張宇，閆振鋒，陳剛

(河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院，石家莊 050000)

外泌體在肺癌微環(huán)境形成及診治中作用的研究進展

張宇，閆振鋒，陳剛

(河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院，石家莊 050000)

外泌體是由直徑為30～150 nm含有膜蛋白的脂質(zhì)雙分子層形成的空腔，包含蛋白、核酸、脂質(zhì)、碳水化合物等多種物質(zhì)。外泌體不僅在細(xì)胞間傳遞活性物質(zhì)，還參與細(xì)胞活動的調(diào)節(jié)，是肺癌微環(huán)境形成中的重要參與者，在免疫逃避、免疫應(yīng)答、成纖維細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞向成肌纖維細(xì)胞分化、肺癌上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化等多方面發(fā)揮作用。外泌體獲得途徑廣泛，顯示出較高的癌癥靶向治療的特異性，是一種具有極好前景的診治手段。

外泌體；肺癌；肺癌微環(huán)境；上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化；間充質(zhì)干細(xì)胞

1986年，Johnstone等對綿羊紅細(xì)胞上清液進行超速離心，發(fā)現(xiàn)了一種直徑30～150 nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體，即外泌體；他們提出外泌體由紅細(xì)胞分泌，紅細(xì)胞成熟后，通過外泌體將自身代謝廢物排出胞外。于是，外泌體與紅細(xì)胞的關(guān)系研究成為熱點。1996年，有研究者發(fā)現(xiàn)，EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞內(nèi)有一種富含主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類分子的腔室，腔室內(nèi)有一些囊泡狀結(jié)構(gòu)的小體，與紅細(xì)胞內(nèi)的外泌體形成和排出過程相似，這種囊泡被認(rèn)為是來源于B細(xì)胞的外泌體。此后研究者又發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、腸上皮細(xì)胞等都能分泌外泌體，外泌體的作用不僅僅是紅細(xì)胞處理組織廢物的運輸體，其在免疫調(diào)節(jié)、腫瘤轉(zhuǎn)移微環(huán)境形成等多個方面發(fā)揮作用，隨后引起多領(lǐng)域研究者的關(guān)注[1]。1889年P(guān)aget曾針對腫瘤的發(fā)生機制提出了種子-土壤假說，一百多年來，在腫瘤轉(zhuǎn)移機制研究方面并未取得突破性進展。2015年，Hoshino等[2]發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞釋放了數(shù)百萬攜帶著它們蛋白質(zhì)和遺傳物質(zhì)的外泌體到擬轉(zhuǎn)移的目的器官，并觸發(fā)了這些器官中必要的分子反應(yīng)，如炎癥、血管形成等，使腫瘤細(xì)胞到達后可以增殖。這一理論的提出，支持了Paget的“種子與土壤”學(xué)說，推進了對腫瘤轉(zhuǎn)移機制的研究，提示外泌體是腫瘤微環(huán)境形成中的重要載體。現(xiàn)就外泌體在肺癌微環(huán)境形成及診治中的作用研究進展情況綜述如下。

1 外泌體特性及其內(nèi)容物

外泌體直徑為30～150 nm，在蔗糖密度梯度溶液中密度為1.13～1.21 g/mL范圍富集。外泌體由含有膜蛋白的脂質(zhì)雙分子層形成空腔，其內(nèi)含有蛋白、脂質(zhì)、核酸等物質(zhì)。外泌體存在于血液、唾液、尿液、母乳等體液中，可通過生理屏障[3]，是活細(xì)胞分泌的來源于晚期核內(nèi)體(多囊泡體)的膜性囊泡。一般情況下細(xì)胞內(nèi)較大的微囊泡是從質(zhì)膜上直接分離而來的，而外泌體則來源于細(xì)胞內(nèi)的核內(nèi)小體，通過胞外分泌途徑產(chǎn)生。外泌體也存在于體外培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)液中。

1.1 外泌體所含的蛋白 有超過4 600種蛋白與外泌體相關(guān)，這些蛋白來自胞質(zhì)、質(zhì)膜，高爾基體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)[4]。大部分外泌體包含以下蛋白：①膜運輸和融合蛋白，如GTP酶、Rab蛋白、膜聯(lián)蛋白、脂筏標(biāo)志性蛋白；②四跨膜蛋白，如CD9、CD63、CD81、CD82；③參與多泡體生物合成的蛋白，如Alix蛋白、TSG101；④熱休克蛋白(HSPs)，如Hsp60、Hsp70、Hsp90；⑤脂質(zhì)相關(guān)蛋白、磷脂酶；⑥細(xì)胞骨架蛋白，如肌動蛋白、微管蛋白和膜突蛋白[5]、四跨膜蛋白、Alix蛋白、TSG101、Rab5b蛋白。

1.2 外泌體所含的核酸物質(zhì) 外泌體的一個鮮明特點是攜帶了大量核酸物質(zhì)，包括miRNAs、mRNA、線粒體DNA(mtDNA)、piRNAs、長鏈非編碼RNAs、核糖體RNAs、小核仁RNAs、核仁小RNAs及轉(zhuǎn)移RNAs[6]。外泌體miRNA與癌的病理類型有關(guān)，其種類和數(shù)量由其親本細(xì)胞決定，反映親本細(xì)胞miRNA的內(nèi)容，提示外泌體選擇性包裝miRNA。外泌體攜帶的mRNA被降解成至少200個片段，卻能在體外翻譯成完整蛋白[7]，提示外泌體與目標(biāo)細(xì)胞融合后，其攜帶的mRNA可以翻譯成蛋白。外泌體攜帶功能性核酸物質(zhì)，與腫瘤微環(huán)境或遠(yuǎn)隔轉(zhuǎn)移部位的細(xì)胞進行膜融合，將生物信息傳遞給這些細(xì)胞，發(fā)揮抑癌基因或癌基因作用。

1.3 外泌體所含的脂質(zhì) 外泌體是由脂質(zhì)雙分子層形成的囊泡，包含的脂質(zhì)有以下幾類：①脂質(zhì)筏相關(guān)脂質(zhì)，如膽固醇；②甘油二酯類；③鞘脂類，如神經(jīng)鞘磷脂和神經(jīng)酰胺；④磷脂；⑤甘油磷脂類，如磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸；⑥聚甘油磷脂[8]。外泌體的脂質(zhì)種類不同于其親本細(xì)胞，鞘磷脂的含量、PS、PI、神經(jīng)酰胺、膽固醇的含量增加，而磷脂酰膽堿含量降低。這些脂質(zhì)結(jié)構(gòu)保證了外泌體在體液和細(xì)胞培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性。外泌體外表面磷脂酰絲氨酸的存在，使接收細(xì)胞識別并接納外泌體。同時，外泌體也是功能性脂質(zhì)的載體，使大量具有生物活性的脂質(zhì)存在于腫瘤微環(huán)境中，以利于腫瘤的增殖、免疫逃逸，如前列腺素類[9]。然而，在腫瘤微環(huán)境中外泌體也可能攜帶具有抗癌作用的脂質(zhì)，如二十二碳六烯酸、ω-3多不飽和脂肪酸，這些抗癌物質(zhì)可以影響腫瘤細(xì)胞間的交流，抑制腫瘤生長，并提高腫瘤對治療的敏感性[10]。

1.4 外泌體所含的碳水化合物 盡管外泌體膜表面的糖基也參與細(xì)胞和外界環(huán)境的交流，但關(guān)于外泌體中碳水化合物的研究卻較少。糖基化是常見的蛋白翻譯后修飾方式，針對蛋白N-端和O-端糖基化研究較多。多項研究[11,12]表明，外泌體中富含特異的糖基化的糖復(fù)合物。

1.5 外泌體的提取方法 在過去5年間，對于外泌體的研究呈指數(shù)增長，從其在人體的生理功能到作為診斷標(biāo)記物的潛在可能性全面展開，于是完整提取、分離外泌體成為研究的關(guān)鍵一環(huán)。細(xì)胞可分泌多個類型的外泌體，它們具有共同的生理、生化特性，有研究者使用了多種方法試圖將具有同質(zhì)性的一組外泌體純化，但目前尚未發(fā)現(xiàn)較好的方法[13]。目前，有幾種方法用于從體液或細(xì)胞培養(yǎng)液中提取分離外泌體，包括差速離心法、密度梯度離心法、尺寸排阻色譜法、免疫親和捕獲及聚乙二醇介導(dǎo)的沉淀法。

2 外泌體在肺癌微環(huán)境形成中的作用

肺癌是全世界發(fā)病率及病死率最高的腫瘤,其5年生存率僅18%，其早期無特異性臨床癥狀，且缺乏有效的檢測手段，影響了早期肺癌的檢出率。而晚期肺癌，生存率極低，ⅢB/Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌使用基于鉑類的化療方案，中位生存期僅為12個月。肺癌的形成和發(fā)展受多種因素、機制的影響，是一個長期、復(fù)雜的過程。癌基因或抑癌基因的突變導(dǎo)致正常細(xì)胞演變?yōu)槟[瘤細(xì)胞，并出現(xiàn)失控性增張[14]?；虻淖兓瘜?dǎo)致了細(xì)胞層面的變化，但是癌變的細(xì)胞形成腫塊，離不開細(xì)胞間信號傳遞。在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中，外泌體是腫瘤細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞信息交流的重要信使。細(xì)胞間的信息交流可以通過直接作用，即細(xì)胞因子或膜來源的囊泡進行。有證據(jù)[15]表明，細(xì)胞外囊泡是細(xì)胞間信息交流的重要途徑，這些囊泡將具有生物功能的mRNA、micRNA、DNA、蛋白、脂質(zhì)、代謝產(chǎn)物等從其親本細(xì)胞運輸?shù)狡渌?xì)胞，從而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。

2.1 外泌體在上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)形成中的作用 EMT是指上皮細(xì)胞的特性消失，而具備了間質(zhì)細(xì)胞的表型并具有運動能力，是腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移前的重要過程。這一過程復(fù)雜，包括細(xì)胞骨架改變、E-鈣黏連蛋白降低等因素[16]。研究發(fā)現(xiàn)，幾種蛋白、miRNA參與了EMT過程。在此過程中，信號通路被來自細(xì)胞外的信號激活，通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后機制而改變基因的表達。其中，轉(zhuǎn)化生長因子家族的信號傳導(dǎo)起著主導(dǎo)作用。Kim等[17]發(fā)現(xiàn)，肺腺癌A549細(xì)胞自分泌的外泌體誘發(fā)了TCF/LEF的轉(zhuǎn)錄活性，從而激活了經(jīng)典的Wnt通路。外泌體攜帶的miR-23a影響了肺癌A549細(xì)胞EMT相關(guān)表型的改變。晚期肺癌患者血清中的外泌體波形蛋白表達增加，可使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT。已出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的肺癌細(xì)胞分泌外泌體，可使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增值、侵襲、遷移能力[18]。

2.2 外泌體在間充質(zhì)干細(xì)胞中的作用 實體腫瘤由腫瘤細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞組成，而間質(zhì)細(xì)胞在腫瘤細(xì)胞生長、遷移中具有重要作用。腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(TAFs)是一種重要的間質(zhì)細(xì)胞，在多種類型腫瘤的微環(huán)境及腫瘤間質(zhì)的相互作用中具有重要作用。TAF的形成可能包含以下機制，即固有的成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞，EMT，周細(xì)胞，骨髓來源的循環(huán)纖維細(xì)胞和間質(zhì)干細(xì)胞[19]。Karnoub等[20]發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞召集腫瘤干細(xì)胞進入其微環(huán)境，使其轉(zhuǎn)化為TAFs，從而影響腫瘤生長、血管生成和轉(zhuǎn)移。體外實驗證實，腫瘤細(xì)胞來源的外泌體能夠誘發(fā)正常肺成纖維細(xì)胞反應(yīng)，促進脂肪組織的間質(zhì)干細(xì)胞獲得肌成纖維細(xì)胞的特性，說明腫瘤細(xì)胞來源的外泌體具有刺激、輔助腫瘤相關(guān)的成纖維細(xì)胞獲得致癌特性的作用。

在腫瘤微環(huán)境中，腫瘤來源的外泌體在腫瘤細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞具有通訊功能。Wang等[21]發(fā)現(xiàn)，肺癌A549來源的外泌體攜帶多種lncRNA，刺激間充質(zhì)干細(xì)胞進入活躍狀態(tài)，提示外泌體攜帶的lncRNA對間充質(zhì)干細(xì)胞具有重要調(diào)節(jié)作用，進一步揭示了間充質(zhì)干細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間的通訊機制。肺癌A549來源的外泌體表面具有的熱休克蛋白70，可誘發(fā)間充質(zhì)干細(xì)胞出現(xiàn)炎癥表型，觸發(fā)了NF-κB通路，使IL-6、IL-8、MCP-1分泌增多，從而提高肺癌的生長能力[22]。

2.3 外泌體在免疫應(yīng)答中的作用 免疫應(yīng)答的環(huán)境包括：①固有免疫細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、髓系抑制細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞；②獲得性免疫細(xì)胞，如T和B淋巴細(xì)胞。而腫瘤巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中更具有代表性。T細(xì)胞活化是宿主抗腫瘤免疫過程中的關(guān)鍵步驟。在此過程中，T細(xì)胞釋放大量外泌體，在免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間的信息交流中具有重要作用。具有生物活性的T細(xì)胞可分泌含有FasL的外泌體，誘發(fā)T細(xì)胞自身凋亡。細(xì)胞與免疫系統(tǒng)的交流，依靠外泌體、細(xì)胞因子、趨化因子等產(chǎn)物。當(dāng)腫瘤炎癥反應(yīng)、抗腫瘤免疫發(fā)生時，這些調(diào)節(jié)因子的活性及豐度維持平衡狀態(tài)。肺癌細(xì)胞分泌的外泌體含有的癌基因miR-21和miR-29a可以與小鼠和人類的Toll樣受體結(jié)合[23]。腫瘤來源CD8和FasL雙陽性的外泌體可使MMP9表達增加，提高鼠肺癌3LL細(xì)胞的侵襲能力，活化的T細(xì)胞外泌體可通過Fas信號通路，增加MMP9表達量，從而提高肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。白三烯是由免疫細(xì)胞產(chǎn)生的一種炎性介質(zhì)，當(dāng)細(xì)胞受到刺激時，細(xì)胞內(nèi)磷脂酶A2和5-脂氧合酶遷移到核膜，花生四烯酸從核膜磷脂釋放，然后產(chǎn)生白三烯A4。白三烯在肺的免疫反應(yīng)中起重要作用，白三烯D4是半胱氨酰LT1最有力的激動劑，可致支氣管收縮和組織重塑。Lukic等收集了單核細(xì)胞MM6及肺癌A549細(xì)胞培養(yǎng)液中的外泌體，對其中的白三烯進行研究，發(fā)現(xiàn)外泌體在細(xì)胞間的相互作用是LTD4產(chǎn)生的重要影響因素。Besse等收集了第二代樹突細(xì)胞來源的外泌體(含有IFN-γ)，應(yīng)用于化療后的終末期肺癌患者進行Ⅱ期臨床實驗，發(fā)現(xiàn)這些外泌體應(yīng)用于晚期非小細(xì)胞肺癌患者可加強自然殺傷細(xì)胞的抗腫瘤免疫作用。內(nèi)源性的miRNA-155和miRNA-146a可調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，miRNA-155可增加炎癥基因表達，而miRNA-146a減少炎癥基因表達，從而維持炎癥反應(yīng)的平衡。樹突細(xì)胞間可依靠外泌體傳遞miRNA-155和miRNA-146a，參與靶基因的表達，平衡炎癥反應(yīng)，改變細(xì)胞對內(nèi)毒素的反應(yīng)。

2.4 外泌體在肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中的作用 腫瘤來源的外泌體可以優(yōu)先與目標(biāo)細(xì)胞融合，形成腫瘤轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)移前位[2]。在遠(yuǎn)隔部位創(chuàng)造易于腫瘤生長的微環(huán)境，而后再通過外泌體將腫瘤細(xì)胞的生物信息運載到已構(gòu)造的適合腫瘤生長的小環(huán)境中，從而形成遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶。肺癌在轉(zhuǎn)移到其他組織器官前，釋放了數(shù)百萬外泌體至循環(huán)系統(tǒng)中，卻只有少數(shù)會“筑巢”-形成轉(zhuǎn)移灶，而“筑巢”的器官并不是隨機的。其原因何在？是否有可能因為腫瘤的釋放的“偵察兵”外泌體具有一些分子標(biāo)記，以某種方式引導(dǎo)它們到達特定器官？在肺癌的微環(huán)境中，來源于活化T細(xì)胞的外泌體可通過Fas/Fasl通路提高肺癌的轉(zhuǎn)移能力。Janowska-Wieczorek等發(fā)現(xiàn)，血小板衍生的外泌體可以與肺癌細(xì)胞相互作用，增強其轉(zhuǎn)移能力。

作為一個傳播者，外泌體可以直接刺激靶細(xì)胞膜分子的多種類型或?qū)⑺鼈鬟f的內(nèi)容直接刺激細(xì)胞。外泌體表面的整合素不僅僅提高其黏附性，同時也觸發(fā)目標(biāo)細(xì)胞的信號通路和炎癥反應(yīng)，有利于轉(zhuǎn)移細(xì)胞的生長[2]。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤來源的外泌體可將小鼠的正常上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤細(xì)胞。急性髓系白血病細(xì)胞來源的外泌體可傳遞miRNA-155到正常造血干細(xì)胞，降低C-Myd的表達，破壞正常的造血干細(xì)胞，而促進白血病細(xì)胞生長。所有這些均提示，在腫瘤進展過程中，外泌體是細(xì)胞間交流的重要信使。

3 外泌體在肺癌診治中的作用

在腫瘤細(xì)胞黏附和內(nèi)化的外泌體數(shù)量是同樣大小脂質(zhì)體的10倍，顯示出其較高的癌癥靶向治療特異性。此外，由于增強滲透和滯留效應(yīng)，納米外泌體往往易于在含有異常血管形成的腫瘤組織積聚，因此其能輕易達到大的固體腫瘤，從而增加藥物輸送效率。外泌體可通過其表面受體識別特異細(xì)胞，例如具有Tspan8的外泌體優(yōu)先與CD11b、CD54陽性細(xì)胞結(jié)合。利用此特點，研究者可設(shè)計具有特殊受體的外泌體，更好的與特定細(xì)胞結(jié)合。外泌體表面糖基化的肽在循環(huán)中可耐受蛋白酶的分解，使其更穩(wěn)定有效的進行靶向傳遞?；谕饷隗w這些天然優(yōu)勢，其可作為傳遞載體應(yīng)用于癌癥治療，用于傳遞藥物和功能RNA。

目前，有研究證明外泌體可影響肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，通過調(diào)節(jié)外泌體的釋放，即可降低肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。研究通過抑制SNARE家族蛋白YKT6表達，減少了80.9%的外泌體釋放，降低了肺癌的轉(zhuǎn)移能力，并且證實miR-134、miR-135b是YKT6的目標(biāo)miRNA。Xiao等發(fā)現(xiàn)，順鉑耐藥的肺腺癌A549細(xì)胞株分泌的外泌體較敏感株增加，外泌體攜帶的miR-21、miR-133含量顯著升高，將耐藥株分泌的外泌體傳遞給敏感株能顯著提高敏感株的耐藥性。

肺癌目前尚無特異性高的血清或血漿標(biāo)記物，低劑量螺旋CT在肺癌篩查中的作用尚存在爭議，而外泌體具有雙層質(zhì)膜、不易被分解等特點，可能承載肺癌有效的標(biāo)記物。microRNA是具有轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)功能的小分子，單個microRNA可能通過抑制性復(fù)合物與多個mRNA結(jié)合，從而阻滯整個生物通路。腫瘤細(xì)胞來源的外泌體分泌的microRNA完全不同于正常細(xì)胞。外泌體的microRNA具有成為肺癌標(biāo)志物的優(yōu)勢。Cazzoli等收集了30個血漿樣本，通過對742種microRNA進行篩查，發(fā)現(xiàn)miR-378a、miR-379、miR-139-5p、miR-200b-5p用于肺癌篩查，miR-151a-5p、miR-30a-3p、miR200b-5p、miR-629、miR-100、miR-154-3p可用于肺癌的診斷。Munagala等比較了初始肺癌裸鼠與復(fù)發(fā)裸鼠腫瘤及血清中外泌體的差異miRNA，發(fā)現(xiàn)miR-21 和 miR-155在復(fù)發(fā)腫瘤模型中顯著上調(diào)，外泌體microRNA將成為一種具有極好前景的無創(chuàng)診斷手段。

綜上所述，外泌體獲得途徑廣泛，易于被患者接受，脂質(zhì)雙分子囊泡結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不易破壞，使其成為蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)等生物活性物質(zhì)的良好載體，與肺癌微環(huán)境形成，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。目前針對肺癌來源外泌體的研究仍較少，缺乏對外泌體所攜帶活性物質(zhì)的全面分析，外泌體與肺癌腫塊內(nèi)細(xì)胞異質(zhì)性的關(guān)系、肺癌微環(huán)境中血管形成、肺癌轉(zhuǎn)移至特定器官的機制等問題尚有待進一步研究探索。

[1] Lamparski HG, Metha-Damani A, Yao JY, et al. Production and characterization of clinical grade exosomes derived from dendritic cells[J]. J Immunol Methods, 2002,270(2):211-226.

[2] Hoshino A, Costa-Silva B, Shen TL, et al. Tumour exosome integrins determine organotropic metastasis[J]. Nature, 2015,527(7578):329-335.

[3] Alvarez-Erviti L, Seow Y, Yin H, et al. Delivery of siRNA to the mouse brain by systemic injection of targeted exosomes[J]. Nat Biotech, 2011,29(4):341-345.

[4] Bang C, Thum T. Exosomes: new players in cell-cell communication[J]. Int J Biochem Cell Biol, 2012,44(11):2060-2064.

[5] Harshman SW, Canella A, Ciarlariello PD, et al. Characterization of multiple myeloma vesicles by label-free relative quantitation[J]. Proteomics, 2013,13(20):3013-3029.

[6] Gajos-Michniewicz A, Duechler M, Czyz M. MiRNA in melanoma-derived exosomes[J]. Cancer Lett, 2014,347(1):29-37.

[7] Pegtel DM. Oncogenic herpesviruses sending mixed signals[J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2013,110(31):12503-12504.

[8] Record M, Carayon K, Poirot M, et al. Exosomes as new vesicular lipid transporters involved in cell-cell communication and various pathophysiologies[J]. Biochim Biophys Acta, 2014,1841(1):108-120.

[9] Xiang X, Poliakov A, Liu C, et al. Induction of myeloid-derived suppressor cells by tumor exosomes[J]. Int J Cancer, 2009,124(11):2621-2633.

[10] Cao W, Ma Z, Rasenick MM, et al. N-3 poly-unsaturated fatty acids shift estrogen signaling to inhibit human breast cancer cell growth[J]. PLoS One, 2012,7(12):e52838.

[11] Gerlach JQ, Griffin MD. Getting to know the extracellular vesicle glycome[J]. Mol Biosyst, 2016,12(4):1071-1081.

[12] Escrevente C, Grammel N, Kandzia S, et al. Sialoglycoproteins and N-glycans from secreted exosomes of ovarian carcinoma cells[J]. PLoS One, 2013,8(10):e78631.

[13] Pocsfalvi G, Stanly C, Fiume I, et al. Chromatography and its hyphenation to mass spectrometry for extracellular vesicle analysis[J]. J Chromatogr A, 2016,1439:26-41.

[14] Hanahan D, Weinberg RA. Hallmarks of cancer: the next generation[J]. Cell, 2011,144(5):646-674.

[15] Fujita Y, Yoshioka Y, Ochiya T. Extracellular vesicle transfer of cancer pathogenic components[J]. Cancer Sci, 2016,107(4):385-390.

[16] Ramteke A, Ting H, Agarwal C, et al. Exosomes secreted under hypoxia enhance invasiveness and stemness of prostate cancer cells by targeting adherens junction molecules[J]. Mol Carcinog, 2015,54(7):554-565.

[17] Kim J, Kim TY, Lee MS, et al. Exosome cargo reflects TGF-beta1-mediated epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) status in A549 human lung adenocarcinoma cells[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2016,478(2):643-648.

[18] Rahman MA, Barger JF, Lovat F, et al. Lung cancer exosomes as drivers of epithelial mesenchymal transition[J]. Oncotarget, 2016,7(34):54852-54866.

[19] Otranto M, Sarrazy V, Bonte F, et al. The role of the myofibroblast in tumor stroma remodeling[J]. Cell Adh Migr, 2012,6(3):203-219.

[20] Karnoub AE, Dash AB, Vo AP, et al. Mesenchymal stem cells within tumour stroma promote breast cancer metastasis[J]. Nature, 2007,449(7162):557-563.

[21] Wang S, Li X, Zhu R, et al. Lung cancer exosomes initiate global long non-coding RNA changes in mesenchymal stem cells[J]. Int J Oncol, 2016,48(2):681-689.

[22] Li X, Wang S, Zhu R, et al. Lung tumor exosomes induce a pro-inflammatory phenotype in mesenchymal stem cells via NFkappaB-TLR signaling pathway[J]. J Hematol Oncol, 2016,9:42.

[23] Kucharzewska P, Christianson HC, Welch JE, et al. Exosomes reflect the hypoxic status of glioma cells and mediate hypoxia-dependent activation of vascular cells during tumor development[J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2013,110(18):7312-7317.

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.47.035

R734.2

A

1002-266X(2017)47-0110-04

河北省級科技項目(2015043463)。

陳剛(E-mail: chengang.8@hotmail.com)

2017-10-13)