張 燕，岳玉林，張之烽， 王 賢，沈 瀚

·臨床經(jīng)驗·

兒童幽門螺桿菌感染檢測方法臨床適用性分析

張 燕1，岳玉林2，張之烽1， 王 賢1，沈 瀚1

目的 分析13C-尿素呼氣試驗(13C-UBT)、血清幽門螺桿菌-IgG抗體、糞便幽門螺桿菌抗原和幽門螺桿菌培養(yǎng)試驗方法檢測兒童幽門螺桿菌感染的適用性。 方法 92例懷疑幽門螺桿菌感染患兒進行幽門螺桿菌培養(yǎng)，其中41例(44.57%)培養(yǎng)出幽門螺桿菌。將41例幽門螺桿菌感染患兒和30例健康體檢兒童同時行13C-UBT、血清幽門螺桿菌-IgG抗體檢測、糞便幽門螺桿菌抗原檢測。 結(jié)果 糞便幽門螺桿菌抗原檢測敏感性為46.34%，13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測敏感性較高，分別為92.68%和90.24%。13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測敏感性均高于糞便幽門螺桿菌抗原檢測(P<0.05) ；13C-UBT和糞便幽門螺桿菌抗原檢測特異性和陽性預(yù)測值均高于血清幽門螺桿菌-IgG檢測 (P<0.05)；糞便幽門螺桿菌抗原檢測的陰性預(yù)測值明顯小于其他方法(P<0.05)。結(jié)論13C-UBT檢測的敏感性及特異性均較高，更能反映幽門螺桿菌感染的變化狀況，可作為臨床診斷幽門螺桿菌感染的首選方法。血清幽門螺桿菌-IgG特異性較低，不宜單獨作為幽門螺桿菌感染的診斷依據(jù)，可用于幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查。

幽門螺桿菌；兒童；檢測方法

兒童為幽門螺桿菌的易感人群，幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)情況與成人有所不同，感染后組織病理學(xué)改變、臨床表現(xiàn)、機體的免疫機制和細菌致病及治療等均與成人有所不同，對兒童幽門螺桿菌感染檢測方法的研究具有重要的意義。提高檢驗人員和臨床醫(yī)師對兒童幽門螺桿菌感染試驗診斷的充分正確認識，從而探索出合理、經(jīng)濟的檢測方法非常有必要。本文通過分析13C-尿素呼氣試驗(13C-UBT)、血清幽門螺桿菌-IgG抗體、糞便幽門螺桿菌抗原和幽門螺桿菌培養(yǎng)試驗方法檢測兒童幽門螺桿菌感染的適用性，研究尋求快速簡便、敏感性及特異性高的兒童幽門螺桿菌感染檢測方法，為臨床兒童幽門螺桿菌感染提供可靠的檢測結(jié)果，促進幽門螺桿菌感染的早期診斷及治療[1-3]。

1 資料與方法

1.1 對象 2014年5月至2015年12月在南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院消化科住院的最近1個月內(nèi)未使用過抗生素、質(zhì)子泵抑制劑、H2受體阻滯劑的92例懷疑幽門螺桿菌感染患兒，其中男48例，女44例，年齡3～14歲。92例均進行幽門螺桿菌培養(yǎng)，其中41例(44.57%)培養(yǎng)出幽門螺桿菌。2015年5-12月在南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院健康體檢兒童30例作為陰性對照，其中男16例，女14例，年齡3～14歲，無血液系統(tǒng)疾病、腫瘤、結(jié)核、消化不良、營養(yǎng)不良、消化系統(tǒng)疾病及自身免疫性疾病。將41例幽門螺桿菌感染患兒和30例健康體檢兒童同時行13C-UBT、血清幽門螺桿菌-IgG抗體檢測和糞便幽門螺桿菌抗原檢測。

1.2 試驗方法

1.2.1 細菌培養(yǎng) 常規(guī)插入胃鏡，用活檢鉗在患兒胃竇部距幽門2～3 cm處及胃體中部前壁各取胃黏膜組織1塊，將其研磨后直接種于含選擇性抗生素添加劑和10%馬血的哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基，37℃微氧環(huán)境(含5%的O2，15%的CO2，85%的N2)，培養(yǎng)4～5 d后觀察分離效果，鏡下查找到幽門螺桿菌為幽門螺桿菌培養(yǎng)陽性，為幽門螺桿菌感染診斷金標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.213C-UBT 患者清晨空腹時在相應(yīng)的儀器上進行13CO2檢測，試劑盒由北京勃然制藥有限公司提供，儀器為北京華亙安邦科技有限公司提供的HG-IRIS200型紅外光譜儀。

1.2.3 血清幽門螺桿菌-IgG抗體檢測(膠體金法) 間接固相免疫層析法，測試時血清中抗體從樣本孔向上遷移與固定在膜上的幽門螺桿菌抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，接著復(fù)合物與金標(biāo)記的抗人IgG結(jié)合而被檢出。質(zhì)控線含有蛋白A，與人IgG結(jié)合，做為質(zhì)控指標(biāo)。試劑由MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司提供，嚴(yán)格按照說明書要求操作。

1.2.4 幽門螺桿菌抗原檢測 患兒糞便2～4 g經(jīng)稀釋后采用雙抗體夾心法檢測幽門螺桿菌抗原,操作步驟嚴(yán)格按說明書進行,試劑盒由北京協(xié)和藥業(yè)有限公司提供。

1.3 觀察指標(biāo) 比較幽門螺桿菌感染3種檢測方法的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值。計算公式：靈敏性=a/(a+b)；特異性=d/(c+d)；陽性預(yù)測值=a/(a+c)；陰性預(yù)測值= d /(b+d)。a為呈陽性結(jié)果的幽門螺桿菌感染數(shù),b為呈陰性結(jié)果的幽門螺桿菌感染數(shù),c為呈陽性結(jié)果的非幽門螺桿菌感染數(shù),d為呈陰性結(jié)果的非幽門螺桿菌感染數(shù)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件包進行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兒童幽門螺桿菌感染檢測結(jié)果 41例幽門螺桿菌感染患兒的13C-UBT陽性檢出率[92.68%(38/41)]最高，糞便幽門螺桿菌陽性抗原檢出率[46.34%(19/41)]最低。見表1。

表1 41例幽門螺桿菌感染患兒和30例健康體檢兒童幽門螺桿菌感染3種檢測方法結(jié)果

檢測方法幽門螺桿菌感染患兒(n=41)健康體檢兒童(n=30)+-+-13C?UBT383228血清幽門螺桿菌?IgG檢測374624糞便幽門螺桿菌抗原檢測1922129

2.2 靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值比較13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測敏感性較高，分別為92.68%和90.24%，兩者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；13C-UBT和血清幽門螺桿菌-IgG檢測敏感性均高于糞便幽門螺桿菌抗原檢測(P<0.05) ；13C-UBT和糞便幽門螺桿菌抗原檢測特異性和陽性預(yù)測值均高于血清幽門螺桿菌-IgG檢測，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而3C-UBT與糞便幽門螺桿菌抗原檢測特異性和陽性預(yù)測值差異不具統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；糞便幽門螺桿菌抗原檢測的陰性預(yù)測值明顯小于其他方法(P<0.05)。見表2。

表2 幽門螺桿菌感染3種檢測方法的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值比較(%)

檢測方法敏感性特異性陽性預(yù)測值陰性預(yù)測值13C?UBT92 68?93 33#95 00#90 32?血清幽門螺桿菌?IgG檢測90 24?80 0086 0485 71?糞便幽門螺桿菌抗原檢測46 3496 67#95 00#56 86與糞便幽門螺桿菌抗原檢測比較，?P<0 05；與血清幽門螺桿菌?IgG檢測，#P<0 05

3 討 論

流行病學(xué)研究顯示在發(fā)達國家30%～50%的成年人有幽門螺桿菌感染,而發(fā)展中國家的幽門螺桿菌感染率則高達80%[1]。眾多研究發(fā)現(xiàn)幽門螺桿菌與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴樣組織(MALT)淋巴瘤等疾病的關(guān)系密切。1994年幽門螺桿菌被世界衛(wèi)生組織確定為第Ⅰ類致癌因子。我國屬于發(fā)展中國家，幽門螺桿菌感染率為40%～90%，平均為54.76%[1-3]。成人幽門螺桿菌感染往往始于兒童期，如不給予根除治療，可持續(xù)終身。因此，兒童幽門螺桿菌感染狀況的研究對控制和消除人群幽門螺桿菌感染有不可忽視的意義。國內(nèi)外幽門螺桿菌感染檢測方法很多，各有優(yōu)缺點。細菌培養(yǎng)是金標(biāo)準(zhǔn)，幽門螺桿菌為微需氧苛養(yǎng)菌，培養(yǎng)條件較為嚴(yán)格，一般醫(yī)院缺少相應(yīng)的技術(shù)和設(shè)備，污染菌及污染物會抑制幽門螺桿菌的生長[4-5]，陽性率較低(本文僅為44.57%)，同時取標(biāo)本檢查時具有創(chuàng)傷性、易受胃黏膜病變及取樣誤差的影響。13C是一種穩(wěn)定性較高的同位素，無放射性污染，13C-UBT檢測的敏感性和特異性均較高，更能反映幽門螺桿菌感染的變化狀況，具有準(zhǔn)確、快速、可反復(fù)檢測、無痛苦等優(yōu)點，價格低廉、不易受胃黏膜病變及取樣誤差的影響，在兒童幽門螺桿菌感染檢查及療效判斷評價中發(fā)揮重要作用[6-7]。

幽門螺桿菌-IgG抗體一般都不能自行消失，血清抗幽門螺桿菌-IgG在幽門螺桿菌根治后6～8個月內(nèi)仍可持續(xù)存在，故有較高的假陽性率。敏感性與13C-UBT比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。幽門螺桿菌-IgG陽性不能肯定患者是否有活動性感染，陰性不能排除是否為初期感染[8-10]。所以幽門螺桿菌-IgG不能作為幽門螺桿菌感染的診斷指標(biāo)和療效監(jiān)測，但其具有高的敏感性可用于流行病學(xué)調(diào)查，還有不愿意或不能配合呼氣試驗的兒童可以選擇此方法。糞便幽門螺桿菌抗原檢測敏感性不是很理想，可能和取材的因素有關(guān)，用于檢測的糞便僅為2～4 g，這可能是陽性率偏低的因素之一。

總之13C-UBT檢測的敏感性及特異性均較高，更能反映幽門螺桿菌感染的變化狀況，更適合臨床，是臨床診斷幽門螺桿菌的首選方法。幽門螺桿菌-IgG敏感性、特異性雖然也較高，不宜單獨作為幽門螺桿菌感染的診斷依據(jù)，更不宜用于根除幽門螺桿菌藥物的療效監(jiān)測，可用于幽門螺桿菌感染兒童的流行病學(xué)調(diào)查[11-13]。

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(本文編輯：葉華珍)

1.210008 南京,南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院檢驗科：2. 210008南京,南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院檢驗科

沈 瀚，E-mail：shenhan10366@sina.com

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