張寧 劉德清 洪紹峰 郭旋 梁強(qiáng) 藍(lán)常力 蔣振南 吳志君

摘要：【目的】對比分析豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（PRRSV）陽性血清馴化和疫苗免疫兩種方式對豬場后備母豬免疫抗體水平及繁殖性能的影響，為規(guī)模養(yǎng)殖場選擇適宜免疫方式防控豬繁殖與呼吸綜合癥（PRRS）提供參考依據(jù)。【方法】以血清馴化和疫苗免疫兩種方式分別免疫90日齡后備母豬，1個(gè)月后經(jīng)前腔靜脈竇采血檢測抗體水平，同時(shí)測定后備母豬第一胎的受胎率、分娩率、胎產(chǎn)仔數(shù)、胎產(chǎn)活仔數(shù)、產(chǎn)弱仔率、產(chǎn)死胎率、產(chǎn)畸形及木乃伊率等繁殖性能指標(biāo)?！窘Y(jié)果】血清馴化與疫苗免疫后備母豬的血清抗體陽性率分別為100.00%和99.30%，但疫苗免疫后備母豬的抗體水平離散度相對較低，且較集中。血清馴化與疫苗免疫后備母豬第一胎的受胎率（96.79% vs 97.11%）、分娩率（88.55% vs 88.96%）、胎產(chǎn)仔數(shù)（11.26 vs 11.41）、胎產(chǎn)活仔數(shù)（10.3 vs 10.5）、產(chǎn)弱仔率（3.61% vs 3.32%）、產(chǎn)死胎率（2.96% vs 2.99%）、產(chǎn)畸形及木乃伊率（4.35% vs 4.13%）相近，二者差異不顯著（P>0.05），但均優(yōu)于對照后備母豬。【結(jié)論】在確定養(yǎng)豬場內(nèi)只流行一種血清型PRRSV時(shí)，可采用血清馴化替代疫苗免疫防控PRRS，除了能有效提高后備母豬的繁殖性能外，還具有成本低廉、操作簡單的特點(diǎn)。

關(guān)鍵詞： 后備母豬；豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（PRRSV）；血清馴化；疫苗免疫；抗體水平；繁殖性能

中圖分類號： S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：2095-1191（2017）06-1113-06

Abstract：【Objective】Effects of porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV） positive serum acclimation and vaccine immunization on immune antibody level and reproductive performance of gilts were analyzed， in order to provide reference for large-scale farms to select the proper immunity method to control porcine reproductive and respiratory syndrome（PRRS）. 【Method】Gilts of 90 days were immunized with serum acclimation and vaccine immunization respectively. Blood samples were obtained from vena cava anterior to detect antibody level. Meanwhile， indexes of reproductive performance were measured， including conception rate of the firstborn， delivery rate， litter size， number born alive of litter， weak piglet rate， stillbirth rate， deformity and mummy rate of gilts. 【Result】Serum antibody positive rates of serum domestication group and vaccine immunization group reached 100.00% and 99.30% respectively. Antibody level dispersion of vaccine immunization group was low and its antibody level was concentrated. Conception rate of the firstborn（96.79% vs 97.11%）， delivery rate（88.55% vs 88.96%）， litter size（11.26 vs 11.41）， number born alive of litter（10.3 vs 10.5）， weak piglet rate（3.61% vs 3.32%）， stillbirth rate（2.96% vs 2.99%）， deformity and mummy rate（4.35% vs 4.13%） of gilts in serum domestication group and vaccine immunization group were close. The difference between the two groups was insignificant（P>0.05）. The performances of the two groups were both better than that of control. 【Conclusion】It is suitable way to immune pig with serum acclimation to prevent and control PRRSV when there is only a serotype PPRSV prevalent in pig farm. This vaccine method not only enhances the reproduction performance of gilts， but also costs less and operates easily.

Key words： gilt； porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）； serum acclimation； vaccine immunization； antibody level； reproductive performance

0 引言

【研究意義】豬繁殖與呼吸綜合癥（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是一種嚴(yán)重?fù)p害豬繁殖與呼吸系統(tǒng)的急性病毒性傳染病，由豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起，可導(dǎo)致成年母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等繁殖障礙及各年齡段豬群（尤其是仔豬）的呼吸系統(tǒng)疾病（Albina，1997；孟春花等，2015；張華等，2016）。PRRS于1987年在美國北卡羅來納州首次被發(fā)現(xiàn)（Keffaber，1989），之后蔓延至整個(gè)北美洲及歐洲。1991年初PRRS在我國臺灣首次暴發(fā)（代軍等，2014），此后我國養(yǎng)豬業(yè)一直受PRRS困擾，尤其在2006年我國多?。▍^(qū)、市）豬群暴發(fā)以體溫高熱、皮膚發(fā)紺、呼吸困難及高發(fā)病率和死亡率為癥狀的豬高熱?。═ian et al.，2007；楊漢春，2007），給養(yǎng)豬業(yè)造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，急需探索出能有效防控PRRS的技術(shù)措施?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前，市場上尚無治療PRRS的特效藥物，只能采取疫苗免疫及生物安全體系等措施進(jìn)行防控。常用的PRRS疫苗類型有滅活疫苗和弱毒疫苗，PRRS弱毒疫苗能有效誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生體液免疫及細(xì)胞免疫，其效果優(yōu)于滅活疫苗。弱毒疫苗免疫可在很大程度上預(yù)防同源PRRSV毒株的感染，保護(hù)感染豬群不再發(fā)病，但對異源毒株的保護(hù)率低下（張鶴，2015；張華等，2016）。此外，部分豬場開始采用血清馴化方式防控PRRS。Fano等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)血清馴化的后備母豬病情穩(wěn)定，按計(jì)劃實(shí)施一年后的豬群PRRSV陽性率顯著下降，且生產(chǎn)的斷奶仔豬均呈PRRSV陰性。楊玉堅(jiān)和樊福好（2011）將采自發(fā)燒保育豬的PRRSV陽性血清肌肉接種后備種豬進(jìn)行馴化，馴化后的豬群健康指數(shù)雖降低，但仍維持在100以上，表明血清馴化發(fā)揮了較好的免疫效果。張軍等（2012）認(rèn)為，在我國現(xiàn)有的養(yǎng)豬條件下要實(shí)現(xiàn)PRRS凈化十分困難，而使用血清馴化控制PRRSV在豬群中穩(wěn)定感染是當(dāng)前豬場防控PRRS的最實(shí)用方案。曹玉美等（2013）對兩個(gè)規(guī)模商品種豬場進(jìn)行血清馴化，發(fā)現(xiàn)馴化一年后母豬的分娩率和產(chǎn)活胎數(shù)明顯上升，且豬群中的PRRS抗體水平相對穩(wěn)定，說明血清馴化對PRRS防控起到一定作用；隨后又通過仔豬攻毒試驗(yàn)證實(shí)，20個(gè)PRRSV拷貝數(shù)即可感染仔豬，為確定血清馴化措施中的血清病毒含量提供了參考（曹玉美等，2016）。曾昭芙等（2015）研究表明，血清馴化能在很大程度上提高母豬的生產(chǎn)性能。【本研究切入點(diǎn)】目前，PRRSV已普遍存在我國各養(yǎng)豬區(qū)域，因其具有遺傳多變性，疫苗毒株在豬體內(nèi)經(jīng)反復(fù)復(fù)制而極易出現(xiàn)基因變異的疫苗樣毒株，甚至出現(xiàn)毒力返強(qiáng)，導(dǎo)致疫苗免疫效果不佳。為了規(guī)避疫苗免疫的弊端，臨床上通常采用血清馴化方式以求穩(wěn)定豬群病情發(fā)展及停止排毒，從而達(dá)到防控PRRS的目的?！緮M解決的關(guān)鍵問題】對比分析血清馴化和疫苗免疫兩種方式對豬場后備母豬免疫抗體水平及繁殖性能的影響，為規(guī)模養(yǎng)殖場選擇適宜免疫方式防控PRRS提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

后備母豬由廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)金光有限公司提供，體重45～50 kg/頭，共7個(gè)批次（血清馴化組3批，疫苗免疫組3批，對照組1批），每批次約150頭。供試疫苗為勃林格公司生產(chǎn)的Ingelvac■ PRRS MLV疫苗（245-E50）；供試血清為廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)金光有限公司養(yǎng)豬場保存的PRRSV陽性血清，其測序結(jié)果顯示為VR-2332-like亞型，且該豬場只流行一種血清型毒株，適合進(jìn)行血清馴化。馴化血清稀釋度1∶120。PRRSV抗體X3檢測試劑盒購自IDEXX公司，檢測結(jié)果以計(jì)算樣品與陽性對照的比值（S/P）進(jìn)行判定：當(dāng)S/P低于0.50，判定為PRRSV抗體陰性；S/P大于或等于0.50，則判定為PRRSV抗體陽性。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 血清馴化后備母豬 將含PRRSV的血清按1∶120比例用生理鹽水稀釋，加入抗生素使其質(zhì)量濃度達(dá)0.01 g/mL，于后備母豬90日齡時(shí)經(jīng)左右兩邊鼻孔各噴1.0 mL，2 d后重復(fù)感染1次，第2次感染1個(gè)月后于前腔靜脈竇采血。制備血清：用一次性注射器于前腔靜脈竇無菌采集血液，然后置于37 ℃溫箱中靜置30 min以上，待血液完全凝固后3000 r/min離心8 min，取上清液，分裝，-80 ℃保存或直接用于血清抗體檢測。后備母豬感染PRRSV后3～5 d，密切關(guān)注豬群體溫及臨床表現(xiàn)，對發(fā)燒嚴(yán)重、精神狀態(tài)較差的母豬采集血液進(jìn)行病原檢測，并給予治療。

1. 2. 2 疫苗免疫后備母豬 按照PRRS MLV疫苗說明進(jìn)行免疫，于后備母豬90日齡時(shí)肌注1頭份PRRS MLV疫苗，110日齡時(shí)進(jìn)行加強(qiáng)免疫（二免）。二免后1個(gè)月于前腔靜脈竇采血，析出血清用于血清抗體檢測。

1. 3 繁殖性能指標(biāo)測定

繁殖性能指標(biāo)包括后備母豬第一胎的受胎率、分娩率、胎產(chǎn)仔數(shù)、胎產(chǎn)活仔數(shù)、產(chǎn)弱仔率、產(chǎn)死胎率、產(chǎn)畸形及木乃伊率等生產(chǎn)成績。

1. 4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2007進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，再以SPSS 17.0進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2. 1 豬群馴化結(jié)果

經(jīng)血清馴化或疫苗免疫后，篩選健康度及體況良好的后備母豬進(jìn)行采血，從血清抗體檢測平均合格率來看，血清馴化后備母豬的合格率為98.07%，疫苗免疫后備母豬的合格率為97.62%（表1），兩種處理方法的血清抗體檢測合格率差異不顯著（P<0.05，下同）。

2. 2 后備母豬血清抗體檢測結(jié)果

由表2可看出，血清馴化后備母豬抗體陽性率為100.00%，疫苗免疫后備母豬為99.30%，二者差異不顯著。在實(shí)際生產(chǎn)中以S/P>0.50為合格，得知血清馴化和疫苗免疫后備母豬的平均合格率分別為98.0%和97.6%。血清馴化后備母豬的平均S/P均在2.00以上，而疫苗免疫后備母豬的在1.30～1.50，且血清馴化后備母豬的S/P均極顯著高于疫苗免疫后備母豬（P<0.01）。血清馴化后備母豬的抗體水平離散度為32.6%～

34.7%，平均為33.9%；疫苗免疫后備母豬的抗體水平離散度為26.3%～32.7%，平均為30.5%，即疫苗免疫組的S/P離散度相對較低，且較集中。

2. 3 后備母豬受胎率

由表4可看出，血清馴化后備母豬的平均受胎率為96.79%，疫苗免疫后備母豬為97.11%，二者差異不顯著，但均高于對照后備母豬（94.67%），說明無論采取血清馴化還是疫苗免疫均能有效提高后備母豬的受胎率。

2. 4 后備母豬的分娩率

由表5可看出，血清馴化后備母豬的平均分娩率為88.55%，疫苗免疫后備母豬為88.96%，二者差異不顯著，但均高于對照后備母豬（80.28%），說明采取血清馴化和疫苗免疫均可有效提高后備母豬分娩率。

2. 5 后備母豬平均胎產(chǎn)仔數(shù)

由表6可看出，血清馴化后備母豬的平均胎產(chǎn)仔數(shù)11.26頭，疫苗免疫后備母豬為11.41頭，二者差異不顯著，但明顯高于對照后備母豬（10.40頭），說明采取血清馴化和疫苗免疫均可有效提高后備母豬的胎產(chǎn)仔數(shù)。

2. 6 后備母豬胎產(chǎn)活仔數(shù)

由表7可看出，血清馴化后備母豬的平均胎產(chǎn)活仔數(shù)為10.33頭，疫苗免疫后備母豬為10.47頭，二者差異不顯著，但明顯高于對照后備母豬（9.20頭），說明采取血清馴化和疫苗免疫均可有效提高后備母豬的胎產(chǎn)活仔數(shù)。

2. 7 后備母豬產(chǎn)弱仔率

由表8可看出，血清馴化后備母豬的平均產(chǎn)弱仔率為3.61%，疫苗免疫后備母豬為3.32%，二者明顯低于對照后備母豬（6.21%），說明采取血清馴化和疫苗免疫均可有效降低后備母豬的產(chǎn)弱仔率。

2. 8 后備母豬產(chǎn)死胎率

由表9可看出，血清馴化后備母豬的平均產(chǎn)死胎率為2.96%，疫苗免疫后備母豬為2.99%，二者差異不顯著，但明顯低于對照后備母豬（4.89%），說明采取血清馴化和疫苗免疫均可有效降低后備母豬的產(chǎn)死胎率。

2. 9 后備母豬產(chǎn)畸形及木乃伊率

由表10可看出，血清馴化后備母豬的平均產(chǎn)畸形及木乃伊率為4.35%，疫苗免疫后備母豬為4.13%，二者明顯低于對照后備母豬（7.00%），說明采取血清馴化和疫苗免疫均可有效降低后備母豬的產(chǎn)畸形及木乃伊率。

3 討論

PRRS是影響母豬健康的主要疫病之一，PRRSV可通過血液循環(huán)感染胎豬，從而導(dǎo)致妊娠后期母豬發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或產(chǎn)木乃伊胎等（Albina，1997；孟春花等，2015；張華等，2016）。本研究結(jié)果表明，以血清馴化和疫苗免疫處理后備母豬后，其血清抗體陽性率分別為100.00%和99.30%；血清馴化后備母豬的S/P普遍較疫苗免疫后備母豬的高，但疫苗免疫后備母豬的S/P離散度相對較低，且較集中。這與周慶華和余興龍（2010）的研究結(jié)果基本一致，即血清馴化能縮短種豬群PRRSV的持續(xù)感染時(shí)間，使種豬群在較短時(shí)間內(nèi)獲得較高的抗體水平。本研究還對后備母豬的第一胎生產(chǎn)成績進(jìn)行觀察比較，結(jié)果表明，后備母豬經(jīng)血清馴化和疫苗免疫均可提高其受胎率、分娩率、胎產(chǎn)活仔數(shù)，有效降低產(chǎn)弱仔率、產(chǎn)死胎率、產(chǎn)畸形及木乃伊率，二者對后備母豬繁殖性能的影響差異不明顯，與曹玉美等（2013）的研究結(jié)果一致，血清馴化后種豬群的分娩率、窩產(chǎn)活仔數(shù)等繁殖性能指標(biāo)穩(wěn)定在較高水平，且所產(chǎn)仔豬在產(chǎn)房、保育階段處于相對穩(wěn)定的狀態(tài)。

疫苗免疫的安全性較高，目前國內(nèi)外有多種血清型疫苗可供選擇，也就要求養(yǎng)殖場在選擇PRRSV疫苗進(jìn)行免疫時(shí)，需選擇與本養(yǎng)殖場流行毒株同源性高的疫苗進(jìn)行免疫，且免疫后要定期監(jiān)測豬群抗體水平，不宜頻繁變換使用不同血清型毒株的疫苗（周緒斌等，2016）。與疫苗免疫相比，血清馴化能節(jié)約疫苗費(fèi)用，操作簡單，但馴化血清的采集和保存必須經(jīng)嚴(yán)格檢測，確定無其他病原菌，且要科學(xué)控制血清中的病毒含量，能引起良好的免疫應(yīng)答，又要防止病毒量過大帶來感染發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。尤其選擇PRRSV陽性血清進(jìn)行馴化時(shí)，首先要確定養(yǎng)豬場內(nèi)只流行一種血清型毒株，若存在多種血清型毒株，不但馴化無效，反而引起混合感染，造成更嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失；其次要把握好血清馴化的最佳時(shí)機(jī)，并確定豬場內(nèi)無其他病原感染；最后要觀察留意血清馴化豬群的日常表現(xiàn)，定期監(jiān)測豬群抗體水平，特別是PRRSV抗體水平下降或突然上升時(shí)要及時(shí)采取措施，防止PRRS暴發(fā)。

4 結(jié)論

在確定養(yǎng)豬場內(nèi)只流行一種血清型PRRSV時(shí)，可采用血清馴化替代疫苗免疫防控PRRS，除了能有效提高后備母豬的繁殖性能外，還具有成本低廉、操作簡單的特點(diǎn)。

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（責(zé)任編輯 蘭宗寶）