安瓊，李倩，李寧，黃瑞萍*

(1.河西學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合研究所，甘肅 張掖 734000；2.蘭州大學(xué)藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000)

鎖陽藥材最新研究進展

安瓊1，李倩1，李寧2，黃瑞萍1*

(1.河西學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合研究所，甘肅 張掖 734000；2.蘭州大學(xué)藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000)

查閱近5年來鎖陽藥材研究的文獻資料，從化學(xué)成分及藥理活性、化學(xué)成分的提取工藝、原藥材及復(fù)方制劑的質(zhì)量控制三個方面來介紹其最新研究進展，為鎖陽藥材的開發(fā)利用、質(zhì)量控制提供理論依據(jù)，為含鎖陽藥材復(fù)方制劑的配伍研究奠定基礎(chǔ)，提高臨安全床用藥。并對其研究進行分析、討論，對鎖陽藥材新的研究提出展望。

鎖陽；化學(xué)成分；藥理活性；提取工藝；質(zhì)量控制

鎖陽，俗稱“不老藥”,又名繡鐵棒、地毛球、羊鎖不拉、烏蘭-告亞(蒙名)、耶爾買他格(維名)、沙漠人參,為鎖陽科植物鎖陽CynomoriumsongaricumRupr.的干燥肉質(zhì)莖。鎖陽性溫,味甘,歸肝,腎,大腸經(jīng)。有補腎陽、益精血、潤腸通便的功效,用于腎陽不足,精血虧虛,腰膝酸軟,陽痿滑精,腸燥便秘等[1]。鎖陽廣泛分布于甘肅、新疆、內(nèi)蒙、寧夏、青海等地,其中質(zhì)量最好的是甘肅河西地區(qū)瓜州的鎖陽,有“瓜州鎖陽甲天下”的美譽,特別是鎖陽城“三九鎖陽”，更是鎖陽中的極品,被當?shù)厝艘暈檎鋵?人稱“三九鎖陽賽人參”[2-3]。本文就近5年來對鎖陽化學(xué)成分及藥理活性、化學(xué)成分及提取工藝、原藥材及其復(fù)方制劑質(zhì)量控制的研究做了概述,為鎖陽藥材的開發(fā)利用、質(zhì)量控制提供新的理論指導(dǎo)。

1 鎖陽最新化學(xué)成分及藥理活性研究

中藥材的化學(xué)成分，決定了它的藥理活性。分析中藥材的化學(xué)成分，是開發(fā)利用它的首要任務(wù)。在已報道鎖陽藥材化學(xué)成分的基礎(chǔ)上，高乃群等，用HPLC-MS分析了鎖陽藥材中所含的原花青素，檢測出2種單體、6種二聚體、5種三聚體，并對其做了定性分析[4]。隨后，熱西旦木·托乎提，從產(chǎn)地新疆的鎖陽藥材中分離得到6個單體化合物，借助1H-NMR,13C-NMR等波譜法和化學(xué)方法鑒定這6個單體分別為:β-谷甾醇，胡蘿卜苷，熊果酸，兒茶素，南酸棗苷，沒食子酸，為新疆鎖陽藥材化學(xué)成分的研究提供了重要的文獻資料如表1所示；在用乙酸乙酯提取鎖陽藥材的化學(xué)成分時，研究發(fā)現(xiàn)提取物對體外結(jié)腸腺癌(Caco-2)細胞生長有抑制作用[5]，該研究對結(jié)腸癌疾病的診斷、預(yù)防、治療做了鋪墊。

表1 鎖陽藥材最新化學(xué)成分

Meng 等，對鎖陽藥材的化學(xué)成分及藥理活性做了系統(tǒng)研究，報告指出其含有鞣酸、甾體、三萜、酸性多糖、黃酮、木質(zhì)素、生物堿等化學(xué)成分；藥理活性主要有抗氧化、抗缺氧、抗糖尿病、抗癲癇、HIV-PR和HCV-PR抑制劑、α-葡萄糖苷酶抑制劑、增強機體耐受、提高免疫、抗疲勞、神經(jīng)保護、防衰老及癡呆等作用[6]。后來楊帆等人，在鎖陽多糖對人非小細胞肺癌 A549 細胞端粒的影響研究中，發(fā)現(xiàn)鎖陽多糖可抑制 TER TmRNA 表達，從而縮短了端粒長度，對癌細胞的增殖起到抑制作用，對癌細胞的凋亡起到抑制作用[7]。

對鎖陽藥材化學(xué)成分的分析及藥理作用的研究，使人們更加深刻的了解鎖陽藥材，為以后其活性組分的開發(fā)利用奠定研究基礎(chǔ)，也為鎖陽藥材與其它藥材的配伍提供理論指導(dǎo)，提高臨床安全用藥。

2 鎖陽化學(xué)成分提取工藝的研究

目前，對中藥材活性組分的提取是當今研究的一個熱點。有效提取中藥的活性組分，是中藥生產(chǎn)的重要操作。工藝方法、工藝流程等的選擇對中藥質(zhì)量及臨床效果有重要影響。中藥材活性提取工藝方法有傳統(tǒng)的浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流法及連續(xù)回流法、水蒸氣蒸餾法等，也有后續(xù)研究提出的超臨界流體萃取法、超聲提取法、中藥絮凝分離技術(shù)、加壓逆流提取、大孔樹脂吸附法、膜分離技術(shù)、酶法等[8]。此外，提取時間、提取溶劑、溫度等因素也會影響到活性組分的提取，因此在選擇提取工藝和提取流程應(yīng)較全面的考慮方法的選擇和諸因素的影響。

對鎖陽藥材提取工藝報道較多的是，鎖陽藥材中黃酮類、多糖類化合物的提取。欒娜等采用超臨界CO2萃取法，優(yōu)化了提取工藝的條件，獲得到了操作簡便、速度快、萃取率高，建立了適合鎖陽藥材中黃酮類化合物的提取工藝。羅光宏等，采用正交實驗優(yōu)化水提醇沉法的提取工藝，并用硫酸苯酚比色法對甘肅河西沙區(qū)不同地區(qū)鎖陽中所含的多糖進行含量測定。結(jié)果顯示甘肅河西沙區(qū)不同地區(qū)鎖陽多糖含量差別顯著，鎖陽多糖可作為控制鎖陽質(zhì)量的一項指標性成分[9]。二是王學(xué)喜等[10]、Yang等[11]、劉曉風等[12]，采用的超聲法提取的鎖陽多糖的工藝研究。

含有黃酮類、多糖類的中藥材占絕大多數(shù)，對它們提取工藝的研究，可作為其它含黃酮類、多糖類中藥材提取工藝提供理論參考。

3 鎖陽藥材及復(fù)方制劑質(zhì)量標準的研究

中藥材的質(zhì)量是制約中藥材走向國際化市場的瓶頸，目前就中藥材質(zhì)量控制的研究方法主要分兩大類：一是以中藥材所含的指標性化學(xué)成分來控制中藥材的質(zhì)量；測定指標性化學(xué)成分的質(zhì)量控制方法，需要對照品。對中藥材來說化學(xué)成分復(fù)雜，對照品分離困難，價格較貴，難獲得。在已研究的基礎(chǔ)上，近年來研究者提出了用一測多評的方法來控制中藥材的質(zhì)量。一測多評的方法是指以樣品中的某一組分為內(nèi)標，建立與其它組分之間的相對校正因子，通過相對校正因子來計算其它組分的含量[13]。該方法操作簡單、節(jié)省成本。二是符合中藥特點的整體、模糊的指紋圖譜方法。指紋圖譜方法包括化學(xué)指紋圖譜法和DNA指紋圖譜法。雖然指紋圖譜控制中藥材質(zhì)量的方法已得到國內(nèi)、國際研究者的認可，但是對于研究確定的共有峰并不能定量。此外，將化學(xué)成分與模糊指紋圖譜的方法結(jié)合報道的較少，一測多評是將二者結(jié)合起來全面控制中藥材質(zhì)量的一個契合點。

中藥材鎖陽及復(fù)方制劑的質(zhì)量控制方法，主要指標性化學(xué)成分的測定及從指紋圖譜兩方面來研究，如下所述。

3.1 HPLC法測定鎖陽藥材指標性成分的研究

在近年來已報道的研究中，測定鎖陽藥材指標性的成分主要有兒茶素、沒食子酸、原兒茶酸和熊果酸。建立測定它們含量的方法多數(shù)基于HPLC法。在不同的報道中，方法的建立一方面是改變色譜柱的類型、長短、孔徑的大小，另一方面是對于流動相的研究。建立的測定鎖陽藥材指標性成分的HPLC法，方法簡便、結(jié)果準確、重現(xiàn)性好，可為控制該藥材質(zhì)量提供參考依據(jù)，從而為鎖陽藥材的質(zhì)量評價和資源的合理開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)見表2。

表2 HPLC法測定鎖陽藥材指標性成分的研究

3.2 鎖陽藥材指紋圖譜的研究

3.2.1 鎖陽藥材的化學(xué)指紋圖譜

劉曄瑋等，建立鎖陽藥材不同產(chǎn)區(qū)HPLC 指紋圖譜，測定了兒茶素、根皮苷兩種有效成分的含量[20]。

3.2.2 鎖陽DNA條形碼研究

自2010年，Chen等首次提出把ITS2作為藥用植物鑒定的標準DNA條形碼[21]。李偉等人，通過單因素試驗、正交試驗的方法，對影響鎖陽ISSR-PCR反應(yīng)體系的7種主要因素在3個水平上進行優(yōu)化篩選，得到鎖陽ISSR-PCR反應(yīng)的最佳體系，這一體系的建立為今后利用ISSR-PCR標記技術(shù)研究鎖陽的遺傳多樣性奠定了基礎(chǔ)。同時對ISSR-PCR體系中添加劑的作用進行了探討，為添加劑在其他植物ISSR-PCR反應(yīng)中的應(yīng)用提供借鑒[22]。侯典云等人，用DNA條形碼技術(shù)準確快速鑒定中藥材鎖陽及混淆品，為鎖陽藥材的快速準確鑒定提供技術(shù)保障，也為臨床用藥安全奠定基礎(chǔ)；ITS2條形碼可有效鑒定中藥材鎖陽及其混偽品，且具有較好的穩(wěn)定性和準確性[23]。李振華等人，研究荒漠肉蓯蓉、鎖陽和黃花列當之間的DNA分子鑒別方法，通過位點特異PCR的方法實現(xiàn)了荒漠肉蓯蓉與混偽品鎖陽、黃花列當?shù)目焖?、準確鑒別[24]。

3.2.3 色譜法控制鎖陽復(fù)方制劑質(zhì)量的研究

賈丹兵等，用薄層色譜法對參姜鎖陽益氣片的成分做了鑒別，用HPLC法測定了其指標成分的含量。該藥物的質(zhì)量控制方法操作簡便、重復(fù)性好、靈敏度高、專屬性強，可用于參姜鎖陽益氣片的質(zhì)量控制[25]。

在研究中并未見到將化學(xué)成分含量測定和指紋圖譜結(jié)合到一起全面控制鎖陽藥材質(zhì)量的方法。

4 結(jié)語與展望

上述討論，對鎖陽藥材的化學(xué)成分及藥理活性、化學(xué)成分的提取工藝、質(zhì)量控制方法進行了較全面的分析，為鎖陽藥材的開發(fā)和利用提供了新的理論依據(jù)，為含鎖陽藥材的復(fù)方制劑的配伍研究奠定了基礎(chǔ)，提高了臨床安全用藥。對全面控制鎖陽藥材質(zhì)量的方法，探討了研究新的契合點。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010版(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:478.

[2] 中國科學(xué)院植物研究所.中國高等植物圖鑒(第2冊)[M].北京:中國科學(xué)出版社,1972:657.

[3] 中國科學(xué)院中國植物雜志編輯委員會.中國植物志[M].北京:科學(xué)出版社,1999:388.

[4] 高乃群,曹玉華,陶冠軍.鎖陽原花青素的HPLC-MS分析[J].現(xiàn)代化工，2010,30(10):91-94.

[5] 熱西旦木·托乎提.鎖陽體外抑制Caco-2細胞活性部位化學(xué)成分及其質(zhì)量研究[D].烏魯木齊：新疆醫(yī)科大學(xué)，2011.

[6] Meng HC, Wang S, Li Y, et al. Chemical constituents and pharmacologic actions of Cynomorium plants [J]. Chinese Journal of Natural Medicines, 2013, 11 (4) : 0321-0329.

[7] 楊帆,趙鵬偉,孫鵬,等.鎖陽多糖對肺癌細胞端粒的影響[J].中國中藥雜志,2016,41(5):917-922.

[8] 林鵬.鎖陽化學(xué)成分類型檢識、四類化合物提取工藝及生物活性研究[D].蘭州：蘭州理工大學(xué),2013.

[9] 羅光宏,王勤,祖廷勛,等.甘肅河西沙區(qū)鎖陽多糖提取工藝優(yōu)化及含量測定[J].食品科學(xué),2011,32(10):79-84.

[10] 王學(xué)喜,張俊,李新明.響應(yīng)面法優(yōu)化超聲提取鎖陽多糖工藝研究[J]．北方園藝,2011,5(6):191-195.

[11] Yang GW, Wei Q, Liu H, et al. Study on polysaccharide extracting process from Cynomorium songaricunby ultrasonic-assistant extraction[J]. Food & Machinery ,2013, 29(3):141-145.

[12] 劉曉風,林鵬,錢嬌玲,等.鎖陽多糖超聲提取工藝及含量測定研究[J].食品工業(yè)科技,2013,34(19):239-243.

[13] 戚進,余伯陽.中藥質(zhì)量評價新模式—“譜效整合指紋譜”研究進展[J].中國天然藥物，2010，8(3):171-176.

[14] 欒娜,常平,莊麗影,等.鎖陽中兒茶素的富集及含量測定[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(20):10644-10645.

[15] 王勤,孫蕓.HPLC法測定鎖陽中沒食子酸和原兒茶酸的含量[J].西北藥學(xué)雜志,2010,25(3):190-193.

[16] 王學(xué)軍,江振,劉雄,等.高效液相色譜法測定不同產(chǎn)地鎖陽中熊果酸的含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2010,30(16):1414-1416.

[17] 吳桂玲.HPLC測定青海地區(qū)鎖陽中沒食子酸與原兒茶素的含量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(6):3831-3832.

[18] 閆朝壘,朱蕓,王翔飛.RP-HPLC法測定新疆不同產(chǎn)地鎖陽中熊果酸的含量[J].北方藥學(xué),2013,10(10):7-10.

[19] 楊瀚,王榮,夏鵬霄,等.用HPLC法同時測定鎖陽中的多種有效成分[J].藥物服務(wù)與研究,2014,14(2):122-125.

[20] 劉曄瑋,陳衛(wèi)林,郭玫,等.鎖陽高效液相指紋圖譜研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2011,22(6):1367:1370.

[21] Chen SL,Yao H,Han J P，et al. Validation of the ITS2 regionas a novel DNA barcode for identifying medicinal plant species [J]. PLoS ONE,2010,5(1): 8613-8621.

[22] 李偉,劉廣達,陳青,等.鎖陽ISSR-PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化研究[J].生物技術(shù)通報，2012,8(17):1135-1141.

[23] 侯典云,宋經(jīng)元,石林春,等.中藥材鎖陽的ITS2條形碼分子鑒定研究[J].中國中藥雜志，2013,38(23):4028-4053.

[24] 李振華,龍平,鄒德志,等.基于ITS序列位點特異性PCR的肉蓯蓉與其混偽品的鑒別研究[J].中國中藥雜志,2014,39(19):3684-3689.

[25] 賈丹兵,劉珊,李乃民,等.參姜鎖陽益氣片的質(zhì)量控制[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2011,31(11):940-943.

The Latest Research Progresses onCynomoriumSongaricumRupr.

AN Qiong1, LI Qian1, LI Ning2, HUANG Rui-ping1

(1.HexiUniversity,ZhangYe734000,China; 2.LanzhouUniversity,Lanzhou730000,China)

The pharmacoactive constituents, chemical extraction technology, and the quality control ofCynomoriumsongaricumRupr. have been introduced and analyzed in detail according to recent five-year literatures. This research contributes to the development and utilization ofCynomoriumsongaricumRupr. and lay a foundation for the compatibility and the safe use of it. The future research development ofCynomoriumsongaricumRupr. was also discussed in this research.

CynomoriumsongaricumRupr.; Chemical constituents; Pharmacological activity; Extraction technology; Quality control

2016-07-04

2016-10-10

2014年度甘肅省教育科學(xué)規(guī)劃“十二五”課題首批立項(GS[2014]GHB0305)；河西學(xué)院校長基金(XZ2015-20)

安瓊(1983-)，女，碩士，講師，主要從事藥物分析新方法及活性組分開發(fā)利用研究。

*通訊作者：黃瑞萍(1962-)，女，教授,主要從事生理學(xué)及中藥活性組分開發(fā)利用研究。

R282.71

A

1002-2392(2017)03-0117-03