張 波，董建明，李 雯，羅洪英，畢 丹

(1.宜賓市第三人民醫(yī)院藥劑科，宜賓 644000；2.宜賓市第一人民醫(yī)院藥劑科，宜賓 644000)

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肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌的分布與耐藥性監(jiān)測

張 波1，董建明1，李 雯2，羅洪英1，畢 丹1

(1.宜賓市第三人民醫(yī)院藥劑科，宜賓 644000；2.宜賓市第一人民醫(yī)院藥劑科，宜賓 644000)

目的 了解我院肺炎克雷伯菌與大腸埃希菌在不同臨床標本中的分布及耐藥特點。方法 采用K-B法藥敏進行藥敏試驗并應用WHONET 5.4軟件和SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。結(jié)果 醫(yī)院產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌總檢出率分別為30.9%和22.7%，且對絕大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率高于30%；產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌在不同標本間對同一抗菌藥物的耐藥率有顯著差別。結(jié)論 肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌在各類臨床標本中的檢出率和耐藥率有差異，及時了解其耐藥特點對合理應用抗菌藥物十分重要。

肺炎克雷伯菌；大腸埃希菌；ESBLs；耐藥性；分布

A.stract:Objective To investigate the distribution of different clinical specimens and the surveillance of drug resistance inK.pneumoniaeandE.coli.Methods Kirby-Bauer method was adopted for antibiotic sensitivity test.Data was analyzed by WHONET 5.4 software and SPSS 17.0.Results The detection rates of ESBLs producingE.coliandK.pneumoniaewere 30.9% and 22.7%，respectively，and the resistant rate was higher than 30% for the vast majority of antimicrobial drugs.There was significant different of resistant rate of the same ESBLs producingK.pneumoniaeandE.colifor the same antimicrobial drug among the different clinical specimens.ConclusionK.pneumoniaeandE.colidistributed in various clinical specimens in different proportion，timely investigate their resistance characteristics in different clinical specimens is very important for rational application of antimicrobial agents.

大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌是臨床常見的分離菌，也是導致患者發(fā)病和死亡的重要病原菌。產(chǎn)ESBLs是大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥的主要機制之一[1]。本文主要報道大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌在不同臨床分離標本中的分布、產(chǎn)ESBLs菌株檢出率及細菌耐藥性分析，為臨床合理使用抗菌藥物、有效預防感染和控制醫(yī)院感染提供實驗依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床標本和菌株 標本、菌株：我院2010～2014年檢驗科藥敏實驗室分離的臨床標本(剔除同一患者同部位重復分離菌株)，包括尿液、痰液、血液以及鼻咽拭子等。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC70063。

1.2 分離鑒定方法 標本接種、培養(yǎng)菌株、分離鑒定嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行；產(chǎn)ESBLs鑒定包括初篩試驗和確認試驗，嚴格按照《產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶細菌感染防治專家共識》[2]規(guī)定進行。1.3 藥敏試驗 采用臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)推薦的K-B藥敏法，藥敏結(jié)果判讀按照其制定的2012年確定的標準判斷。

1.4 統(tǒng)計處理 采用WHONET 5.4軟件統(tǒng)計分析、匯總，并應用 SPSS 17.0軟件處理數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.1 細菌檢出情況 2010～2014年送檢樣本共檢出大腸埃希菌792例，肺炎克雷伯菌232例，其中尿液、痰液、血液和鼻咽拭子檢出大腸埃希菌為745例，肺炎克雷伯菌為211例；產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別為230例和48例。

2.2 ESBLs的檢出率 不同臨床標本中大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌ESBLs的檢出率不同，同一標本中的2種細菌ESBLs的檢出率也有區(qū)別，具體情況見表1。

表1 4類主要標本中大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌ESBLs的檢出情況

Tab.1 The detection of ESBLs ofK.pneumoniaeandE.coliin four types of main specimens

送檢樣本大腸埃希菌標本/株檢出產(chǎn)ESBLs/株肺炎克雷伯菌標本/株檢出產(chǎn)ESBLs/株尿液333112263痰液2488511635血液9218142咽拭子7215558合計74523021148

2.3 耐藥率

2.3.1 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對抗菌藥物的耐藥率 不產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對絕大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率低于30%；產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對青霉素類、頭孢菌素類及其他類抗菌藥物的耐藥率有差異，具體耐藥率見表2～4。

表2 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對青霉素類抗菌藥物的耐藥率及敏感率

Tab.2 The resistance and sensitive rate ofK.pneumoniaeandE.colifor penicillins(%)

青霉素類大腸埃希菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率肺炎克雷伯菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率替卡西林/棒酸90.66.24.493.787.710.39.490.6替卡西林47.652.40.399.760.433.60.999.1阿莫西林/棒酸92.24.737.160.391.18.931.866.2阿莫西林55.342.61.298.870.021.80.999.1哌拉西林/他唑巴坦97.20.170.924.697.82.229.967.3哌拉西林61.127.90.0100.080.118.50.0100.0合計80.716.423.874.682.213.615.982.3

表3 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對頭孢菌素類抗菌藥物的耐藥率及敏感率

Tab.3 The resistance and sensitive rate ofK.pneumoniaandE.colifor cephalosporins(%)

頭孢菌素類大腸埃希菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率肺炎克雷伯菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率頭孢噻吩88.111.67.992.180.913.80.0100.0頭孢呋辛88.510.16.893.285.912.18.191.9頭孢噻肟90.89.22.497.682.017.50.899.2頭孢他啶92.43.663.936.196.93.134.262.8頭孢吡肟90.91.740.853.998.91.144.955.1頭孢西丁95.62.958.841.290.57.764.134.6合計90.76.828.970.191.17.220.377.2

表4 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對其他類抗菌藥物的耐藥率及敏感率

Tab.4 The resistance and sensitive rate ofK.pneumoniaandE.colifor other antimicrobials(%)

其他類大腸埃希菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率肺炎克雷伯菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率阿米卡星99.40.688.610.397.52.580.519.5慶大霉素87.212.834.364.380.816.940.158.7奈替米星90.18.940.155.288.710.348.850.6妥布霉素91.88.235.162.185.513.631.266.8環(huán)丙沙星64.333.68.891.282.517.511.488.6復方新諾明70.528.317.882.275.622.315.684.4亞胺培南100.00.099.10.09100.00.099.90.01美羅培南100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0合計87.510.343.254.486.811.352.145.9

2.3.2 不同標本中大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對抗菌藥物的耐藥率 不同標本分布的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對同類抗菌藥物的耐藥率不同，具體見表5～6。

表5 各類標本中大腸埃希菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率

Tab.5 The resistance and sensitive rate ofE.colifor antimicrobial among different specimens(%)

抗菌藥物血液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率尿液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率痰液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率*P1**P2***P3青霉素類80.614.872.919.771.812.6<0.05<0.05>0.05頭孢菌素類76.98.770.76.970.16.2<0.05<0.05>0.05其他類59.919.252.310.653.714.3<0.01<0.05>0.05

注：*P1血液中的 ESBLs(+)耐藥率與尿液中的 ESBLs(+)耐藥率比較；**P2血液中的 ESBLs(+)耐藥率與痰液中的 ESBLs(+)耐藥率比較；***P3尿液中的 ESBLs(+)耐藥率與痰液中的 ESBLs(+)耐藥率比較。

表6 各類標本中肺炎克雷伯菌對抗菌藥物的敏感率和耐藥率

Tab.6 The resistance and sensitive rate ofK.pneumoniaefor antimicrobial among different specimens(%)

抗菌藥物血液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率尿液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率痰液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率*P1**P2***P3青霉素類81.211.583.914.784.210.3>0.05<0.05>0.05頭孢菌素類94.910.790.78.989.89.3<0.05<0.05>0.05其他類79.99.273.113.271.911.1<0.05<0.05>0.05

注：*P1血液中的 ESBLs(+)耐藥率與尿液中的 ESBLs(+)耐藥率比較；**P2血液中的 ESBLs(+)耐藥率與痰液中的 ESBLs(+)耐藥率比較；***P3尿液中的 ESBLs(+)耐藥率與痰液中的 ESBLs(+)耐藥率比較。

3 討論

3.1 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌檢出情況 我院2010～2014年5年間，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌的檢出率不斷上升，這可能與我院抗菌藥物的使用頻度較高有關(guān)。臨床分離標本中產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率各有差異，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的檢出率以尿液和痰液標本較高，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的檢出率以痰液標本為高。從產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對頭孢他啶與頭孢噻肟的耐藥率可推斷其菌株以CTX-M為主[3]，這為臨床醫(yī)師更精確針對耐藥機制選擇抗菌藥物提供了依據(jù)。

3.2 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對抗菌藥物的總耐藥情況 非產(chǎn)ESBLs菌株對青霉素類、頭孢菌素類及其他類抗菌藥物的耐藥率低于20%，產(chǎn)ESBLs菌株對青霉素類、頭孢菌素類的耐藥率較高，達70.0%以上，可能是由于長期大量使用第二、三代頭孢菌素類藥物所致，使產(chǎn)酶株通過DNA轉(zhuǎn)移酶變異和外膜蛋白通透性降低而對此類抗菌藥物耐藥，也可能是產(chǎn)酶菌株攜帶有針對此類抗菌藥物的耐藥基因檢出于相同標本[4-6]，應當引起臨床重視。產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌對碳青霉烯類耐藥率低，提示碳青霉烯類仍然是抗產(chǎn)ESBLs細菌最有效的藥物；對阿米卡星的耐藥率均小于20%，提示該藥對產(chǎn)ESBLs細菌具有良好的抗菌作用，臨床醫(yī)生可按藥敏試驗結(jié)果合理選擇抗菌藥物。

3.3 不同標本中大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對抗菌藥物的耐藥情況 不同標本分離的不產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌或肺炎克雷伯菌對不同類抗菌藥物的耐藥率無明顯差別，血液與尿液分離的產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對不同類抗菌藥物的耐藥率有差別(P<0.05)，血液與尿液分離的產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌對不同類抗菌藥物的耐藥率無差別，血液與痰液分離的產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌或肺炎克雷伯菌對不同類抗菌藥物的耐藥率也有差別(P<0.05)，尿液與痰液分離的產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌或肺炎克雷伯菌對不同類抗菌藥物的耐藥率無明顯差別，可以為臨床醫(yī)師的經(jīng)驗性用藥提供理論依據(jù)。

總的來說，ESBLs菌株的出現(xiàn)給臨床抗菌治療帶來了很大的困難，為防止多重耐藥、泛耐藥和產(chǎn)ESBLs菌株感染的出現(xiàn)和爆發(fā)流行，應廣泛開展多重耐藥、泛耐藥和產(chǎn)ESBLs菌株感染的前瞻性監(jiān)測[7]。醫(yī)務人員應該認真對待醫(yī)院細菌分布和耐藥的情況，綜合患者病情，合理使用抗菌藥物，這樣可有效預防和控制感染爆發(fā)流行，對提高醫(yī)療質(zhì)量有重要意義。

[1] 蔣冬香，陳剛，王玉春，等．產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌的臨床分布與耐藥性[J]．中華醫(yī)院感染學雜志，2011，21(2)：371-373．

[2] 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶細菌感染防治專家委員會．產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶細菌感染防治專家共識 [J]．中華實驗和臨床感染病雜志，2010，4(2)：207-214．

[3] 葉燕崧，梁杰昌，劉玉華．傷口感染病原菌分布及耐藥分析[J]．西北藥學雜志，2013，28(3)：307-310．

[4] 翁幸鐾，糜祖煌．大腸埃希菌對β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥特征及分子流行病學研究 [J]．國際流行病學傳染病學雜志，2011，38(6)：375-380．

[5] 喬登嫣，強桂芳，趙曉英，等．正常糞便中大腸埃希菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶及耐藥性調(diào)查 [J]．國際檢驗醫(yī)學雜志，2011，32(12)：1377-1378．

[6] 孫康德，馮志磊，虞中敏，等．質(zhì)粒介導的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐喹諾酮類藥物的研究 [J]．國際檢驗醫(yī)學雜志，2011，32(6)：635-637．

[7] 王彬翀，李寶珍，雷金娥，等．217株產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌耐藥監(jiān)測結(jié)果分析[J]．西北藥學雜志，2012，27(6)：579-580．

The distribution and resistanece detection of K.pneumoniae and E.coli

ZHANG Bo1，DONG Jianming1，LI Wen2，LUO Hongying1，BI Dan1

(1.The Third People′s Hospital of Yibin， Yibin 644000，China； 2.The First People′s Hospital of Yibin，Yibin 644000，China)

K.pneumoniae；E.coli；ESBLs；drug resistance；distribution

10.3969/j.issn.1004-2407.2016.06.027

R969.3

A

1004-2407(2016)06-0640-04

2016-02-03)