張 薇，梁 慧，王玉飛，劉 佳，胡紅焱

嗜沫聚生桿菌致顱內(nèi)感染1例

張 薇，梁 慧，王玉飛，劉 佳，胡紅焱

嗜沫聚生桿菌；顱內(nèi)感染；鑒定

嗜血桿菌屬細(xì)菌主要在人和動物的咽喉和口腔黏膜寄居，少數(shù)寄居于生殖道，引起原發(fā)性化膿性感染及嚴(yán)重的繼發(fā)感染[1-3]。嗜沫聚生桿菌(Aggregatibacter aphrophilus)是最近從嗜血桿菌屬中分出的一個新種，引起的顱內(nèi)感染在國內(nèi)外鮮有報道[4,5]；分離時需要特殊培養(yǎng)基，生化反應(yīng)不典型，鑒定比較困難。本院2014-08檢出1例嗜沫聚生桿菌顱內(nèi)感染病例，微生物特征及耐藥譜值得重視。

1 病例報告

1.1 一般資料 患者，男，50歲，突發(fā)左側(cè)頭痛10 d、右側(cè)肢體活動不利進(jìn)行性加重7 d入院。無眩暈、嘔吐、視物模糊、抽搐等伴隨癥狀。體檢神志清醒、回答切題，不能自立。雙側(cè)瞳孔等大等圓、對光反射靈敏，計算力、理解力、定向力、記憶力正常。MRI檢查提示左側(cè)頂葉長圓形占位(考慮膿腫)，4.1 cm×3.1 cm×3.6 cm，左側(cè)側(cè)腦室受壓。腦脊液檢查潘氏實驗陽性，白細(xì)胞數(shù)1245 M/L，多核細(xì)胞占85%。將無菌抽取的膿性腦脊液進(jìn)行細(xì)菌分離與鑒定。

1.2 細(xì)菌分離與鑒定

1.2.1 主要試劑 巧克力平板、羊血瓊脂平板平板購自英國Oxoid 公司，藥敏紙片、Ⅴ因子、Ⅹ因子、Ⅴ+Ⅹ因子、 β- 內(nèi)酰胺酶檢測試劑等均為英國Oxoid 公司產(chǎn)品。

1.2.2 鑒定 無菌抽取的膿性腦脊液分別進(jìn)行肉湯培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)和直接劃線接種血平板、哥倫比亞巧克力平板，放入5%～10% CO2培養(yǎng)箱，37 ℃培養(yǎng)18～24 h后挑取可疑菌落進(jìn)行分離鑒定; 將分純后的菌株使用生物梅里埃Vitek 2-Compact全自動細(xì)菌鑒定儀和嗜血桿菌配套鑒定卡進(jìn)行鑒定; 采用藥物紙片擴散法(K-B法) 進(jìn)行抗生素敏感試驗，質(zhì)控菌株為流感嗜血桿菌ATCC 49247。菌株β-內(nèi)酰胺酶的測定采用頭孢硝噻吩紙片法，將菌落涂布于浸濕頭孢硝噻吩的紙片上，10 min 內(nèi)觀察結(jié)果，紙片變?yōu)榧t色，即判斷為β-內(nèi)酰胺酶陽性菌株，否則為陰性。之后進(jìn)行16 s rRNA 序列測定。

1.3 實驗結(jié)果

1.3.1 菌落形態(tài) 35 ℃培養(yǎng)24 h后觀察菌落，血平板出現(xiàn)針尖樣菌落，繼續(xù)培養(yǎng)48 h，菌落增至0.5 mm左右，灰白色、無溶血。置于5% CO2孵育箱的巧克力平板培養(yǎng)24 h 后，菌落呈現(xiàn)為黃色不透明、表面出現(xiàn)粗大凸起。肉湯培養(yǎng)基中形成顆粒沉淀，管壁形成的黏性菌膜不易剝落。生理鹽水涂片，染色鏡檢可見短小規(guī)則的桿菌。

1.3.2 藥敏試驗 紙片法測定β- 內(nèi)酰胺酶為陰性，對四環(huán)素、復(fù)方新諾明耐藥, β- 內(nèi)酰胺類如氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢噻肟、頭孢呋辛、氨曲南、美羅培南、亞胺培南均為敏感，對阿奇霉素、左氧氟沙星、氯霉素也敏感。

1.3.3 16 s RNA序列測定 經(jīng)過GenBank和核糖體工程數(shù)據(jù)庫的16 s RNA序列的比對，與嗜沫聚生桿菌同源性為99.8%，最終確定為嗜沫聚生桿菌完善檢查、預(yù)防性抗感染治療后全麻下行左頂葉開顱膿腫清除術(shù)+去骨襻減壓術(shù)，手術(shù)順利，術(shù)后美羅培南抗感染治療。手術(shù)后1周復(fù)查腦脊液常規(guī)正常，3周后復(fù)查CT、磁共振見膿腫消失，痊愈出院。

2 討 論

聚生桿菌屬(Aggregatibacter)細(xì)菌為革蘭陰性桿菌短小桿菌，因培養(yǎng)時容易聚集生長而得名。2006年Norskov 根據(jù)16s RNA序列和全基因組測序的結(jié)果，重新規(guī)劃了聚生桿菌屬[6]，包括伴放線聚生桿菌，嗜沫嗜血桿菌, 副嗜沫嗜血桿菌, 惰性嗜血菌；后來發(fā)現(xiàn)副嗜泡沫嗜血桿菌其實是嗜泡沫嗜血桿菌的一個變種，現(xiàn)在統(tǒng)稱嗜沫聚生桿菌。

嗜沫聚生桿菌最早是1940年引起感染性心內(nèi)膜炎報道[7]，1962年就發(fā)現(xiàn)伴放線聚生桿菌和嗜沫聚生桿菌的相似性，后來發(fā)現(xiàn)副嗜沫嗜血桿菌與嗜沫嗜血桿菌的區(qū)別是生長需要V因子，其原因是副嗜沫嗜血桿菌尼克酰胺-核糖轉(zhuǎn)移酶的基因的缺失。嗜沫聚生桿菌與伴放線聚生桿菌的區(qū)別是觸酶實驗和ONPG水解實驗。

嗜沫聚生桿菌廣泛寄居于人類口腔和上呼吸道，引起呼吸道的急性感染、心內(nèi)膜炎、腦膿腫等[8]，近年國外偶有尿液、生殖道分泌物等標(biāo)本中檢出嗜沫嗜血桿菌，有重要的臨床意義。筆者認(rèn)為，國內(nèi)臨床與實驗室對這類需要在培養(yǎng)基中添加特殊營養(yǎng)成分的致病菌，未引起足夠重視。臨床工作中需要注意，嗜沫聚生桿菌需要富含Ⅴ因子和Ⅹ因子的嗜血桿菌專用巧克力平板和5%CO2環(huán)境下才能生長，這類細(xì)菌的非呼吸道感染應(yīng)引起微生物工作者和臨床醫(yī)師的高度重視。

治療嗜沫聚生桿菌感染通常首選青霉素類，對其耐藥監(jiān)測通常只需檢測β-內(nèi)酰胺酶，以及進(jìn)行氯霉素的耐藥性檢測，而不需要檢測對其他抗生素敏感性。在絕大多數(shù)情況下，β-內(nèi)酰胺酶試驗可以成為檢測細(xì)菌對氨芐西林與阿莫西林耐藥性的快速方法。β-內(nèi)酰胺酶陽性提示對青霉素、氨芐西林和阿莫西林均耐藥。

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(2016-11-08收稿 2017-02-10修回)

(責(zé)任編輯 尤偉杰)

張 薇，本科學(xué)歷，主管技師。

100039 北京，武警總醫(yī)院檢驗科

胡紅焱，E-mail：huhongyanwj@163.com

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