駱成玉 范克民 葛沙沙 崔智淼
(首都醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)?fù)興醫(yī)院乳腺微創(chuàng)中心,北京 100038)
·臨床研究 ·
血管細(xì)胞黏附分子-1評(píng)估乳腺癌乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃手術(shù)血液轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的臨床研究
駱成玉*范克民 葛沙沙 崔智淼
(首都醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)?fù)興醫(yī)院乳腺微創(chuàng)中心,北京 100038)
目的 佐證乳腺癌乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃手術(shù)在腫瘤學(xué)方面的安全性。方法 采用隨機(jī)前瞻臨床對(duì)照研究,將2014年1月1日至2015年7月31日間于首都醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)?fù)興醫(yī)院乳腺微創(chuàng)中心的治療的104例乳腺癌病人,利用抽簽法隨機(jī)分成乳腔鏡清掃(乳腔鏡組)和常規(guī)腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)(常規(guī)組),各52例。于術(shù)前、術(shù)后1、3、5 d抽取病人血清標(biāo)本。采用ELISA方法,分析2組病人血清中血管細(xì)胞黏附分子(vascular cell adhesion molecular-1,VCAM-1)表達(dá)。 結(jié)果 常規(guī)組病人血清VCAM-1濃度手術(shù)后1、3、5 d分別為(51.74±1.37)ng/mL、(52.64±1.24)ng/mL、(52.22±1.29)ng/mL,較手術(shù)前(56.56±1.24)ng/mL顯著下降,乳腔鏡組病人血清VCAM-1濃度手術(shù)后1、3、5 d分別為(53.24±1.21)ng/mL、(52.07±1.34)ng/mL、(48.99±1.27)ng/mL,較手術(shù)前(58.66±0.95)ng/mL顯著下降。乳腔鏡組手術(shù)后血清VCAM-1濃度低于常規(guī)組(結(jié)果同上),但差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃手術(shù)后病人血清VCAM-1濃度變化與常規(guī)清掃差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,該手術(shù)并沒有顯示導(dǎo)致腫瘤血液轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的增加。
乳腺癌;乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃;細(xì)胞間黏附分子-1
血管細(xì)胞黏附分子(vascular cell adhesion molecular-1,VCAM-1)是一種作用較強(qiáng)的黏附分子,屬免疫球蛋白超家族,由細(xì)胞因子腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素-1等誘導(dǎo)產(chǎn)生,其主要分布在激活的內(nèi)皮細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞上,在正常細(xì)胞不表達(dá)或僅有微量表達(dá)。VCAM-1與腫瘤的生物學(xué)行為有關(guān),且實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移與腫瘤中微血管密度有關(guān)。曹華祥等[1-2]已證實(shí)VCAM-1不僅在乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞上高表達(dá),在乳腺癌細(xì)胞膜上也有表達(dá),而且VCAM-1的表達(dá)強(qiáng)度、表達(dá)率與乳腺癌的血管的生成和轉(zhuǎn)移相關(guān),病人血清VCAM-1濃度與腫瘤組織在體內(nèi)的負(fù)荷多少呈正相關(guān)。據(jù)報(bào)道[3-5]采用脂肪抽吸術(shù)可完成乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃后,已有多個(gè)中心采用相同方法對(duì)該技術(shù)的可行性和安全性進(jìn)行了驗(yàn)證評(píng)價(jià)。研究[6-9]表明乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)(mastoscopic axillary lymph node dissection, MALND)的切除淋巴結(jié)個(gè)數(shù)、術(shù)后癥狀、引流時(shí)間、引流液量等指標(biāo),與常規(guī)開放性手術(shù)組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而長(zhǎng)期合并癥如上肢功能障礙、嚴(yán)重的疼痛、水腫以及與活動(dòng)有關(guān)的合并癥方面,乳腔鏡手術(shù)組比常規(guī)手術(shù)組明顯減少。郭美琴等[10]研究表明乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃手術(shù)和傳統(tǒng)手術(shù)對(duì)外周血潛伏腫瘤細(xì)胞的影響無(wú)差異,但目前MALND是否會(huì)導(dǎo)致血行微轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),尚無(wú)定論[11]。本課題擬通過(guò)檢測(cè)、比較104例女性乳腺癌病人手術(shù)前后外周靜脈血VCAM-1濃度,對(duì)比分析手術(shù)方式對(duì)VCAM-1的影響,以期進(jìn)一步評(píng)價(jià)乳腺癌乳腔鏡技術(shù)是否滿足外科腫瘤安全性原則。
1.1 研究對(duì)象
1)入選標(biāo)準(zhǔn):乳腺癌病理確診病人,年齡小于80歲、腋窩淋巴結(jié)經(jīng)術(shù)前臨床觸診或彩超檢查陰性或雖然腫大其直徑不超過(guò)1cm或經(jīng)過(guò)新輔助化學(xué)藥物治療后術(shù)前腋窩淋巴結(jié)達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)者。
2)排除標(biāo)準(zhǔn):合并有其他部位的惡性腫瘤病史、已存在引起患側(cè)上肢水腫的疾病、既往有患側(cè)腋窩手術(shù)史者。
3)分組方法:本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò),嚴(yán)格遵循《赫爾辛基宣言》的精神,所有入組者均被詳細(xì)告知研究細(xì)節(jié)并簽署書面知情同意書。收集2014年1月1日至2015年7月31日在首都醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)?fù)興醫(yī)院收治的乳腺癌病人104例,應(yīng)用抽簽法隨機(jī)分組,分為2組:乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃組(乳腔鏡組,52例)和常規(guī)腋窩淋巴結(jié)清掃組(常規(guī)組,52例)。
4)臨床資料:①性別:104例病人均為女性,無(wú)差異;②年齡:乳腔鏡組中位年齡 51.73(32~76)歲,常規(guī)組中位年齡 49.46(33~72)歲,2組病人年齡相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);③腫瘤分期:乳腔鏡組Ⅰ期占57.69%(30/52),Ⅱ期占34.62%(18/52)、Ⅲ期占7.69%(4/52),常規(guī)組Ⅰ期占 53.85%(28/52)、Ⅱ期占34.62%(18/52)、Ⅲ期占11.53%(6/52),2組病人腫瘤分期相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);④病理學(xué)類型:乳腔鏡組浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌90.38%(47/52),其他占 9.62%(5/52);常規(guī)組浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌84.62%(44/52),其他占 15.38%(8/52);2組病人病理學(xué)類型相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見表1。
表1 乳腔鏡組與常規(guī)組術(shù)前資料比較
1.2 手術(shù)方法
1.2.1 常規(guī)組
按照傳統(tǒng)開放手術(shù)方式完成乳腺切除手術(shù)和腋窩淋巴結(jié)清掃(conventional axillary lymph node dissection, CALND)。
1.2.2 乳腔鏡組
手術(shù)順序是先進(jìn)行腋窩脂肪溶解抽吸MALND,再進(jìn)行乳腺切除手術(shù)。MALND方法,簡(jiǎn)述如下:1)配制脂肪溶解液:0.9%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))氯化鈉注射液 200~250 mL、雙蒸水(或蒸餾水)200~250 mL、2%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))利多卡因20 mL和0.5~1 mg腎上腺素的混合液。2)手術(shù)步驟:①腋窩脂肪抽吸:全身麻醉后于腋窩多點(diǎn)、分層次注入脂肪溶解液。約10 min后,從腋窩下方腋中線乳頭水平上方戳孔,抽吸腋窩脂肪。②腋窩氣腔的建立:于脂肪抽吸孔置入10 mm trocar,注氣。③腋窩淋巴結(jié)清掃:從10 mm的trocar孔放入30°角10 mm腔鏡,在腋窩上部胸大肌外側(cè)緣和背闊肌前緣各切5 mm的trocar孔,旋入塑料螺紋trocar,插入短臂分離鉗和電剪,進(jìn)行分離。④剪斷形如蜘蛛網(wǎng)樣的纖維間隔,剔除附著在血管神經(jīng)間隔上的脂肪和淋巴結(jié),完成腋窩Ⅰ、Ⅱ或/加Ⅲ組淋巴結(jié)的切除。
2組手術(shù)均為同一組醫(yī)師實(shí)施。
1.3 標(biāo)本的采集、處理和保存
2組均于術(shù)前、術(shù)后1、3、5 d,分別采集外周靜脈血約5 mL。全部標(biāo)本均用肝素抗凝,離心后取上清液置于零下80 ℃冰箱保存,統(tǒng)一檢測(cè)。
1.4 實(shí)驗(yàn)方法
酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA),操作步驟按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。
向孔內(nèi)加入100 μL的稀釋好的樣品及標(biāo)準(zhǔn)品,室溫孵育2.5 h;接著注入100 μL生物素標(biāo)記的抗VCAM-1抗體,室溫下放置1 h;然后加入100 μL HRP標(biāo)記的鏈霉親和素抗體,室溫下放置45 min;再加入100 μL的TMB底物反應(yīng)液,室溫下放置30 min;最后加入50 μL的終止液。溶液顏色應(yīng)該從藍(lán)色變成為黃色。輕輕拍板子,保證孔內(nèi)液體充分混勻在30 min內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值,波長(zhǎng)為450 nm,630 nm波長(zhǎng)吸光度值為參照。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值得到標(biāo)準(zhǔn)曲線y=8.537x-1.4037,R2=0.9947,從標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到稀釋樣品的值,再乘以4,得到每個(gè)樣品中VCAM-1蛋白濃度,分布符合正態(tài)分布。
104例入組本研究的乳腺癌病人中,常規(guī)組手術(shù)后1、3、5 d分別較手術(shù)前VCAM-1濃度均明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);乳腔鏡組手術(shù)后1、3、5 d分別較手術(shù)前VCAM-1濃度均明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。乳腔鏡組術(shù)前、術(shù)后1、3、5 d VCAM-1濃度均分別低于常規(guī)組,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);采用重復(fù)測(cè)量方差分析的組間比較平衡時(shí)間對(duì)組間對(duì)比的影響后,差異仍無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),詳見表2。
表2 乳腔鏡組術(shù)前、術(shù)后1、3、5 d 細(xì)胞間黏附分子-1濃度與常規(guī)組比較
Fintergroup=0.031,Pintergroup=0.862,F(xiàn)time=0.031,Ptime=0.862;*P<0.05vspre-operation;#P<0.05vspre-operation;VCAM-1: vascular cell adhesion molecule-1; CLAND:conventional axillary lymph node dissection; MALND:mastoscopic axillary lymph node dissection.
隨著乳腔鏡微創(chuàng)技術(shù)的發(fā)展,乳腔鏡技術(shù)突飛猛進(jìn),尤其特別的是,乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃手術(shù)在保證腋窩淋巴結(jié)清掃效果前提下,進(jìn)一步降低了手術(shù)合并癥而獲得較好的上肢功能、較佳的胸部及腋窩美觀及其由此產(chǎn)生的乳房功能效果,其在乳腺癌外科治療中的作用和地位也逐漸清晰。乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)的清除腋窩淋巴結(jié)的徹底性已被認(rèn)可。MALND手術(shù)的切除淋巴結(jié)個(gè)數(shù)、術(shù)后癥狀、引流時(shí)間、引流液量等指標(biāo),與常規(guī)開放性手術(shù)組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而長(zhǎng)期合并癥如上肢功能障礙、嚴(yán)重的疼痛、水腫以及與活動(dòng)有關(guān)的合并癥乳腔鏡手術(shù)組比常規(guī)手術(shù)組明顯減少,達(dá)到了微創(chuàng)、功能和美觀三重優(yōu)勢(shì),改觀了腋窩淋巴結(jié)切除手術(shù)的面貌,達(dá)到了生理微創(chuàng)與心理微創(chuàng)兩方面目的。前期研究[12-14]已經(jīng)證實(shí)乳腺乳腔鏡手術(shù)對(duì)機(jī)體影響小,未出現(xiàn)嚴(yán)重合并癥,操作技術(shù)是安全的并逐漸成熟。
乳腺癌是一種全身疾病,乳腺癌在發(fā)病早期即可出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的全身擴(kuò)散,而血行播散是乳腺癌轉(zhuǎn)移的重要途徑,腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因可以通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)任何組織和器官。丁永斌等[15]檢測(cè)了52例乳腺癌病人手術(shù)前后外周血中VCAM-1數(shù)量,發(fā)現(xiàn)乳腺癌手術(shù)后病人血清中VCAM-1 的濃度顯著下降。嚴(yán)群等[16]對(duì)50例手術(shù)治療的乳腺癌病人VCAM-1的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組VCAM-1的陽(yáng)性表達(dá)率分別為70.00%和31. 75%,2組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),提示檢測(cè)VCMA-1的表達(dá)可作為乳腺癌的預(yù)后指標(biāo)。最新研究[17-18]證實(shí),VCAM-1與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。因此認(rèn)為VCAM可作為乳腺癌有無(wú)轉(zhuǎn)移及判斷預(yù)后的重要指標(biāo)。
乳腺癌乳腔鏡手術(shù)并沒有改變?nèi)橄侔┦中g(shù)的基本原則,但與傳統(tǒng)手術(shù)相比大大降低了其術(shù)后合并癥的發(fā)生率。傳統(tǒng)乳腺癌改良根治術(shù)的經(jīng)典手術(shù)程序是先切除乳房,然后行腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)。在進(jìn)行乳腺癌改良根治術(shù)切除乳房時(shí)分離皮瓣等操作會(huì)擠壓腫瘤,有可能增加了“手術(shù)性”腫瘤細(xì)胞經(jīng)血液和淋巴途徑轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)。而乳腔鏡乳腺癌手術(shù)先行乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù),阻斷了乳腺癌原發(fā)灶經(jīng)血液和淋巴途徑轉(zhuǎn)移的通道,然后切除乳房或進(jìn)行保留乳房的乳腺癌切除術(shù)。既往研究[19]顯示,乳腔鏡乳腺癌手術(shù)不增加淋巴結(jié)破損率。另外,乳腔鏡乳腺癌手術(shù)中的溶脂、吸脂等特殊操作程序也不增加腋窩淋巴結(jié)破損的數(shù)目和程度。
本研究通過(guò)檢測(cè)乳腺癌病人手術(shù)前后血清VCAM-1表達(dá)濃度,比較了乳腺癌不同手術(shù)方式致血行轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的差異,結(jié)果顯示乳腔鏡組及常規(guī)組手術(shù)后VCAM-1濃度均較手術(shù)前降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)乳腔鏡組術(shù)后VCAM-1濃度較常規(guī)組更低,雖然差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但某一程度上可以認(rèn)為乳腔鏡手術(shù)引起腫瘤細(xì)胞脫落入血的機(jī)會(huì)更小,至少可以說(shuō)明乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃手術(shù)并沒有導(dǎo)致腫瘤血液轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的增加。本研究最終間接說(shuō)明先行乳腔鏡腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù),阻斷腫瘤細(xì)胞經(jīng)血液或淋巴途徑轉(zhuǎn)移通道,然后切除乳房這一程序變化對(duì)于預(yù)防腫瘤血液轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的積極意義,在理論上也更符合腫瘤安全性原則。
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編輯 孫超淵
Clinical study on circulating VCAM-1 to evaluate the metastasis risk of mastoscopic axillary lymph node dissection
Luo Chengyu*, Fan Kemin, Ge Shasha, Cui Zhimiao
(BreastMinimallyInvasiveCenter,FuxingHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100038,China)
Objective To elucidate the change after mastoscopic axillary lymph node dissection (MALND) and conventional axillary lymph node dissection (CALND) and further prove the safety of MALND.Methods 104 breast cancer patients (January 1st, 2014 to July 31 st, 2015) from Breast Minimally Invasive Center, Fuxing Hospital,Capital Medical University who were undergone ALND were randomly divided into two groups:CALND(n=52) and MALND(n=52). The peripheral blood samples were respectively collected in pre-operation and 1,3,5 days after operation. The circulating levels of vascular cell adhesion molecular-1 (VCAM-1) in blood were analyzed by ELISA. Results Circulating VCAM-1 levels of CALND group on postoperative 1 d(51.74±1.37)ng/mL,3 d(52.64±1.24)ng/mL,5 d(52.22±1.29)ng/mL decreased significantly than that of pre-operation (56.56±1.24)ng/mL. And the figures of MALND group turn to be(53.24±1.21)ng/mL,(52.07±1.34)ng/mL,(48.99±1.27)ng/mL,(58.66±0.95) ng/mL. The VCAM-1 levels of MALND group is lower than that of CALND, but there was no statistical difference between the two groups (P>0.05). Conclusion The change of circulating VCAM-1of patients after MALND is same to that of CALND. There is no evidence that MALND increases the risk of blood dissemination of tumor.
breast cancer;mastoscopic axillary lymph node dissection(MALND);vascular cell adhesion molecular-1 (VCAM-1)
北京市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)“首都臨床特色應(yīng)用研究”(Z131107002213145)。This study was supported by Study of the Application of Clinical Characteristics of Capital (Z131107002213145).
時(shí)間:2017-04-13 20∶04
http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.3662.R.20170413.2004.052.html
10.3969/j.issn.1006-7795.2017.02.028]
R65
2016-12-26)
*Corresponding author, E-mail: luochengyu@163.com
首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)2017年2期