霍道坦 孫進(jìn)生 馮 川

(菏澤市牡丹區(qū)畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局,山東菏澤 274000)

菏澤市牡丹區(qū)家畜布魯氏分枝桿菌病流行病學(xué)調(diào)查

霍道坦 孫進(jìn)生 馮 川

(菏澤市牡丹區(qū)畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局,山東菏澤 274000)

為全面了解菏澤市牡丹區(qū)牛羊布魯氏分枝桿菌病的流行情況，我們于2016年4月份開(kāi)展了牛羊布氏桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查研究。采用虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)結(jié)合的方式對(duì)采集的1420份血清（牛320份，羊1100份）進(jìn)行布病檢測(cè)。結(jié)果顯示：布氏桿菌病檢測(cè)全部為陰性。

牛羊布魯氏桿菌

布氏分枝桿菌病簡(jiǎn)稱布病，是由布氏桿菌引起的一種人畜共患傳染病，我國(guó)將其列為二類動(dòng)物疫病。牛、羊、豬最易感，主要侵害生殖系統(tǒng)，感染后，以母羊發(fā)生流產(chǎn)和公羊發(fā)生睪丸炎為特征。給畜牧業(yè)生產(chǎn)造成重大經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)和人類健康。

為了解牡丹區(qū)牛羊布魯氏分枝桿菌病的流行情況，本試驗(yàn)選取了不同區(qū)域的4個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，并對(duì)其周邊散養(yǎng)戶進(jìn)行采樣，已便為下一步牡丹區(qū)布病防控工作做出指導(dǎo)。

1 試驗(yàn)材料和方法

1.1 材料

牛血清320份，羊血清1100份，來(lái)自四個(gè)不同的規(guī)模場(chǎng)及周邊區(qū)域。

1.2 血清的制備與保存

待血清析出時(shí)，分裝入離心管，放于4℃冰箱用于試驗(yàn)檢測(cè)，將其他備份血清放于- 20℃冰箱凍存。

1.3 實(shí)驗(yàn)材料

布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)抗原、陽(yáng)性血清、陰性血清均購(gòu)自青島易邦生物工程有限公司。

真空管、離心管、離心機(jī)、冰箱、玻璃板、試管、游標(biāo)卡尺（精度為0.02 mm）、毛剪、酒精棉、1m1注射器、工作服、一次性帽子、一次性口罩、膠靴、記錄表等。

1.4 樣品檢測(cè)

對(duì)采集的1420份血清采用布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)初步篩查，對(duì)出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果的血清，再使用試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行復(fù)檢。

1.4.1 布病虎紅平板凝集試驗(yàn)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)

參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18646-2002動(dòng)物布氏桿菌診斷技術(shù)，在滅菌潔凈的玻璃板片上，分別吸取被檢血清30μ1與虎紅平板凝集抗原30μ1混合均勻，同時(shí)以 陽(yáng)、陰性血清做對(duì)照。在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)凝集現(xiàn)象判為陽(yáng)性，無(wú)凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性。

1.4.2 布病試管凝集試驗(yàn)（SAT）方法及判定標(biāo)準(zhǔn)

參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18646-2002動(dòng)物布氏桿菌診斷技術(shù)，首先稀釋血清，羊血清稀釋度依次為1：12.5、1：25、1：50、1：100；牛血清稀釋度依次為1：25、1：50、 1：100、1：200。加入等量稀釋后的抗原，混勻。同時(shí)做陰陽(yáng)性對(duì)照及抗原對(duì)照，并配制比濁管。將全部試管、對(duì)照管及比濁管充分振蕩后置37℃溫箱24h，取出檢查并記錄結(jié)果。參照比濁管，按各試管上層液體亮度判讀，++++菌體完全凝集，100%下沉，上層液體100%清亮；+++菌體幾乎完全凝集，上層液體75%清亮；++菌體凝集顯著，液體50%清亮；+凝集物有沉淀，液體25%清亮；－凝集物無(wú)沉淀，液體均勻混濁。

2 結(jié)果與分析

布氏桿菌初篩及復(fù)檢結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知，初檢結(jié)果牛12頭陽(yáng)性、羊5頭陽(yáng)性；經(jīng)試管凝集試驗(yàn)復(fù)檢，全部為陰性。

表1　牛羊布氏桿菌病的檢測(cè)結(jié)果

3 討論

通過(guò)這次調(diào)查，檢測(cè)出牡丹區(qū)已基本上不存在布氏桿菌病。近幾年來(lái)，牡丹區(qū)非常重視牛羊布魯氏分枝桿菌病的防控，花費(fèi)大量的人力和物力，對(duì)全區(qū)牛、羊逐個(gè)進(jìn)行檢測(cè)排查，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性全部進(jìn)行無(wú)害化處理。

雖然牡丹區(qū)布病的防控工作取得了一定的成效，但任務(wù)仍然十分艱巨。在今后的工作中，將重點(diǎn)從以下三個(gè)方面做起：一是加強(qiáng)布魯菌病的宣傳，定期舉辦飼養(yǎng)管理及疾病預(yù)防技術(shù)培訓(xùn)班，提高養(yǎng)殖者整體素質(zhì)。同時(shí)，加強(qiáng)飼養(yǎng)環(huán)節(jié)的技術(shù)服務(wù)，提高基層畜牧獸醫(yī)人員業(yè)務(wù)素質(zhì)和進(jìn)場(chǎng)入戶服務(wù)水平。二是定期檢疫家畜與監(jiān)測(cè)，應(yīng)盡量減少病畜數(shù)量、嚴(yán)格制病畜的流動(dòng)，避免患病的和為患病的病畜混養(yǎng)，及時(shí)檢疫家畜。對(duì)檢出的陽(yáng)性病畜進(jìn)行及時(shí)隔離和淘汰，對(duì)已感染的病畜要集中焚燒或深埋，對(duì)病畜所產(chǎn)的流產(chǎn)胎兒、排泄物和乳制品等也要進(jìn)行嚴(yán)格消毒，并做無(wú)害化處理，以控制傳染源，切斷傳播途徑。三是將平板凝集和試管凝集有機(jī)結(jié)合起來(lái)，防止布病的誤診和漏診。