腫瘤患者細(xì)胞免疫特征分析

遲艷新

目的分析腫瘤患者細(xì)胞免疫的特征。方法用流式細(xì)胞儀檢測(cè)腫瘤患者的細(xì)胞免疫狀態(tài)，并與正常體檢者比較。結(jié)果兩組腫瘤患者組與對(duì)照組比較，CD3+CD4+、CD4+CD45RA細(xì)胞以及CD4+/CD8+比值降低，CD3+CD8+、CD4+CD45RO以及CD8+CD28-細(xì)胞升高（P＜0．05）。結(jié)論腫瘤患者T淋巴細(xì)胞的變化情況的檢測(cè)，有助于臨床醫(yī)生了解患者腫瘤發(fā)展程度和手術(shù)療效。

腫瘤患者；細(xì)胞免疫；T淋巴細(xì)胞

腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與機(jī)體的免疫系統(tǒng)具有密不可分的關(guān)系，免疫系統(tǒng)的紊亂、免疫功能的低下可能是導(dǎo)致腫瘤產(chǎn)生的因素。人體發(fā)揮免疫功能的淋巴細(xì)胞，主要包括T細(xì)胞、B細(xì)胞以及NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞，通過釋放免疫因子發(fā)揮免疫效應(yīng)。本文通過分析腫瘤患者與正常對(duì)照人群的細(xì)胞免疫狀態(tài)的差異，旨在為腫瘤患者的診斷和治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象與分組

選擇2013年5月—2016年5月本院收治的腫瘤患者80例，其中包括直腸癌患者40例，男22例，女18例，年齡38～76歲，平均（62.7±10.9）歲。乳腺癌患者40例，均為女性患者，年齡39～83歲，平均（65.8±12.6）歲。同時(shí)選擇同期健康門診患者40例作為對(duì)照組，男19例，女21例。采集靜脈血，采集量至少1 ml，樣本的采集應(yīng)在6小時(shí)內(nèi)處理，冷凍的標(biāo)本不能用。溶血樣本不能用。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

首先，取采集的血液作為檢驗(yàn)樣品，應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。打開流式細(xì)胞儀，預(yù)熱系統(tǒng)，給待檢測(cè)樣品管中加入去離子水，隨后使用去離子水沖洗流式細(xì)胞儀液流的噴嘴系統(tǒng)；用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整，調(diào)定激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益等，調(diào)節(jié)熒光強(qiáng)度至最強(qiáng)，變異系數(shù)最小。把樣品信息登記至實(shí)驗(yàn)記錄本。

隨后，向試管中分別加入5 μl 抗人CD4抗體、抗人CD8抗體、抗人CD3抗體，并加入抗凝血40 μl ，振蕩混勻后避光靜置保存20 min，用震蕩器邊震蕩邊加入緩沖液600 μl，7秒后，加入上樣液260 μl待測(cè)。抗人CD4抗體、抗人CD45RO抗體需在此基礎(chǔ)上混勻，1 000 rpm條件下離心5 min，倒上清液體，留殘液，加適量PBS待測(cè)。

選擇預(yù)先存儲(chǔ)的檢測(cè)軟件，同時(shí)將樣品和陰性對(duì)照放入檢測(cè)臺(tái)，自動(dòng)檢測(cè)樣品管并進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，得出檢測(cè)結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 10.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（）表示，使用t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞比較

腫瘤患者組與對(duì)照組比較，T細(xì)胞亞群中，患者組CD3+CD4+細(xì)胞降低（P＜0.01），CD3+CD8+細(xì)胞升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（見表1）。

2.2 CD4+、CD4+CD45RO及CD4+CD45RA比較

腫瘤組患者與對(duì)照組比較，CD4+CD45RO升高，CD4+CD45RA降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。三組CD4+比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（見表2）。

2.3 CD4+/CD8+、CD8+CD28+、CD8+CD28-比較

腫瘤組患者T細(xì)胞亞群中CD4+/CD8+比值降低（P＜0.05）；CD8+CD28-升高（P＜0.05）（見表3）。

3 討論

CD3+CD4+T細(xì)胞是輔助性的細(xì)胞，主要起輔助作用。腫瘤患者一般CD3+CD4+T細(xì)胞明顯減少，CD3+CD8+T細(xì)胞明顯升高，正常對(duì)照組則無(wú)此現(xiàn)象。

CD3+CD4+T細(xì)胞亞群有輔助和誘導(dǎo)其它細(xì)胞的功能。CD3+CD4+T細(xì)胞亞群的減少必導(dǎo)致免疫應(yīng)答減弱，CD3+CD4+T細(xì)胞亞群增多可引起免疫應(yīng)答增強(qiáng)，在CD3+CD4+T細(xì)胞亞群的控制和引導(dǎo)下，機(jī)體免疫系統(tǒng)得以正常運(yùn)行，CD3+CD4+細(xì)胞被稱為人體免疫系統(tǒng)的大腦和中樞[1-3]。對(duì)CD3+CD4+的監(jiān)測(cè)也是監(jiān)測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群的關(guān)鍵。

CD4+T按功能不同可分為CD4+CD45RO+T、CD4+CD45RA+T兩類。CD4+CD45RO+T屬于典型的記憶性的細(xì)胞，能接受抗原的刺激，粘附能力較強(qiáng)，并能再次分化。CD4+CD45RA+T不能接受抗原刺激，粘附能力也較低下，不能再次分化。有研究表明，腫瘤患者CD4+T細(xì)胞比例不變，腫瘤患者的CD4+CD45RO+T細(xì)胞在術(shù)后有所下降，CD4+CD45RA+T在術(shù)后有所上升[4]。CD4+CD45RO+T細(xì)胞和CD4+CD45RA+T細(xì)胞在腫瘤免疫中作用很大。單獨(dú)看CD45RO T細(xì)胞亞群及CD45RA T細(xì)胞亞群作用不大。但綜合各因素影響，綜合考慮CD4+CD45RO+T細(xì)胞和在CD4+CD45RA+T的作用在腫瘤免疫中至關(guān)重要。CD4+CD45RA T細(xì)胞亞群和CD4+CD45RO T細(xì)胞亞群加在一起為CD4+T細(xì)胞亞群。一旦CD4+CD45RA T細(xì)胞亞群增加，CD4+CD45RO T細(xì)胞亞群則應(yīng)相應(yīng)的減少。一旦CD4+CD45RO T細(xì)胞亞群增加，CD4+CD45RA T細(xì)胞亞群則應(yīng)相應(yīng)的減少，以維持CD4+T細(xì)胞亞群的相對(duì)穩(wěn)定。一旦這種平衡被打破，說(shuō)明機(jī)體免疫狀況被破壞，所以應(yīng)及時(shí)監(jiān)測(cè)CD4+CD45RO T細(xì)胞亞群，CD4+CD45RA T細(xì)胞亞群。

T細(xì)胞活化有兩個(gè)不同的信號(hào)介導(dǎo)。CD3+CD8+細(xì)胞由CD28可以區(qū)分成T抑制細(xì)胞亞群CD8+CD28-和細(xì)胞毒T細(xì)胞亞群CD8+CD28+[5]。CD8+CD28-T細(xì)胞亞群具有免疫調(diào)節(jié)作用，還能殺傷效應(yīng)細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤患者CD8+CD28-細(xì)胞亞群高于對(duì)照組。腫瘤患者一般CD8+CD28-細(xì)胞亞群升高明顯，導(dǎo)致總T淋巴細(xì)胞升高，引起CD4+/CD8+比例降低[6-7]。CD8+CD28-T細(xì)胞亞群對(duì)抗體的產(chǎn)生有抑制作用。

CD3+T細(xì)胞亞群、CD4+T細(xì)胞亞群、CD8+T細(xì)胞亞群在腫瘤免疫中相互影響，只有在CD3+CD4+T細(xì)胞亞群、CD3+CD8+T細(xì)胞亞群正常時(shí)，抗腫瘤作用才有效[4]。晚期惡性腫瘤患者普遍免疫功能低下，CD3+T細(xì)胞亞群、CD4+T細(xì)胞亞群降低，CD8+升高T細(xì)胞亞群、CD4+/CD8+比值降低或倒置來(lái)衡量機(jī)體免疫狀態(tài)，CD4+CD45RO T細(xì)胞亞群升高、CD4+CD45RA T細(xì)胞亞群下降，表明機(jī)體免疫功能嚴(yán)重受損[8]。

表1 T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞比較

表2 CD4+、CD4+CD45RO及CD4+CD45RA比較

表3 CD4+/CD8+、CD8+CD28+、CD8+CD28-比較

綜上所述，本研究顯示通過對(duì)腫瘤患者T細(xì)胞亞群進(jìn)行分析，可以對(duì)腫瘤有更全面的分析，對(duì)判斷預(yù)后有一定好處。

[1] 蕭劍軍，彭杰文，賀景煥，等． 晚期大腸癌患者化療前后T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)的臨床價(jià)值[J]． 腫瘤防治研究，2010，37（8）：931-934．

[2] 張為，曾麗． CD4+T細(xì)胞及其亞群與多發(fā)性硬化[J]． 中國(guó)臨床康復(fù)，2006，10（4）：156-158．

[3] 殷纓，張盈華，張利朝，等． 惡性腫瘤患者T細(xì)胞亞群與紅細(xì)胞免疫功能的變化及其相關(guān)性分析[J]． 實(shí)用癌癥雜志，2001，16（2）：171-172，175．

[4] 王剛． CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與晚期食道癌免疫化療及預(yù)后的研究[D]． 合肥：安徽醫(yī)科大學(xué)，2008：6-11．

[5] 烏蘭圖雅，王士勇，杜微麗，等． 晚期肺癌患者免疫功能的系統(tǒng)評(píng)價(jià)及臨床意義[J]． 中國(guó)肺癌雜志，2010，13（4）：331-336．

[6] 楊佩芳． CD4+T細(xì)胞平衡失調(diào)與宮頸癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究[D]．鎮(zhèn)江：江蘇大學(xué)，2012：16-17．

[7] 周靜，陳建安，丁茜，等． CD8+CD28+Tc細(xì)胞在急性白血病患者化療前后外周血中的表達(dá)及臨床意義[J]． 海南醫(yī)學(xué)，2015，26（12）：1778-1780．

[8] 王仲，周新伏，唐鐵鋼，等． 熱化療對(duì)晚期惡性腫瘤患者外周血CD8+CD28+T細(xì)胞表達(dá)的影響及臨床意義[J]． 腫瘤防治研究，2011，38（12）：1405-1408．

Analysis of Cellular Immune Characteristics in Cancer Patients

CHI Yanxin Clinical Laboratory Department, People's Hospital of Jilin, Jilin Jilin 132001, China

ObjectiveTo analyze the cellular immune characteristics in cancer patients.MethodsThe cellular immune status of the tumor patients were analyzed by flow cytometry, and the results were compared with the normal subjects.ResultsThe CD3+CD4+, CD4+CD45RA cells and the ratio of CD4+/ CD8+in the tumor groups were significantly lower than that in the control group, and CD3+CD8+, CD4+CD45RO and CD8+CD28-cells were significantly increased (P＜ 0.05).ConclusionThe detection of T lymphocyte changes in cancer patients help clinicians to understand the degree of tumor development and surgical efficacy.

cancer patients; cellular immunity; T lymphocytes

R730．51

A

1674-9316（2017）11-0110-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．11．066

吉林市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 吉林 132001