王愛娜，楊　艷，王　玳

（山西省食品藥品檢驗(yàn)所，山西太原030001）

安神補(bǔ)腦膠囊中淫羊藿苷含量測(cè)定方法的研究

王愛娜，楊艷，王玳

（山西省食品藥品檢驗(yàn)所，山西太原030001）

目的：建立安神補(bǔ)腦膠囊中淫羊藿苷含量的測(cè)定方法。方法：采用高效液相色譜法，C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%三氟乙酸（30∶70）；檢測(cè)波長(zhǎng)：270 nm；流速：1.0 mL/min。結(jié)果：淫羊藿苷在0.050 6～2.024 0 μg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系（r2=0.999），平均回收率為96.4%，RSD=0.56%。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便，可用于安神補(bǔ)腦膠囊中淫羊藿苷的含量測(cè)定。

高效液相色譜法；安神補(bǔ)腦膠囊；淫羊藿苷；含量測(cè)定

安神補(bǔ)腦膠囊由鹿茸、制首烏、淫羊藿、干姜、甘草、大棗、維生素B1組方而成，具有生精補(bǔ)髓、增強(qiáng)腦力的功效，用于治療神經(jīng)衰弱、失眠、健忘、頭暈等。為了更有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證臨床用藥安全有效，本文選擇淫羊藿中的淫羊藿苷作為質(zhì)控指標(biāo)，用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定其含量［1-3］。

1　儀器與試藥

島津LC-2010AHT高效液相色譜儀。乙腈為色譜純（迪馬科技有限公司），水為純化水，其余試劑均為分析純。淫羊藿苷（購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，供含量測(cè)定用，批號(hào)110737-200415），安神補(bǔ)腦膠囊（批號(hào)：100901）。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

色譜柱：方法學(xué)考察采用C18柱（日本富士填料，4.6 mm×250 mm，5 μm）。波長(zhǎng)：參照《中國(guó)藥典》2010年版一部中淫羊藿藥材含量測(cè)定項(xiàng)下淫羊藿苷的測(cè)定波長(zhǎng)，選擇270 nm作為測(cè)定波長(zhǎng)［4］。柱溫：室溫；流速：1.0 mL/min；流動(dòng)相：乙腈-0.1%三氟乙酸（30∶70）。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于5 000。

2.2供試品溶液的制備

取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物10粒，研細(xì)，取約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率33 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。供試品HPLC色譜圖見圖1。

圖1　供試品HPLC色譜圖

2.3對(duì)照品溶液的制備

取淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每1 mL含16 μg的溶液，即得。淫羊藿苷對(duì)照品HPLC色譜圖見圖2。

圖2　淫羊藿苷對(duì)照品HPLC色譜圖

2.4專屬性試驗(yàn)

取處方中除淫羊藿外的全部藥味，按本品工藝及供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液，照上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明陰性對(duì)照無(wú)干擾（見圖3）。

圖3　陰性對(duì)照（缺淫羊藿）HPLC色譜圖

2.5線性范圍的考察

精密吸取淫羊藿苷對(duì)照品溶液（0.101 2 mg/mL）0.5 μL、1 μL、2 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL分別注入液相色譜儀，測(cè)定其峰面積，以峰面積值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)得回歸方程為Y=21 745X-485.3，r2=0.999。結(jié)果表明，進(jìn)樣量在0.050 6～2.024 0 μg范圍內(nèi)，淫羊藿苷峰面積值與進(jìn)樣量有良好的線性關(guān)系。

2.6精密度考察

精密吸取同一份供試品溶液（100901），重復(fù)進(jìn)樣6次，峰面積分別為237 794、237 124、237 617、237 627、238 021、237 371，RSD=0.14%。結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.7重復(fù)性試驗(yàn)

取同批樣品（100901），依法平行測(cè)定6份，計(jì)算淫羊藿苷的含量分別為6.913 mg/g、6.924 mg/g、6.951 mg/g、6.839 mg/g、6.999 mg/g、7.005 mg/g，平均含量為6.94 mg/g，RSD=0.89%。結(jié)果表明該方法的重復(fù)性良好。

2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一份供試品溶液（100901），分別在制備后0 h、4 h、9 h、13 h、27 h依法測(cè)定淫羊藿苷的峰面積分別為232 880、242 774、239 954、240 608、238 015，RSD=1.6%。結(jié)果表明供試品溶液在27 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.9準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取本品（100901）約0.25 g，精密稱定，分別精密加入對(duì)照品適量，按上述方法制備供試品溶液，依法測(cè)定，以下列公式計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。結(jié)果表明該方法具有良好的回收率，準(zhǔn)確度好。

表1　加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.10耐用性實(shí)驗(yàn)

儀器改用Waters2695-2996型液相色譜儀，色譜柱使用菲羅門C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）柱及島津LC-20AT液相色譜儀，色譜柱使用極限系列AQ-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）柱，均能達(dá)到很好的分離效果。

2.11樣品測(cè)定

按上述含量測(cè)定方法，分別對(duì)不同企業(yè)6批樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表2。

表2　6批樣品含量測(cè)定結(jié)果

3　討論

通過(guò)對(duì)6批樣品中淫羊藿苷的含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，不同批次含量差別較大，這可能與不同產(chǎn)地淫羊藿中淫羊藿苷的含量高低有關(guān)，也考慮到可能是不同制劑工藝在藥物制備過(guò)程對(duì)有效成分的影響不同。本方法重現(xiàn)性好，精密度高，能準(zhǔn)確測(cè)定安神補(bǔ)腦膠囊中淫羊藿苷的含量，可用于評(píng)價(jià)該制劑的質(zhì)量。

［1］馮勝民，朱山寅.RP-HPLC法測(cè)定安神補(bǔ)腦液中淫羊藿苷的含量［J］.中國(guó)新藥雜志，2006，15（7）：544-575.

［2］羅淑萍，郭炎榮，楊青.SPE-HPLC法同時(shí)測(cè)定安神補(bǔ)腦液中二苯乙烯苷和淫羊藿苷的含量［J］.中國(guó)藥師，2013，16（10）：1 493-1 494.

［3］王寶全，趙慶華，劉忠良，等.不同廠家安神補(bǔ)腦液中淫羊藿苷含量考察［J］.實(shí)用醫(yī)藥雜志，2011，28（2）：140-141.

［4］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：306.

（編輯：梁葆朱）

Determination of icariin in Anshen Bunao capsule by HPLC

Wang Aina，Yang Yan，Wang Dai
（Shanxi Institute For Food and Drug Control，Taiyuan Shanxi 030001）

Objective：The method for determining icariin in Anshen Bunao capsule was established.Methods：HPLC was conducted on Packing C18column（4.6 mm×250 mm，5 μm）with the mobile phase of acetonitrile and 0.1%trifluoroacetic acid（30∶70）.Detection wavelength was at 270 nm and flow rate was 1.0 mL/min.Results：The linear range of icariin was 0.050 6～2.024 0 μg（r2=0.999），and the average recovery was 96.4%（RSD=0.56%）.Conclusion：The method is simple，rapid，accurate and can be used in the determination of icariin in Anshen Bunao capsule.

HPLC；Anshen Bunao capsule；icariin；determination

R286

A

1671-0258（2016）05-0029-03

王愛娜，碩士，主管藥師，E-mail：wangandhh2@126.com