元靜，衛(wèi)芋君，曾雷， 張艷，徐莉，周芳，馮國(guó)華，楊建中

·論著·

細(xì)胞色素氧化酶CYP1A2基因多態(tài)性與利培酮治療漢族精神分裂癥患者療效的關(guān)聯(lián)研究

元靜，衛(wèi)芋君，曾雷， 張艷，徐莉，周芳，馮國(guó)華，楊建中

目的：探對(duì)細(xì)胞色素氧化酶CYP1A2基因多態(tài)性與利培酮治療漢族精神分裂癥患者療效的相關(guān)性。 方法：給予93例漢族精神分裂癥患者單一利培酮治療12周；治療前后陽(yáng)性與陰性癥狀量表(PANSS)、個(gè)人和社會(huì)功能量表(PSP)及認(rèn)知功能評(píng)估；采用微測(cè)序分型技術(shù)(SNaPshot SNP)檢測(cè)患者及100名漢族正常對(duì)照者(對(duì)照組)CYP1A2基因5個(gè)位點(diǎn)(rs2069514,rs2472304,rs35694136,rs4646427,rs762551) 多態(tài)性，分析CYP1A2基因多態(tài)性與利培酮療效的關(guān)系。 結(jié)果：兩組間5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)的基因型、等位基因頻率及SNPs單倍型比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)不同基因型患者間的臨床療效比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；多重線(xiàn)性回歸分析發(fā)現(xiàn)部分多態(tài)性位點(diǎn)與利培酮治療精神分裂癥后陰性癥狀、一般病理學(xué)癥狀、PANSS總分、注意轉(zhuǎn)移力、注意集中力的療效有關(guān)。 結(jié)論：未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞色素氧化酶CYP1A2多態(tài)性是漢族精神分裂癥的易感基因相關(guān)證據(jù)；CYP1A2基因多態(tài)性與利培酮治療的療效相關(guān)。

細(xì)胞色素氧化酶； CYP1A2基因多態(tài)性； 精神分裂癥； 利培酮

利培酮屬于苯丙異噁唑衍生物，是常用的第2代抗精神病藥之一，其在體內(nèi)被細(xì)胞色素氧化酶P450系統(tǒng)的CYP2D6、CYP3A4代謝為藥理作用相近的9-羥利培酮[1-2]，它們一起作為該藥抗精神病的活性成份發(fā)揮作用[2]。有報(bào)道CYP1A2、CYP2D6 及CYP3A4基因多態(tài)性與抗精神病藥療效有重要關(guān)聯(lián)[3]。本研究探討CYP1A2基因多態(tài)性與利培酮治療漢族精神分裂癥療效的關(guān)聯(lián)關(guān)系。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象

患者組：為2015年3月至2016年1月本院住院治療的漢族精神分裂癥患者93例；入組者均符合《美國(guó)精神障礙診斷與統(tǒng)計(jì)手冊(cè)》第4版(DSM-IV)診斷標(biāo)準(zhǔn)；均為首次發(fā)病或既往未經(jīng)過(guò)任何形式治療；陽(yáng)性與陰性癥狀量表(PANSS)>70分；排除患有嚴(yán)重腦器質(zhì)性或軀體疾病、物質(zhì)濫用者；其中男52例，女41例；年齡13～63歲，平均(37.7±12.2)歲；受教育年限0～16年，平均(7.7±3.6)年；病程0.5～44年，平均(6.4±7.4)年?；颊呋蚱浔O(jiān)護(hù)人對(duì)本研究知情同意。對(duì)照組：為同期在我院進(jìn)行健康體檢的100位漢族成年人，其中男79人，女21人；年齡27～70歲，平均(51.4±7.7)歲。入組者無(wú)嚴(yán)重軀體疾病、酒精和/或藥依賴(lài)史及精神病史，且自愿參加本研究并簽署知情同意書(shū)。

兩組間性別、年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

1.2.2 臨床評(píng)估方法 治療前后應(yīng)用 PANSS評(píng)估患者的臨床癥狀；個(gè)人和社會(huì)功能量表(PSP)評(píng)估社會(huì)功能；認(rèn)知功能評(píng)估：瑞文標(biāo)準(zhǔn)推理測(cè)驗(yàn)測(cè)試觀察力及思維能力，韋氏智能測(cè)驗(yàn)中數(shù)字識(shí)記法測(cè)驗(yàn)即刻記憶，數(shù)字劃消測(cè)驗(yàn)測(cè)評(píng)注意力(數(shù)字劃消-1:測(cè)試注意集中力，數(shù)字劃消-2:測(cè)試注意轉(zhuǎn)移力，數(shù)字劃消-3:測(cè)試注意選擇性)。

1.2.3 CYP1A2基因多態(tài)性檢測(cè)方法 采集所有入組者的靜脈血。通過(guò)haplpoview和hapmap軟件對(duì)CYP1A2基因進(jìn)行tag SNP篩選，根據(jù)最小等位基因頻率(MAF)>10%，連鎖不平衡參數(shù)D’=1，r2>0.8 (D’為連鎖不平衡程度隨距離的改變程度，r2為遺傳標(biāo)記與致病位點(diǎn)間的連鎖不平衡系數(shù))的單核苷酸(SNPs)多態(tài)性選取rs2069514(-2964G/A和 3860G>A或 CYP1A2*1C)、rs2472304、rs35694136(-2467delT或 CYP1A2*1D)、rs4646427和rs762551(C734A或-163C/A或CYP1A2*1F)5個(gè)SNP位點(diǎn)。利用基于熒光標(biāo)記單堿基延伸原理的基因分型技術(shù)(SNaPshot SNP)[4]對(duì)入組者進(jìn)行rs2069514、rs2472304、rs35694136、rs4646427和rs762551共5個(gè)SNP位點(diǎn)分型。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SHEsis在線(xiàn)軟件檢測(cè)Hardy-Weinberg平衡、成對(duì)多態(tài)位點(diǎn)連鎖不平衡分析、基因頻率及單倍型等分析。應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同基因型之間測(cè)驗(yàn)量表得分采用方差分析或t檢驗(yàn)、秩和檢驗(yàn);影響因素分析采用多重線(xiàn)性回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 患者組治療情況

患者組均完成12周療程；利培酮平均劑量為(3.12±1.12)mg/d?；颊呓M中較常見(jiàn)的不良反應(yīng)有便秘、體質(zhì)量增加，極少數(shù)出現(xiàn)靜坐不能、口干，經(jīng)過(guò)對(duì)癥處理或隨治療時(shí)間延長(zhǎng)而消失。無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生。

2.2 患者組治療前后各量表評(píng)分比較

治療后患者組PANSS評(píng)分較治療前明顯減少；PSP、瑞文標(biāo)準(zhǔn)推理、數(shù)字識(shí)記、數(shù)字劃消測(cè)驗(yàn)-2評(píng)分較治療前明顯升高(P均<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 患者組治療前后各量表評(píng)分比較±s)

注：**P<0.01

2.3 兩組 CYP1A2基因型、等位基因頻率及基因單倍型比較

兩組 5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡；兩組間5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)基因型、等位基因頻率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。運(yùn)用SHEsis軟件對(duì)rs2069514、rs2472304、rs35694136、rs4646427、rs762551 SNP位點(diǎn)分別構(gòu)建5位點(diǎn)、4位點(diǎn)、3位點(diǎn)、2位點(diǎn)的單倍型，未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的單倍型。

2.4 各基因型患者治療前后各量表評(píng)分差值比較

rs2069514、rs2472304、rs35694136、rs4646427、rs762551這5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)不同基因型患者治療前后PANSS、PSP、數(shù)字記憶廣度值、數(shù)字劃消、瑞文推理評(píng)分差值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.5 基因多態(tài)性與利培酮療效相關(guān)分析

分別以患者rs2069514基因型、rs2472304基因型、rs35694136基因型、rs4646427基因型、rs762551基因型以及基線(xiàn)評(píng)估分?jǐn)?shù)為自變量(X)，不同癥狀治療前后差值為因變量(Y)，進(jìn)行逐步回歸分顯示，部分多態(tài)性位點(diǎn)與利培酮治療精神分裂癥后陰性癥狀、一般病理學(xué)癥狀、PANSS總分、注意轉(zhuǎn)移力、注意集中力的療效有關(guān)。見(jiàn)表3。

表2 兩組 CYP1A2基因基因型及等位基因頻率比較(例，%)

表3 4個(gè)位點(diǎn)基因型治療前后部分量表評(píng)分差值比較±s)

表4 影響利培酮療效的多因素分析

注：PANSS陽(yáng)性差值的決定系數(shù)R2=0.510， PANSS陰性差值的決定系數(shù)R2=0.637， 精神病理分差值的決定系數(shù)R2=0.789， PANSS總分的決定系數(shù)R2=0.686， PSP差值的決定系數(shù)R2=0.418， 瑞文推理差值的決定系數(shù)R2=0.134，瞬時(shí)記憶差值的決定系數(shù)R2=0.173，數(shù)字劃消-1凈分差值的決定系數(shù)R2=0.330，數(shù)字劃消-2凈分差值的決定系數(shù)R2=0.545，數(shù)字劃消-3凈分差值的決定系數(shù)R2=0.215

3 討論

肝臟微粒體細(xì)胞色素P450酶(CYP450)系統(tǒng)是促進(jìn)藥物生物轉(zhuǎn)化的主要酶系統(tǒng)；在已經(jīng)鑒定的多個(gè)P450同工酶中，CYP1A2為“增毒”同工酶，主要存在于肝臟中[5]。人類(lèi)CYP1A2基因位于15號(hào)染色體[5-6]，長(zhǎng)約718 kb，包含7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子。由其轉(zhuǎn)錄的mRNA總長(zhǎng)3121 bp，mRNA翻譯起始密碼子從第2個(gè)外顯子的第10位核苷酸開(kāi)始。

通過(guò)同工酶活性測(cè)定得出CYP1A2基因有2處易發(fā)生移位，分別是5＇側(cè)翼區(qū)-3860位點(diǎn)的G→A突變(rs2069514或-2964G/A或 CYP1A2*1C)和內(nèi)含子1的-163位點(diǎn)的C→A突變(rs762551或C734A或CYP1A2*1F)。有研究[7]發(fā)現(xiàn)在吸煙人群中，5＇側(cè)翼區(qū)-3860位點(diǎn)的G→A突變可降低CYP1A2酶的可誘導(dǎo)性，內(nèi)含子1的-163位點(diǎn)突變純合子的酶活性為其他基因型的1.6倍。本研究所篩選出的Taq SNPs中，也包含了上述兩個(gè)位點(diǎn)；結(jié)果顯示在漢族患者組和對(duì)照組中該基因5個(gè)SNP位點(diǎn)基因型、等位基因頻率以及構(gòu)建的單倍型比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；未發(fā)現(xiàn)CYP1A2基因多態(tài)性是精神分裂癥易感基因的證據(jù)；此與Rodrigo等[8]、陳柯霖等[9]研究結(jié)果不一致，可能與患者病情、地域及人種等因素有關(guān)。

CYP1A2是多種抗精神病藥的代謝酶，有研究[3]發(fā)現(xiàn)CYP1A2、 CYP2D6、CYP3A4基因多態(tài)性與抗精神病藥療效有關(guān)。Yan等[10]研究表明，CYP1A2基因的rs762551位點(diǎn)C等位基因頻率在發(fā)生遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙的精神分裂癥患者中明顯高于未發(fā)生遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙的精神分裂癥患者。多項(xiàng)研究[11-14]探討了CYP1A2基因多態(tài)性與氯氮平、奧氮平所致不良反應(yīng)的關(guān)聯(lián)研究，但尚未得到統(tǒng)一結(jié)論。本研究對(duì)CYP1A2基因多態(tài)性與利培酮療效的關(guān)系進(jìn)行分析，未發(fā)現(xiàn)不同位點(diǎn)基因型患者在治療前后PANSS總分、陽(yáng)性癥狀分、陰性癥狀分及認(rèn)知功能改善的比較存在差異性。CYP1A2基因多態(tài)性與抗精神病藥療效，特別是與認(rèn)知功能變化之間是否有關(guān)?目前此類(lèi)研究較少。通過(guò)對(duì)利培酮治療精神分裂癥療效的影響因素進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)rs762551、rs2472304、rs2069514、rs35694136均參與了影響PANSS陰性癥狀、一般病理學(xué)癥狀、PANSS總分、注意轉(zhuǎn)移力、注意集中力等療效的回歸方程。雖然不同基因型之間癥狀評(píng)分差值無(wú)明顯差異，但在rs762551中，C/C基因型PANSS陰性癥狀分差值變化相對(duì)較大，A/A基因型變化相對(duì)較小，綜合考慮，A/A基因型的精神分裂癥患者可能為利培酮治療陰性癥狀改善的危險(xiǎn)因素；同理，在rs2472304中，A/G基因型在一般精神病學(xué)癥狀評(píng)分差值變化、PANSS總分差值變化較A/A相對(duì)大，A/G可能為利培酮治療精神分裂癥改善一般精神病學(xué)評(píng)分、PANSS總分的保護(hù)因素；在rs2069514中，G/G型PANSS總分差值變化、數(shù)字劃消-2凈分差值較A/A、A/G兩型相對(duì)較大，G/G型可能為利培酮治療精神分裂癥改善PANSS總體以及注意轉(zhuǎn)移力的保護(hù)因素；在rs3569413中，-/-型數(shù)字劃消-1凈分差值變化較T/T、T/-兩型相對(duì)較大，-/-型可能為利培酮治療精神分裂癥改善注意集中力的保護(hù)因素。目前已有大量研究證實(shí)精神分裂癥患者存在明顯的注意損害，尤其對(duì)注意的選擇、轉(zhuǎn)移、控制和保持等方面有缺陷[15]。Sumiyoshis[16]綜述中指出利培酮可以改善注意力這一結(jié)果與多數(shù)研究報(bào)道一致，也與本研究結(jié)果相符。此外，還發(fā)現(xiàn)部分多態(tài)性位點(diǎn)與利培酮治療精神分裂癥后PANSS總分、陰性癥狀分、一般病理學(xué)得分、注意集中力、注意轉(zhuǎn)移力的改善有關(guān)。本研究樣本量少，因此，這些結(jié)果還需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，再次進(jìn)行重復(fù)驗(yàn)證。

綜上， 雖未發(fā)現(xiàn)CYP1A2基因是精神分裂癥易感基因的相關(guān)證據(jù)，但精神分裂癥患者經(jīng)利培酮治療后，其臨床癥狀及認(rèn)知功能改善可能與CYP1A2基因多態(tài)性相關(guān)。

[1]Kennedy WK,Jann MW,Kutscher EC.Clinically significant drug interactions with atypical antipsychotics[J].CNS Drugs, 2013,27 (12)：1021-1048.

[2]何妙珍.利培酮對(duì)精神分裂癥患者代謝影響的臨床研究[D].青島大學(xué),2012.

[3]Fleeman N, McLeod C,Bagust A,et al.The clinical effectiveness and cost-effectiveness of testing for cytochrome P450 polymorphisms in patients with schizophrenia treated with antipsychotics:a systematic review and economic evaluation[J].Centre Reviews Dissemination (UK),2010,14 (3)：1-157.

[4]陳勇,余亞新,劉興祥,等.SNaPshot技術(shù)檢測(cè)乙型肝炎病毒基因組P基因區(qū)單核苷酸多態(tài)性的研究[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志,2005,19(2):162-164.

[5]金劍,肖忠革,陳慧瑾.細(xì)胞色素氧化酶CYP1A2基因多態(tài)性及其對(duì)代謝的影響[J].中國(guó)臨床藥學(xué)雜志,2005,14 (1)：60-62.

[6]Wiley Online Labrary Inc.Currently recognized genes for schizophrenia:High-resolution chromosome ideogram representation [EB/OL].[2015-10-13].http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26462458.

[7]肖鵬,周宏灝.細(xì)胞色素氧化酶CYP1A2的研究進(jìn)展[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2008,33 (5)：456-460.

[8]Rodrigo BB,Leandro CA,Mateus JAD,et al.The CYP1A2-163C>A polymorphism is associated with super-refractory schizophrenia[J].Schizophrenia Research,2015,169(1-3)：502-503.

[9]陳柯霖,張國(guó)軍,呂虹,等.CYP1A2基因C163A多態(tài)性與精神分裂癥易感性的相關(guān)研究[J].中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù),2015,10(2)：182-183.

[10]Yan Fu,Chang-he Fan,He-huang Deng,et al.Association of CYP2D6 and CYP1A2 gene polymorphism with tardive dyskinesia in Chinese schizophrenic patients[J].Acta Pharmacologica Sinica,2006,27(3)：328-332.

[11]Hakan B,Cengiz B,Stefan L,et al.CYP1A2*1F polymorphism decreases clinical response to clozapine in patients with schizophrenia[J].Bulletin Clinical Psychopharmacology,2011,21 (2)：93-99.

[12]Fleeman N,Dundar Y,Dickson R,et al.Cytochrome P450 testing for prescribing antipsychotics in adults with schizophrenia:systematic review and meta-analyses[J].Pharmacogenomics J,2011,11 (1)：1-14.

[13]Kohlrausch FB,Severino GC,Lobato ML,et al.The CYP1A2-163C>A polymorphism is associated with clozapine-induced generalized tonic-clonic seizures in Brazilian schizophrenia patients[J].Psychiatry Research,2013,209 (2)：242-245.

[14]Ivanova SA,Toshchakova VA,Filipenko ML,et al.Cytochrome P450 1A2 co-determines neuroleptic load and may diminish tardive dyskinesia by increased inducibility[J].World J Biological Psychiatry,2015,16(3)：200-205.

[15]譚西英,甘景梨,高存友,等.精神分裂癥患者的認(rèn)知功能損害[J].國(guó)際精神醫(yī)學(xué)雜志,2011, 38(1)：33-38.

[16]Sumiyoshi T.Possible dose-side effect relationship of antipsychotic drugs:relevance to cognitive function in schizophrenia[J].Expert Rev Clin Pharmacol,2008,1(6)：791-802.

Association between cytochrome oxidase CYP1A2 gene polymorphisms and effecacy of risperidone in Chinese Han patients with schizophrenia

YUANJing，WEIYu-jun，ZENGLei，ZHANGYan，XULi，ZHOUFang，F(xiàn)ENGGuo-hua，YANGJian-zhong.

DepartmentofPsychiatric,theSecondAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity,Kunming650101,China

Objective：To explore the association between cytochrome oxidase CYP1A2 gene polymorphisms and effecacy of risperidone in Chinese Han schizophrenia. Method：Ninty-three Chinese Han patients with schizophrenia (cases group) received 12-week risperidone treatment. And they were evaluated by positive and negative symptoms scale (PANSS),personal and social performance scale (PSP) and cognitive function before and after risperidone treatment，respectively. Using micro sequencing-genotyping technology(SNaPshot SNP) the CYP1A2 gene including 5 tags of single nucleotide polymorphisms (rs2069514,rs2472304,rs35694136,rs4646427,rs762551) in the patients and 100 Chinese Han normal controls (control group) were detect and compared. The correlation of CYP1A2 gene polymorphism and the efficacy of risperidone was analyzed. Results：The frequencies of genotype, allele and SNPs haploid type of the 5 tags of CYP1A2 gene between the two groups showed no significant difference. Multiple linear regression analysis indicated that partial polymorphism loci were correlated with PANSS scores (including negative symptoms, pathological symptoms commonly, PANSS total scores), attention transfer, attention concentration through risperidone treatment. Conclusion：There is no evidence that the cytochrome oxidase CYP1A2 gene is a susceptibility gene of schizophrenia. The effecacy of risperidone is related to CYP1A2 gene polymorphisms.

cytochrome oxidase； CYP1A2 gene polymorphisms； schizophrenia； risperidone

國(guó)家自然科學(xué)基金(81160170)

650101 昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院精神科

楊建中，E-Mail：:jzhyang2004@163.com

R749.3

A

1005-3220(2017)01-0004-05

2016-05-27

2016-10-18)