蓋麗娜， 傅占江， 代曉朋

(白求恩醫(yī)務士官學校 醫(yī)學技術系， 河北 石家莊 050081)

寄生蟲教學標本的保存與管理

蓋麗娜， 傅占江， 代曉朋

(白求恩醫(yī)務士官學校 醫(yī)學技術系， 河北 石家莊 050081)

介紹了各類寄生蟲標本的采集、制作和保存的規(guī)范方法，列舉了幾種常用的標本固定液的制作方法，通過探討幾種常見寄生蟲不同發(fā)育期和不同寄生部位固定與保存的方法，使得寄生蟲標本能夠形態(tài)完整并得以長期保存，有效解決了寄生蟲標本缺乏的問題，提升了寄生蟲標本的保護與利用水平,使現(xiàn)有標本得到妥善保管，保證教學使用.

寄生蟲； 標本； 保存

人體寄生蟲學檢驗是醫(yī)學檢驗專業(yè)的專業(yè)課程之一，也是醫(yī)學的重要基礎課程之一.按照素質教育的要求，強化醫(yī)學實驗課的實踐活動將成為培養(yǎng)學生創(chuàng)造能力的重要渠道.因此，如何為寄生蟲實驗課提供保存完好的寄生蟲標本，是實驗課成功的重要影響因素.

近年來，隨著社會的發(fā)展，人們的生活水平不斷提高，普遍的衛(wèi)生條件得到了大幅改善，預防和治療寄生蟲病知識也得到廣泛宣傳普及，人體寄生蟲感染率的不斷下降，一部分寄生蟲感染性疾病病例已很少出現(xiàn)甚至消失，導致了人體寄生蟲學實驗教學標本采集越來越困難，造成了寄生蟲教學標本的缺乏，給人體寄生蟲實驗教學帶來了許多困難[1].因此，如何更有效地對這些現(xiàn)存的珍貴標本進行妥善保存和管理，使其最大限度的發(fā)揮作用，應用于實驗教學和臨床研究，已經(jīng)成為當前急待解決的課題.本文主要從寄生蟲標本的分類、保存及管理三個方面進行探討，以期能夠使現(xiàn)有的寄生蟲標本得到妥善保管，保證教學使用.

1 寄生蟲標本的分類

寄生蟲標本依其制作方法不同可以分為三大類：玻片標本、浸制標本和干制標本[2].玻片標本是指經(jīng)過一定處理的寄生蟲的整體或局部的標本，如蠕蟲的蟲卵、幼蟲和成蟲或蟲體某一部分、原蟲、節(jié)肢動物的幼蟲及成蟲，是為了便于生物顯微鏡觀察而制作的標本；浸制標本是指利用藥劑浸漬液的化學性質，處理和保存標本，防止標本發(fā)生物理、化學性質的變化，一般較大的蠕蟲、蠕蟲的中間宿主及被蟲體寄生的病變器官或組織等可用此法保存，用肉眼即可觀察；干制標本即經(jīng)過防腐處理并干燥后的標本，如節(jié)肢動物成蟲、蠕蟲的中間宿主等，可直接肉眼觀察，有時需用解剖顯微鏡、放大鏡觀察.

2 寄生蟲標本的保存

收集到寄生蟲標本后需按照常規(guī)寄生蟲標本的固定及保存方法及時進行處理.一般寄生蟲標本的首要處理步驟就是固定處理，固定處理能夠在不損傷和改變蟲體的前提下使蟲體迅速死亡，保持蟲體原有的形態(tài)結構，并且蟲體內(nèi)的物質最終會凝固成不溶物，防止其自溶和腐爛，使得標本的內(nèi)部結構完整并易于著色.通常選用甲醛溶液及酒精作為標本固定保存液.

2.1 玻片標本的保存

玻片標本可以用于保存蠕蟲的蟲卵、幼蟲及成蟲、節(jié)肢動物的幼蟲及成蟲、原蟲的各發(fā)育階段標本.制備玻片標本一般需先對標本進行固定然后封片.不同寄生蟲的各發(fā)育階段應選用不同的固定及封片方法.

蟲卵可選用10%甲醛溶液固定，在處理極易分化發(fā)育的蟲卵(如鉤蟲卵、感染期蛔蟲卵等)時，須加熱標本(約70 ℃)以殺死蟲卵[3].蟲卵標本的常用保存方法是甘油明膠封片法，做法是：將甘油明膠水浴加熱溶化，然后用吸管吸取一小滴已固定的蟲卵懸液，滴在潔凈的載玻片上；用細玻璃棒蘸取已溶化的甘油明膠一滴，滴加在載玻片的蟲卵上，用玻璃棒將蟲卵懸液與甘油明膠兩者快速調勻，立即覆蓋以圓形蓋玻片；待稍干后，用樹膠封邊保存.

對蠕蟲的幼蟲(如鉤蟲的鉤蚴、血吸蟲的尾蚴等)固定時，使用5%甲醛或75%乙醇，方法是：先將固定液加熱至50 ℃，再與幼蟲液混合，加熱后的固定液可使蟲體伸展，便于鑒定，在上述固定液中滴加數(shù)滴甘油可使蟲體略透明，便于觀察.蠕蟲的成蟲如不需染色(如各種線蟲及吸蟲)則使用單一的固定液，如5%～10%甲醛溶液或70%酒精，如做染色標本(如絳蟲的孕節(jié))則選用幾種固定劑配制成的混合液.標本封片方法：首先在潔凈的載玻片上滴加適量樹膠，然后取出保存液中的標本，用吸水紙吸去標本上多余的液體后，立即放入載玻片上的樹膠內(nèi)，調整好蟲體的姿態(tài)，排出氣泡，覆蓋潔凈的蓋玻片.

2.2 浸制標本的保存

浸制標本是寄生蟲標本收藏和科普知識展覽展示的常用形式. 制作浸漬標本時要按照寄生蟲蟲體的大小選擇尺寸合適的標本瓶，再在瓶底墊一些脫脂棉，取玻璃板或玻璃圓柱作為固定大體標本的底板，從保存液中取出完整的寄生蟲蟲體，在玻璃板或玻璃圓柱上擺好蟲體的姿勢和位置，取已融化的動物明膠將蟲體粘貼牢固；然后將玻璃板或玻璃圓柱放入標本瓶中，再緩緩倒入保存液(通常為75%酒精或5%福爾馬林)；最后蓋上標本瓶的蓋塞，用石蠟密封.

被蟲體寄生的組織器官以及吸蟲的中間宿主水生植物等都可以直接放入標本瓶，然后加保存液，蓋上蓋塞，石蠟密封即可.

吸蟲的中間宿主蝦蟹類，首先用清水洗去粘附的污物，用5%～10%的酒精麻醉，使其組織松弛自然死亡后再固定，或在10%的福爾馬林中殺死、固定；然后將標本置于浸制液中保存，浸漬液為80%酒精與10%甘油的混合液或15%福爾馬林與10%甘油的混合液[4].

2.3 干制標本的保存

吸蟲的中間宿主螺類需先將其軟體部分用解剖針取出，而后洗凈空殼內(nèi)外部分、陰干；最后按照螺類體積大小放入不同的容器(玻璃指管、紙盒等)中，同時放入標簽標明[5].

節(jié)肢動物昆蟲類可以用昆蟲針固定昆蟲，然后將昆蟲針的一端插入合適大小的軟木塊，另一端用軟木塞固定，再在標本外小心扣上粗玻璃試管，使之與軟木塞密封組合在一起.

3 寄生蟲標本的管理

不同種類寄生蟲標本特性有差別，在日常標本維護中應進行分類管理.

3.1 玻片標本的管理

玻片標本由于蓋玻片及載玻片都很薄、易碎，使用時應輕拿輕放，每次使用完后要用清潔的布蘸取少量酒精擦拭干凈，并按標簽或編號平放在標本盒中避光保存.在實驗中指導學生正確使用顯微鏡，嚴格按照實驗規(guī)程操作，盡量防止標本損壞.對已破損的玻片標本要及時修復或更換，重新封片，以便再次使用.

3.2 浸制標本的管理

浸制標本是為了保持動植物體固有的形態(tài)和色澤防腐液浸泡制成的.在浸制標本的管理中，要注意標簽要貼牢，要保持標簽的潔凈干燥和保存標本瓶體的干凈整潔，標本要放在標本柜中避光保存.如發(fā)現(xiàn)保存液變質或揮發(fā)減少應及時更換或添加[6].

3.3 干制標本的管理

干制標本管理過程中，要注意標本保形和保色.在日常管理中應有專人負責，定期檢查，防潮、防蟲、防光.例如在標本盒及標本柜中放入樟腦精或樟腦粉等；標本柜的柜門應嚴密，可在柜中放入干燥劑用來除濕；標本室要掛窗簾，平時不用時應關閉窗簾，防止光照使標本變色.

4 結 語

寄生蟲標本的收集、制作、保存以及管理過程中的每一環(huán)節(jié)都很重要.為了保證寄生蟲標本的質量，要制定嚴格的實驗室標本管理制度，利用多種方法與手段將標本的損耗降到最低，保證標本的質量，才能使寄生蟲標本在教學工作中發(fā)揮其應有的作用.隨著寄生蟲標本管理方法及制度的進一步完善，這些標本將會更好地服務于教學和科研，同時對于控制寄生蟲病傳播以及治療和預防等方面也將會發(fā)揮更大的社會效益.

[1] 言敢威,曾慶仁,舒衡平.實驗教學標本來源的現(xiàn)況及其措施[J].基礎醫(yī)學教育,2002,4(3):240-242.

[2] 秦嘯峰,潘晉,陳茜文,等.淺談人體寄生蟲學實驗標本的保存[J].繼續(xù)醫(yī)學教育,2012,11(26):1-3.

[3] 徐靜.常見寄生蟲標本的固定與保存[J].中外醫(yī)療,2008,27(12):108.

[4] 鄭偉.水生經(jīng)濟種類生物標本的制作與保存[J].中國漁業(yè)經(jīng)濟,2009,6(27):138-142.

[5] 張儀,周曉農(nóng),劉和香.醫(yī)學軟體動物標本制作技術的探討[J].中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志,2006,(24):54-61.

[6] 姜良樹.生物標本的保養(yǎng)和維護[J].生物學通報,2001,7(36):35.

PreservationandManagementofParasiticSpecimensforTeaching

GAI Lina, FU Zhanjiang, DAI Xiaopeng

(Department of Medical Technology, Bethune Medical NCO School, Shijiazhuang 050081, China)

This article introduces the methods of collecting, producing and preserving all kinds of parasitic specimens. And several commonly used methods of making specimen fixatives are listed. By discussing the methods of fixing and preserving several common parasites at different developmental stages and different parasitic sites, this paper draws a conclusion that the parasite specimens can be preserved in shape and long-term preservation, so it effectively solves the problem of lack of parasite specimens and further enhances the protection of parasite specimens and the level of utilization, which enables the existing specimens to be properly kept for teaching.

parasites; specimen; preservation

2017-08-08

蓋麗娜，碩士，助教，研究方向：寄生蟲學與生物化學檢驗.E-mail：45638630@qq.com

R38

A

1009-1734(2017)10-0109-03

[責任編輯邵圣文]