呂佳佳，陳 慶，王 森，陳 莉，滿雪玉，熊永愛

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)學(xué)院 國(guó)家藥學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，貴州 遵義 563099)

技術(shù)與方法

HPLC-DAD法同時(shí)測(cè)定八珍顆粒中五種成分

呂佳佳1，陳 慶1，王 森1，陳 莉1，滿雪玉2，熊永愛1

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)學(xué)院 國(guó)家藥學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，貴州 遵義 563099)

目的 建立HPLC-DAD法用于同時(shí)測(cè)定八珍顆粒中芍藥苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、阿魏酸和甘草酸銨的方法。方法 采用Diamonsil Plus C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為237 nm，流速1.0 mL/min，柱溫37 ℃，進(jìn)樣量10 μL。結(jié)果 芍藥苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、阿魏酸和甘草酸銨在上述色譜條件下具有良好的分離度；其線性范圍分別為9.905～138.670 μg/mL(r=0.999 8)、2.632～36.848 μg/mL(r=0.999 5)、1.372～19.208 μg/mL(r=0.999 8)、1.596～22.344 μg/mL(r=0.999 7)、9.828～137.585 μg/mL(r=0.999 4)；方法精密度RSD值<1.0%，重復(fù)性RSD值<3.0%，待測(cè)樣品在室溫下放置24 h內(nèi)穩(wěn)定；平均加樣回收率在96.71%～100.36%，RSD值<3.0%；不同廠家的6批八珍顆粒中芍藥苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、阿魏酸和甘草酸銨質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為1.462 6～2.254 0 mg/g、0.253 3～0.274 9 mg/g、0.142 7～0.305 4 mg/g、0.062 3～ 0.084 6 mg/g、80.642 3～1.138 7 mg/g。結(jié)論 該方法分離度好，簡(jiǎn)便易行，重現(xiàn)性好，可用于八珍顆粒的質(zhì)量控制。

八珍顆粒；HPLC-DAD；芍藥苷；毛蕊花糖苷；甘草苷

八珍顆粒(Bazhen granule，BG)收載在2015年版《中國(guó)藥典》中藥成方制劑中，具有補(bǔ)氣益血作用，用于氣血兩虛、面色萎黃、食欲不振、四肢乏力和月經(jīng)過(guò)多等癥狀[1]。原方出自于明朝的《正體類要》，為四物湯和四君子湯的復(fù)方。因本方集兩方為一方，且主方中八味藥物皆為補(bǔ)氣養(yǎng)血之珍品，故名“八珍湯”[2]?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，扶正中藥對(duì)腫瘤化療有增效減毒的作用[3]，八珍顆粒除了治療婦科疾病外[4]，在化療引起的細(xì)胞免疫功能低下方面具有顯著作用[5-9]。魏開建等[10]研究表明，八珍顆粒能促進(jìn)中晚期氣血兩虛型惡性腫瘤患者免疫功能的恢復(fù)和提高。郭經(jīng)鋒等[11]研究表明，八珍顆粒聯(lián)合紫杉醇、卡鉑治療晚期非小細(xì)胞肺癌，在降低毒性反應(yīng)、增強(qiáng)細(xì)胞免疫方面具有較好優(yōu)勢(shì)。處方中主要由黨參、炒白術(shù)、茯苓、炙甘草、當(dāng)歸、炒白芍、川芎和熟地黃8味藥材組成。其中甘草苷和甘草酸為炙甘草的主要化學(xué)成分；阿魏酸為當(dāng)歸和川芎的主要化學(xué)成分；芍藥苷為白芍的主要化學(xué)成分；毛蕊花糖苷為熟地黃的主要化學(xué)成分。

目前，《中國(guó)藥典》2015版中對(duì)于八珍顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在含量測(cè)定項(xiàng)下僅用芍藥苷一種成分的量來(lái)衡量該藥物的質(zhì)量。通過(guò)文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)[12-16]，為更加合理地控制制劑質(zhì)量，同時(shí)測(cè)定制劑中不同成分含量的研究已有報(bào)道，而關(guān)于八珍顆粒的制備工藝研究或成分的含量研究中仍主要以芍藥苷1種成分進(jìn)行定量測(cè)定，未發(fā)現(xiàn)同時(shí)測(cè)定八珍顆粒中多種成分的報(bào)道。針對(duì)八珍顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，本實(shí)驗(yàn)利用HPLC-DAD法對(duì)其中5種成分進(jìn)行同時(shí)測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 黨參、炒白術(shù)、茯苓、炙甘草、當(dāng)歸、炒白芍、川芎和熟地黃8味處方飲片均購(gòu)自成都新荷花飲片有限公司，由遵義醫(yī)學(xué)院生藥學(xué)楊建文教授鑒定上述藥材均為《中國(guó)藥典》2015版記載正品。對(duì)照品芍藥苷(批號(hào)151120，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.50%)、毛蕊花糖苷(批號(hào)160526，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.26%)、阿魏酸(批號(hào)16011402，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.06%)、甘草苷(批號(hào)160421，質(zhì)量分?jǐn)?shù)97.88%)、甘草酸銨(批號(hào)151013，質(zhì)量分?jǐn)?shù)97.52%)，均購(gòu)于成都普菲德生物技術(shù)有限公司。八珍顆粒，批號(hào)151102、151412、160127由四川禾邦陽(yáng)關(guān)制藥股份有限公司提供；批號(hào)160519、160723、160108由寧波立華制藥有限公司提供。甲醇、乙睛為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

1.2 儀器 Agilent 1260型高效液相色譜儀，包括四元泵、DAD檢測(cè)器、在線真空脫氣機(jī)、Chemstation工作站(美國(guó)Agilent 公司)；BT125D型分析天平，十萬(wàn)分之一[賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司]；T9CS雙光束紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)；DL-820D型智能超聲波清洗器(上海之信儀器有限公司)；DURA12純水機(jī)(上海和泰儀器有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 色譜條件 采用Diamonsil Plus C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脫：0～5 min，5%～10%乙睛；5～30 min，10%～60%乙睛；30～40 min，60%～80%乙睛；40～48 min，80%～5%乙睛；檢測(cè)波長(zhǎng)：237 nm；流速為1.0 mL/min；柱溫37 ℃；進(jìn)樣量10 μL。

1.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、阿魏酸和甘草酸銨對(duì)照品適量，分別置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制備成質(zhì)量濃度分別為甘草苷0.196 mg/mL、甘草酸銨1.433 mg/mL、芍藥苷1.415 mg/mL、毛蕊花糖苷0.376 mg/mL、阿魏酸0.228 mg/mL的對(duì)照品儲(chǔ)備液，備用。再精密吸取各對(duì)照品儲(chǔ)備液3.5 mL于25 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，制得混合對(duì)照品溶液，4 ℃避光保存，備用。

1.3.3 供試品溶液的制備 將八珍顆粒研細(xì)后稱取約0.5 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率120 W，頻率59 kHz)30 min，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。

1.3.4 陰性對(duì)照溶液的制備 按照八珍顆粒的處方比例和制備工藝，分別制備缺少黨參、茯苓、炒白術(shù)藥材的陰性對(duì)照樣品；缺少炙甘草藥材的陰性對(duì)照樣品；缺少當(dāng)歸和川芎藥材的陰性對(duì)照樣品；缺少白芍藥材的陰性對(duì)照樣品；缺少熟地黃藥材的陰性對(duì)照樣品；并按照“1.3.3”項(xiàng)下方法制備各陰性對(duì)照溶液。

1.3.5 專屬性實(shí)驗(yàn) 分別精密吸取“1.3.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液、“1.3.3”項(xiàng)下供試品溶液、“1.3.4”項(xiàng)下陰性對(duì)照溶液，按照“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行分析。

1.3.6 線性關(guān)系的考察 精密吸取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、5.0、7.0 mL于10 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，得系列混合對(duì)照品溶液，按照“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定。

1.3.7 精密度試驗(yàn) 精密吸取混合對(duì)照品溶液10 μL，按照“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，分別計(jì)算各組分峰面積的RSD值。

1.3.8 重復(fù)性試驗(yàn) 稱取同一批八珍顆粒(批號(hào)：151102)6份，每份0.5 g，精密稱定，按“1.3.3”項(xiàng)下方法平行制備6份樣品。HPLC進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算各待測(cè)成分的平均質(zhì)量濃度和RSD值。

1.3.9 穩(wěn)定性試驗(yàn) 稱取八珍顆粒(批號(hào)：151102)0.5 g，按“1.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件分別于0、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣測(cè)定，測(cè)定各成分峰面積。

1.3.10 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的八珍顆粒(批號(hào)：151102)6份，每份約0.25 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，每份中分別精密加入芍藥苷對(duì)照品3.67 mL(質(zhì)量濃度為0.203 2 mg/mL)，毛蕊花糖苷對(duì)照品0.36 mL(質(zhì)量濃度為0.376 mg/mL)，甘草苷對(duì)照品0.49 mL(質(zhì)量濃度為0.295 2 mg/mL)，阿魏酸對(duì)照品0.185 mL(質(zhì)量濃度為0.228 mg/mL)，甘草酸銨對(duì)照品2.525 mL(質(zhì)量濃度為0.221 6 mg/mL)，按“1.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，分別計(jì)算各待測(cè)成分的回收率。

1.3.11 樣品含量測(cè)定 分別取不同廠家不同批次的八珍顆粒，按“1.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，制備好后按“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖并計(jì)算樣品中5個(gè)成分的含量。

2 結(jié)果

2.1 專屬性實(shí)驗(yàn) 分別精密吸取混合對(duì)照品溶液、供試品溶液、以及陰性對(duì)照溶液，按照“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行分析，供試品中各待測(cè)成分色譜峰的分離度均大于1.5，峰形良好，各陰性對(duì)照溶液在相應(yīng)位置沒(méi)有出現(xiàn)色譜峰，表明方法專屬性良好。色譜圖見圖1。

A：混合對(duì)照品；B：八珍顆粒供試品；C：缺黨參、炒白術(shù)、茯苓陰性對(duì)照；D：缺白芍陰性對(duì)照；E：缺當(dāng)歸、川芎陰性對(duì)照；F：缺甘草陰性對(duì)照；G：缺熟地黃陰性對(duì)照。1：芍藥苷；2：毛蕊花糖苷；3：甘草苷；4：阿魏酸；5：甘草酸銨。圖1 HPLC-DAD色譜圖

2.2 線性關(guān)系的考察 將系列混合對(duì)照品溶液按照“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(X)，峰面積為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸，得到5個(gè)成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，相關(guān)系數(shù)(r)和線性范圍(見表1)。

表1 八珍顆粒中5種成分的線性關(guān)系

成分線性方程r線性范圍(μg/mL)芍藥苷Y=11.941X-6.01110.99989.905～138.670毛蕊花糖苷Y=9.512X-1.90730.99952.632～36.848甘草苷Y=24.632X-2.93080.99981.372～19.208阿魏酸甘草酸Y=34.359X-4.8533Y=4.585X-35.0240.99970.99941.596～22.3449.828～137.585

2.3 精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn) 根據(jù)各測(cè)定結(jié)果計(jì)算芍藥苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、阿魏酸和甘草酸銨的RSD(n=6)值和平均質(zhì)量濃度。結(jié)果(見表2)表明，儀器精密度良好，同時(shí)供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好，該方法的穩(wěn)定性良好。

表2 精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

項(xiàng)目芍藥苷毛蕊花糖苷甘草苷阿魏酸甘草酸銨精密度RSD(%)0.410.380.220.190.54穩(wěn)定性RSD(%)1.562.831.772.091.96重復(fù)性RSD(%)1.432.112.082.871.1重復(fù)性平均質(zhì)量濃度(mg/g)1.500.270.280.0741.12

2.4 加樣回收率試驗(yàn) 將“1.3.10”項(xiàng)下加樣回收率試驗(yàn)供試品溶液進(jìn)行測(cè)定和計(jì)算，結(jié)果(見表3)表明，方法的準(zhǔn)確性良好。

表3 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

成分樣品含量(mg)加入量(mg)測(cè)得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)芍藥苷0.74690.74571.469398.4497.241.410.76280.74571.437895.310.74580.74571.461397.980.74880.74571.455097.360.76210.74571.455195.840.74020.74571.464298.54毛蕊花糖苷0.13750.13540.269998.9096.711.700.13250.13540.264698.770.13140.13540.255195.610.13870.13540.266295.660.13920.13540.262495.560.13120.13540.255395.76甘草苷0.14560.14460.289699.79100.271.820.14420.14460.280697.160.14210.14460.2936102.410.14260.14460.2921101.710.14180.14460.2865100.030.14380.14460.2899100.52阿魏酸0.04180.04220.083198.9397.591.540.04170.04220.082698.450.04260.04220.082397.050.04110.04220.082799.280.04250.04220.081496.100.04230.04220.080995.74甘草酸銨0.56160.55951.1327101.03100.361.330.55910.55951.1305101.060.55730.55951.1308101.250.54700.55951.106399.980.56090.55951.095897.800.56640.55951.1373101.01

2.5 樣品含量測(cè)定 計(jì)算樣品中5個(gè)成分的含量，結(jié)果(見表4)。

表4 八珍顆粒中5種成分的測(cè)定結(jié)果(n=3)

批號(hào)芍藥苷(mg/g)毛蕊花糖苷(mg/g)甘草苷(mg/g)阿魏酸(mg/g)甘草酸銨(mg/g)1511021.49380.27490.29130.08461.12321514121.46260.27100.30190.07721.13871601271.48050.25330.30540.07911.13401605192.25400.26190.14270.06230.06231607232.23070.25570.15030.07250.69881601082.19840.26460.15670.07090.7283

3 討論

根據(jù)八珍顆粒中5種主要成分的理化性質(zhì)與色譜行為，分別比較了甲醇-水、乙睛-水、乙睛-0.1%磷酸水溶液、甲醇-0.1%磷酸水溶液作為流動(dòng)相梯度洗脫，結(jié)果表明，以甲醇-水或甲醇-0.1%磷酸水溶液作為流動(dòng)相時(shí)，整體峰形較差，對(duì)稱性不好，樣品中甘草苷和阿魏酸分離度也不好，改為乙睛-0.1%磷酸水溶液后，樣品中各成分分離效果明顯改善，且峰形較好。

通過(guò)查閱文獻(xiàn)及紫外掃描可知，芍藥苷在230 nm處有最大吸收，甘草苷、甘草酸銨最大吸收為237 nm，毛蕊花糖苷最大吸收為332 nm，阿魏酸的最大吸收為316 nm，初期實(shí)驗(yàn)中毛蕊花糖苷和阿魏酸的檢測(cè)波長(zhǎng)定為330 nm，其余3個(gè)成分的檢測(cè)波長(zhǎng)定為237 nm，但實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)237 nm處同時(shí)能檢測(cè)出毛蕊花糖苷和阿魏酸2個(gè)色譜峰，并且峰面積與330 nm處相當(dāng)，因此本實(shí)驗(yàn)將5個(gè)成分的檢測(cè)波長(zhǎng)都定為237 nm。

在樣品含量測(cè)定中發(fā)現(xiàn)，各批次的八珍顆粒中5種指標(biāo)性成分的含量存在差異，但同一廠家的不同批次含量差異明顯小于不同廠家之間的含量差異，如立華制藥的八珍顆粒中芍藥苷含量明顯高于禾邦制藥的八珍顆粒，而其余4種成分均比禾邦低，產(chǎn)生這一現(xiàn)象可能與原藥材產(chǎn)地、采收季節(jié)以及生產(chǎn)工藝等差異所致。

本實(shí)驗(yàn)首次建立HPLC-DAD法同時(shí)測(cè)定八珍顆粒中5種成分的含量，該方法靈敏度高、簡(jiǎn)便易行、結(jié)果準(zhǔn)確，可作為八珍顆粒多指標(biāo)定量測(cè)定方法，對(duì)八珍顆粒的質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：463-464.

[2] 尚雨嫣.基于代謝組學(xué)的四君子湯、四物湯、八珍湯對(duì)14月齡雌性小鼠的作用[D].哈爾濱：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，2016.

[3] 黃茜，祝彼得.八珍湯臨床應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011,8(19)：2377-2379.

[4] 黃飛華，裘維焰，陸傳寶，等.八珍顆粒治療氣血兩虛型月經(jīng)不調(diào)61例臨床觀察[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技，2009,16(3)：236-237.

[5] 孫卓.八珍顆粒聯(lián)合化療治療晚期乳腺癌30例臨床觀察[J].中醫(yī)中藥，2009,16(11)：121-122.

[6] 李小軍，馮春蘭，羅海亮，等.八珍湯輔助化療治療中晚期食管癌45例臨床觀察[J].中醫(yī)雜志，2016,57(5)：416-419.

[7] 陳俊強(qiáng)，劉健，鐘蓮花，等.食管癌術(shù)后放化療聯(lián)合中藥八珍顆粒的療效觀察[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2010,23(5)：405-407.

[8] 高尚峰，王新胤，潘婧.八珍顆粒配合腹腔化療對(duì)進(jìn)展期胃癌患者術(shù)后的影響[J].華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006,8(2)：199-200.

[9] 魏開建，杜建.八珍顆粒對(duì)中晚期氣血兩虛型惡性腫瘤患者微量元素、免疫功能影響的臨床研究[J].福建中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011,21(2)：11-13.

[10] 魏開建，杜建.八珍顆粒對(duì)中晚期氣血兩虛型惡性腫瘤患者免疫功能的影響[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010,16(12)：25-28.

[11] 郭經(jīng)鋒，吳鋒，邢輝，等.八珍顆粒聯(lián)合紫杉醇、卡鉑方案治療老年晚期非小細(xì)胞肺癌的療效觀察[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015,14(6)：449-452.

[12] 胡雙豐.反相高效液相色譜法測(cè)定八珍顆粒中芍藥苷含量研究[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2005,22(6)：491-493.

[13] 謝靜，雷灼雨，蔣萬(wàn)浪.高效液相色譜法測(cè)定八珍顆粒中芍藥苷含量[J].中國(guó)藥業(yè)，2008,17(13)：26-27.

[14] 洪梅，施法.HPLC法測(cè)定加味八珍益母顆粒中鹽酸水蘇堿的含量[J].中國(guó)藥事，2009,23(11)：1113-1114.

[15] 李順意，蔡敏，韓鳳梅，等.高效液相色譜法測(cè)定八珍益母顆粒中芍藥苷和阿魏酸的含量[J].中國(guó)中藥雜志，2001,26(9)：631-632.

[16] 張艷，周旭美，姚曉東，等.HPLC-ELSD測(cè)定綏陽(yáng)山銀花中綠原酸和灰氈毛忍冬皂苷乙的含量[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013,36(6):575-577.

[收稿2016-12-12;修回2017-02-27]

(編輯：譚秀榮)

Simultaneous determination of five constituents in Bazhen Granule by HPLC-DAD

LyuJiajia1,ChenQing1,WangSen1,ChenLi1,ManXueyu2,XiongYongai1

(1.Department of Pharmacy,Pharmacy School of Zunyi Medical University,Zunyi Guizhou 563099,China;2.National Experimental Teaching Demonstration Center of Pharmacy,Zunyi Medical University,Zunyi Guizhou 563099,China)

Objective To establish an HPLC-DAD method for the simultaneous determination of paeoniflorin,verbascoside,liquiritin,ferulic acid,and ammonium glycyrrhetate in Bazhen granules (BG).Methods The chromatographic separation was performed on a Diamonsil Plus C18column (250 mm×4.6 mm,5 μm),adopting gradient elution of acetonitrile-0.1% phosphate acid solution and the column temperature was 37 ℃.The detection wavelength was set at 237 nm and the flow rate was 1.0 mL/min.The injection volume was 10 μL.Results The five components were well separation under the determined chromatographic conditions.The linear ranges of paeoniflorin,verbascoside,liquiritin,ferulic acid,and ammonium glycyrrhetate were 9.905-138.670 μg/ml (r=0.999 8),2.632-36.848 μg/ml (r=0.999 5),1.372-19.208 μg/ml (r=0.999 8),1.596-22.344 μg/ml (r=0.999 7) and 9.828-137.585 μg/mL(r=0.999 4),respectively.The RSD of precision was less than 1% and the RSD of repeatability was less than 3%.Tthe sample solution was stable during 24 h.The average recoveries (n=6) were between 96.71%-100.36% and the RSDs were all less than 3.0%.The content ranges of paeoniflorin,verbascoside,liquiritin,ferulic acid,and ammonium glycyrrhetate in different manufactures of BG were 1.462 6-2.254 0 mg/g,0.253 3-0.274 9 mg/g,0.142 7-0.305 4 mg/g,0.062 3-0.084 6 mg/g,0.642 3-1.138 7 mg/g,respectively.Conclusion The method is simple and convenient with good separating capacity,and could be used for the quality control of BG with satisfactory repeatability.

Bazhen granules;HPLC-DAD;paeoniflorin;verbascoside;liquiritin

遵義醫(yī)學(xué)院碩士啟動(dòng)基金資助項(xiàng)目(NO：F-751)。

熊永愛，男，博士，副教授，研究方向：藥物新劑型與新技術(shù)，E-mail:625221174@qq.com。

R917

A

1000-2715(2017)02-0208-06