患者腦梗死病情的加重，血清LXRβ水平不斷降低(P<0.05)；隨著急性腦梗死患者功能障礙程度的加重，血清LXRβ水平不斷降低(P<0.05)。急性腦梗死患者血清DEC1水平與LXRβ水平呈負相關(r=-0.331，P=0.009)。結論 DEC1、LXRβ可能參與了急性腦梗死的發(fā)病及病情進展，且DEC1可能通過負向調控LXRβ進而在急性腦梗死發(fā)病、病情加重、功能障礙程度加重過程中發(fā)揮作用。

腦梗死 分化型胚胎軟骨發(fā)育基因1 肝X受體β

腦梗死為常見的腦缺血性病變，其發(fā)病機理主要是腦部缺血缺氧引起的腦組織壞死或軟化[1]。腦梗死患者可出現言語障礙、智力障礙、功能障礙等常見臨床癥狀，患者往往伴發(fā)糖尿病、高血壓病等基礎性疾病[2]。在中國腦梗死作為最常見的心腦血管疾病之一，其發(fā)病率逐年攀升，尤其高發(fā)于45～70歲人群[3-4]。分化型胚胎軟骨發(fā)育基因1(differentiation type embryonic cartilage development genes 1,DEC1)在人體很多重要組織中廣泛表達，在神經元發(fā)育生長、脂質代謝、細胞增殖分化及免疫反應過程中亦發(fā)揮一定作用[5]。肝X受體β(Liver X receptor β,LXRβ)的一個亞型在脂質代謝紊亂、神經炎癥中起重要作用。有研究顯示，DEC1對LXRβ具有一定的調控作用[6]。有關DEC1、LXRβ與急性腦梗死關系的研究較少，本研究旨在探討DEC1、LXRβ與動脈硬化性腦梗死發(fā)病及病情進展的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年3月～2015年12月被本院神經內科收治的60例急性腦梗死患者為研究對象(腦梗死組)，符合急性腦梗死的診斷標準[7]；腦梗死病例的選擇排除有代謝性疾病、嚴重肝腎疾病、帕金森病、免疫性疾病、消耗性疾病的患者；患者年齡51～80歲，平均年齡(62.12±5.62)歲，男36例，女24例，病程2～7年，平均病程(3.15±0.87)年，體質量指數(23.16±2.35)kg/m2。選擇2013年3月～2015年12月在本院門診體檢健康人群60例為對照組，年齡51～80歲，平均年齡(63.24±5.57)歲，男33例，女27例，體質量指數(24.32±3.24)kg/m2。腦梗死組患者按照美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分[7]，NIHSS評分>5分，20例，NIHSS評分≤5分，40例。Barthel指數(BI)評分總分為100分，0～45分為重度功能障礙，46～70分為中度功能障礙，71～95分為輕度功能障礙，96～100分為完全可自理。將60例腦梗死患者按BI評分[7]分為三類：輕度功能障礙15例，中度功能障礙24例，重度功能障礙21例。腦梗死組和對照組年齡、性別、體質量指數等資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究經入組對象簽署知情同意書，并獲本院倫理委員會審批通過。

1.2 標本采集 于清晨空腹時抽取入組對象外周血標本4 mL，3 500 r/min離心后凍存于-80 ℃，備用。

1.3 檢測DEC1、LXRβ水平 采用雙抗體夾心ELISA法檢測DEC1、LXRβ水平，試劑盒購于武漢博士德生物技術有限公司。雙抗體夾心ELISA法步驟如下：(1)包被。用0.05 M pH9，碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10 μg/mL，在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1 mL，4 ℃過夜；次日棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3 min；(2)加樣。加一定稀釋的待檢樣品0.1 mL于上述已包被之反應孔中，置37 ℃孵育1 h，然后洗滌；(3)加酶標抗體。于各反應孔中加入新鮮稀釋的酶標抗體0.1 mL，37 ℃孵育0.5～1 h，洗滌；(4)加底物液顯色。于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1 mL，37 ℃ 10～30 min；(5)終止反應。于各反應孔中加入2 M硫酸0.05 mL；(6)結果判定。在ELISA檢測儀上于450 nm處以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

1.4 統(tǒng)計學處理 使用SPSS 18.0，計量資料行t檢驗或單因素方差分析，相關性分析采用Pearson檢驗；P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 腦梗死組和對照組血清DEC1、LXRβ水平比較

腦梗死組血清DEC1水平高于對照組(P<0.01)，腦梗死組血清LXRβ水平低于對照組(P<0.01)(表1)。

表1 腦梗死組和對照組血清DEC1、LXRβ水平比較)

注：與對照組比較，*P<0.01

2.2 急性腦梗死患者血清DEC1、LXRβ水平與各臨床指標的關系

隨著急性腦梗死患者病情的加重，血清DEC1水平呈不斷升高趨勢(P<0.05)；隨著患者功能障礙程度的加重，血清DEC1水平不斷升高(P<0.05)。隨著急性腦梗死患者病情的加重，血清LXRβ水平不斷降低(P<0.05)；隨著急性腦梗死患者功能障礙程度的加重，血清LXRβ水平不斷降低(P<0.05)。血清DEC1、LXRβ水平與急性腦梗死患者年齡、性別、不同循環(huán)梗死區(qū)部位未表現出明顯的相關性(P>0.05)(表2)。

2.3 相關性分析

急性腦梗死患者血清DEC1水平與LXRβ水平呈負相關(r=-0.331，P=0.009)。

3 討 論

腦梗死為神經內科最常見的心腦血管疾病[8]，患者體內存在多種生化指標的變化[9-10]。脂質代謝紊亂在腦梗死發(fā)病過程中起重要作用。Raimund 等[8]的研究發(fā)現，腦梗死患者存在嚴重的脂質代謝紊亂，而和脂質代謝相關的生化指標較正常人群出現明顯的波動和改變。DEC1亦稱為分化型胚胎軟骨發(fā)育基因，為BHLH家族成員，廣泛分布于心臟、呼吸道、消化道等人體常見組織[11]，其在神經元發(fā)育生長、脂質代謝、細胞增殖分化及免疫反應過程中均發(fā)揮一定作用[12]。本研究探討了DEC1與腦梗死的關系。本研究結果顯示，腦梗死患者血清DEC1水平明顯高于健康人群，表明DEC1可能參與了腦梗死的發(fā)病。此外，本研究亦發(fā)現隨著腦梗死病情和功能障礙程度的不斷加重，血清DEC1水平呈不斷升高趨勢，這表明DEC1可能參與了腦梗死的病情進展。本研究還發(fā)現，DEC1與腦梗死患者的年齡及性別無明顯相關性。表明DEC1在腦梗死病情發(fā)展及功能障礙中扮演重要角色。本研究結果與Seino等的研究結果[11]一致。Seino等[11]在研究中亦發(fā)現DEC1的表達與腦梗死病情及功能障礙有關。

表2 急性腦梗死患者血清DEC1、LXRβ水平與臨床指標的關系

LXRβ為LXRs亞型之一，位于19號染色體，與LXRα具有同源性[13]。LXRβ在神經發(fā)育、脂質代謝、炎癥反應中均發(fā)揮作用[14-15]。本研究亦對LXRβ在腦梗死發(fā)病及進展中的作用進行了探討。本研究發(fā)現，LXRβ可能亦與腦梗死的發(fā)病有關，腦梗死患者血清中LXRβ水平明顯低于健康人群。隨著腦梗死患者病情的加重、功能障礙程度的加重，LXRβ亦呈不斷降低。同樣，LXRβ與腦梗死患者的年齡及性別亦無明顯相關性。

本研究亦發(fā)現，腦梗死患者血清DEC1、LXRβ水平呈負相關，這表明DEC1、LXRβ在腦梗死的發(fā)病及病情進展中可能共同起作用。相關研究亦證實，DEC1對LXRβ具有調節(jié)作用[14]。LXRβ的缺失或表達減少可加重功能障礙的程度，加重腦梗死病情。因此，本研究推測，DEC1通過負向調控LXRβ進而在急性腦梗死發(fā)病及病情加重、功能障礙程度加重過程中發(fā)揮作用，但具體信號通路仍然有待下一步深入探討。

本研究的不足在于研究規(guī)模較小，且未對DEC1如何調控LXRβ進而調控急性腦梗死病情進展的具體信號通路進行深入探討。因此，本研究打算對此進行進一步深入探討。

綜上所述，本研究顯示，DEC1、LXRβ可能參與了急性腦梗死的發(fā)病及病情進展，且DEC1可能通過負向調控LXRβ進而在急性腦梗死發(fā)病及病情加重、功能障礙程度加重過程中發(fā)揮作用。

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(2016-05-16收稿 2016-06-13修回)

The expression of serum DEC1 and LXRβ in atherosclerotic cerebral infarction and its clinical significance

ShiJingjing,ChenTao,LiuYi,etal.

DepartmentofNeurology,AnkangCentralHospital,Ankang725000

Objective To detect the expression of serum differentiation type embryonic cartilage development genes 1(DEC1)and liver X receptor β(LXRβ) in atherosclerotic cerebral infarction, and explore its clinical significance.Methods 60 patients with acute cerebral infarction from March 2011 to December 2015 in our hospital were selected as the research object,and 60 healthy people from March 2013 to December 2015 were selected as control group.The concentration of serum DEC1 and LXRβ in all cases was detected.Results The serum level of DEC1 in acute stroke group was significantly higher than in the control group (P<0.01).The serum level of LXRβ in the acute stroke group was significantly lower than in the control group (P<0.01).With the deterioration of patients’ condition,the serum level of DEC1 was rising (P<0.05).When the patients’ dysfunction was aggravating,the serum level of DEC1 was rising (P<0.05).With the deterioration of patients’ condition,the serum level of LXRβ trended to decrease (P<0.05).As the patients’ dysfunction was aggravating,the serum level of LXRβ trended to decrease (P<0.05).The serum level of DEC1in patients with acute stroke had a negative correlation with that of LXRβ(r=-0.331，P=0.009).Conclusion DEC1 and LXRβ are involved in the onset of acute cerebral infarction and its progression.DEC1 plays a role in the pathogenesis of acute cerebral infarction,its deteriorating process and the aggravation of patients’ dysfunction through negatively regulating LXRβ.

Stroke Differentiation type embryonic cartilage development genes 1 Liver X receptor β

725000 陜西省安康市中心醫(yī)院神經內科[施靜靜 陳濤(通信作者) 劉毅 金泉偉 王婧蕾 徐杰]

R743.1

A

1007-0478(2017)01-0024-04

10.3969/j.issn.1007-0478.2017.01.006