袁艷

（河南省鄭州市兒童醫(yī)院 感染科，河南 鄭州 450000）

·經(jīng)驗(yàn)交流·

手足口病患兒血清神經(jīng)元烯醇化酶、降鈣素原、S100β蛋白及神經(jīng)肽Y表達(dá)水平與病情的關(guān)系

袁艷

（河南省鄭州市兒童醫(yī)院 感染科，河南 鄭州 450000）

目的探討手足口病患兒血清神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）、降鈣素原（PCT）、S100β蛋白及神經(jīng)肽Y（NPY）表達(dá)水平與病情的關(guān)系。方法收集手足口病患兒112例，根據(jù)病情程度分為輕度組（n =48）、重度組（n =40）、危重組（n =24）。對(duì)比患兒血清及腦脊液血清神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）、降鈣素原（PCT）、S100β蛋白、神經(jīng)肽Y（NPY）水平。結(jié)果重度組血清和腦脊液中NSE、PCT、S100β、可溶性血管間黏附分子1（sVCAM-1）及NPY水平均明顯高于輕度組（P ＜0.05），危重組血清和腦脊液中NSE、PCT、S100β及NPY水平均明顯高于重度組和輕度組（P ＜0.05）。結(jié)論動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)手足口病患兒血清、腦脊液中NSE、PCT、S100β及NPY水平變化，可了解患兒的神經(jīng)元受損及病情情況，故對(duì)重癥手足口病的早期發(fā)現(xiàn)及及時(shí)干預(yù)具有一定的臨床意義。

手足口??；神經(jīng)元烯醇化酶；降鈣素原；S100β蛋白；神經(jīng)肽

手足口病是一種由腸道病毒引起的急性傳染病，其發(fā)病急，傳染性強(qiáng)，多發(fā)生于學(xué)齡前兒童，且在＜3歲兒童中發(fā)病率最高[1]。手、足及口腔等部位出現(xiàn)斑丘疹、皰疹是其主要臨床表現(xiàn)。近10年來(lái)，我國(guó)手足口病發(fā)生率呈升高趨勢(shì)，且重癥病例數(shù)逐年增多，部分重癥患兒臨床病情進(jìn)展快，神經(jīng)系統(tǒng)受累及因此引發(fā)神經(jīng)源性肺水腫、肺出血等繼發(fā)性并發(fā)癥而病死、病殘，對(duì)兒童的生命健康造成了嚴(yán)重影響[2]。所以尋找一種可靠的快速判斷病情的指標(biāo)，對(duì)手足口病的防治具有積極意義。血清神經(jīng)元烯醇化酶（neuron specific enolase,NSE）、降鈣素原（procalcitonin,PCT）、S100β蛋白及神經(jīng)肽Y（neuropeptide Y,NPY）水平能較好地反映神經(jīng)細(xì)胞損傷情況。本研究收集2015年3月‐2016年12月在本院小兒科就診治療的手足口病患兒血液樣本，檢測(cè)血清及腦脊液NSE、PCT、S100β及NPY水平，對(duì)比不同病情狀態(tài)下各項(xiàng)血清及腦脊液指標(biāo)的差異，以分析血清NSE、PCT、S100β及NPY水平與病情的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2015年3月‐2016年12月在本院兒科就診的手足口病患兒112例。患兒選擇標(biāo)準(zhǔn)：① 診斷符合手足口病診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。輕度：不伴中樞神經(jīng)系感染。重度：伴神經(jīng)系統(tǒng)受累表現(xiàn)，如頭痛、嘔吐;精神差、嗜睡、驚厥、譫妄；眼球震顫、共濟(jì)失調(diào)、肢體抖動(dòng)，肌陣攣、眼球運(yùn)動(dòng)障礙；無(wú)力或急性弛緩性麻痹。有腦膜刺激征，腱反射減弱或消失體征。危重：伴有呼吸困難、發(fā)紺、血性泡沫痰、肺部啰音、休克等循環(huán)和呼吸功能不全表現(xiàn)及頻繁抽搐、昏迷、腦疝中樞系統(tǒng)功能受累表現(xiàn)。②月齡≤36個(gè)月的患兒。③發(fā)病時(shí)間＜48 h。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有急、慢性肝炎的患兒；② 有先天性疾病的患兒；③因其他疾病所致心臟損害的患兒；④合并其他腸道疾病的患兒。根據(jù)病情程度分為輕度組、重度組、危重組。輕度組48例，其中男31例，女17例；月齡為8～36個(gè)月，平均（17.3±7.6）個(gè)月，發(fā)病時(shí)間為5～47 h，平均（30.2±3.5）h。重度組40例，其中男27例，女13例；月齡為7～35個(gè)月，平均（16.9±7.8）個(gè)月，發(fā)病時(shí)間為4～47 h，平均（31.4±3.7）h。危重組24例，其中男16例，女8例；月齡為8～35個(gè)月，平均（16.7±8.0）個(gè)月，發(fā)病時(shí)間為7～46 h，平均（31.5±3.9）h。3組性別、月齡、發(fā)病時(shí)間對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），符合可比性的研究要求，均經(jīng)家長(zhǎng)或監(jiān)護(hù)人知情同意。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑 羅氏ECL1010全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀（瑞士羅氏公司）；全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀（北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司）。NSE、S100試劑盒購(gòu)自上海拜力生物科技有限公司。PCT、NPY試劑盒購(gòu)自上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)有限公司。

1.2.2 標(biāo)本采集及檢測(cè) 采集患兒入院后24 h內(nèi)空腹外周靜脈血5 ml，同時(shí)進(jìn)行腰椎穿刺取患兒腦脊液2 ml。血標(biāo)本加入含有肝素抗凝的離心管內(nèi)，置于水平離心機(jī)上，室溫下離心10～15 min（3 000 r/min），獲取上層清液，將腦脊液及血清標(biāo)本置于-80℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。NSE、S100用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，NPY采用放射免疫發(fā)光法檢測(cè)，PCT采用免疫熒光法檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，3 組間比較采用方差分析，兩兩比較采用SNK檢驗(yàn)。P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組血清NSE、PCT、S100β、可溶性血管間黏附分子1及NPY水平比較情況

重度組血清NSE、PCT、S100β、可溶性血管間黏附分子1（soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1）及NPY水平均明顯高于輕度組（P ＜0.05），危重組血清 NSE、PCT、S100β、可溶性血管間黏附分子1（sVCAM-1）及NPY水平均明顯高于重度組和輕度組（P ＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 3 組腦脊液 NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平比較情況

重度組腦脊液NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平均明顯高于輕度組（P ＜0.05），危重組腦脊液NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平均明顯高于重度組和輕度組（P ＜0.05），見(jiàn)表2。

表1 3組血清NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平比較情況 （±s）

注：1）與輕度組比較，P ＜0.05；2）與重度組及輕度組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) NSE/(pg/ml) PCT/(ng/ml) S100β/(μg/L) NPY/(μg/L)輕度組 48 16.3±7.1 0.6±0.3 4.6±1.2 114.8±38.2重度組 40 27.6±8.31） 1.2±0.21） 10.7±4.81） 242.0±57.31）危重組 24 38.2±11.32） 1.9±0.42） 23.4±5.82） 367.5±61.62）F值 34.188 15.547 19.725 48.271 P值 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 3組腦脊液NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平比較情況 （±s）

注：1）與輕度組比較，P ＜0.05；2）與重度組及輕度組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) NSE/(pg/ml) PCT/(ng/ml) S100β/(μg/L) NPY/(μg/L)輕度組 48 16.9±7.5 0.7±0.4 4.7±1.3 115.1±38.6重度組 40 28.0±8.41） 1.3±0.51） 10.8±4.61） 243.4±57.21）危重組 24 39.1±11.62） 2.0±0.62） 24.0±6.32） 368.2±62.32）F值 34.724 15.867 20.072 48.345 P值 0.000 0.000 0.000 0.000

3 討論

手足口病患兒一般會(huì)在發(fā)病后約1周痊愈，但仍有部分患兒病情進(jìn)展迅速，可在極短時(shí)間內(nèi)累及中樞神經(jīng)，引起神經(jīng)源性肺水腫等并發(fā)癥，是導(dǎo)致患兒病死病殘的主要原因。目前，尚無(wú)針對(duì)手足口病的有效疫苗，抗炎治療手足口病的療效并不佳。大量研究表明，由新型腸道病毒71型（enterovirus 71,EV71）感染引起的手足口病病情進(jìn)展極快，可在短期內(nèi)進(jìn)展至重癥、危重型手足口病，這是由于EV71可通過(guò)逆向軸漿運(yùn)輸機(jī)制直接損害神經(jīng)細(xì)胞，并通過(guò)誘導(dǎo)釋放多種炎癥細(xì)胞因子間接損傷神經(jīng)細(xì)胞，尤其對(duì)腦干部位具有極強(qiáng)的攻擊能力，可見(jiàn)，該病毒對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的侵襲性極強(qiáng)[4]。目前，普遍觀點(diǎn)認(rèn)為，神經(jīng)細(xì)胞受損是手足口病發(fā)生的關(guān)鍵，一定發(fā)生腦干腦炎，患兒可出現(xiàn)中樞性交感神經(jīng)興奮癥狀，并可繼發(fā)神經(jīng)性肺水腫、肺出血等嚴(yán)重并發(fā)癥，嚴(yán)重者可致死，極少數(shù)存活患兒會(huì)遺留某些神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，如中樞性低通氣障礙綜合征、四肢癱瘓等[5]。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，手足口病是我國(guó)兒童病死、病殘率最高的急性傳染病[6]。因此，如何對(duì)重癥手足口病進(jìn)行早期識(shí)別并采取及時(shí)的干預(yù)措施，對(duì)降低該類疾病的病死率、病殘率具有重要意義。

NSE是神經(jīng)細(xì)胞分泌的一種特殊蛋白酶，主要分布于腦神經(jīng)細(xì)胞核神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞胞質(zhì)中[7]。正常生理?xiàng)l件下，人類腦脊液及血循環(huán)中NSE含量極低，當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞損傷時(shí)，受損的神經(jīng)細(xì)胞會(huì)釋放NSE并經(jīng)血腦屏障進(jìn)入腦脊液和血循環(huán)，使腦脊液和血清NSE水平升高，因此可作為神經(jīng)元損傷的敏感性和特異性指標(biāo)。周綱等[8]研究發(fā)現(xiàn)，急性腦損傷患者的腦脊液和血清NSE水平較正常明顯升高，且與疾病嚴(yán)重程度和預(yù)后有關(guān)。S100β蛋白是一種偏酸性鈣結(jié)合蛋白，是神經(jīng)組織蛋白之一，分別于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中。有研究報(bào)道，S100β蛋白能特異性反映腦組織的損傷程度，其在腦脊液及血清水平隨腦損傷程度的加重而升高，故可作為腦損傷的早期診斷、病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估[9]。NSE和S100β分別存在于神經(jīng)元細(xì)胞的胞漿內(nèi)，只有神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞受損，使細(xì)胞膜的完整性被破壞后，兩者才從相應(yīng)的細(xì)胞中漏出，并通過(guò)受損的血腦屏障進(jìn)入腦脊液和外周血，因此均可作為神經(jīng)元損傷的敏感性和特異性生物學(xué)指 標(biāo)。

PCT是降鈣素的前體，正常情況下，其水平較低，當(dāng)感染發(fā)生時(shí)，其水平明顯升高。與傳統(tǒng)的炎癥指標(biāo)比較，PCT在發(fā)病早期即發(fā)生明顯改變，靈敏度及特異度高均較高，對(duì)病情的早期評(píng)估、預(yù)后判斷均有極高的價(jià)值[10]。腦脊液中PCT水平升高表明顱內(nèi)感染的存在。

NPY屬胰多肽家族成員，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)及外周神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛分布。近年來(lái)，大量研究報(bào)道，在一些腦組織疾病中，包括腦炎、缺血缺氧性腦病及腦出血等，患者血漿及腦脊液中NPY均明顯升高，其機(jī)制可能是，疾病早期機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)，交感神經(jīng)-兒茶酚胺系統(tǒng)異常激活，引起NPY大量釋放，進(jìn)入腦脊液和血循環(huán)，引起其水平升高；病毒感染侵襲中樞神經(jīng)系統(tǒng)，使機(jī)體免疫反應(yīng)被激活而釋放一系列炎癥因子，引起血管炎性改變，活化血小板而釋放NPY；顱內(nèi)壓升高、腦水腫等均可致機(jī)體釋放應(yīng)激性激素，加劇NPY水平的升 高[11]。

本研究發(fā)現(xiàn)，隨著手足口病病情嚴(yán)重程度的增加，患兒血清、腦脊液NSE、PCT、S100β及NPY水平逐漸增加，提示血清、腦脊液NSE、PCT、S100β及NPY水平可作為手足口病患兒神經(jīng)損傷及病情嚴(yán)重程度的評(píng)估指標(biāo)。

總而言之，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)手足口病患兒血清、腦脊液NSE、PCT、S100β及NPY水平變化，可了解患兒的神經(jīng)元受損及病情情況，故對(duì)重癥手足口病的早期發(fā)現(xiàn)及及時(shí)干預(yù)具有一定的臨床意義。

[1]王玉肖,趙燦,李娟娟,等.2012-2015年保定市唐縣地區(qū)手足口病病原學(xué)分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2017,32(1):18-21.

[2]李博,張東曉,劉楚云.2012-2013年深圳市南山區(qū)手足口病原學(xué)及初發(fā)臨床癥狀分析[J].河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2014,43(4):249-251.

[3]張志剛,蔡鋼.手足口病方輔助治療手足口病患兒的臨床療效及對(duì)細(xì)胞因子的影響研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2016,19(24):2935-2938.

[4]楊燕,邵耀明,朱旭明.兩種腸道病毒與四種臨床檢驗(yàn)指標(biāo)在小兒手足口病的關(guān)系[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2017,21(3):441- 444.

[5]俞蕙.兒童手足口病重癥病例的臨床早期識(shí)別[J].中華兒科雜志,2012,50(4):284-285.

[6]張王劍,季振東,郭貔,等.廣東省2009-2012年手足口病流行趨勢(shì)分析[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2014,35(4):607- 613.

[7]齊英斌,許卓,李麗,等.急性腦梗死患者血清中NDR與D100β蛋白的表達(dá)情況及其與腦損傷嚴(yán)重程度的相關(guān)性[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2015,19(12):2024-2026.

[8]周綱,應(yīng)婷婷,葉永青,等.右美托咪定對(duì)急性腦損傷患者血清NSE、S-100β、內(nèi)脂素的影響[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2016,21(11):1292-1295.

[9]王春生,孟盡海,吳燕,等.丙泊酚對(duì)急性腦損傷大鼠早期S100β蛋白和腦組織總鈣含量及含水量的影響[J].臨床麻醉學(xué)雜志,2014,30(4):400-403.

[10]葉貴誠(chéng),彭建明,官燕飛.降鈣素原、C 反應(yīng)蛋白、前清蛋白及白細(xì)胞計(jì)數(shù)在兒童手足口病診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2016,37(6):758-760.

[11]張春雷.急性顱腦損傷患者外周血紅細(xì)胞免疫功能狀況和血清NPY水平的相關(guān)分析[J].放射免疫學(xué)雜志,2013,26(2):158-159.

R725.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

10.19338/j.issn.1672-2019.2017.11.013

2017-07-18

（張立芳 編輯）