黃燁禎，王幼明，葉林方

（1. 江西省動物疫病預(yù)防控制中心，江西南昌 330029；2. 中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)研究中心，山東青島 266032）

江西省種豬群偽狂犬病血清學(xué)橫斷面研究

黃燁禎1，王幼明2，葉林方1

（1. 江西省動物疫病預(yù)防控制中心，江西南昌 330029；2. 中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)研究中心，山東青島 266032）

為了解江西省種豬群偽狂犬?。≒R）的流行情況，尋找狂犬病毒（PRV）感染的潛在風(fēng)險因素，開展了本次橫斷面研究。按照估計流行率的抽樣策略，隨機(jī)抽取73個種豬場，根據(jù)豬場養(yǎng)殖規(guī)模將其分為3種類型，分別進(jìn)行抽樣，然后采用PRV gE-ELISA抗體檢測試劑盒進(jìn)行抗體檢測。同時，根據(jù)73個種豬場的詳細(xì)地址，描繪豬場的空間分布圖，并對其開展問卷調(diào)查，對問卷中涉及的風(fēng)險因素進(jìn)行單因素分析，篩選出P＜0.2的變量，將其導(dǎo)入多因素Logistic回歸模型，用倒推法選擇變量，進(jìn)行回歸分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：江西省種豬群PR的群流行率為28.63%（95%CI：18.26%～38.99%），個體流行率為9.37%（95%CI：8.98%～9.77%）；PR陽性豬場多分布于江西省中部的上饒、撫州、鷹潭、宜春等縣市；與PR感染相關(guān)的2個風(fēng)險因素是場區(qū)周圍3 km范圍內(nèi)是否有其他豬場（OR=4.766，P=0.020）和養(yǎng)殖場主是否愿意開展PR凈化（OR=0.054，P=0.014）。依據(jù)研究結(jié)果，建議加強(qiáng)對養(yǎng)殖場主的培訓(xùn)與宣傳，使其認(rèn)識到PR凈化的重要性，并掌握PR防控與凈化的專業(yè)技術(shù)。

橫斷面研究；豬偽狂犬??；血清流行率；風(fēng)險因素；宣傳干預(yù)

豬偽狂犬?。≒orcine Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（PRV）引起的豬的急性傳染病。種豬PRV感染后主要表現(xiàn)為繁殖障礙，15日齡內(nèi)仔豬感染后的病死率可達(dá)100%，斷乳仔豬病死率為10%～20%，育肥豬感染后則主要表現(xiàn)呼吸道癥狀和增重滯緩。因本病給養(yǎng)豬業(yè)造成了較嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，我國將其列為二類動物疫病[1-3]。

根據(jù)《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》，PR為種畜禽重點(diǎn)凈化疫病，要求到2015年，原種豬場達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)；到2020年，全國所有種豬場達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)[4]。江西省從2009年開始，在全省種豬場范圍內(nèi)開展PR凈化工作，但檢測結(jié)果顯示種豬場PR陽性率自2011年后呈緩慢上升趨勢。為此設(shè)計本項(xiàng)流行病學(xué)研究，以期為種豬場的PR凈化提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 目標(biāo)群

本次研究的目標(biāo)群是使用PRV gE基因缺失疫苗免疫的83家或省級批準(zhǔn)注冊的種豬場（站）；研究單元為各場內(nèi)的種豬群（能繁母豬、后備母豬、種公豬）。

1.2 病例定義

陽性個體：經(jīng)PRV KgE-ELISA抗體試劑盒檢測，結(jié)果為gE抗體陽性的種豬；陽性場：場內(nèi)有1只或1只以上PRV gE抗體陽性個體的種豬場；陰性場：場內(nèi)未檢測到PRV gE抗體陽性個體的種豬場。

1.3 抽樣策略

1.3.1 群體水平。全省共有83家省級種豬場。按照估計流行率的方式，設(shè)場間預(yù)期流行率為50%，置信區(qū)間為99%，可接受誤差為5%，經(jīng)樣本量計算，需要調(diào)查74家種豬場[5]，實(shí)際隨機(jī)抽取了73家種豬場作為研究群。

1.3.2 個體水平。按照估計流行率的方式進(jìn)行抽樣。根據(jù)種豬場的種豬數(shù)量，分成3種類型進(jìn)行抽樣。種豬數(shù)量＜450頭：設(shè)預(yù)期流行率為50%，可接受誤差為2%，置信區(qū)間為99%；種豬數(shù)量在451～850頭之間：設(shè)預(yù)期流行率為25%，可接受誤差為4%，置信區(qū)間為99%；種豬數(shù)量＞851頭：設(shè)預(yù)期流行率為15%，可接受誤差為4%，置信區(qū)間為99%。

1.4 檢測試劑

PRV gE-ELISA抗體檢測試劑盒（美國IDEXX公司產(chǎn)品），其敏感性（Se）為98%，特異性（Sp）為99%。

1.5 問卷調(diào)查

設(shè)計《江西省種豬場豬偽狂犬病風(fēng)險評估調(diào)查表》，對種豬場養(yǎng)殖基礎(chǔ)信息、地理位置、生產(chǎn)管理、消毒措施、PR防控措施和參與凈化意愿等方面進(jìn)行問卷調(diào)查。

1.6 數(shù)據(jù)分析

1.6.2 空間分析。根據(jù)73個種豬場的詳細(xì)地址，通過在線經(jīng)緯度查詢網(wǎng)站[6]，查得對應(yīng)的經(jīng)緯度坐標(biāo)，用ArcGis10.1軟件描繪豬場空間分布圖。

1.6.3 風(fēng)險因素。以PR陰性場和陽性場為因變量，用IBM SPSS Statistics 22 統(tǒng)計軟件，對所有二分類變量進(jìn)行單因素分析。結(jié)合變量單因素分析結(jié)果和生物學(xué)知識，篩選出P＜0.2的變量進(jìn)行多因素Logistic回歸分析[7]。

2 結(jié)果

2.1 問卷調(diào)查情況

本次調(diào)查的73個種豬場中，種豬飼養(yǎng)數(shù)量小于450頭的小規(guī)模種豬場占52.05%（38/73）；451～850頭的中等規(guī)模種豬場占31.51%（23/73）；大于850頭的大規(guī)模種豬場占16.44%（12/73）。對這73個種豬場下發(fā)調(diào)查問卷，回收70份，回收率為95.89%（70/73），其中有效問卷58份，有效率為82.86%（58/70）。

2.1.1 地理位置情況。15.52%（9/58）的豬場周邊有河流湖泊。豬場周邊3 km范圍內(nèi)，29.31%（17/58）的豬場有其他豬場；1.72%（1/58）的豬場有豬屠宰場；27.57%（16/58）的豬場有無害化處理點(diǎn)。

2.1.2 生產(chǎn)管理情況。36.21%（21/58）的豬場全部在場外購置飼料；84.48%（49/58）的豬場飲用水完全依賴井水；43.10%（25/58）的豬場從外場引進(jìn)種豬或精液，其中80.00%（20/25）的豬場在引進(jìn)是進(jìn)行PR病原或野毒抗體檢測。

2.1.3 消毒情況。98.28%（57/58）的豬場設(shè)有車輛消毒池，其中49.12%（28/57）的豬場平均每月更換消毒液4～6次；98.28%（57/58）的豬場設(shè)有獨(dú)立的人員消毒通道，消毒方式有紫外線消毒、噴霧消毒、淋浴等；94.83%（55/58）的豬場采取了滅鼠措施；100%（58/58）的豬場采取了殺蟲滅蠅措施；17.24%（10/58）的豬場內(nèi)有流浪犬貓活動，其中60%的（6/10）豬場內(nèi)流浪犬貓可以直接接觸到飼養(yǎng)豬只。

2.1.4 防控情況。100%（58/58）的被調(diào)查豬場免疫PRV gE缺失疫苗，其中74.14%（43/58）的豬場使用進(jìn)口苗，免疫豬群為種豬和仔豬；3.45%（2/58）的豬場為全場免疫；96.55%（56/58）的種豬場會定期檢測PR野毒或野毒抗體，但其中有16.07%（9/56）的場（站）僅依賴省、市、縣疫控機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測；豬場認(rèn)為發(fā)生PR的因素依次為：引進(jìn)種豬/精液（84.48%，49/58），流浪犬貓（70.69%，41/58），疫苗保護(hù)力不夠（68.97%，40/58），外來車輛（62.07%，36/58），外來人員串場（50.00%，29/58），周邊地區(qū)流行嚴(yán)重（48.28%，28/58）。

2.1.5 參與凈化意愿。89.66%（52/58）的豬場愿意開展PR凈化，而其他豬場不愿意開展凈化的原因主要為凈化所需費(fèi)用太高、缺少技術(shù)人員、PR凈化沒有實(shí)際的效益，因此希望能得到資金、檢測技術(shù)和人員培訓(xùn)等方面的幫助。

2.2 流行率

對來自73個場的21 322份血清樣品進(jìn)行PRV gE-ELISA抗體檢測，結(jié)果21個場的2 152份樣品檢測為抗體陽性（表1）。

表1 種豬場PR抗體檢測結(jié)果

2.3 空間分布

根據(jù)73個種豬場的經(jīng)緯度坐標(biāo)，繪制坐標(biāo)圖，并標(biāo)注陽性場和陰性場（圖1）。

圖1 江西省PR陽性和陰性種豬場地理分布

2.4 風(fēng)險因素

2.4.1 單因素分析。經(jīng)分析得到14個風(fēng)險因素（表2），其中有7個因素（P＜0.2）顯示與種豬場PR的發(fā)生有一定關(guān)系，分別為：場區(qū)周圍3 km范圍內(nèi)是否有豬場；3 km范圍內(nèi)是否有散養(yǎng)戶；3 km范圍內(nèi)是否有病死畜禽無害化處理點(diǎn)；場內(nèi)是否有流浪犬貓；流浪犬貓是否能接觸到飼養(yǎng)豬；本場是否開展過PR凈化；是否愿意開展PR凈化。

2.4.2 多因素分析。根據(jù)單因素分析結(jié)果，將篩選出的P＜0.2的變量，導(dǎo)入多因素logistic回歸模型，用倒推法選擇變量，進(jìn)行回歸分析，分析結(jié)果見表3。

表2 種豬場PR單因素風(fēng)險分析結(jié)果

表3 種豬場PR多因素風(fēng)險分析結(jié)果

3 討論

據(jù)相關(guān)資料表明，仔豬PRV gE抗體呈陽性，既有可能是由PRV感染導(dǎo)致的，也有可能是母源抗體引起的，因此從流行病學(xué)分析角度考慮，對種豬的血清學(xué)調(diào)查與分析更具有意義。公豬和后備豬帶毒是PR凈化的最大障礙，尤其是后備母豬如果豬場不能阻止后備母豬被感染，則很難控制和凈化PR，因此對種豬群和后備種豬群進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查和分析是符合實(shí)際要求的[8-10]。

本次調(diào)查中，江西省種豬場群流行率為28.63%（95%CI：18.26%～39.00%），個體流行率為8.99%（95%CI：8.61%～9.36%），21個陽性豬場的樣品陽性率在0.21%～100%之間。被調(diào)查的豬場雖然全部免疫了PRV gE基因缺失疫苗，但場間流行率差異較大，說明疫苗免疫接種雖然在一定程度上可以阻止PR臨床發(fā)病，但不能完全防止病毒入侵，也不能清除已經(jīng)感染的PRV。因此，PRV凈化不能僅僅依賴疫苗，野毒抗體監(jiān)測、淘汰陽性豬只和加強(qiáng)生物安全等綜合措施也非常重要[11-12]。同時，系統(tǒng)開展PR場間流行風(fēng)險因素研究，找到PR防控的主要風(fēng)險因素，將有助于PR的防控和凈化。

個體流行率和群體流行率調(diào)查結(jié)果顯示，感染情況最嚴(yán)重的是中等規(guī)模種豬場。這與研究設(shè)計時假設(shè)的情況不一致，但不影響本次結(jié)果的可靠性，其具體原因需要進(jìn)一步調(diào)查。

PR陽性場多分布于江西省的上饒、撫州、鷹潭、宜春等中部地區(qū)。這些地區(qū)雖然面積小，卻承擔(dān)著全省43.13%的養(yǎng)殖量，養(yǎng)殖非常密集。而本次研究發(fā)現(xiàn)，風(fēng)險因素“場區(qū)周圍3 km范圍內(nèi)是否有其他豬場”與養(yǎng)殖密度也存在一定的關(guān)聯(lián)性。因采集的信息有限，本次研究未對養(yǎng)殖密度與PRV傳播之間的關(guān)系進(jìn)行探討。

雖然有70.69%（41/58）的種豬場認(rèn)識到流浪犬貓是導(dǎo)致發(fā)生PR的重要因素，但仍有17.24%（10/58）的豬場內(nèi)有流浪犬貓活動，這一現(xiàn)象應(yīng)該嚴(yán)格禁止再次出現(xiàn)。

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖場主是否愿意開展PR凈化是影響病毒傳播的關(guān)鍵風(fēng)險因素之一，因此應(yīng)引起疫病防控工作人員和養(yǎng)殖人員的重視。雖然有96.55%（56/58）的種豬場會定期檢測PRV野毒或野毒感冒抗體，但其中有16.07%的場（站）僅依賴省、市、縣疫病控制機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測，以至于不能及時淘汰感染豬只，導(dǎo)致場陽性率居高不下。另外，有10.34%的養(yǎng)殖場主不愿意開展PR凈化，主要是因?yàn)橘M(fèi)用高、技術(shù)人員少、實(shí)際效益低。為此，須加強(qiáng)對養(yǎng)殖場主的培訓(xùn)與宣傳，讓其認(rèn)識到PR凈化的重要性，使其掌握PR防控與凈化的專業(yè)技術(shù)。

本次研究僅針對生產(chǎn)管理水平較高的省級種豬場進(jìn)行了調(diào)查，對數(shù)量更多、更具代表性的生產(chǎn)豬場的流行狀況有待進(jìn)一步調(diào)查。因問卷中設(shè)計的風(fēng)險因素較多，雖在填寫前進(jìn)行了小范圍的預(yù)調(diào)查，并對調(diào)查人員進(jìn)行了培訓(xùn)，但因其中有一些回顧性問題，可能會產(chǎn)生信息偏倚。

[1] 陸承平. 獸醫(yī)微生物學(xué)[M]. 4版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2007.

[2] OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals[M]. 6th ed. Paris：OIE，2008.

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[4]國務(wù)院辦公廳. 關(guān)于印發(fā)國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012-2020）的通知：國辦發(fā)（2012）31號[A]. 北京；農(nóng)業(yè)部，2012.

[5]沈朝建，王幼明. 獸醫(yī)流行病學(xué)調(diào)查與監(jiān)測抽樣技術(shù)手冊[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2013.

[6]GPSspg. 經(jīng)緯度在線查詢[DB/OL].[2016-10-11]. http:// www.gpsspg.com/maps.htm.

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（責(zé)任編輯：朱迪國）

A Cross-sectional Study on Sero-prevalence of Pseudorabies in Swine Breeding Herds in Jiangxi Province

Huang Yezhen1，Wang Youming2，Ye Linfang1

（1. Jiangxi Animal Disease Prevention and Control Center，Nanchang，Jiangxi 330029；2. China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong 266032）

In order to estimate the prevalence of Pseudorabies（PR）in swine breeding herds in Jiangxi Province，and to identify the potential risk factors，a cross-sectional study was conducted. According to the sampling strategy，73 swine breeding farms were randomly selected and divided into 3 types based on their scales，then the selected serum samples were tested by PRV gE-ELISA kits. Meanwhile，a spatial distribution map was drawn in terms of the 73 detailed addresses，and a questionnaire survey was conducted to analyze the relevant risk factors. Firstly，variates screened from single factor analysis（P <0.2）were imported into multiple logistic regression model. Then by means of backward induction，the variates were chosen to carry out regression analysis. Results showed that in Jiangxi Province，the herd prevalence of PR was 28.63%（95%CI：18.26%～38.99%），while the rate at individual level was 9.37%（95%CI：8.98%～9.77%）. Besides，the infected farms distributed mainly in the middle area of Jiangxi province，including Shangrao，F(xiàn)uzhou，Yingtan and Yichun. Two risk factors associated PR infection were found，one was whether there were other swine farms within 3 km（OR=4.766，P=0.020），and the other was if the farmers had willing to eradicate PR（OR=0.054，P=0.014）.This study indicated that further training and propaganda about PR eradication for farmers should be strengthened，which would conducive to let them realize the importance and master professional techniques for PR prevention and control.

cross-sectional study；PR；sero-prevalence；risk factor；propaganda

S851.3

A

1005-944X（2017）04-0020-05

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.04.006

聯(lián)合國糧農(nóng)組織-中國獸醫(yī)現(xiàn)場流行病學(xué)培訓(xùn)項(xiàng)目；科技部科技基礎(chǔ)性工作專項(xiàng)（2012FY111000）