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促紅細(xì)胞生成素對地塞米松沖擊大鼠股骨頭壞死的預(yù)防作用及機(jī)制

2017-03-24 12:12:31張春光
中國老年學(xué)雜志 2017年4期
關(guān)鍵詞:股骨頭骨密度紅細(xì)胞

張春光

(吉林省武警總隊(duì)醫(yī)院骨科,吉林 長春 130052)

促紅細(xì)胞生成素對地塞米松沖擊大鼠股骨頭壞死的預(yù)防作用及機(jī)制

張春光

(吉林省武警總隊(duì)醫(yī)院骨科,吉林 長春 130052)

目的 探討促紅細(xì)胞生成素對地塞米松沖擊大鼠股骨頭壞死的預(yù)防作用及機(jī)制。方法 SD雄性大鼠36只隨機(jī)分為正常組、地塞米松組和實(shí)驗(yàn)組,每組12只。地塞米松組和實(shí)驗(yàn)組大鼠尾靜脈注射脂多糖20 μg/kg,連續(xù)2 d,第2次給予脂多糖注射后,當(dāng)日肌肉注射地塞米松20 mg/kg,連續(xù)注射3 d。結(jié)果 與正常組比較,地塞米松組和實(shí)驗(yàn)組全血低切、全血高切、血細(xì)胞比容水平變化均上升,且實(shí)驗(yàn)組均明顯低于地塞米松組(P<0.05);與正常組比較,地塞米松組血鈣(Ca)、血磷(P)、骨密度明顯下降(P<0.05),而實(shí)驗(yàn)組均無明顯變化(P>0.05);實(shí)驗(yàn)組血鈣、血磷、骨密度明顯高于地塞米松組(P<0.05);與正常組比較,地塞米松組和實(shí)驗(yàn)組血漿一氧化氮(NO)水平下降,內(nèi)皮素(ET)水平上升(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組血漿NO水平高于地塞米松組,ET水平低于地塞米松組(P<0.05);正常組大鼠骨小梁完整及股骨頭軟骨完整;地塞米松組大鼠骨小梁有壞死現(xiàn)象,且股骨頭軟骨下陷,造血細(xì)胞數(shù)量降低;實(shí)驗(yàn)組大鼠較地塞米松組明顯改善。結(jié)論 促紅細(xì)胞生成素對地塞米松沖擊大鼠股骨頭壞死具有良好的預(yù)防作用,其作用機(jī)制可能與改善血液流變學(xué),提高血磷、血鈣、骨密度及改善血管內(nèi)皮功能紊亂相關(guān)。

促紅細(xì)胞生成素;地塞米松;股骨頭壞死

股骨頭壞死主要是因不同病因破壞股骨頭的血液循環(huán),從而導(dǎo)致骨髓造血細(xì)胞、骨細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞壞死的一種病理過程,進(jìn)一步致使股骨頭塌陷,髖關(guān)節(jié)功能障礙的疾病〔1,2〕。激素性股骨頭壞死不僅起病快,進(jìn)程快,致殘率高,且預(yù)后差,同時(shí)容易致使股骨頭塌陷,最終致使骨細(xì)胞壞死〔3,4〕。促紅細(xì)胞生成素是由腎臟成纖維氧細(xì)胞分泌合成的而一種糖蛋白激素,主要通過與其特異性受體結(jié)合而發(fā)揮促紅細(xì)胞生成作用,具有促進(jìn)新生血管的生成作用〔3,5〕。本研究旨在分析促紅細(xì)胞生成素對地塞米松沖洗大鼠股骨頭壞死的預(yù)防作用及其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 SD雄性SPF大鼠36只,體質(zhì)量(200±20)g。適應(yīng)性飼養(yǎng)1 w,保持良好通風(fēng)條件,室溫23℃~25℃,空氣濕度50%,所有大鼠均飼養(yǎng)于干凈的塑料籠具中,所有食物、水、墊料均通過滅菌處理,大鼠于整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間可自由進(jìn)水、進(jìn)食。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 促紅細(xì)胞生成素(生產(chǎn)廠家:上海實(shí)業(yè)科華生物有限公司;批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字S20030068);地塞米松(生產(chǎn)廠家:重慶迪康長江制藥有限公司;批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H50021041)。

1.3 主要試劑和儀器 血鈣(Ca)試劑盒、血磷(P)試劑盒、一氧化氮(NO)試劑盒和內(nèi)皮素(ET)試劑盒(均購于武漢博士德生物工程有限公司)。全自動血液流變儀(天津市唐宇醫(yī)療器械科技發(fā)展有限公司)及配套試劑盒,雙能X線骨密度測量儀(美國Hologic公司)。

1.4 方法

1.4.1 實(shí)驗(yàn)分組 36只大鼠依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為正常組、地塞米松組和實(shí)驗(yàn)組,每組12只。

1.4.2 模型制備 所有大鼠尾靜脈注射脂多糖20 μg/kg,連續(xù)注射2 d,第2次給予脂多糖注射后,當(dāng)日肌肉注射地塞米松20 mg/kg,連續(xù)注射3 d。6 w后進(jìn)行病理學(xué)檢查,證實(shí)股骨頭壞死造模成功。地塞米松組和實(shí)驗(yàn)組大鼠均造模成功。

1.4.3 給藥方法 正常組和地塞米松組注射同等劑量生理鹽水,實(shí)驗(yàn)組于造模成功后腹腔內(nèi)注射促紅細(xì)胞生成素500 U/kg,連續(xù)注射6 w。

1.4.4 各組大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)檢測 于給藥末采用2.5 ml/kg戊巴比妥鈉腹腔麻醉,靜脈取血3 ml,注入含50 μl肝素鈉注射液離心管中,抗凝,制成全血樣本,采用全自動血液流變儀嚴(yán)格按照試劑盒標(biāo)準(zhǔn)測定。

1.4.5 各組大鼠血Ca、血P、骨密度檢測及NO、ET 于給藥末采用2.5 ml/kg戊巴比妥鈉腹腔麻醉,靜脈取血3 ml,3 000 r/min,離心12 min,分離血清,將其置于-80℃下保存待測。嚴(yán)格按照試劑盒標(biāo)準(zhǔn)測定。

1.4.6 各組大鼠組織病理學(xué)變化 處死大鼠,取大鼠兩側(cè)股骨,左側(cè)股骨頭沿大鼠冠狀面剖開,一半放于10%中性甲醛給予固定,常規(guī)石蠟包埋切片,觀察骨小梁、軟骨組織結(jié)構(gòu)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件行SNK-q檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠血液流變學(xué)水平比較 與正常組比較,地塞米松組和實(shí)驗(yàn)組全血低切、全血高切、血細(xì)胞比容水平變化均上升,且實(shí)驗(yàn)組均明顯低于地塞米松組(P<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠血液流流變學(xué)影響

與正常組比較:1)P<0.05;與地塞米松組比較:2)P<0.05;下表同

2.2 各組大鼠血Ca、血P、骨密度比較 與正常組比較,地塞米松組血Ca、血P、骨密度明顯下降(P<0.05),而實(shí)驗(yàn)組無明顯變化(P>0.05);實(shí)驗(yàn)組血Ca、血P、骨密度明顯高于地塞米松組(P<0.05)。見表2。

表2 各組大鼠血Ca、血P、骨密度比較

2.3 各組大鼠血漿NO和ET水平比較 與正常組比較,地塞米松組和實(shí)驗(yàn)組血漿NO水平下降,ET水平上升(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組血漿NO水平高于地塞米松組,ET水平低于地塞米松組(P<0.05)。見表3。

表3 各組大鼠血漿NO和ET水平比較

2.4 各組大鼠病理組織學(xué)變化 正常組大鼠骨小梁完整及股骨頭軟骨完整;地塞米松組大鼠骨小梁有壞死現(xiàn)象,且股骨頭軟骨下陷,造血細(xì)胞數(shù)量降低;實(shí)驗(yàn)組大鼠較地塞米松組明顯改善。

3 討 論

促紅細(xì)胞生成素能夠作用于骨髓中紅系造血祖細(xì)胞,且可促進(jìn)其增殖、分化。在不同時(shí)期和身體的不同時(shí)期都有促紅細(xì)胞生成素基因的表達(dá),而在胚胎時(shí)間,促紅細(xì)胞生成素主要來源于肝臟,出生后主要由腎臟產(chǎn)生。促紅細(xì)胞生成素對機(jī)體骨骼具有一定保護(hù)作用〔6〕。彭昊等〔7〕表明,促紅細(xì)胞生成素對大鼠糖皮質(zhì)激素性股骨頭壞死具有良好的保護(hù)作用。地塞米松可使骨生成速度下降,骨吸收增加,且會降低腸道對Ca的吸收,提高尿Ca的排泄,使血Ca下降而導(dǎo)致負(fù)Ca平衡,從而引起甲狀旁腺功能亢進(jìn),加強(qiáng)破骨,使骨鹽丟失〔6~10〕。本研究提示促紅細(xì)胞生成素可明顯提高血Ca、血P、骨密度。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為,激素使血液呈高黏滯狀態(tài),血液的凝固性上升,靜脈栓塞,從而形成骨內(nèi)高壓,此外,高黏滯狀態(tài)的血液中血小板聚集,血管閉塞,以及局部酸性代謝產(chǎn)物聚集,血漿外滲,毛細(xì)血管通透性上升,導(dǎo)致骨髓間質(zhì)水腫,也會使骨內(nèi)壓增加,最終致使骨壞死〔11,12〕。本研究表明,促紅細(xì)胞生成素可明顯改善股骨頭壞死大鼠血液流變。ET廣泛存在于各種組織和細(xì)胞中,是一種調(diào)節(jié)心血管功能的重要因子,其中ET-1為目前作用最強(qiáng)的一種縮血管物質(zhì)。NO作為一種反應(yīng)性極強(qiáng)的自由基,在體內(nèi)具有廣泛的生理作用,如抑制血小板聚集、免疫調(diào)節(jié)、松弛血管平滑肌、調(diào)節(jié)血流等。近年來研究報(bào)道顯示血管內(nèi)皮功能與股骨頭壞死具有一定關(guān)系〔13,14〕。本研究表明,促紅細(xì)胞生成素可明顯改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂。

綜上,促紅細(xì)胞生成素對地塞米松沖擊大鼠股骨頭壞死具有良好的預(yù)防作用,其作用機(jī)制可能與改善血液流變學(xué),提高血Ca、血P、骨密度及改善血管內(nèi)皮功能紊亂相關(guān)。

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〔2016-06-23修回〕

(編輯 李相軍/滕欣航)

張春光(1964-),男,碩士,副主任醫(yī)師,主要從事骨科臨床研究。

R6

A

1005-9202(2017)04-0841-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.024

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