楊濟維，程 玉，王海濤

（1.華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北唐山 063000；2.承德醫(yī)學(xué)院）

YANG Ji-wei， CHENG Yu， WANG Hai-tao

(School of Basic Medical Sciences, North China University of Science and Technology, Hebei Tangshan 063000, China)

胃癌組織Oct4和PI3K的表達和相關(guān)性

楊濟維1、2，程 玉2，王海濤1△

（1.華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北唐山 063000；2.承德醫(yī)學(xué)院）

目的：探討八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子（Oct4）與磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）在胃癌組織中的表達和意義，并分析二者的相關(guān)性。方法：應(yīng)用免疫組化S-P法檢測60例胃癌組織和25例正常胃組織（距癌組織邊緣10cm以上的胃組織）Oct4與PI3K蛋白的表達情況。結(jié)果：胃癌組織Oct4、PI3K的陽性表達率均明顯高于癌旁正常胃組織（P＜0.01）；胃癌組織Oct4、PI3K的表達均與分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05），與年齡和性別無關(guān)（P＞0.05）。胃癌組織Oct4、PI3K的表達呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.532，P＜0.05）。結(jié)論：Oct4和PI3K可能與胃癌的發(fā)生、發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

胃癌；Oct4；PI3K

YANG Ji-wei， CHENG Yu， WANG Hai-tao

(School of Basic Medical Sciences, North China University of Science and Technology, Hebei Tangshan 063000, China)

胃癌在我國的發(fā)病率和死亡率總體呈上升趨勢，因此胃癌的發(fā)生機制成為了研究的熱點。八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4蛋白（octamer binding factor 4，Oct4）對細胞的正常分化起著決定性作用［1］。PI3K/Akt信號通路的活化可促進細胞增殖，并能促進腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和侵襲［2］。PI3K是PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的始動因子。目前，對于在胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中Oct4和PI3K信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相互作用的研究報道較少。本研究通過檢測正常胃組織與胃癌組織中Oct4與PI3K的表達情況，分析胃癌組織中Oct4與PI3K的相互關(guān)系，以探索胃癌的發(fā)生、發(fā)展機制，以期為臨床治療胃癌提供新的作用靶點。

1 材料與方法

1.1 一般資料 承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2013年7月至2014年2月手術(shù)切除胃癌組織60例及距癌組織邊緣10cm以上的正常胃組織25例，術(shù)前均未行化療、放療，所有患者均經(jīng)術(shù)后病理學(xué)檢查證實為胃腺癌，相應(yīng)癌旁組織均未見癌累及。60例胃癌患者中，男45例、女15例，年齡39-80歲，中位年齡56歲；高-中分化24例、低分化36例，癌組織侵及漿膜層48例、未侵及漿膜層12例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25例、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例。所有標本離體后立即置于10%福爾馬林溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋、切片。

1.2 免疫組化染色及結(jié)果判定 采用S-P法，兔抗人Oct4單克隆抗體、兔抗人PI3K多克隆抗體，購自博士德生物工程有限公司，工作濃度為1：100。以PBS代替一抗作為陰性對照，用已知陽性切片作為陽性對照。Oct4、PI3K陽性染色呈黃色至棕黃色，主要定位于癌細胞的細胞質(zhì)。在染色均勻的區(qū)域，選取5個高倍鏡視野（×400）：⑴按陽性細胞百分率評分（A值）：1%-25%為1分，25%-50%為2分，＞50%為3分；⑵按染色強度評分（B值）：不著色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。A、B兩項得分相加≤2分為陰性，＞2分為陽性。

1.3 統(tǒng)計分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行處理，率的比較采用卡方檢驗，相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Oct4、PI3K蛋白的表達情況及二者的相關(guān)性 胃癌組織Oct4蛋白的陽性表達率為71.67%（43/60），PI3K蛋白的陽性表達率為86.67%（52/60），均明顯高于正常胃組織（P＜0.01）。胃癌組織中，Oct4蛋白和PI3K蛋白的表達呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.532，P＜0.05）。見表1-2：

表1 Oct4和PI3K蛋白在胃癌組織和正常胃組織中的表達情況

表2 胃癌組織Oct4和PI3K蛋白表達的相關(guān)性

2.2 Oct4、PI3K蛋白表達與胃癌病理特征的關(guān)系 胃癌組織Oct4、PI3K蛋白的表達與患者年齡、性別無關(guān)（P＞0.05）；與胃癌的分化程度、浸潤深度和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）：低分化明顯高于高-中分化、侵及漿膜明顯高于未侵及漿膜、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。見表3：

表3 Oct4和PI3K蛋白表達與胃癌臨床病理特征的關(guān)系

3 討論

Oct4基因是八聚體核苷酸結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子家族中的一員，早期發(fā)現(xiàn)于胚胎干細胞中［3-4］。人的Oct4蛋白在調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育、維持胚胎干細胞自我更新能力及定向分化能力方面具有重要作用［5-6］。除在胚胎和生殖細胞癌中表達外，有研究者在乳腺癌MCF7細胞和宮頸癌Hela細胞株等非生殖細胞癌中也發(fā)現(xiàn)了Oct4的表達［7-10］。本研究采用免疫組化技術(shù)對Oct4蛋白在胃癌中的表達情況進行了檢測，發(fā)現(xiàn)胃癌組織Oct4的陽性表達率明顯高于正常胃組織；并且發(fā)現(xiàn)，胃癌組織Oct4表達與腫瘤的分化程度、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)：低分化明顯高于高-中分化、侵及漿膜明顯高于未侵及漿膜、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。因此提示，隨著胃癌惡性程度的增加，Oct4的陽性表達率逐漸升高。

PI3K是PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的始動因子，此信號通路是一條酪氨酸激酶級聯(lián)信號通路。Src、Ras、Rac、Ab1、v-Crk等具有酪氨酸激酶活性的癌性蛋白可與PI3K的調(diào)節(jié)亞基P85結(jié)合而發(fā)生作用，這些癌性蛋白的異?；罨墒筆I3K持續(xù)活化，進而使細胞形態(tài)改變、凋亡受阻，導(dǎo)致細胞轉(zhuǎn)化及過度增殖［11］。本研究顯示，胃癌組織PI3K蛋白的陽性表達率明顯高于正常胃組織，隨著胃癌分化程度高、中→低變化，浸潤深度由淺→深改變，PI3K的陽性表達率明顯升高，且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者PI3K的陽性表達率也明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。提示PI3K的激活與胃癌的發(fā)生發(fā)展和浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)。

綜上所述，本研究證實了胃癌組織Oct4、PI3K的陽性表達明顯升高，提示二者均參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展及浸潤、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為，因此，本研究可為胃癌的臨床治療提供新的作用靶點。同時，本研究還發(fā)現(xiàn)，胃癌組織Oct4與PI3K的表達呈正相關(guān)關(guān)系，二者的相互作用可能為胃癌的發(fā)病機制提供新的理論依據(jù)。

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EXPRESSION AND CORRELATION OF OCT4 AND PI3K IN GASTRIC CARCINOMA

Objective: To investigate the expression and signif icance of octamer-binding transcription factor （Oct4）and phosphatidyl inositol 3-kinase （PI3K） in gastric carcinoma， and analyze the correlations between them. Methods: S-P immunohistochemical stain was used to detect the expression of Oct4 and PI3K in 60 cases gastric carcinoma and 25 casesnormal gastric tissues. Results: The positive expression rate of Oct4 and PI3K in gastric carcinoma was obviously higher than normal gastric tissues （P＜0.01）. In gastric carcinoma， the expression of Oct4 and PI3K were all related to differentiated degree， infi ltration depth and lymph node metastasis （P＜0.05）； but not related to age and sex （P＜0.05）. In gastric carcinoma，the expression of Oct4 was positively correlated with PI3K （r=0.532，P＜0.05）. Conclusions: Oct4 and PI3K may play important role in development， infi ltration and metastasis of gastric carcinoma.

Gastric carcinoma； Oct4； PI3K

R735.2

A

1004-6879（2016）02-0187-03

△

（2015-11-12）