張廣慧，沈喜梅，周則衛(wèi)，劉培勛，吳紅英，龍 偉*(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院＆北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所,天津 300192)

黑茶的藥理作用研究進(jìn)展

張廣慧，沈喜梅，周則衛(wèi)，劉培勛，吳紅英，龍 偉*
(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院＆北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所,天津 300192)

本文對近年來黑茶在藥理學(xué)方面的研究進(jìn)行了梳理，黑茶的藥理作用包括以下幾個(gè)方面：減肥、降脂、降膽固醇、降血糖、抑菌、改善腸道、抗氧化抗衰老、抗腫瘤等。

黑茶；藥理作用；減肥；降血脂；降血糖；抗菌；抗氧化；抗腫瘤

黑茶，是我國生產(chǎn)的綠茶、黃茶、黑茶、白茶、紅茶、青茶六大茶類之一，它的主要產(chǎn)地有湖南、湖北、四川、云南、陜西等地。黑茶采用的原料較粗老，是壓制緊壓茶的主要原料。制茶工藝一般包括殺青、揉捻、渥堆和干燥四道工序。黑茶按地域分布，主要分類為湖南黑茶（茯茶）、四川黑茶（邊茶）、云南黑茶（普洱茶）、廣西六堡茶、湖北老黑茶及陜西黑茶（茯茶）（俗稱黑五類）。黑茶屬于后發(fā)酵茶，由于其特殊的加工過程形成了其獨(dú)特的品質(zhì)。渥堆是黑茶品質(zhì)形成的關(guān)鍵工序，其原理是渥堆過程中的胞外酶、微生物呼吸熱以及微生物自身體內(nèi)代謝的綜合作用，具體表現(xiàn)在葉綠素被破壞、多酚類物質(zhì)的氧化、果膠、糖類的水解，香氣物質(zhì)的形成等［1-2］。黑茶經(jīng)過渥堆發(fā)酵后，茶多酚因多酚氧化酶引起的氧化聚合反應(yīng)而含量銳減；兒茶素因微生物的酶促氧化與非酶促作用轉(zhuǎn)化，其組分及比例發(fā)生明顯改變；氨基酸和可溶性糖含量亦有所變化等［3］。黑茶作為我國的主要飲品之一,具有廣泛的藥用和保健作用，目前研究表明黑茶已知的功效主要有以下幾方面。

1 減肥

邊疆人民自古就有飲用黑茶的習(xí)慣，有“寧可三日無食，不可一日無茶”之說。現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)從個(gè)體水平、細(xì)胞水平和分子水平等多面證明黑茶具有減肥作用。在個(gè)體水平上，Qiong S等［4］研究發(fā)現(xiàn)普洱茶中乙酸乙酯提取物和水提取物對營養(yǎng)性肥胖ICR模型小鼠有顯著的減肥作用。另有研究發(fā)現(xiàn)［5-6］，黑茶水提取物對營養(yǎng)肥胖型小鼠的體質(zhì)量、Lee′s指數(shù)、脂肪的重量、脂肪系數(shù)和脂肪細(xì)胞的大小和數(shù)目有不同程度的抑制作用。在細(xì)胞水平上，黑茶水提物能有效抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖和分化，并具有劑量依賴關(guān)系；200 μg/mL黑茶水提取物還可調(diào)控肝HepG2中與脂肪代謝相關(guān)酶系的基因表達(dá)，有效控制肝細(xì)胞HepG2中的脂質(zhì)積累［7］。在分子水平上，黑茶可影響胰脂肪酶、α－淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酸合酶等消化酶的活性［8-9］，即可減少機(jī)體對脂肪和糖類物質(zhì)的吸收，也可阻滯脂肪酸的合成使脂肪合成減少，并升高丙二酰輔酶A濃度，降低食欲，從而達(dá)到減肥目的［10］。此外，另有研究［11-12］發(fā)現(xiàn)，黑茶能夠誘導(dǎo)3T3-Ll前脂肪細(xì)胞內(nèi)活性氧（reactive oxygen species，ROS）增加，明顯下調(diào)過氧化物酶體增殖物激活受體γ2（peroxisome proliferator-activated receptor γ2,PPARγ2）、CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白-α（C/EBPα）和蛋白酪氨酸磷酸酶1B （PTP-1B）mRNA及其蛋白質(zhì)表達(dá)，下調(diào)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 （GLUT4）mRNA表達(dá)及GLUT4蛋白質(zhì)表達(dá)，抑制3T3-Ll前脂肪細(xì)胞的分化。黑茶提取物從個(gè)體細(xì)胞和分子等不同水平上調(diào)節(jié)與脂肪合成分解相關(guān)基因表達(dá)，抑制脂肪的合成，加速脂肪的分解，從而抵抗和防治肥胖。

2 降膽固醇

膽固醇是機(jī)體各種組織及細(xì)胞的必要組成物質(zhì)，是各種甾體類激素的重要前體，與人體多個(gè)系統(tǒng)的正常生理功能密切相關(guān)，但是由于膽固醇的升高也使人體產(chǎn)生了多種疾?。ㄈ鐒?dòng)脈硬化、膽石癥、脂肪肝等）。膽固醇降解的主要通路是膽汁酸的合成，新近研究表明，肝臟X受體(1iver X receptor,LXR)、法尼酯衍生物 X受體 (farnesoid X receptor,FXR)等在膽汁酸代謝過程中起重要作用[13]。Lv HaiPeng等［14］研究發(fā)現(xiàn)，普洱黑茶的乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及水提取物在濃度大于 50 μg/mL時(shí)，對LXR和PPARγ均有激活作用，乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物主要成分是多酚類物質(zhì)。傅冬和等［15］研究發(fā)現(xiàn)，黑茶水提物可通過FXR受體抑制膽固醇7α羥化酶（CYP7A1）控制膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)槟懼幔龠M(jìn)膽汁酸的分泌和排泄，調(diào)節(jié)膽固醇的轉(zhuǎn)運(yùn)、合成和吸收。動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)的早期病變的重要環(huán)節(jié)是巨噬細(xì)胞無限制地?cái)z取氧化脂質(zhì)進(jìn)而形成泡沫細(xì)胞，Chen LiChing等［16］發(fā)現(xiàn)普洱黑茶可通過抑制煙堿型乙酰膽堿受體（α9nAChR）和單核細(xì)胞上低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein，LDL）受體的表達(dá)，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的早期病變，對尼古丁誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞的形成有重要影響。黑茶可通過調(diào)節(jié)膽汁酸的合成影響膽固醇的降解，減少過高引起的多種疾病的發(fā)生，通過影響泡沫細(xì)胞的形成對動(dòng)脈粥樣硬化早期病變有一定的預(yù)防作用。

3 降脂

隨著人們生活水平的不斷提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，同時(shí)缺乏足夠的運(yùn)動(dòng)，致使高血脂癥的發(fā)病率逐年升高。關(guān)于黑茶對血脂的降低作用，國內(nèi)外已有大量文獻(xiàn)證實(shí)。林勇等［17］以高脂血癥小鼠為模型，給予茯磚茶水提物，與模型組相比，茯磚茶組血清總膽固醇 （Total Cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）和低密度脂蛋白 （Low-density lipoproteincholesterol，LDL-C）水平下降，并呈劑量依賴性升高高密度脂蛋白 （High-density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）水平，同時(shí)小鼠肝組織切片HE染色顯示，肝細(xì)胞漿中的脂肪顆粒明顯減少?？Х葔A對小鼠肝臟脂肪酶活性有明顯的影響[18]。高斌等[19]發(fā)現(xiàn)普洱黑茶茶褐素可以促進(jìn)體內(nèi)脂質(zhì)TC的降解，起到明顯的降血脂功效。并且黑茶還可通過增加激素敏感性脂肪酶 （hormone-sensitive triglayceride lipase,HSL）活性及其mRNA的表達(dá)量促進(jìn)TG的降解；吳朝比等[20]認(rèn)為黑茶抑制FAS蛋白的活性而降低對外源性TG的吸收，減少脂肪的合成，促進(jìn)脂肪酸的排泄。表明黑茶能減少外源脂質(zhì)的消化吸收，抑制細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的生物合成，同時(shí)促進(jìn)它在體內(nèi)的氧化分解及轉(zhuǎn)運(yùn)排出，從而降低血脂。

4 降血糖

糖尿病是一種代謝性疾病，現(xiàn)已成為危害人類健康的主要疾病之一。隨著對糖尿病研究的不斷深入，對于該疾病的預(yù)防和治療已經(jīng)取得不錯(cuò)的成果。黑茶提取物在調(diào)節(jié)血糖方面也有著明顯的效果。龔受基等［21］以HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型研究，發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞中葡萄糖消耗量減少，TG、TC堆積量增加，GLUT2、肝脂酶（Tepaticlipase，HL）和AMP依賴的蛋白激酶（Adenosine 5‘-monophosphate(AMP)-activated protein kinase，AMPKα2）基因表達(dá)降低，磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（Phosphoenolpyruvate carboxykinase，PEPCK）和ACC2基因表達(dá)升高。六堡茶通過增加AMPKα2和HL mRNA表達(dá)、減少ACC1、ACC2 mRNA表達(dá)，調(diào)控能量代謝和加速脂肪氧化來促進(jìn)葡萄糖吸收，改善胰島素抵抗HepG2細(xì)胞內(nèi)總膽固醇含量；在蛋白水平上六堡茶能夠促進(jìn)磷酸化蛋白激酶（Akt）ser473位點(diǎn)磷酸化，改善胰島素抵抗導(dǎo)致的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和肝糖原合成紊亂。另有Cai Xianbin等［22］研究發(fā)現(xiàn)普洱黑茶在肥胖小鼠模型中，可改善葡萄糖耐受性和胰島素抵抗，降低糖異生相關(guān)基因的表達(dá)，增強(qiáng)信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子（signal transducer and activator of transcription，STAT3）的磷酸化。體外HepG2細(xì)胞中，普洱黑茶可增強(qiáng)的IL-6誘導(dǎo)的STAT3磷酸化，推測普洱黑茶可能通過調(diào)節(jié)IL-6/STAT3信號(hào)通路改善脂質(zhì)代謝和胰島素抵抗。普洱黑茶中咖啡堿處理3T3-L1前脂肪細(xì)胞后，經(jīng)基因芯片分析發(fā)現(xiàn)磷脂轉(zhuǎn)移蛋白（phospholipid transfer protein，PLTP）可能與血糖的降低有關(guān)，可用于2型糖尿病的治療［23］。黑茶水提取物還可以抑制α_葡萄糖苷酶活性，有效地抑制食物中碳水化合物的水解和消化，延緩葡萄糖的吸收，從而有效地阻止糖尿病患者餐后血糖的升高達(dá)到降血糖的目的［24-26］。黑茶提取物還可以在體外抑制葡萄糖苷酶，減少蛋白質(zhì)非酶糖基化和抑制醛糖還原酶，由此可見黑茶具有降糖和改善糖尿病并發(fā)癥的作用。

5 抗氧化抗衰老

許多研究表明，衰老與自由基損傷密切相關(guān)。氧陰離子(.O2-)、羥自由基(.OH)和過氧化氫(H2O2)等是生物體內(nèi)主要的活性氧自由基 ,由它們引發(fā)的體內(nèi)脂質(zhì)過氧化是機(jī)體衰老發(fā)生的重要原因。丁金祥等［27-29］研究發(fā)現(xiàn)茯磚茶的乙醇提取物和青磚茶乙酸乙酯萃取物具有明顯的抗氧化活性，體外可清除DPPH，ABTS自由基。也可保護(hù)豬腎細(xì)胞 （LLCPK1）細(xì)胞H2O2誘導(dǎo)的氧化損傷，表現(xiàn)為提高細(xì)胞內(nèi)的抗氧化酶活性，包括過氧化氫酶（Catalase, CAT），超氧化物歧化酶 （Superoxide Dismutase, SOD），谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase, GSH-PX），降低丙二醛（Malondialdehyde,MDA）的含量。另有Yu Miao等［30］研究表明，普洱黑茶可保護(hù)由喹烯酮引起的功能性和器質(zhì)性肝損傷，這種保護(hù)作用是通過激活Nrf2/HO-1通路實(shí)現(xiàn)的，由普洱黑茶中的茶多酚等活性物質(zhì)活化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)酶（extracellular regulated protein kinases, ERK），有效保護(hù)氧化應(yīng)激產(chǎn)生的損傷。普洱黑茶和γ-氨基丁酸還可有效降低紅藻氨酸處理的大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞 (PC12)中Ca2+的釋放、ROS的產(chǎn)生和脂質(zhì)的過氧化，經(jīng)Western blot分析發(fā)現(xiàn)環(huán)氧酶-2（Cyclooxygenase-2，COX-2）和分裂原激活的蛋白激酶（mitogen activated protein kinases，P38MAPK）的表達(dá)降低，前列腺素E2（Prostaglandin E2，PGE2）含量降低［31］。普洱黑茶可通過提高SOD、GSH-PX及GSH-PX/MDA比值緩解順鉑產(chǎn)生的肝毒性，對順鉑誘導(dǎo)的肝臟氧化損傷有一定的保護(hù)作用［17，32］。黑茶激活抗氧化相關(guān)通路，提高抗氧化酶的活性，表現(xiàn)明顯的抗氧化活性。

6 改善腸道

隨著飲食結(jié)構(gòu)及精神心理和社會(huì)因素等的改變，胃腸功能障礙性疾病成為影響現(xiàn)代人生活質(zhì)量的重要疾病之一。黑茶調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)和腸道菌群的作用也不斷被發(fā)現(xiàn)。曾婷玉等［33-34］研究發(fā)現(xiàn)，茯磚茶高、中、低劑量（210,105,52.5 mg/kg）的預(yù)防組和治療組對番瀉葉引起小鼠腹瀉腸道生理狀態(tài)有調(diào)節(jié)作用，對乳酸桿菌等有益菌群的繁殖有促進(jìn)作用，而對大腸桿菌等有害菌群的生長有抑制作用，并呈現(xiàn)劑量依賴性。Wang Yuan-liang等［35］發(fā)現(xiàn)小鼠感染大腸桿菌后，經(jīng)茯磚茶提取物治療后，血液中血小板，總蛋白和白蛋白上調(diào)，而血清中甘油三酯，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶，肌酸酐和尿素氮下調(diào)，胃、腎、十二指腸、回腸和結(jié)腸的組織學(xué)切片表明感染黏膜炎癥減輕，乳酸桿菌，類桿菌等菌群多樣性增加，說明茯磚黑茶還可保護(hù)感染大腸桿菌小鼠腎臟和肝臟，提高免疫功能，調(diào)節(jié)結(jié)腸菌群。通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)［36-38］表明青磚茶、六堡茶、茯磚茶、千兩茶四種黑茶均能不同程度促進(jìn)小鼠胃排空和小腸推進(jìn)功能。吳香蘭等［39］用氨芐青霉素引起的小鼠腸道菌群失調(diào)及免疫功能低下模型，檢測小腸黏膜中分泌型免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，sIgA）、白介素-2（Interleukin-2，IL-2），血清中白蛋白和總蛋白含量及回腸部病理，發(fā)現(xiàn)茯磚茶提取物能修復(fù)受損黏膜，表現(xiàn)出對腸道免疫功能的調(diào)節(jié)作用。而在黑茶對紊亂小鼠模型的影響的實(shí)驗(yàn)中也證明了黑茶具有一定的調(diào)整腸道紊亂作用。

7 抑菌

黑茶含有多種成分，在黑茶提取物中其有效成分茶多酚具有較強(qiáng)的抗菌消炎、抗病毒等生物活性而備受研究者青睞。Keller等［40］研究茯磚茶和綠茶對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、索氏志賀菌、沙門氏菌的抑菌作用，發(fā)現(xiàn)茯磚茶提取物，在5 mg/mL及以下濃度時(shí)可減少腸道病原體志賀氏菌和金黃色葡萄糖菌的生長，抑制率達(dá)50%，而對大腸桿菌、銅綠假單胞菌和沙門氏菌無明顯抑制作用。Wang Yi等［41］發(fā)現(xiàn)普洱黑茶可減少附著在牙齦組織上的口腔病原菌，改善口腔軟組織的健康。

8 抗腫瘤

近年來，隨著醫(yī)學(xué)與茶學(xué)學(xué)科交叉日益緊密，黑茶及黑茶中很多組分的抗腫瘤研究呈現(xiàn)十分活躍的局面。宋魯彬等[42]利用人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-8及人胃癌細(xì)胞SGC-7901兩種細(xì)胞株研究黑茶對消化道腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黑茶具有良好的抑制消化道腫瘤細(xì)胞生長的作用,飲用黑茶極大的降低了食管癌產(chǎn)生的幾率，Zhao Hang等［43］的研究證明普洱黑茶提取物茶褐素使胃癌細(xì)胞SGC-7901細(xì)胞周期停留在S期，G2/M期細(xì)胞數(shù)減少，但對正常細(xì)胞CCC-HEL-1細(xì)胞影響較小。Zhao Xin等［44］發(fā)現(xiàn)普洱黑茶對人舌鱗癌TCA8113細(xì)胞增值也有抑制作用并誘導(dǎo)其凋亡。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，與對照組小鼠相比，普洱黑茶給藥組小鼠腫瘤的體積和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率均降低，血清中促炎性因子IL-6、IL-12、TNF-α和TNF-γ水平也均有不同程度的降低，通過上調(diào)Bax和下調(diào)Bcl-2誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，表明普洱黑茶對頰黏膜癌有預(yù)防和抗轉(zhuǎn)移作用，并有劑量依賴性。目前認(rèn)為黑茶中起到抑制腫瘤細(xì)胞生長的物質(zhì)主要是兒茶素類茶多酚及其組成中的各種兒茶素單體和茶多酚的氧化產(chǎn)物茶色素。并且茶多酚作為一種抗氧化劑，可以結(jié)合金屬離子、捕獲活性氧產(chǎn)物，降低它們對蛋白質(zhì)、細(xì)胞脂膜和核酸的損害作用。在較低劑量時(shí)，其還可以特異性地影響細(xì)胞內(nèi)特定的酶類、受體和脂膜的活動(dòng)，從而表現(xiàn)出多種生物活性[45]。

除以上藥理作用，黑茶還具有抗凝血［46］、保肝以及激活胰脂肪酶和α-淀粉酶等作用［47-48］。郭紹來等[49]研究還發(fā)現(xiàn)黑茶茶多酚及其主要成分兒茶素，表沒食子酸鹽（epigallocatechin gallate，EGCG）可以通過提高被紫外輻射動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的抗氧化酶活性、降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，而減輕輻射所致的過氧化損傷，以達(dá)到抗輻射的目的。

9 小結(jié)

綜上所述，黑茶作為我國的特種茶之一，它獨(dú)特的風(fēng)味和廣泛的藥用及保健作用已經(jīng)引起了國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。經(jīng)過多年的研究，現(xiàn)在已經(jīng)知道了黑茶中的主要有效成分及其部分作用，但是還是有不少關(guān)于黑茶的藥理作用及理化性質(zhì)沒有探明。今后對于黑茶的研究探索可以從下幾個(gè)方面展開：（1）研究黑茶中各種有效成分各自具體的藥理作用及其作用機(jī)制；（2）研究黑茶各成分的含量對黑茶品質(zhì)的影響，及不同制茶工藝對黑茶藥理活性的影響；（3）目前，市面上以黑茶為主要原料的產(chǎn)品較少，所以研究黑茶提取物在保健品方面的應(yīng)用擁有不錯(cuò)的前景；（4）有關(guān)黑茶抗輻射作用的研究還不夠完善，還需要更進(jìn)一步研究觀察黑茶的抗輻射作用機(jī)制。

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（本文編輯 匡靜之）

Research Progress of Pharmacological Effects of Dark Tea

ZHANG Guanghui,SHEN Ximei,ZHOU Zewei,LIU Peixun,WU Hongying,LONG Wei*
(Institute of Radiation Medicine,Chinese Academy of Medical Science&Peking Union Medical College,Tianjin 300192,China)

In this paper,the pharmacological effects of Dark tea on weight loss,lipid-lowering,lowering cholesterol, lowering blood sugar,antibacterial,improve intestinal tract,anti-aging antioxidant,anti-tumor and so on in recent years were presented.

dark tea;pharmacological effects;weight loss;lipid-lowering;lowering blood sugar;antibacterial;antioxidant; anti-tumor

R28；S571.1

B

10.3969/j.issn.1674－070X.2017.03.029

2016-05-12

國家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(81202153)；天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃青年項(xiàng)目(14JCQNJC10900)；中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所發(fā)展基金(2016ZX310070)；中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所青年探索基金（2016ZX310072）。

張廣慧，女，在讀碩士研究生，研究方向：輻射防護(hù)食品藥品研究。

*龍 偉，男，博士，副研究員，E-mail:longway@irm-cams.ac.cn。

本文引用：張廣慧，沈喜梅，周則衛(wèi)，劉培勛，吳紅英，龍 偉.黑茶的藥理作用研究進(jìn)展[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，37（3）：340-344.