賀婭莎 王 彥

（山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，山西 太原 030001）

鹽酸小檗堿對T2DM大鼠血內(nèi)毒素的干預(yù)研究

賀婭莎 王 彥

（山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，山西 太原 030001）

目的研究小檗堿對T2DM大鼠血內(nèi)毒素的影響及意義。方法58只大鼠隨機分為:對照組、T2DM組。14周后，將成模的T2DM組又分為：單純飲食組（A組）、小檗堿組（B組）；于4、8、14、22周時處理大鼠，同期設(shè)對照組（n=6）。利用生化法測定相應(yīng)指標。結(jié)果①成模過程中，T2DM組比NC組所測指標升高（P＜0.05）；②干預(yù)后A、B組大鼠指標降低，高于NC組（P＜0.05），B組較A組明顯（P＜0.05）。結(jié)論鹽酸小檗堿可以改善體內(nèi)炎癥水平，進而治療T2DM。

2型糖尿??；內(nèi)毒素血癥；胰島素抵抗；鹽酸小檗堿

隨著人民生活方式的改變，肥胖癥的發(fā)生率逐年上升，已有研究表明，肥胖是引發(fā)糖尿病等代謝性疾病的主要誘因。2型糖尿病具有較高致殘及致死率，已經(jīng)成為全世界嚴重危害公共社會健康的疾病之一。目前研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病和肥胖這兩種代謝性疾病是以胰島素抵抗和慢性低度全身性炎癥為特征的[1]；小檗堿（又名黃連素）作為臨床上長期使用于抗腸道細菌感染的藥物，其對糖尿病降糖效果還未廣為應(yīng)用。本實驗旨在檢測大鼠血漿內(nèi)毒素水平,探討鹽酸小檗堿對代謝性內(nèi)毒素血癥的保護作用，為臨床治療肥胖和胰島素抵抗等相關(guān)疾病提供一點新的治療依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料：健康雄性SD大鼠64只[6～8周，體質(zhì)量（180±20）g]由山西醫(yī)科大學(xué)生理實驗室提供及飼養(yǎng)。高糖高脂飼料組成成分：基礎(chǔ)飼料65%、豬油10%、蔗糖15%、干蛋黃10%。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機分兩組:對照組（NC組，n=24）和T2DM組（T2DM組，n=40）。NC組大鼠普通飼料喂養(yǎng)。T2DM組大鼠經(jīng)高糖高脂膳食喂養(yǎng)12周后，隔夜禁食8 h給予腹腔注射藥物鏈脲佐菌素（STZ）30 mg/kg，之后每2 d于鼠尾靜脈取血測空腹血糖（FBG），連續(xù)2次以上FBG＞7.8 mmol/L，即認為造模成功。將成模的2型糖尿病大鼠隨機分為單純飲食組（干預(yù)Ⅰ組，n=6，改為普通飼料喂養(yǎng)）、小檗堿聯(lián)合飲食治療組[干預(yù)Ⅱ組，n=6，改為普通飼料喂養(yǎng)，同時給予鹽酸小檗堿200 mg/（kg?d）灌胃]、繼續(xù)高糖高脂飲食喂養(yǎng)組（簡稱干預(yù)Ⅲ組，n=6，高糖高脂飼料喂養(yǎng)）。

1.2 實驗方法

1.2.1 標本采集：T2DM大鼠成模高糖高脂飼料喂養(yǎng)第4、8周時，及成模后第14周，分別隨機選取NC組和T2DM組各6只大鼠，禁食8 h后給予20%烏拉坦4 mL/kg的劑量腹腔注射麻醉大鼠后，測定大鼠體質(zhì)量，無菌環(huán)境下開腹，采血，分離血漿、血清置EP管內(nèi)，存于-80 ℃冰箱，樣本集齊后統(tǒng)一處理。

1.2.2 檢測方法：上述血標本同批測定以下指標，試劑顯色基質(zhì)法測血漿內(nèi)毒素（LPS），免疫濁度法測血清C反應(yīng)蛋白（CRP）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽固醇（TC）、血三酰甘油（TG）、空腹血糖（FBG），放免法測空腹胰島素（FINS），計算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR），計算公式：FPG（mmol/L）×FINs（mIU/L）/22.5。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS 17.0軟件包進行統(tǒng)計分析，定量數(shù)據(jù)以（x-±s）表示，定性資料用率或構(gòu)成比表示。不同組間各指標均數(shù)的比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD法；不同組間不同時間點各指標的比較采用析因設(shè)計資料的方差分析；指標間相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 T2DM大鼠成模過程中：①第4周末，與NC組相比，T2DM組大鼠體質(zhì)量增加，F(xiàn)PG、FINS及HOMA-IR無明顯變化， ALT、TG、CRP、LPS水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。②第8周末，與NC組相比，T2DM組大鼠體質(zhì)量增加，F(xiàn)PG、FINS及HOMA-IR水平輕度增高，ALT、TG、CRP、LPS均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。③T2DM大鼠成模時，與NC組相比，T2DM組大鼠毛色無光澤，活動少，體質(zhì)量增加較為顯著，F(xiàn)PG、FINS顯著升高，HOMA-IR增大，ALT、TG、CRP、LPS顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 造模成功后各組的情況：即第22周末，①與干預(yù)Ⅲ組相比，干預(yù)Ⅰ組大鼠體質(zhì)量、FPG、HOMA-IR、ALT、TG、CRP、LPS均低于干預(yù)Ⅲ組（P＜0.05），高于NC組（P＜0.05）。②與干預(yù)Ⅲ組相比，干預(yù)Ⅱ組大鼠體質(zhì)量、FPG、HOMA-IR、ALT、TG、CRP、LPS有顯著下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；高于NC組（P＜0.05）。③與NC組比較，干預(yù)Ⅲ組大鼠體型肥碩，無活動，小便增多，體質(zhì)量、FPG、FINS、HOMA-IR、ALT、TG、CRP、LPS均顯著增高（P＜0.05）。干預(yù)后各組大鼠FPG、FINS、HOME-IR的變化。

3 討 論

肥胖和糖尿病是胰島素抵抗和全身慢性低度炎癥性為特征的兩種代謝性疾病，LPS則是參與早期全身炎癥級聯(lián)反應(yīng)的觸發(fā)因子。Cani等發(fā)現(xiàn)，高脂喂養(yǎng)4周的小鼠 LPS濃度升高了2～3倍，本實驗經(jīng)過高糖高脂喂養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)大鼠的體質(zhì)量增加，炎性因子CRP、LPS隨著喂養(yǎng)時間的延長逐漸增高，這與Cani的研究一致，說明高脂飲食喂養(yǎng)后的大鼠體內(nèi)存在著慢性低度炎癥。隨著造模時間的延長，于實驗第14周成模時，大鼠的CRP、LPS、FPG、FINS、HOMA-IR增高，說明成模的大鼠體內(nèi)伴發(fā)著胰島素抵抗與慢性低度炎癥。22周時，大鼠的體質(zhì)量進一步增加，LPS與胰島素抵抗程度加重，說明高脂飲食誘發(fā)的代謝性內(nèi)毒素血癥，致使的全身性慢性炎癥與肥胖、胰島素抵抗密切相關(guān)。

小檗堿是存在于黃連、黃柏等藥材中的主要生物堿，臨床上長期用于抗腸道細菌感染，現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)它還有抗心律失常、擴張冠狀血管、降血糖、降血脂、減輕體質(zhì)量等多種作用。近年來動物實驗及臨床療效觀察均證實，小檗堿能安全、有效地降脂、降糖、減輕體質(zhì)量等。但其對糖尿病的發(fā)生機制尚不明確，本實驗的研究結(jié)果中，可以得出：經(jīng)過小檗堿與單純飲食干預(yù)后的大鼠炎癥水平下降，胰島素抵抗程度減輕；小檗堿表現(xiàn)明顯；說明小檗堿對代謝性內(nèi)毒素血癥及系統(tǒng)性炎癥有保護作用。Eva Tomas 還研究發(fā)現(xiàn)，高脂飲食可迅速改變腸道菌群的結(jié)構(gòu)，但當其轉(zhuǎn)變?yōu)檎ｏ嬍澈螅c道菌群的結(jié)構(gòu)則可以完全恢復(fù)，表明成年小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)具有高度的彈性，飲食治療后，腸道菌群結(jié)構(gòu)改善，隨著G-的減少體內(nèi)LPS減少，因此可以得出，飲食于肥胖、糖尿病等代謝性疾病中起著至關(guān)重要的作用。

總之，代謝性內(nèi)毒素血癥引起的慢性低度炎癥伴隨著肥胖和2型糖尿病等代謝性疾病的發(fā)生發(fā)展。本實驗研究可以得出：小檗堿作為一種臨床上長期抗腸道感染的藥物，可通過改善血漿內(nèi)毒素水平，從而改善胰島素抵抗。為2型糖尿病及肥胖的控制、治療提供新的理論依據(jù)和新的治療途徑。

[1] 艾正琳.黃芩苷、苦參堿、小檗堿對NASH大鼠的治療作用及對L-FABP的影響與機制研究[D].北京:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,2012.

R587.1 文獻標識碼：B 文章編號：1671-8194（2017）23-0026-02