魏鳳靜 （遼寧省綏中縣畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)察所 125200）

文獻(xiàn)綜述

關(guān)于“瘦肉精”分類、危害及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的探討

魏鳳靜 （遼寧省綏中縣畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)察所 125200）

“瘦肉精”是一類腎上腺素受體激動(dòng)劑的統(tǒng)稱，在我國被嚴(yán)格禁止應(yīng)用于食品動(dòng)物中。本文對(duì)“瘦肉精”的分類、作用機(jī)理、中毒危害等做了梳理和歸納，并針對(duì)其檢測(cè)手段和標(biāo)準(zhǔn)做了比較和探討，以期為瘦肉精的有效監(jiān)管提供參考和借鑒。

1 “瘦肉精”的分類

“瘦肉精”不是指某一種特定的藥物，而是一類具有促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，抑制脂肪沉積的苯乙醇胺類化合物的統(tǒng)稱。它們同屬于腎上腺素受體(主要β受體)激動(dòng)劑類物質(zhì)，按結(jié)構(gòu)通?？煞譃楸桨沸汀⒈椒有秃捅蕉有偷热箢?。市場(chǎng)上常見的“瘦肉精”主要是鹽酸克侖特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇等三種[1,2]。2001～2002年，農(nóng)業(yè)部等國家部委先后下發(fā)了第176號(hào)公告、第193號(hào)公告和第1519號(hào)條例等禁止使用β激動(dòng)劑類藥物作為獸藥和飼料添加劑[3,4,5]。

表1 “瘦肉精”的主要分類

除了上述16種“瘦肉精”外，近年來又出現(xiàn)了一些新型“瘦肉精”物質(zhì)。比如可樂定(Clonidine)、巴氯芬(Baclofen)、賽庚啶(Cyproheptadine)等[5]。

2 “瘦肉精”的作用機(jī)理及其危害

2.1 作用機(jī)理 以鹽酸克侖特羅為例，它與β-腎上腺素受體結(jié)合，形成激動(dòng)劑受體復(fù)合物，復(fù)合物激活G5蛋白，G5蛋白的α亞基隨后激活腺苷酸環(huán)化酶，由該酶產(chǎn)生的環(huán)腺苷酸(cAMP)是一種重要的胞內(nèi)信使分子。環(huán)腺苷酸(cAMP)產(chǎn)生效應(yīng)的機(jī)制是通過結(jié)合到蛋白激酶k的調(diào)節(jié)亞基，以釋放該酶的催化亞基，使其磷酸化一系列的胞內(nèi)蛋白。其中的部分蛋白是酶，在被磷酸化時(shí)激活。環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)被蛋白激酶A磷酸化，結(jié)合到一個(gè)基因調(diào)控部位的cAMP應(yīng)答元件上，并激活該基因的轉(zhuǎn)錄，磷酸化增強(qiáng)了CREB的轉(zhuǎn)錄活性，這也是在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，β-腎上腺受體激動(dòng)劑介導(dǎo)的很多基因轉(zhuǎn)錄的機(jī)制，其他一些酶的活性在磷酸化時(shí)受到抑制[6,7]。

2.2 危害 （1）鹽酸克倫特羅急性中毒主要是由于激動(dòng)心臟和骨骼肌的β2腎上腺素受體所致。若短時(shí)間攝入過量的克倫特羅可引起急性中毒，在臨床上主要表現(xiàn)為心悸、胸悶、頭暈頭痛、惡心嘔吐、頸背部肌肉酸痛、血壓升高。心電圖顯示竇性心動(dòng)過速，陣發(fā)性室上性心動(dòng)過速、竇房傳導(dǎo)阻滯、早搏等。實(shí)驗(yàn)室檢查血象增高、心肌酶學(xué)登高、血糖增高、血鉀降低、肌酐增高、尿素氮增高等[8]。（2）鹽酸克侖特羅可作用于多種靶器官，過量且長(zhǎng)時(shí)間使用會(huì)對(duì)器官造成慢性毒性。小鼠染毒30d，解剖發(fā)現(xiàn)其右心室擴(kuò)張，心臟外形呈卵圓形。心尖鈍圓，心壁變薄而柔軟，心臟內(nèi)積有多量的血液，切開心臟后心壁自行塌陷，心臟組織形態(tài)出現(xiàn)了明顯的變化[9]。Femmer等給予麻醉的狗連續(xù)靜脈注射克倫特羅12.5μg/kg劑量，心率增加18%，血壓升高44%，增加心臟容積43%，降低外周阻力30%，心肌在顯微鏡下有小損傷，此損傷非劑量依賴性，全部定位于左心室乳頭狀肌[10]。李明禎等在研究克倫特羅對(duì)小鼠的肝臟損傷時(shí)發(fā)現(xiàn)，在染毒30d后可觀察到高劑量組小鼠體內(nèi)MDA明顯升高，而SOD和GSH-PX活力出現(xiàn)明顯降低。而谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)出現(xiàn)明顯上升[11]。（3）鹽酸克倫特羅對(duì)腎臟的毒性主要表現(xiàn)在高劑量能使腎臟器系數(shù)發(fā)生改變。同時(shí)也有實(shí)驗(yàn)表明，長(zhǎng)時(shí)間染毒的大鼠其腎上腺皮質(zhì)激素細(xì)胞會(huì)增生，說明長(zhǎng)期服用可鹽酸克侖特羅會(huì)導(dǎo)致腎上腺分泌過度，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不利影響。Spencer等對(duì)綿羊的實(shí)驗(yàn)表明鹽酸克侖特羅對(duì)抗體的產(chǎn)生有抑制作用，在一定程度上降低了免疫力。作為重要的免疫器官，胸腺和脾臟在克侖特羅作用下也會(huì)出現(xiàn)一系列的病理變化。此外，鹽酸克侖特羅對(duì)大鼠胚胎枝芽細(xì)胞的分化也有一定的抑制作用，顯示出其細(xì)胞毒性[12]。

3 檢測(cè)方法及其標(biāo)準(zhǔn)限值

3.1 檢測(cè)方法 （1）根據(jù)監(jiān)測(cè)對(duì)象和代謝規(guī)律的不同，“瘦肉精”檢測(cè)通常采用尿液檢測(cè)，近年來，反芻類動(dòng)物中毛發(fā)檢測(cè)也成為研究熱點(diǎn)[13]。（2）根據(jù)檢測(cè)原理的不同，目前我國的“瘦肉精”檢測(cè)技術(shù)主要包括了快速篩查技術(shù)和確證分析技術(shù)?？焖俸Y查技術(shù)主要利用免疫學(xué)分析原理，通過膠體金免疫技術(shù)和酶聯(lián)免疫技術(shù)(ELISA)，產(chǎn)品對(duì)應(yīng)為快速試紙檢測(cè)卡和試劑盒?？捎糜凇笆萑饩钡亩ㄐ?半定量檢測(cè)篩查。檢測(cè)限值一般在納克(ng)數(shù)量級(jí)。其優(yōu)點(diǎn)是價(jià)格相對(duì)低廉，快速便捷，適于大規(guī)模的樣本初篩。對(duì)檢測(cè)出的陽性樣本仍需實(shí)驗(yàn)室確證才可以作為執(zhí)法依據(jù)。（3）確證分析技術(shù)主要包括了薄層層析(TLC)、高壓液相色譜(HPLC)、高壓液相色譜/二極管陳列(HPLC/ PDA)、高壓液相色譜/熒光(HPLC/FLU)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)、氣相色譜-傅里葉紅外聯(lián)用(GC-FTIP)和毛細(xì)管電泳等方法。優(yōu)點(diǎn)是準(zhǔn)確度、靈敏度高，但需要復(fù)雜昂貴的檢測(cè)設(shè)備，對(duì)其廣泛應(yīng)用有一定的限制[14]。

表2 我國“瘦肉精”檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)限值

3.2 標(biāo)準(zhǔn)限值 （1）農(nóng)業(yè)部在第176號(hào)公告、第193號(hào)公告、第235號(hào)公告中明確指出鹽酸克侖特羅、(硫酸)沙丁胺醇、萊克多巴胺等禁止在飼料和動(dòng)物飲用水中使用，在所有可食用組織中不得檢出，LC-MS方法中檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)限值為≤0.5μg/L；膠體金試紙條可從農(nóng)業(yè)部備案產(chǎn)品中或者各省組織的比對(duì)試驗(yàn)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品中選擇。假陽性率應(yīng)≤5%，假陰性率為0。鹽酸克侖特羅和萊克多巴胺檢測(cè)限值應(yīng)≤3μg/L，沙丁胺醇檢測(cè)限值應(yīng)≤5μg/L；酶聯(lián)免疫試劑盒應(yīng)符合農(nóng)業(yè)部《獸藥殘留酶聯(lián)免疫試劑(盒)備案參考評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)》的要求。假陽性率應(yīng)≤5%，假陰性率為0。鹽酸克侖特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇檢測(cè)限值應(yīng)≤1μg/kg。（2）在國外，歐盟早在1996年通過委員會(huì)指令96/23/EC中，對(duì)鹽酸克侖特羅等進(jìn)行了嚴(yán)格管制，禁用于食用動(dòng)物。對(duì)于β2類激動(dòng)劑用于牲畜支氣管痙攣、抑制子宮收縮等要進(jìn)行登記使用，并嚴(yán)格控制用量。根據(jù)86/469/EEC指令，歐盟成員國均有義務(wù)對(duì)動(dòng)物及肉制品中合法及非法獸藥(添加劑)殘留等進(jìn)行管控。美國食品和藥物管理局(FDA)法規(guī)21CFR530.41規(guī)定，克侖特羅為食品動(dòng)物禁用物質(zhì)。其只能用于某些動(dòng)物疾病的治療，并且嚴(yán)格指定了克侖特羅原料供應(yīng)商，其他購買方式和途徑均視為違法。日本等國對(duì)鹽酸克侖特羅的檢出限定值定為0.05μg/kg[15]。

4 討論

（1）“瘦肉精”對(duì)于我國養(yǎng)殖業(yè)來說并不陌生，部分養(yǎng)殖戶出于利益和投機(jī)，將其非法飼喂于食品動(dòng)物，造成了在動(dòng)物肌體和人體內(nèi)的殘留和蓄積損傷。近幾年來，群發(fā)性和單發(fā)性的“瘦肉精”中毒事件更是屢見報(bào)端。中國、美國、日本、歐盟等國家對(duì)克侖特羅等“瘦肉精”已經(jīng)亮起了紅燈。（2）本文以“瘦肉精”的定義入手，從結(jié)構(gòu)上對(duì)其做了分類，并歸納總結(jié)了近年來新興的“瘦肉精”類物質(zhì)。以實(shí)際生產(chǎn)中最為常用的、價(jià)格最便宜的鹽酸克侖特羅為例，從分子層面和表觀癥狀上對(duì)其作用機(jī)理和危害做了詳述，使人們知其然和所以然。（3）在檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)上，近年來我國已經(jīng)出臺(tái)了相應(yīng)條例對(duì)飼料中、肉制品中、尿液中的“瘦肉精”殘留檢測(cè)限值提出了明確規(guī)定。但應(yīng)該清晰地認(rèn)識(shí)到與發(fā)達(dá)國家標(biāo)準(zhǔn)差異和不同。以克侖特羅為例，我國檢出限值定為0.5μg/kg，而日本為0.05μg/kg，較中國嚴(yán)格10倍，檢測(cè)能力的巨大差距和實(shí)際殘留的高風(fēng)險(xiǎn)對(duì)我國的進(jìn)出口肉類產(chǎn)品都造成了一定壓力和隱患，也為下一步技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)的革新提供了參考。（4）檢測(cè)手段上，應(yīng)該清晰地認(rèn)識(shí)到快速篩查和確證分析的利弊，根據(jù)實(shí)際情況，選擇合適的檢測(cè)手段，以滿足工作和實(shí)際需求。需要強(qiáng)調(diào)的是，目前“瘦肉精”快檢卡生產(chǎn)廠家眾多，而在農(nóng)業(yè)部備案的生產(chǎn)廠家僅約為30家。鹽酸克侖特羅檢測(cè)卡種類可達(dá)180余種，而經(jīng)農(nóng)業(yè)部備案的CL快檢卡只有10余種。所以在監(jiān)管采購的選擇上要注意甄別。

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