蓋春蕾，張?jiān)l(fā)，葉海斌

(1.山東省海洋生物研究院，海水養(yǎng)殖病害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東青島 266104；2.即墨市海洋與漁業(yè)局，山東即墨 266200)

凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)大黃苷的藥代動(dòng)力學(xué)特征*

蓋春蕾1，張?jiān)l(fā)2，葉海斌1

(1.山東省海洋生物研究院，海水養(yǎng)殖病害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東青島 266104；2.即墨市海洋與漁業(yè)局，山東即墨 266200)

【目的】研究大黃苷(Rhein)在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的吸收、分布和代謝規(guī)律，并制定臨床給藥方案。【方法】以5 mg/kg劑量的大黃苷一次性肌肉注射凡納濱對(duì)蝦，利用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)其在凡納濱對(duì)蝦血淋巴、肝胰臟、肌肉和鰓組織中的藥物濃度-時(shí)間變化，并通過(guò)3P87軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，分析其在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力特征?！窘Y(jié)果】大黃苷在4種組織里的達(dá)峰時(shí)間(Tmax)較早，分別為0.17 h、2.73 h、0.44 h、0.23 h；消除半衰期(T1/2Ke)較短，分別為2.13 h、2.36 h、3.12 h、3.72 h；在房室模型選擇上，大黃苷在4種組織中的最適藥動(dòng)模型均符合一級(jí)吸收一室模型。【結(jié)論】肌注大黃苷后，藥物在凡納濱對(duì)蝦各組織中分布廣泛、吸收快、清除能力強(qiáng)。大黃苷在凡納濱對(duì)蝦鰓部的濃度較高，這為利用其治療凡納濱對(duì)蝦爛鰓病提供理論依據(jù)。

大黃苷 凡納濱對(duì)蝦 藥代動(dòng)力學(xué) 高效液相色譜

0 引言

【研究意義】凡納濱對(duì)蝦(Penaeus vannamei)，又稱(chēng)南美白對(duì)蝦，具有對(duì)鹽度適應(yīng)范圍廣、生長(zhǎng)速度快、養(yǎng)殖周期短和產(chǎn)量高等優(yōu)點(diǎn)，在我國(guó)沿海及內(nèi)地均有凡納濱對(duì)蝦的養(yǎng)殖[1]。對(duì)蝦養(yǎng)殖量一旦超過(guò)環(huán)境容納量[2]，就會(huì)導(dǎo)致養(yǎng)殖環(huán)境惡化，從而引發(fā)對(duì)蝦各類(lèi)細(xì)菌病、病毒病，嚴(yán)重制約對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。而藥物代謝動(dòng)力學(xué)(pharmacokinetics)是闡述藥物在機(jī)體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的一門(mén)科學(xué)，能定量描述藥物在生物機(jī)體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過(guò)程[3]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)對(duì)蝦的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行豐富的研究?；前?2，6-二甲氧嘧啶(Sulfadimethoxine,SDM)與土霉素(Oxytetracycline,OTC)在凡納濱對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeus monodon)和日本囊對(duì)蝦(Marsupenaeus japonicus)體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)在國(guó)外均有相關(guān)研究[4-6]。國(guó)內(nèi)對(duì)中國(guó)明對(duì)蝦(Fenneropenaeus chinensis)和凡納濱對(duì)蝦的藥動(dòng)學(xué)研究較多，其次是日本囊對(duì)蝦和斑節(jié)對(duì)蝦；涉及的藥物主要有呋喃唑酮[7]、新諾明[8]、恩諾沙星[9-10]、諾氟沙星[11]、米諾沙星[12]、麻保沙星[13]、氟苯尼考[14-15]以及磺胺類(lèi)[16-18]。另外中草藥提取物在對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)也有相關(guān)報(bào)道，如李小彥等[19]報(bào)道中藥提取物黃芩苷在對(duì)蝦體內(nèi)的藥物代謝。中草藥大黃及大黃制劑目前廣泛應(yīng)用于對(duì)蝦病害防治中，可有效地治療養(yǎng)殖對(duì)蝦爛鰓病、爛眼病、紅腿病、對(duì)蝦甲殼潰瘍病等細(xì)菌性疾病[20]。【本研究切入點(diǎn)】大黃苷是大黃的主要有效成分，而其在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)卻未見(jiàn)有相關(guān)報(bào)道。對(duì)大黃苷在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的藥物代謝研究，可以幫助人們更科學(xué)地制定給藥方案，使其更好地應(yīng)用于對(duì)蝦細(xì)菌性病害防治。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】利用高效液相色譜技術(shù)測(cè)定肌肉注射大黃苷后，藥物在凡納濱對(duì)蝦組織中血淋巴、肝胰臟、肌肉及鰓的濃度變化，分析大黃苷在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的代謝規(guī)律，為應(yīng)用大黃及大黃制劑在對(duì)蝦病害防治及制定給藥方案提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

HEWLETT PACKARD 1100高效液相色譜系統(tǒng)，水浴氮吹儀，IKA T10高速分散勻漿機(jī)，TGL-16G高速冷凍離心機(jī)，潔康PS-30超聲波清洗機(jī)，富勒姆FJY0502-UVF型純水機(jī)，Mettler電子天平，金怡旋渦混合器；大黃苷標(biāo)準(zhǔn)品，色譜純甲醇，色譜純磷酸，分析純高氯酸，分析純乙醚，超純水。

1.2 方法

1.2.1 凡納濱對(duì)蝦的暫養(yǎng)

凡納濱對(duì)蝦(Penaeus vannamei)平均體重(15.9±2.3)g，實(shí)驗(yàn)前于循環(huán)水槽中暫養(yǎng)一周，投喂優(yōu)質(zhì)對(duì)蝦配合飼料。水溫條件26～28℃，海水鹽度29‰～31‰，pH值為7.8，充氣養(yǎng)殖，每天早晚兩次吸污。試驗(yàn)前選取健康對(duì)蝦個(gè)體，禁食24 h。

1.2.2 給藥及樣品的采集

精確稱(chēng)取大黃苷標(biāo)準(zhǔn)品配制成濃度為0.8 mg/mL注射藥液，將配制好的藥液以5 mg/kg的劑量一次性肌肉注射凡納濱對(duì)蝦，輕推注入。給藥后0.25 h、0.5 h、1 h、3 h、5 h、7 h、9 h、12 h取凡納濱對(duì)蝦的血淋巴、肝胰臟、肌肉及鰓為樣品，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣8尾，-20℃冰箱中冷凍保存以備檢測(cè)。

1.2.3 樣品的處理

樣品處理參照王新宏等[21]對(duì)大黃蒽醌甙元的分析方法：樣品自然解凍后取0.5 mL血淋巴或稱(chēng)取0.5 g肌肉、肝胰臟、鰓組織，加入0.3 mL 3 mol·L-1高氯酸溶液與2 mL乙醚，16 000 r·min-1勻漿5 s；再用2 mL乙醚清洗刀頭，合并提取液；漩渦5 min，5 000 r·min-1離心20 min，取乙醚層水浴(60±2)℃氮?dú)獯蹈?。殘?jiān)?.5 mL甲醇復(fù)溶，經(jīng)孔徑0.2 μm濾膜過(guò)濾后，取20 μL進(jìn)樣測(cè)定。

1.2.4 色譜條件

色譜柱：Waters Symmetry C18 250 mm×4.6 mm (5 μm)；流動(dòng)相：甲醇/0.5%磷酸(80∶20，V∶V)經(jīng)0.2 μm濾膜過(guò)濾后，超聲波脫氣15～20 min；流速：0.8～1 mL·min-1；柱溫：室溫；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；進(jìn)樣量：20 μL。

1.2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

稱(chēng)取1 g空白組織(血淋巴、肝胰臟、肌肉、鰓)，加入0.06 mg·L-1、0.4 mg·L-1、2 mg·L-1、5 mg·L-1、10 mg·L-1、25 mg·L-1、50 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)大黃苷溶液1 mL。按1.2.2項(xiàng)方法處理后20 μL進(jìn)樣測(cè)定。以濃度Y為縱坐標(biāo)，峰面積X為縱坐標(biāo)，分別做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)行回歸分析，分別求出回歸方程和相關(guān)系數(shù)，以引起2～3倍基線(xiàn)噪音的峰面積對(duì)應(yīng)的大黃苷濃度作為最低檢測(cè)限。

1.2.6 回收率和精密度的測(cè)定

(1)回收率

將血淋巴、肝胰臟、肌肉和鰓4份空白組織中適量加入大黃苷標(biāo)準(zhǔn)溶液，使其濃度為0.5 mg·L-1、2 mg·L-1、25 mg·L-1，按1.2.2項(xiàng)方法處理測(cè)定。每個(gè)濃度梯度重復(fù)進(jìn)樣4次，計(jì)算得出各樣品峰面積的平均值，再利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程計(jì)算得出大黃苷的濃度值Ca。

另取4份空白組織，不加入大黃苷標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.2.2項(xiàng)方法處理后，各加入1 mL濃度為0.5 mg·L-1、2 mg·L-1、25 mg·L-1的大黃苷標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)0.2 μm孔徑濾膜過(guò)濾后，進(jìn)樣測(cè)定。計(jì)算得出各樣品峰面積的平均值，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程，計(jì)算得到大黃苷的濃度值Cb。利用Ca與Cb相比即可計(jì)算出萃取回收率=Ca÷Cb×100%。

(2)精密度

測(cè)定已經(jīng)按上述1.2.2項(xiàng)方法處理配制的3份含大黃苷系列血淋巴，濃度分別為0.5 mg·L-1、2.0 mg·L-1、25.0 mg·L-1，一天內(nèi)每隔2 h測(cè)定，共5次，連續(xù)5 d重要測(cè)定。通過(guò)計(jì)算得出其日內(nèi)和日間變異系數(shù)。

1.2.7 數(shù)據(jù)處理

利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程，計(jì)算得出大黃苷在4種組織中的藥物濃度。利用3P87藥動(dòng)學(xué)軟件進(jìn)行分析，擬合出最佳房室模型，并計(jì)算出藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)與最低檢測(cè)限

大黃苷標(biāo)準(zhǔn)液在0.06～50.00 mg·L-1的濃度范圍內(nèi)具有良好的相關(guān)性；以峰面積為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得到大黃苷在血淋巴、肝胰臟、肌肉、鰓組織中的回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別為Y=0.012 6X+0.183 8(R2=0.998 9)，Y=0.011 6X-0.003 9 (R2=0.993 6)，Y=0.012 4X+0.298 3(R2=0.995 2)，Y=0.015 8X-0.165 3(R2=0.999 9)。本實(shí)驗(yàn)條件下采用紫外檢測(cè)器的最低檢測(cè)限為0.02 mg/L(S/N=2)。

2.2 回收率與精密度

大黃苷回收率為79.61%～96.71%，日內(nèi)變異系數(shù)在5.67%～8.23%，日間變異系數(shù)為3.08%～9.33%(表1)?；厥章屎途芏仁菦Q定測(cè)定方法準(zhǔn)確性和可靠性的重要依據(jù)，回收率不應(yīng)低于70%,日內(nèi)和日間精密度的平均變異系數(shù)應(yīng)控制在10%以?xún)?nèi)，本方法回收率穩(wěn)定，變異系數(shù)小，均符合方法學(xué)的要求。

2.3 凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)藥物濃度變化

凡納濱對(duì)蝦單劑量肌肉注射大黃苷后，藥物在血淋巴和鰓中達(dá)到最高濃度所需時(shí)間最短，在0.25 h以?xún)?nèi)；在肝胰臟的所需時(shí)間最長(zhǎng)，為3 h左右。其中，肌肉中的藥物濃度要明顯低于其它3種組織。整體上藥物在4種組織中的達(dá)峰時(shí)間較早，能夠較快地被吸收，從而在對(duì)蝦各組織達(dá)到最大濃度(表2)。

表1 大黃苷在對(duì)蝦4種組織中的回收率及其在血淋巴中的精密度測(cè)定

Table 1 Recovery of rhein in four tissues ofPenaeusvannameiand its precision in hemolymph

濃度Concentration(mg·L-1)大黃苷的回收率Recoveryofrhein(n=4,%)變異系數(shù)Coefficientofvariation(%)血淋巴Hemolymph肝胰臟Hepatopancreas肌肉Muscle鰓Gill日內(nèi)變異系數(shù)Withindayprecision日間變異系數(shù)Daytodayprecision0.591.2486.4680.9187.496.319.332.086.3496.7186.6686.418.233.5825.082.4189.4679.6181.325.673.08

表2 不同時(shí)間點(diǎn)凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的大黃苷濃度(X±SD，n=6)

Table 2 The concentration of rhein inPenaeusvannameibody in different time(X±SD，n=6)

采樣時(shí)間Time(h)藥物濃度Theconcentrationofdrugs(mg·L-1)血淋巴Hemolymph肝胰臟Hepatopancreas肌肉Muscle鰓Gill0.00NDNDNDND0.252.14±0.581.58±0.490.41±0.122.47±0.780.501.58±0.061.39±0.290.42±0.061.89±0.121.001.25±0.081.19±0.490.44±0.121.41±0.023.000.61±0.192.15±0.220.21±0.031.28±0.075.000.48±0.132.09±0.670.16±0.010.98±0.37.000.18±0.011.67±0.690.14±0.011.01±0.479.000.14±0.011.45±0.23ND0.45±0.3812.00ND0.31±0.23ND0.13±0.01

Note:ND mean not determined

2.4 藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

將藥物濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)經(jīng)3P87藥動(dòng)軟件處理后，擬合大黃苷在4種組織中的濃度-時(shí)間的變化過(guò)程，選擇出最適房室模型，結(jié)果顯示大黃苷在凡納濱對(duì)蝦對(duì)蝦4種組織中，其房室模型均符合一級(jí)吸收一室模型。所得的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)如表3所示，其中A為藥時(shí)曲線(xiàn)在橫坐標(biāo)截距；Ka為一級(jí)吸收速率常數(shù)；Ke為藥物的消除速率常數(shù)；V為表觀分布容積；T1/2Ka為吸收半衰期；T1/2Ke為消除半衰期； CL(s)為總體清除率；Tmax為單劑量給藥后出現(xiàn)最高血藥濃度的時(shí)間；Cmax為單劑量給藥后的最高血藥濃度；AUC為藥時(shí)曲線(xiàn)下總面積。

表3 大黃苷在凡納濱對(duì)蝦4種組織中的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

Table 3 Pharmacokinetic parameters of rhein in four tissues ofPenaeusvannamei

參數(shù)Parameters組織Tissues血淋巴Hemolymph鰓Gill肌肉Muscle肝胰臟HepatopancreasA(mg·L-1)1.932.170.5014.94Ke(h-1)0.330.190.220.29Ka(h-1)26.7321.110.400.45V(L·kg-1)2.622.3310.350.96T1/2Ka(h)0.030.030.081.54T1/2Ke(h)2.133.723.122.36CL(s)(L·(h·kg)-1)0.850.432.300.28Tmax(h)0.170.230.442.73AUC(mg·L-1·h)5.8511.542.1817.56

3 討論

3.1 大黃苷在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)代謝房室模型選擇

藥物在動(dòng)物體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的過(guò)程是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化過(guò)程，因此建立一個(gè)數(shù)學(xué)模型，來(lái)模擬機(jī)內(nèi)藥物的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律具有非常重要意義。通過(guò)3P87軟件對(duì)4種組織中藥物濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，結(jié)果顯示大黃苷在凡納濱對(duì)蝦血淋巴、肌肉、鰓和肝胰臟中最佳藥動(dòng)學(xué)模型均符合一級(jí)吸收一室模型。這與草魚(yú)灌胃大黃水煎液后的一室模型相同[22]，而與灌胃哺乳動(dòng)物大鼠[23]、灌服家兔大黃[24]以及人口服大黃水提物[25]后大黃苷在血漿中的二室模型不同，這表明大黃苷在對(duì)蝦和草魚(yú)等水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)的代謝相對(duì)簡(jiǎn)單，藥物到達(dá)其體內(nèi)各組織后，能較快達(dá)到平衡。

3.2 大黃苷在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的分布特征

表觀分布容積(V)是提供外來(lái)化合物在體內(nèi)分布的重要信息[25]。V值越大，表明藥物分布越廣，其與血漿蛋白結(jié)合程度也就越低。本實(shí)驗(yàn)中大黃苷在凡納濱對(duì)蝦血淋巴中的V為2.62 L·kg-1，表觀分布容積大于土霉素0.87 L·kg-1(文獻(xiàn)[26])、恩諾沙星1.21 L·kg-1(文獻(xiàn)[27])、氟甲喹0.53 L·kg-1(文獻(xiàn)[28])，與家兔的(3.01±0.95)L·kg-1(文獻(xiàn)[29])接近，遠(yuǎn)高于其在人血漿中的(0.06±0.01)L·kg-1(文獻(xiàn)[30])。這說(shuō)明大黃苷與凡納濱對(duì)蝦血漿蛋白結(jié)合程度較低，其在對(duì)蝦體內(nèi)的分布廣泛，能在其體內(nèi)多個(gè)組織發(fā)揮藥效。

3.3 大黃苷在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)各組織中的動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較

以5 mg·kg-1的劑量一次性肌肉注射大黃苷，藥物在對(duì)蝦各組織中的達(dá)峰時(shí)間Tmax如下：對(duì)蝦血淋巴為0.17 h，時(shí)間最短，其后依次是對(duì)蝦鰓0.23 h、肌肉0.44 h和肝胰臟2.73 h。其在凡納濱對(duì)蝦血淋巴中的達(dá)峰時(shí)間，較刺參直接大黃苷體腔注射后藥物達(dá)峰時(shí)間0.26 h還要短，這與對(duì)蝦腹部的背面和腹面動(dòng)脈之間有一組血竇直接通往心臟的生理結(jié)構(gòu)有關(guān)[31]。

藥時(shí)曲線(xiàn)下面積(AUC)代表藥物的生物利用度，反映藥物進(jìn)入血循環(huán)的總量。大黃苷在血淋巴、鰓、肌肉及肝胰臟4種組織中的AUC分別為5.85 mg·L-1·h、11.54 mg·L-1·h、2.18 mg·L-1·h和17.56 mg·L-1·h。在同一劑量下，對(duì)蝦肝胰臟中大黃苷的藥物濃度最高，這與大黃歸胃、大腸、肝經(jīng)的中醫(yī)歸經(jīng)理論相符[32]。李蘭生等[33]認(rèn)為藥物吸收后大部分積蓄在肝胰臟，而后緩慢釋放到血淋巴并分布到肌肉等組織。本實(shí)驗(yàn)中大黃苷在凡納濱對(duì)蝦肌肉中的含量最低，肝胰臟與鰓中藥物含量較高，藥物能夠集中于肝胰臟、鰓等部位發(fā)揮藥效。

藥物消除半衰期T1/2Ke是當(dāng)藥物濃度降低到原來(lái)濃度1/2所需要的時(shí)間(t)，其長(zhǎng)短能反映出體內(nèi)藥物消除速度[34]。大黃苷在血淋巴、鰓、肌肉及肝胰臟4種組織中的T1/2Ke分別為1.13 h、3.72 h、3.12 h及2.36 h，均低于4 h，屬于快速消除類(lèi)藥物[35]。大黃苷在血淋巴中T1/2Ke最短，消除最快，而在鰓中T1/2Ke消除最慢，且鰓組織中的藥時(shí)曲線(xiàn)下面積AUC較大，藥物可以較好的被吸收利用，可以間隔4～5 h給藥用以對(duì)蝦爛鰓病治療。

4 結(jié)論

大黃苷在凡納濱對(duì)蝦各組織中能較快達(dá)到藥物濃度峰值，具有吸收快、分布廣泛，清除能力強(qiáng)、消除速度快等特點(diǎn)。鰓是大黃苷對(duì)凡納濱對(duì)蝦主要的效應(yīng)器官，這為利用大黃苷治療凡納濱對(duì)蝦爛鰓病提供理論依據(jù)。

[1] 宋盛憲.凡納濱對(duì)蝦無(wú)公害健康養(yǎng)殖[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2004:2-8. SONG S X.LitopenaeusVannamei Pollution-free Aquaculture[M].Beijing:China Agriculture Press,2004:2-8.

[2] MUROGA K.Viral and bacterial diseases of marine fish and shellfish in Japanese hatcheries[J].Aquaculture,2001,202(1/2):23-44.

[3] PARK E D,LIGHTNERD V,MILNER N,et al.Exploratory bioavailability and pharmacokinetic studies of sulphadimethoxine and ormetoprim in the penaeid shrimp,Penaeus vannamei[J].Aquaculture,1995,130(2/3):113-118.

[4] REED L A,SIEWICKI T C,SHAHJ C.Pharmacokinetics of oxytetracycline in the white shrimp,Litopenaeus setiferus[J].Aquaculture,2004,232(1/2/3/4):11-28.

[5] UNO K.Pharmacokinetics of oxolinic acid and oxytetracycline in kuruma shrimp,Penaeus japonicus[J].Aquaculture,2004,230(1/2/3/4):1-11.

[6] UNO K,AOKI T,KLEECHAYA W,et al.Pharmacokinetics of oxytetracycline in black tiger shrimp,Penaeus monodon,and the effect of cooking on the residues[J].Aquaculture,2006,254(1/2/3/4):24-31.

[7] 張海琪,丁雪燕,薛輝利,等.呋喃唑酮在凡納濱對(duì)蝦組織中代謝動(dòng)力學(xué)研究[J].寧波大學(xué)學(xué)報(bào):理工版,2009,22(4):472-476. ZHANG H Q,DING X Y,XUE H L,et al.Pharmacokinetics of furazolidone in tissues from Litopenaeus vannamei Boone[J].Journal of Ningbo University:Natural Science & Engineering Edition,2009,22(4):472-476.

[8] 范克儉.土霉素和新諾明在中國(guó)明對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[D].青島:中國(guó)海洋大學(xué),2005. FAN K J.Pharmacokinetics of Oxytetracycline and Sulfamethoxazole inFenneropenaeuschinensis[D].Qingdao:Ocean University of China,2005.

[9] 趙海軍,歐安,簡(jiǎn)紀(jì)常,等.恩諾沙星在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的代謝和殘留消除規(guī)律[J].廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2010,30(6):31-34. ZHAO H J,OU A,JIAN J C,et al.Elimination of enrofloxacin residues and its metabolism in Penaeus vannamei[J].Journal of Guangdong Ocean University,2010,30(6):31-34.

[10] 徐維海,林黎明,朱校斌,等.恩諾沙星及其代謝產(chǎn)物在吉富羅非魚(yú)、中國(guó)對(duì)蝦體內(nèi)的殘留規(guī)律研究[J].水產(chǎn)科學(xué),2004,23(7):5-8. XU W H,LIN L M,ZHU X B,et al.Residues of enrofloxacin and its metabolite in Jifu Tilapia and Penaeus chinensis[J].Fisheries Science,2004,23(7):5-8.

[11] 房文紅,邵錦華,施兆鴻,等.斑節(jié)對(duì)蝦血淋巴中諾氟沙星含量測(cè)定及藥代動(dòng)力學(xué)[J].水生生物學(xué)報(bào),2003,27(1):13-17. FANG W H,SHAO J H,SHI Z H,et al.Analytical method of norfloxacin in the giant tiger shrimp(Penaeus monodon) hemolymph and brief study on pharmacokinetics[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2003,27(1):13-17.

[12] 李娜,李健,王群.米諾沙星在中國(guó)對(duì)蝦體內(nèi)的代謝動(dòng)力學(xué)及在養(yǎng)殖系統(tǒng)中的消除[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(24):10480-10483. LI N,LI J,WANG Q.Pharmacokinetics of miloxacin in the culture environment of Penaeus chinensis[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2008,36(24):10480-10483.

[13] 張海珍,李健,王群,等.麻保沙星在中國(guó)對(duì)蝦體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)及殘留研究[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào),2008,10(2):88-93. ZHANG H Z,LI J,WANG Q,et al.Studies on pharmacokinetics and residues of marbofloxacin in Penaeus chinensis[J].Journal of Agricultural Science and Technology,2008,10(2):88-93.

[14] 鄭重鶯,丁雪燕,張海琪,等.氟苯尼考在南美白對(duì)蝦體內(nèi)藥物代謝及殘留消除規(guī)律[J].寧波大學(xué)學(xué)報(bào):理工版,2007,20(1):23-26. ZHENG C Y,DING X Y,ZHANG H Q,et al.Rules of pharmacokinetics and residue elimination of Florfenicol in Penaeus vannamei[J].Journal of Ningbo University:Natural Science & Engineering Edition,2007,20(1):23-26.

[15] 李靜云,李健,王群,等.氟苯尼考3種不同給藥方式在中國(guó)明對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[J].海洋科學(xué),2006,30(7):64-68. LI J Y,LI J,WANG Q,et al.Single dose pharmacokinetics of florfenicol in Fenneropenaeus chinensis[J].Marine Sciences,2006,30(7):64-68.

[16] 宋維彥,蘇永全,潘瀅,等.磺胺甲基噁唑和恩諾沙星在日本囊對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[J].海洋科學(xué),2010,34(7):22-27. SONG W Y,SU Y Q,PAN Y,et al.Pharmacokinetics of Sulfamethoxazole(SMZ ) and Enrofloxacin (ERFX) in shrimp Marsupenaeus japonicus[J].Marine Sciences,2010,34(7):22-27.

[17] 范克儉,王群,李健,等.磺胺甲基異噁唑在中國(guó)明對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[J].齊魯漁業(yè),2005,22(8):1-4,7. FAN K J,WANG Q,LI J,et al.Study on pharmacokinetics of oxytetracycline in Fenneropenaeus chinensis[J].Shandong Fisheries,2005,22(8):1-4,7.

[18] 李靜云,李健,王群,等.磺胺間甲氧嘧啶在中國(guó)對(duì)蝦體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[J].海洋水產(chǎn)研究,2006,27(4):6-11. LI J Y,LI J,WANG Q,et al.Pharmacokinetics studies on sulphamonomethoxine inFenneropenaeuschinensis[J].Marine Fisheries Research,2006,27(4):6-11.

[19] 李小彥,李健,張喆,等.黃芩苷對(duì)中國(guó)對(duì)蝦細(xì)胞色素P450酶及谷光甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性的影響[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2010,40(3):49-53. LI X Y,LI J,ZHANG Z,et al.Effects of baicalin on cytochrome P450 enzymes and glutathione S-transferaseof Fenneropenaeus chinensis[J].Journal of Ocean University of China,2010,40(3):49-53.

[20] 楊先樂(lè).水產(chǎn)養(yǎng)殖用藥處方大全[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2009:294-340. YANG X L.Encyclopedia of Drug Use in Aquaculture[M].Beijing:Chemical Industry Press,2009:294-340.

[21] 王新宏,范廣平,安睿,等.大鼠血漿中大黃蒽醌甙元的HPLC分析方法學(xué)研究[J].中成藥,1997,19(1):37-39. WANG X H,FAN G P,AN R,et al.HPLC analysis of rhubarb in rat plasma[J].Chinese Patent Medicine,1997,19(1):37-39.

[22] 陳學(xué)宏.中藥大黃在草魚(yú)體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究[D].雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2006. CHEN X H.Pharmacokinetics of Rhubarb in Grass Carp[D].Ya’an:Sichuan Agricultural University,2006.

[23] 張錦雯,王廣基,孫建國(guó),等.HPLC-熒光檢測(cè)法測(cè)定大鼠血漿中大黃酸的濃度及其藥代動(dòng)力學(xué)[J].中國(guó)天然藥物,2005,3(4):238-241. ZHANG J W,WANG G J,SUN J G,et al.Determination of rhein in plasma by HPLC-fluorescence detection and its parmacokinetics in rats[J].Chinese Journal of Natural Medicines,2005,3(4):238-241.

[24] 謝華,馬越鳴,王天明,等.桃核承氣湯及單味大黃中大黃酸在家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)[J].中藥藥理與臨床,2005,21(2):1-3. XIE H,MA Y M,WANG T M,et al.Pharmacokinetics of rhein in Taohe Chengqi Decoction (桃核承氣湯) and rhubarb in rabbits[J].Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica,2005,21(2):1-3.

[25] 朱偉,阮新民,陳可冀.性別差異對(duì)大黃酸在人體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過(guò)程的影響[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2006,11(2):223-226. ZHU W,RUAN X M,CHEN K J.Effect of gender difference on pharmacokinetics of rhein healthy volunteers after oral administration of rhubarb extract[J].Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics,2006,11(2):223-226.

[26] ABEDINI S,NAMDARI R,LAW F C P.Comparative pharmacokinetics and bioavailability of oxytetracycline in rainbow trout and chinook salmon[J].Aquaculture,1998,162(1/2):23-32.

[27] LIANG J W,HSIU S L,WU P P,et al.Emodin pharmacokinetics in rabbits[J].Planta Medica,1995,61(5):406-408.

[28] PLAKAS S M,EL SAID K R,MUSSER S M.Pharmacokinetics,tissue distribution,and metabolism of flumequine in channel catfish (Ictalurus punctatus)[J].Aquaculture,2000,187(1/2):1-14.

[29] 房文紅,鄭國(guó)興.肌注和藥餌給藥下諾氟沙星在南美白對(duì)蝦血淋巴中藥代動(dòng)力學(xué)[J].水生生物學(xué)報(bào),2006,30(5):541-546. FANG W H,ZHENG G X.Pharmacokinetics of norfloxacin in hemolymph from whiteleg shrimp,Penaeus vannamei following intramuscle injection and oral administration[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2006,30(5):541-546.

[30] 譚力,袁倚盛,楊俊偉,等.高效液相色譜法測(cè)定人血漿中大黃酸含量及藥動(dòng)學(xué)研究[J].金陵醫(yī)院學(xué)報(bào),1998,11(2):20-23. TAN L,YUAN Y S,YANG J W,et al.Determination of emodin in human plasma by high performance liquid chromatography and its pharmacokinetics[J].Journal of Jinling Hospital,1998,11(2):20-23.

[31] DALL W.對(duì)蝦生物學(xué)[M].陳楠生,譯.青島:青島海洋大學(xué)出版社,1992:31-35. DALL W.Biology of Shrimp[M].CHEN N S,trans.Qingdao:Qingdao Ocean University Press,1992:31-35.

[32] 張靜.《傷寒雜病論》中大黃性能與效用的關(guān)系探討[J].光明中醫(yī),2003,18(5):7-8. ZHANG J.Studies on the relationship between the performance and utility of rhubarb[J].Guangming Journal of Chinese Medicine,2003,18(5):7-8.

[33] 李蘭生,王勇強(qiáng).氯霉素在對(duì)蝦體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)研究[J].色譜,1997,15(5):431-434. LI L S,WANG Y Q.Studies on the pharmacokinetics of chloromycetin in Penaeus chinensis[J].Chinese Journal of Chromatography,1997,15(5):431-434.

[34] LEE J H,KIM J M,KIM C.Pharmacokinetic analysis of rhein in Rheum undulatum L.[J].Journal of Ethnopharmacology,2003,84(1):5-9.

[35] 閆世俊.合理確定給藥間隔時(shí)間[J].醫(yī)學(xué)導(dǎo)報(bào),2000,19(3):279-280. YAN S J.Reasonable determination of drug administration time[J].Herald of Medicine,2000,19(3):279-280.

(責(zé)任編輯：米慧芝)

Pharmacokinetic Characteristics of Rhein in the Body ofPenaeusvannamei

GAI Chunlei1，ZHANG Yuanfa2，YE Haibin1

(1.Key Laboratory of Mariculture Disease Treatment,Marine Biology Institute of Shandong Province，Qingdao，Shandong，266104，China；2.Jimo Ocean and Fishery Bureau，Jimo，Shandong，266200，China)

【Objective】The absorption,distribution and metabolism of rhein in Penaeus vannamei were studied,and the clinical dosing regimen was established.【Methods】We analysed the pharmacokinetics of rhein in Penaeus vannamei，blood，hepatopancreas，muscle and gill were sampled after muscle injecting with a single dose of rhein (5 mg/kg)，the contents of rhein was determined by HPLC，and 3P87 software were used to analyse the data processing.【Results】Rhein in four kinds of tissue in the peak time (Tmax) early and were 0.17 h，2.73 h，0.44 h，0.23 h；elimination half-life (T1/2Ke) short were 2.13 h，2.36 h，3.12 h，3.72 h；in compartment model choice，the four organizations rhein optimum pharmacokinetic model are suitable for a one-compartment model.【Conclusion】Rhein after intramuscular injection，the drug vannamei tissues peak time is short,wide distribution，rapid absorption,strong scavenging ability.The concentration of rhein vannamei gills is high,which provides a theoretical basis for using it to treat gill disease of Penaeus vannamei.

rhein，Penaeus vannamei，pharmacokinetics，HPLC

http://www.cnki.net/kcms/detail/45.1075.N.20161201.0849.004.html

2016-10-29

蓋春蕾(1982-)，男，碩士，助理研究員，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物病害防治研究，E-mail:chunlei317@163.com。

*國(guó)家蝦產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(編號(hào)CARS-47)資助。

S948

A

1002-7378(2016)04-0282-06

網(wǎng)絡(luò)優(yōu)先數(shù)字出版時(shí)間:2016-12-01 【DOI】10.13657/j.cnki.gxkxyxb.20161201.002