劉 全

廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院，廣西柳州 545005

膠質(zhì)瘤是發(fā)病率最高的原發(fā)性腦腫瘤，預(yù)后不佳[1]。目前高級別膠質(zhì)瘤患者1年生存率僅40%[2]。目前膠質(zhì)瘤的臨床治療包括放療、化療和外科手術(shù)[3]。腦膠質(zhì)瘤患者治療費(fèi)用高并且治療效果差，尤其對于高級別膠質(zhì)瘤，手術(shù)后常規(guī)放化療后患者預(yù)后仍很差，目前臨床研究的熱點(diǎn)是組蛋白去乙?；种苿δ[瘤抑制的作用。組蛋白去乙酰化酶 5（histone deacetylase 5，HDAC5）屬于 II類，并已被證明對于調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和凋亡具有重要的作用[4-5]。有研究表明，HDAC5與髓母細(xì)胞瘤、骨肉瘤等相關(guān)[6-7]。本研究通過前期研究發(fā)現(xiàn)，HDAC5可促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖，因此HDAC5可能是膠質(zhì)瘤潛在的治療位點(diǎn)，但HDAC5的表達(dá)水平與臨床病理、腫瘤分化及患者生存周期等臨床表現(xiàn)的相關(guān)程度尚不明確。本研究通過觀察HDAC5蛋白在不同級別的腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)，探討腦膠質(zhì)瘤中HDAC5蛋白的表達(dá)與患者臨床病理、腫瘤分化及患者生存周期的相關(guān)性，為腦膠質(zhì)瘤患者的個(gè)體化治療提供參考，并為后續(xù)選擇使用組蛋白去乙?；敢种苿┛鼓[瘤治療研究提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012年1月～2015年12月確診為腦膠質(zhì)瘤并在柳州市工人醫(yī)院和柳州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校第一附屬醫(yī)院進(jìn)行手術(shù)治療并留有蠟塊標(biāo)本的患者100例，男57例，女43例，年齡2～78歲，平均（41.3±12.5）歲，病例分型：單純普通型29例，單純急診型6例，復(fù)雜疑難型56例，復(fù)雜危重型9例。按照WHO分型Ⅰ～Ⅳ級分為兩組，Ⅰ～Ⅱ級屬于低級別組，Ⅲ～Ⅳ屬于高級別組，每組各50例。對所有患者的臨床病理、腫瘤分化及患者生存周期等臨床特點(diǎn)進(jìn)行調(diào)查隨訪。腦膠質(zhì)瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)符合神經(jīng)外科學(xué)（2012年第二版）。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）WHO病理分級I-IV級各型腦膠質(zhì)瘤；（2）有明確的病理診斷；（3）在我院，保存有腦膠質(zhì)瘤蠟塊標(biāo)本；（4）滿足隨訪。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員批準(zhǔn)，所有患者及其家屬簽署知情同意書，同意參與實(shí)驗(yàn)。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

表1 兩組患者HDAC5表達(dá)比較[n（%）]

1.2 免疫組織化學(xué)法

采用免疫組織化學(xué)法檢測HDAC5在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)，HDAC5蛋白在膠質(zhì)瘤標(biāo)本中的表達(dá)：按著色程度評分，0分無著色，1分淺黃色，2分棕黃色，3分褐棕色；按陽性細(xì)胞占比例評分，無陽性細(xì)胞為0分，＜10%為1分，11%～50%為2分，51%～80%為3分，＞80%為4分；二者乘積判定陽性結(jié)果，0分為陰性（-），1～4分為低度陽性（+），5～ 8 分為中度陽性（++），9 ～ 12 分為強(qiáng)陽性（+++）。

1.3 觀察指標(biāo)

腦膠質(zhì)瘤臨床病理、腫瘤分化按2007年WHO分級劃分為Ⅰ～Ⅳ級及病理結(jié)果分低、中、高度分化?；颊呱嬷芷谟傻谝淮伟l(fā)現(xiàn)原發(fā)腦膠質(zhì)瘤時(shí)開始計(jì)算，隨訪終止時(shí)間為2016年12月31日。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者生存率比較

隨訪終止時(shí)間為2016年12月31日，低級別組2例死亡，生存率96.0%，高級別組死亡18例，生存率64%，明顯低于低級別組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=16.324，P ＜ 0.05）。

2.2 兩組患者HDAC5表達(dá)比較

高級別組HDAC5表達(dá)陽性率顯著高于低級別組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

3 討論

組蛋白去乙酰酶根據(jù)蛋白的同源性和結(jié)構(gòu)分為I～I(xiàn)V類 。其中組蛋白去乙酰酶5于II類的組蛋白去乙?；福驯蛔C明是細(xì)胞增殖的重要調(diào)節(jié)劑，控制細(xì)胞周期進(jìn)程和凋亡[8]。膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腦腫瘤，當(dāng)前常規(guī)的臨床治療包括放射療法、化學(xué)療法和外科手術(shù)治療，但其預(yù)后不良。神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對于化療藥物的耐藥性越來越成為影響治療效果的主要因素。因此，迫切需要開發(fā)新的有效地膠質(zhì)瘤治療方法。近期，在一個(gè)基于12個(gè)中心的隨機(jī)臨床試驗(yàn)薈萃分析中，包括膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和間變性星形細(xì)胞瘤在內(nèi)的高級別膠質(zhì)瘤患者的1年整體生存率僅為40%，其中進(jìn)行了系統(tǒng)的聯(lián)合放療和化療后的患者生存率也僅為46%。而本研究中兩組生存率都較高，這可能與本研究樣本數(shù)較少有關(guān)，有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行相關(guān)性研究。

組蛋白去乙?；讣易逶谀[瘤發(fā)生、擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移中扮演著關(guān)鍵角色。目前的研究發(fā)現(xiàn)多種組蛋白去乙酰化酶抑制劑具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞在動(dòng)物模型中增殖的能力。因此組蛋白去乙酰化酶抑制劑有望成為新型的抗癌治療藥物。目前HDAC5在人腦膠質(zhì)瘤的生物學(xué)功能鮮有研究與報(bào)道。近期，我們的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)HDAC5可通過上調(diào)Notch 1信號(hào)的表達(dá)促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖，但該生物學(xué)功能是否與臨床病理、腫瘤分化及患者生存周期等臨床表現(xiàn)存在相關(guān)性，尚無相關(guān)報(bào)道。Notch家族在細(xì)胞增殖、分化和凋亡中起重要作用。Notch 1蛋白與該家族的其他成員共享結(jié)構(gòu)特征，例如存在由多個(gè)表皮生長因子樣重復(fù)組成的胞外結(jié)構(gòu)域和由多個(gè)不同域類型組成的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域[9]。許多研究表明，Notch 1在腫瘤細(xì)胞系中過度表達(dá)，包括膠質(zhì)瘤[10]。RNA干擾下調(diào)Notch 1及其配體誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡及抑制增殖。因此，Notch 1已提出了構(gòu)成在腦膠質(zhì)瘤治療的一個(gè)靶點(diǎn)[11-12]。

終上所述，HDAC5蛋白在腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)與膠質(zhì)瘤的病理級別、腫瘤分化及患者生存周期可能具有相關(guān)性，這為腦膠質(zhì)瘤患者的個(gè)體化治療提供參考，以期為后續(xù)抗腫瘤研究提供新的思路，具有較大的社會(huì)效益。本研究的局限之處在于，作為單中心研究，患者樣本量較少。需要未來進(jìn)行多中心、擴(kuò)大樣本量的研究，從而獲得更準(zhǔn)確科學(xué)的研究結(jié)果。

[1] Medina Villaamil V，Alvarez García A，Aparicio Gallego G，et al.Tissue array analysis for the differentiation of gliosis from gliomas[J].Mol Med Rep，2011，4（3）：451-457.

[2] Liu Q，Zheng JM，Chen JK，et al.Histone deacetylase 5 promotes the proliferation of glioma cells by upregulation of Notch 1[J].Mol Med Rep，2014，10（4）：2045-2050.

[3] Wang Y，Zhou Z，Luo H，et al.Combination of tamoxifen and antisense human telomerase RNA inhibits glioma cell proliferation and anti-apoptosis via suppression of telomerase activity[J].Mol Med Rep，2010，3（6）：935-940.

[4] Voelter-Mahlknecht S，Ho AD，Mahlknecht U.Chromosomal organization and localization of the novel class IV human histone deacetylase 11 gene[J].Int J Mol Med，2005，16（4）：589-598.

[5] Sen N，Kumari R，Singh MI，et al.HDAC5，a key component in temporal regulation of p53-mediated transactivation in response to genotoxic stress[J].Mol Cell，2013，52（3）：406-420.

[6] Milde T，Oehme I，Korshunov A，et al.HDAC5 and HDAC9 in medulloblastoma：novel markers for risk stratification and role in tumor cell growth[J].Clin Cancer Res，2010，16（10）：3240-3252.

[7] Chen J，Xia J，Yu YL，et al.HDAC5 promotes osteosarcoma progression by upregulation of Twist 1 expression[J]Tumour Biol，2013，35（2）：1383-1387.

[8] Khan O，La Thangue NB.HDAC inhibitors in cancer biology：emerging mechanisms and clinical applications[J].Immunol Cell Biol，2012，90（1）：85-94.

[9] Rana NA，Haltiwanger RS.Fringe benefits：functional and structural impacts of O-glycosylation on the extracellular domain of Notch receptors[J].Curr Opin Struct Biol，2011，21（5）：583-589.

[10] Ayukawa T，Matsumoto K，Ishikawa HO，et al.Rescue of Notch signaling in cells incapable of GDP-L-fucose synthesis by gap junction transfer of GDP-L-fucose in Drosophila[J].Proc Natl Acad Sci USA，2012，109（38）：15318-15323.

[11] Hu B，Nandhu MS，Sim H，et al.Fibulin-3 promotes glioma growth and resistance through a novel paracrine regulation of Notch signaling[J].Cancer Res，2012，72（15）：3873-3885.

[12] Berry N，Gursel DB，Boockvar JA.Notch inhibition via micro-RNA blocks glioma development[J].Neurosurgery，2012，70（4）：20-22.