李 理
(1. 湖北省中醫(yī)院,湖北 武漢 430074;2. 華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,廣東 廣州 510641)
?
火麻仁油—藻油復(fù)配劑對(duì)混合型高脂血癥大鼠的降脂及抗氧化作用
李 理2
(1. 湖北省中醫(yī)院,湖北 武漢 430074;2. 華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,廣東 廣州 510641)
探討火麻仁油—藻油復(fù)配劑對(duì)混合型高脂血癥大鼠的降脂作用及抗氧化作用。將50只大鼠隨機(jī)分為5組,每組10只,分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組和復(fù)配劑低劑量組、中劑量組及高劑量組。高脂飼料喂養(yǎng)并給予相應(yīng)藥物灌胃后,測(cè)大鼠體重、睪脂肪墊重、腎周脂肪墊重、脂體比,檢測(cè)血脂水平、血清的丙二醛(MAD)、谷胱甘肽(GSH)含量及過(guò)氧化超氧化物歧化酶(SOD)的活性。結(jié)果表明:模型組大鼠與正常組比較,體重、睪脂肪墊重、腎周脂肪墊重、脂體比顯著增加,TG、TC含量顯著升高,HDL-C顯著降低,MDA顯著升高,SOD、GSH、GSH-Px顯著降低(P<0.01或P<0.05)。與模型組比較,火麻仁油藻油高、中、低劑量組大鼠體重、睪脂肪墊重、腎周脂肪墊重、脂體比顯著降低,MDA含量顯著降低,SOD、GSH、GSH-Px含量顯著升高(P<0.01或P<0.05)。火麻仁油—藻油復(fù)配劑具有調(diào)節(jié)血脂和抗氧化作用。
火麻仁油;藻油;血脂;抗氧化
高脂血癥又稱脂質(zhì)代謝異常,主要由于脂蛋白合成異常、或者清除紊亂而出現(xiàn)血脂增高[1],臨床表現(xiàn)為高總膽固醇、高甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇過(guò)高或高密度脂蛋白膽固醇過(guò)低。隨著生活水平的不斷提高,高脂血癥發(fā)病率不斷升高,其發(fā)生機(jī)制與環(huán)境、遺傳、飲食生活習(xí)慣等多個(gè)因素關(guān)系密切[2],臨床危害較大。高脂血癥也可通過(guò)不同途徑促進(jìn)血小板的活化,導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病的發(fā)生[3]。目前臨床治療藥物降脂療效明顯均為西藥,但是部分西藥存在一些毒副作用,不宜長(zhǎng)期服用,且停藥易反彈,因此研發(fā)毒副作用小的中藥制劑及保健食品治療高脂血癥成為目前研究熱點(diǎn)[4-5]?;鹇槿视椭?0%以上均為不飽和脂肪酸,其中約80%為必需脂肪酸亞油酸(ω-6系)和α-亞麻酸(ω-3系),且兩者的比例接近3∶1。亞油酸能顯著降低血液中膽固醇的含量;α-亞麻酸在體內(nèi)酶的作用下能一定程度地轉(zhuǎn)化合成DHA和EPA,進(jìn)一步降低血脂并增強(qiáng)心血管健康方面的效應(yīng);此外,火麻仁油中還含有可降低膽固醇的植物甾醇和抗氧化活性的四氫大麻酚[6-7]。藻油富含DHA和EPA,有顯著的降血脂效應(yīng)[8]。因此,本試驗(yàn)以混合型高脂血癥大鼠作為研究對(duì)象,探討火麻仁油和藻油復(fù)配劑(α-亞麻酸60 mg/g, EPA+DHA 180 mg/g)對(duì)高脂大鼠血脂調(diào)節(jié)及抗過(guò)氧化的作用,為復(fù)配劑的臨床降脂作用效果及合適的劑量[9]提供依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及藥物
Wistar雄性大鼠50只,SPF級(jí),體重(200±20) g。試驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證:第420006000000710,許可證號(hào):SCXK(鄂)2008-0005,湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。受試物由火麻仁油(市售)、藻油(市售)為主要原料混合而成,其中含α-亞麻酸約60 mg/g、EPA+DHA約180 mg/g。各組臨用前均溶于1 mL聚山梨酯80,根據(jù)大鼠給藥容積為1 mL/100 g配置混懸液。
1.2 試驗(yàn)分組
設(shè)置空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、火麻仁油和藻油復(fù)配劑低劑量組(170 mg/kg)、中劑量組(340 mg/kg)、高劑量組(510 mg/kg),共5組。
1.3 試驗(yàn)方法
本試驗(yàn)采用在維持飼料中添加15%豬油、20%蔗糖、1.2%膽固醇、0.2%膽酸鈉,另外加入適量酪蛋白、磷酸氫鈣、石粉等。模型飼料的水分、粗蛋白、粗纖維及灰分、鈣、磷、鈣磷比根據(jù)文獻(xiàn)[10]計(jì)算確定。
大鼠喂飼維持飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d,查隨機(jī)數(shù)字表按體重隨機(jī)分成2組,空白對(duì)照組10只給予維持飼料,40只給予模型飼料作為模型對(duì)照組。每周稱量體重1次。模型對(duì)照組給予模型飼料2周后,空白對(duì)照組和模型組大鼠不禁食眼內(nèi)眥采血,測(cè)定血清血脂水平。根據(jù)TC水平將模型對(duì)照組隨機(jī)分成4組,分組后各模型對(duì)照組比較總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)差異均無(wú)顯著性[9]。分組后,連續(xù)灌胃3周,空白對(duì)照組和模型對(duì)照組同時(shí)給予同體積的蒸餾水灌胃,空白對(duì)照組繼續(xù)給予維持飼料,模型對(duì)照組及各給藥組繼續(xù)給予模型飼料,并定期稱量體重,于試驗(yàn)結(jié)束再次測(cè)定血脂。測(cè)定血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性。觀察試驗(yàn)動(dòng)物體重,剝離附睪脂肪墊和腎周脂肪墊稱重,按式(1)計(jì)算脂體比。
(1)
1.4 數(shù)據(jù)處理
2.1 各組大鼠體重、睪脂肪墊重、腎周脂肪墊重、脂體比的比較
由表1可知,與空白對(duì)照組比較,模型組大鼠體重、睪脂肪墊重、腎周脂肪墊重、脂體比顯著增加(P<0.01或P<0.05),表明高脂血癥動(dòng)物模型復(fù)制成功。與模型組比較,火麻仁油和藻油復(fù)配劑高、中、低劑量組大鼠體重、睪脂肪墊重、腎周脂肪墊重、脂體比顯著降低(P<0.01或P<0.05),表明復(fù)配劑在170~510 mg/kg劑量范圍對(duì)高脂血癥動(dòng)物模型大鼠的體重和體脂率都有降低的作用。
2.2 各組大鼠血脂生化指標(biāo)的比較
由表2可知,與空白對(duì)照組比較,模型組大鼠血清TG、TC含量顯著升高,HDL-C顯著降低(P<0.01或P<0.05);與模型組比較,火麻仁油和藻油復(fù)配劑高、中、低劑量組大鼠血清TG、TC含量顯著降低,HDL-C含量顯著升高(P<0.01或P<0.05),其中高劑量組的TG和HDL-C指標(biāo)與空白對(duì)照組相當(dāng),表明復(fù)配劑對(duì)高脂血癥動(dòng)物模型大鼠的血脂調(diào)節(jié)作用十分顯著。這一結(jié)果與吳垠等[8]報(bào)道的微藻油降血脂效果相比,油的用量更少,效果更好。
2.3 各組大鼠MDA、SOD、GSH、GSH-Px活性的影響
由表3可知,與空白對(duì)照組比較,模型組大鼠MDA顯著升高, SOD、 GSH、GSH-Px顯著降低(P<0.01);與模型組比較,火麻仁油和藻油復(fù)配劑高、中、低劑量組大鼠MDA含量均顯著降低,SOD、GSH、GSH-Px含量均顯著升高(P<0.01或P<0.05)并呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系,其中GSH和GSH-Px的活性與空白對(duì)照組接近,表明復(fù)配劑對(duì)高脂血癥動(dòng)物模型大鼠抗氧化功能的恢復(fù)有很強(qiáng)的效應(yīng)。
SOD是機(jī)體中主要的抗氧化酶,能夠清除超氧陰離子[11];
表1 各組體重、睪脂肪墊重、腎周脂肪墊重、脂體比比較?Table 1 Comparison on the body weight, testosterone fat pad weight, perinephric fat pad weight and fat body rate among different treatments (n=10)
? ★表示與空白對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05),★★表示與空白對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.01);▲表示與模型組比較差異顯著(P<0.05),▲▲表示與模型組比較差異極顯著(P<0.01)。
表2 各組血脂生化指標(biāo)的比較?Table 2 Comparison on the biochemical index of blood fat among different treatments (n=10) mmol/L
? ★表示與空白對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05),★★表示與空白對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.01);▲表示與模型組比較差異顯著(P<0.05),▲▲表示與模型組比較差異極顯著(P<0.01)。
表3 各組MDA、SOD、GSH、GSH-Px活性的比較?Table 3 Comparison on MDA, SOD, GSH and GSH-Px among different treatments (n=10)
? ★表示與空白對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05),★★表示與空白對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.01);▲表示與模型組比較差異顯著(P<0.05),▲▲表示與模型組比較差異極顯著(P<0.01)。
MDA是自由基連鎖反應(yīng)(脂質(zhì)過(guò)氧化)的最終產(chǎn)物,兩者的變化可反映心肌的抗氧化能力[12]。GSH作為一種細(xì)胞內(nèi)重要的調(diào)節(jié)代謝的物質(zhì)和抗氧化劑,同樣能夠清除掉人體內(nèi)的自由基,是一種重要的抗氧化劑。GSH-Px是過(guò)氧化物酶,可以阻斷脂質(zhì)過(guò)氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng),保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能[13]。因此,混合型高血脂模型小鼠這些指標(biāo)的恢復(fù)意味著復(fù)配劑有很強(qiáng)的抗氧化效應(yīng)。
火麻仁油作為大麻干燥成熟果實(shí)的提取物,是一種富含不飽和脂肪酸的功能性油脂,具有廣泛的食用及藥用價(jià)值,其在降低高血脂的同時(shí),也減輕了主動(dòng)脈壁內(nèi)皮細(xì)胞的損傷和平滑肌細(xì)胞的增生,從而為抗動(dòng)脈硬化及抗衰老奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)[7]。藻油具有顯著調(diào)血脂作用,并可增強(qiáng)體內(nèi)抗氧化酶活性,降低因高脂飼料引起的小鼠脂質(zhì)過(guò)氧化[8]?;鹇槿视秃驮逵蛷?fù)配劑使ω-6脂肪酸和ω-3脂肪酸的比例更加接近機(jī)體所需,具有更強(qiáng)的降低血脂和增強(qiáng)抗氧化的能力。與蕭敏等[9]的研究相比,進(jìn)一步確定了有效作用劑量,即在170~510 mg/kg 劑量范圍內(nèi)能顯著降低總膽固醇和甘油三酯、升高高密度脂蛋白以及提高抗氧化能力,并呈現(xiàn)出一定的劑量—效應(yīng)關(guān)系。
本研究表明,火麻仁油—藻油復(fù)配劑在形態(tài)上可有效改善高脂血癥模型大鼠的肥胖,減少體重及體脂率;在免疫生化上表現(xiàn)為甘油三酯降低,高密度脂蛋白升高,起到抗氧化的作用;其中火麻仁油—藻油復(fù)配劑的高劑量組能夠更加顯著地調(diào)節(jié)血脂,起到降脂的作用。
[1] 任秀君, 馬惠芳, 圖婭. 電針對(duì)高脂血癥合并腦缺血大鼠室管膜下區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞分化的影響[J]. 針刺研究, 2010, 35(5): 347-353.
[2] 余林德, 陳占利. 中西醫(yī)治療高脂血癥臨床研究進(jìn)展[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2014, 10(22): 35-37.
[3] 李文雄, 孫赫, 劉文婷. 中醫(yī)藥治療高脂血癥研究進(jìn)展[J]. 河南中醫(yī), 2015, 35(2): 439-442.
[4] 賈麗麗, 陳方紅, 李艷婷, 等. 中醫(yī)藥治療高脂血癥的臨床研究進(jìn)展[J]. 湖南中醫(yī)雜志, 2014, 30(11): 180-181.
[5] 文川元, 馬展飛, 柳澤坤, 等. 除濕降脂湯聯(lián)合舒降之治療高血脂癥的療效觀察[J]. 中國(guó)中醫(yī)藥科技, 2015, 22(3): 307-308.
[6] 任漢陽(yáng), 孫紅光. 火麻仁油的降脂及對(duì)過(guò)氧化脂質(zhì)作用的實(shí)臉研究[J]. 中國(guó)中醫(yī)藥科技, 1997, 4(4): 200.
[7] 扈學(xué)俸, 李永進(jìn), 王軍波, 等. 火麻仁油安全性評(píng)價(jià)及血清抗氧化功能初步研究[J]. 中國(guó)食品衛(wèi)生雜志, 2008, 20(5): 385-388.
[8] 吳垠, 劉偉娜. 兩種微藻油對(duì)高脂小鼠脂類代謝及脂質(zhì)過(guò)氧化作用的影響[J]. 中國(guó)海洋藥物, 2010, 29(6): 48-50.
[9] 蕭閔, 李全勝. 火麻仁油與藻油混合物對(duì)營(yíng)養(yǎng)肥胖大鼠的降脂減肥作用研究[J]. 湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2016, 18(4): 12-15.
[10] 熊本海, 龐之洪, 羅清堯. 中國(guó)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值表(2013年第24版)制訂說(shuō)明[J]. 中國(guó)飼料, 2013(21): 34-43.
[11] IKATA J, WAKATSUKI T, OISHI Y, et al. Leukocytecounts and concentrations and soluble asdhesion molecules aspredictors of coronary atheroselerosis[J]. Coron Artery Dis, 2000, 11(6): 445.[12] 任天舒, 李林鵬, 姜遠(yuǎn)英. 高膽固醇血癥大鼠自由基代謝紊亂及阿托伐他汀的干預(yù)作用[J]. 藥學(xué)實(shí)踐雜志, 2007, 25(3): 143-144, 149.
[13] 葉振南, 李楠, 盛丹丹, 等. 青錢柳多糖對(duì)高脂血癥大鼠血脂及抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用的影響[J]. 現(xiàn)代食品科技, 2014, 30(4): 1-5.
Effect of hemp seed and algae oils preparation on blood lipid-lowering and antioxidant activities for mixed hyperlipidemia rats柏傳明1BAI Chuan-ming1
LILi2
(1.HubeiProvincialTraditionalChineseMedicineHospital,Wuhan,Hubei430074,China; 2.SchoolofFoodScienceandEngineering,SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou,Guangdong510641,China)
Objective: The effects of hemp seed and algae oils preparation on blood lipid-lowering and antioxidant activity of mixed hyperlipidemia rats were investigated in this study. 50 rats were randomly divided into 5 groups, i.e., the blank control group, model control group, hemp seed oil and algal oil preparation low dose group (170 mg/kg), medium dose group (340 mg/kg) and high dose group (510 mg/kg). Then their weights of , testis fat pad and perirenal fat pad, fat body ratio, and the activities of malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH) and superoxide dismutase (SOD) were measured after feeding high fat diet and corresponding drugs. The results indicated that the weights of gain, and testis and perirenal fat pads, fat body ratio, TG, TC and MDA of model control group rats increased significantly, however, the activities of GSH, GSH-Px and SOD, and the high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) reduced significantly (P < 0.05, P < 0.01), compared to the blank group. Moreover, in the high dose and low dose group of hemp seed oil and algae oil preparation, rats weight, weights of testis and perirenal fat pads, body fat ratio decreased significantly, and the content of MDA decreased significantly, while the activities of SOD, GSH and GSH PX significantly increased (P < 0.05 or P < 0.05), compared to the model control group. In conclusion, our results confirmed that the hemp seed and algae oils preparation could regulate blood lipid and possessed strong antioxidant activities.
Hemp seed oil; algae oil; blood lipid; antioxidant activity
柏傳明(1966—),男,湖北省中醫(yī)院副主任藥師。 E-mail: 838740831@qq.com
2016—09—16
10.13652/j.issn.1003-5788.2016.11.032