駱華容　沈彥會(huì)　蔡靜如　許建新　莫惠芝　殷金巖　彭金平　王佳

摘要：為探索苔蘚植物無性繁殖技術(shù)，研究了不同的植物激素（GA₃、2，4-D.NAA.6-BA）組合及不同栽培方式對(duì)薄壁卷柏蘚、絹蘚、大灰蘚和粗枝青蘚生長的影響。結(jié)果表明：（1）BA濃度超過0.1mg/L不利于苔蘚的生長，噴施GA₃、2，4-D.NAA激素組合可顯著促進(jìn)苔蘚增重量，提高其覆蓋度，但對(duì)苔蘚新生枝條無顯著促進(jìn)作用；（2）栽培方式可采用吸水纖維布直接培養(yǎng)或加泥炭基質(zhì)層培養(yǎng)，且2種栽培條件下苔蘚的覆蓋度和新枝長度并無明顯差異，增重量以有土栽培為佳；（3）正交試驗(yàn)分析得出4種苔蘚的最優(yōu)噴施激素組合為100mg/L GA₃+25mg/L 2，4-D+（5～50）mg/LNAA。

關(guān)鍵詞：苔蘚；栽培；生長激素；正交試驗(yàn)

苔鮮植物是地球上除被子植物之外最大的綠色植物群，種類繁多，分布廣泛，據(jù)Harris（2008）統(tǒng)計(jì)，世界上大約有21219種，中國約有3500種，但是由于大多數(shù)苔蘚植物個(gè)體微小，目前被開發(fā)利用的種類有限。苔鮮植物的應(yīng)用涉及到環(huán)境指示、園藝造景、立體綠化、工業(yè)、醫(yī)藥以及食品領(lǐng)域等，市場前景廣闊。

苔蘚植物的繁殖方式包括無性繁殖和有性繁殖。有性繁殖對(duì)環(huán)境條件的要求比較高，特別是生殖過程需要借助水的媒介來完成，而無性繁殖要求相對(duì)簡單，一些品種在人工培養(yǎng)條件下，有較快的繁殖速度。無性生殖對(duì)于種群適應(yīng)各類環(huán)境變化的貢獻(xiàn)遠(yuǎn)超過有性生殖，苔蘚學(xué)家發(fā)現(xiàn)自然狀態(tài)下苔蘚植物大部分的芽都是由無性生殖產(chǎn)生，而無性繁殖體總是由配子體分化發(fā)生。培養(yǎng)液對(duì)苔蘚的應(yīng)用一般集中在組織培養(yǎng)技術(shù)方面，如高永超等（2003研究發(fā)現(xiàn)）GA₃和2，4-D誘導(dǎo)牛角蘚產(chǎn)生愈傷組織的效果較好；李艷紅等（2004）研究發(fā)現(xiàn)2，4-D和6-BA可以促進(jìn)立碗蘚產(chǎn)生愈傷組織。在生長調(diào)節(jié)劑方面，丁治國等（1999）通過研究不同葉面肥對(duì)濕地匐燈蘚萌發(fā)及生長的影響發(fā)現(xiàn)ABT生根粉可以明顯促進(jìn)蘚枝假根萌發(fā)，赤霉素可以明顯促進(jìn)濕地匐燈蘚生枝；到目前為止國內(nèi)苔蘚種植研究更多集中在區(qū)系、經(jīng)典分類及生理生化、細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)、生態(tài)學(xué)領(lǐng)域。本文主要研究種植物激素對(duì)4種苔蘚植物無性繁殖及其生長速度的影響，篩選出促進(jìn)苔蘚植物生長繁殖的激素組合配方，達(dá)到縮短繁殖周期的目的，為其廣泛應(yīng)用提供技術(shù)保障。結(jié)合有土和無土的生長環(huán)境，分別考察單因素和兩者協(xié)同作用對(duì)苔蘚生長繁殖的影響。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1苔蘚植物。薄壁卷柏蘚（Racopilum cuspidi-gerum）、絹蘚（Entodon cladorrhizans）、大灰蘚（Hypnumplumaeforme）、粗枝青蘚（Brachythecium helmintboclad-tim）均采自江浙一帶。

1.1.2植物激素。赤霉素（GA₃）；2，4-二氯苯氧基乙酸（2，4-D）；萘乙酸（NAA）；6芐基嘌呤（6-BA）。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用4因素3水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，pH值調(diào)至為5.8，每個(gè)處理重復(fù)3次。設(shè)置有土、無土栽培2種方式，有土栽培：進(jìn)口泥炭；無土栽培：吸水纖維布料。

1.3具體實(shí)施與測量方法

栽植時(shí)，用剪刀剪掉苔蘚底部發(fā)黑或發(fā)黃的老枝。將苔蘚剪成0.8～1cm的小段，清水洗去各處理植物體表面雜物泥土，用紗布吸水紙吸干植物體表水分，通過天平分別稱取卷柏蘚2g、粗枝青蘚2g、大灰蘚2g、絹蘚1.6g作為初始鮮重。撒播于已鋪設(shè)好基質(zhì)的育苗盤內(nèi)，用噴水壺淋水澆透。每種品種設(shè)定3個(gè)重復(fù)。栽植苔蘚后每隔7d噴施1次各濃度的生長調(diào)節(jié)劑，每個(gè)處理每次30mL，共噴施8次，60d后，測量各處理的覆蓋度、新枝長度和鮮重。測量方法：用攝子取出配子枝并放到濕潤的濾紙上，用游標(biāo)卡尺量取配子枝的長度（每個(gè)處理6個(gè)），記錄數(shù)據(jù)，求平均值；蓋度測量為了準(zhǔn)確，采取3次面積估測后，求平均值的方法。增重=處理后鮮重-初始鮮重。

各處理在陰棚自然環(huán)境下進(jìn)行，試驗(yàn)周期5～7月，溫度24～35%，濕度60%～95%。

1.4數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2013軟件對(duì)原始數(shù)據(jù)整理并制圖及極差分析；采用SAS 9.0軟件進(jìn)行多重比較。

2結(jié)果與分析

2.1植物激素組合對(duì)4種苔蘚覆蓋度的影響

不同的苔蘚種類覆蓋度在不同激素處理下生長差異較大（見圖1），其中T₅處理最為顯著，為75%～93%，且4種苔蘚覆蓋度的大小排序?yàn)榇蠡姨\>粗枝青蘚>絹蘚>薄壁卷柏蘚；除絹蘚以外，其余3種苔蘚在T₁和T₉處理?xiàng)l件下，覆蓋度均高于對(duì)照，可見T1、B、Tq激素組合對(duì)4種苔蘚的生長具有促進(jìn)作用；而T₃、T₄處理?xiàng)l件下覆蓋度均顯著低于對(duì)照，僅為35%～50%，說明T₃、T₄激素組合對(duì)4種苔蘚的生長有抑制作用。

2.2植物激素組合對(duì)4種苔蘚新枝長度的影響

不同激素組合對(duì)4種苔蘚新枝生長的情況如表2、表3所示，在無土栽培條件下，4種苔蘚新枝長度在T₉處理下達(dá)到最大，均高于對(duì)照，但與對(duì)照相比無顯著差異；在有土栽培條件下，不同激素組合對(duì)4種苔蘚新枝生長中T₁處理最優(yōu)，除了粗枝青蘚以外，其余3種苔蘚新枝長度均高于對(duì)照，但與對(duì)照相比無顯著差異；無論是有無栽培還是無土栽培條件下（見表2、表3），T₃處理下4種苔蘚新枝長度最差，且顯著低于對(duì)照；可見不同激素組合對(duì)4種苔蘚新枝生長均無顯著促進(jìn)作用。

2.3植物激素組合對(duì)4種苔蘚增重的影響endprint

栽培60d后各苔蘚的增重情況如表4-7所示，在無土栽培條件下，卷柏蘚、絹蘚、粗枝青蘚和大灰蘚在T₅處理的增重量達(dá)到最大，其增重量分別為對(duì)照的2倍、1.4倍、1.5倍和3倍，且均顯著高于對(duì)照，在T₉處理下的增重量次之，除了絹蘚的增重量與對(duì)照無明顯差異以外，其余各苔蘚的增重量均顯著高于對(duì)照。在有土栽培條件下，各激素組合中以T₅最優(yōu)，4種苔蘚的增重量與對(duì)照相比具有顯著差異，其大小排序?yàn)榇蠡姨\>粗枝青蘚>薄壁卷柏蘚>絹蘚。而無論是有土還是無土栽培條件下，T₃和T₄處理對(duì)4種苔蘚的增重均無促進(jìn)作用，且顯著低于對(duì)照。在同種激素組合條件下，4種苔蘚通過有土栽培增重量均高于無土栽培的增重量，可見基質(zhì)作為載體有利于苔蘚植物附著于表面及更好地吸收水分。

從極差值來看，各激素對(duì)4種苔蘚增重影響中6-BA極差值最大，NAA最小，說明6-BA對(duì)4種苔蘚的增重量影響最大，NAA的影響最小，GA₃和2，4-D對(duì)苔蘚生長的影響因物種不同而有所差異。通過各因素單一濃度增重量均值計(jì)算可得各因素的最優(yōu)水平，從而獲得4種苔蘚生長繁殖的最優(yōu)激素組合，其中薄壁卷柏蘚與大灰蘚的最優(yōu)激素組合為A₂B₂C₁D₁，絹蘚與粗枝青蘚的最優(yōu)激素組合為A₂B₂C₂D₁。

3結(jié)論與討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，≥0.1mg/L的6-BA對(duì)薄壁卷柏蘚、絹蘚、大灰蘚、粗枝青蘚4種苔蘚的生長繁殖均具有抑制作用；有土栽培對(duì)促進(jìn)苔蘚生長繁殖的影響均高于無土栽培，可見基質(zhì)作為載體有利于苔蘚植物附著于表面及更好地吸收水分；不同植物激素組合對(duì)4種苔蘚新枝生長均無顯著促進(jìn)作用。薄壁卷柏蘚與大灰蘚的最優(yōu)激素組合為100mg/L GA₃、25mg/L 2，4-D、5mg/L NAA，絹蘚與粗枝青蘚的最優(yōu)激素組合為100mg/L GA₃、25mg/L 2，4-D、50mg/L NAA。

6-BA對(duì)苔蘚生長具有抑制作用，噴施GA₃、2，4-D、NAA激素組合可顯著促進(jìn)苔蘚增重量，提高其覆蓋度，但對(duì)苔蘚新生枝條無顯著促進(jìn)作用。Cvetic etal.（2007）報(bào)道生長素和細(xì)胞分裂素抑制了疣小金發(fā)蘚（Pogonatum urnigerum）原絲體的發(fā)育，生長素IAA能促進(jìn)芽的生長，而生長素6-BA則抑制配子體生長，添加低濃度6-BA對(duì)東亞砂蘚原絲體的輻射生長均沒有顯著變化，而分別添加了0.1mg/L、0.2mg/L、0.5 mg/L的6-BA均對(duì)東亞砂蘚原絲體的生長都有抑制作用。周金川等（2009）研究表明大灰蘚對(duì)2，4-D、GA₃、KT、NAA4種植物生長調(diào)節(jié)劑都表現(xiàn)抑制增重效應(yīng)。本研究表明，100mg/L GA₃、25mg/L 2，4-D、5mg/L NAA 3種植物激素組合對(duì)大灰蘚增重具有顯著促進(jìn)，可能與組合濃度配比有關(guān)，也可能跟試驗(yàn)所處環(huán)境因子以及大灰蘚生活習(xí)性廣泛等特性相關(guān)。

有土栽培和無土栽培2種栽培條件下，苔蘚的覆蓋度和新枝長度并無明顯差異，增重量以有土栽培為佳，可見基質(zhì)作為載體有利于苔蘚植物附著于表面及更好地吸收水分。因基質(zhì)自身的礦質(zhì)元素對(duì)苔蘚植物的生長并不重要，而基質(zhì)的通氣性、保水性以及pH值等理化因素對(duì)苔蘚的生長起到影響作用。苔蘚植物無維管組織，屬非維管植物，沒有真正的根，直接控制水分的能力較差。環(huán)境干旱它們會(huì)迅速失水而代謝緩慢甚至停止，而當(dāng)環(huán)境變濕潤時(shí)，它們又可以迅速吸收水分、恢復(fù)正常的代謝活動(dòng)；苔蘚植物的營養(yǎng)來源主要來自大氣，非植物生長基質(zhì)所提供，由于苔蘚植物有效地獲取養(yǎng)分的能力以及其養(yǎng)分來源的多樣性，通常養(yǎng)分并不是苔蘚植物生長的限制因子。

本試驗(yàn)提供了4種苔蘚植物生長繁殖的植物激素最優(yōu)水平組合，為今后的苔蘚植物無性繁殖提供了理論依據(jù)，為促進(jìn)苔蘚植物人工栽培繁殖提供參考依據(jù)。

（收稿：2017-01-18）endprint