范超，溫子川，霍忠明，楊鳳，閆喜武

（大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，遼寧省貝類良種繁育工程技術(shù)研究中心，遼寧大連116023）

鹽度脅迫對不同發(fā)育時期菲律賓蛤仔生長和存活的影響

范超，溫子川，霍忠明，楊鳳，閆喜武

（大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，遼寧省貝類良種繁育工程技術(shù)研究中心，遼寧大連116023）

為研究鹽度對不同發(fā)育時期菲律賓蛤仔Ruditapes philippinarum（以下稱蛤仔）生長和存活的影響，在水溫24℃條件下，對不同鹽度（5、8、11、14、32、38、41、44、47，鹽度32為對照組）脅迫下蛤仔幼蟲、稚貝和幼貝（殼長10 mm）的生長和存活情況進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：鹽度脅迫對蛤仔的生長和存活具有顯著影響（P＜0.05），鹽度脅迫72 h時，鹽度38組蛤仔幼蟲、稚貝、幼貝的存活率均最高，分別為97.87％±3.69％、100％、100％，且與其他鹽度組有顯著性差異（P＜0.05），而鹽度5組蛤仔幼蟲、稚貝、幼貝以及鹽度8組的幼貝全部死亡；鹽度38組蛤仔幼蟲及稚貝的生長速度最快，殼長平均日生長分別為（4.83±0.03）μm和（6.81±0.11）μm，僅次于對照組（鹽度32），并顯著高于其他鹽度組（P＜0.05）；蛤仔幼蟲、稚貝和幼貝對鹽度的耐受范圍隨著蛤仔受鹽度脅迫時間的延長逐漸減小；鹽度脅迫21 d時，鹽度38組幼蟲存活率為50.27％±3.76％，顯著低于對照組（P＜0.05），其他各鹽度組幼蟲全部死亡；鹽度脅迫30 d時，鹽度38組稚貝存活率為68.75％±5.25％，與對照組無顯著性差異（P＞0.05），其他鹽度組稚貝全部死亡；鹽度脅迫30 d時，鹽度14組幼貝存活率為94.36％±2.03％，與對照組接近（P＞0.05），而鹽度38組存活率為60.00％±14.53％，較對照組顯著下降（P＜0.05），其他鹽度組幼貝全部死亡。本試驗結(jié)果可為蛤仔的生態(tài)養(yǎng)殖及抗逆品系的選育提供理論依據(jù)。

菲律賓蛤仔；鹽度；生長；存活

鹽度是影響貝類生長存活的重要環(huán)境因子之一。海水鹽度變化超過貝類的耐鹽范圍，會使貝類自身滲透壓調(diào)節(jié)紊亂，導(dǎo)致圍心腔血壓突增，進(jìn)而表現(xiàn)出內(nèi)臟團(tuán)顫動、面盤與鰓纖毛擺動速度下降、心跳減慢、足伸縮緩慢和對外界刺激反應(yīng)遲鈍等現(xiàn)象［1］。鹽度對貝類攝食率有較為顯著的影響，低鹽能降低貝類的濾水率，導(dǎo)致貝類攝食能力下降［2］。高鹽或低鹽對貝類產(chǎn)卵質(zhì)量、孵化率、受精率和變態(tài)率均會造成影響［3］。目前，國內(nèi)外關(guān)于貝類鹽度脅迫的研究已有大量報道。Malagoli等［4］研究發(fā)現(xiàn)，極鹽會阻礙紫貽貝Mytilus edulis免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)。何義朝等［5］研究發(fā)現(xiàn)，不同發(fā)育階段的海灣扇貝Argopecten irradias鹽度適宜范圍不同。沈偉良等［6］研究了不同鹽度對毛蚶Scapharca subcrenata受精、孵化和幼蟲生長的影響，結(jié)果表明，適宜幼蟲生長的鹽度范圍廣于其受精卵孵化期的鹽度范圍。尤仲杰等［7］對墨西哥灣扇貝Argopecten irradians concentricus幼蟲和稚貝的研究發(fā)現(xiàn)，幼蟲與稚貝的鹽度耐受范圍相同。張濤等［8］研究了鹽度對硬殼蛤Mercenaria mercenaria稚貝生長和存活的影響，結(jié)果表明，硬殼蛤稚貝的最適鹽度范圍為24～36。章啟忠等［9］對華貴櫛孔扇貝Chlamys nobilis鹽度適應(yīng)范圍的研究表明，當(dāng)鹽度變化超出最適范圍時，低鹽度變化的影響比高鹽度明顯。關(guān)于鹽度對菲律賓蛤仔Ruditapes philippinarum（以下稱蛤仔）的影響研究也有報道：丁鑒鋒等［10］對不同殼色蛤仔的耐低鹽能力進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，斑馬蛤的鹽度耐受性最強(qiáng)；林筆水等［11］對蛤仔稚貝鹽度適應(yīng)性的研究表明，蛤仔稚貝的最適鹽度為20.5；王軍等［12］對蛤仔浮游幼蟲的鹽度適應(yīng)性研究表明，蛤仔幼蟲生長和存活最適鹽度均為29；吳桂漢等［13］研究發(fā)現(xiàn)，蛤仔在鹽度為25時攝食率最高。

蛤仔為廣溫、廣鹽性灘涂貝類，其幼蟲適宜生長的鹽度范圍為23～35［12］，稚貝為14.5～33.5［11］，幼貝為9.36～34.16［14］。夏季暴雨會引起灘涂鹽度急劇下降，另外，在高溫干旱季節(jié)，池塘海水由于自然蒸發(fā)等原因，鹽度又會持續(xù)升高。鹽度變化超過蛤仔的耐受范圍會導(dǎo)致蛤仔大規(guī)模死亡，引起臭灘、爛灘等現(xiàn)象，對生態(tài)環(huán)境造成不良影響。本試驗中研究了鹽度脅迫對不同發(fā)育階段蛤仔的影響，以期為降低養(yǎng)殖風(fēng)險及抗逆品種的培育提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗于2015年6月在獐子島集團(tuán)原良種場進(jìn)行。獐子島海域海水鹽度為32，水溫為24℃。親貝于2015年5月初采自大連獐子島海區(qū)，先將性腺成熟的親貝采集后帶回室內(nèi)，清洗干凈后放在預(yù)先加入新鮮海水的60 L白色塑料桶中（以下簡稱大白桶）暫養(yǎng)，排出泥沙待產(chǎn)。用海水晶、沙濾海水和淡水配制試驗用不同鹽度的海水，使用WYY-Ⅱ手持鹽度折光儀進(jìn)行鹽度校對。

1.2 方法

3個發(fā)育時期蛤仔用相同的鹽度進(jìn)行脅迫，設(shè)置鹽度分別為5、8、11、14、32（對照組）、38、41、44、47，每個鹽度組設(shè)置3個平行。

1.2.1 蛤仔幼蟲鹽度脅迫試驗 挑選健康、殼型規(guī)整的蛤仔進(jìn)行室內(nèi)促熟，經(jīng)陰干刺激后在大白桶中產(chǎn)卵、排精，受精24 h后進(jìn)行選育。受精卵孵化為D形幼蟲后，用自制的300目篩絹網(wǎng)收集等量D形幼蟲，將其直接轉(zhuǎn)入各鹽度的試驗用水中，在顯微鏡下用目微尺（100×）隨機(jī)測量30個幼蟲的殼長。繼續(xù)培養(yǎng)，每天根據(jù)攝食量的情況適量投餌3次，餌料為叉鞭金藻Dicrateria sp.，每天全量換水一次。為防止投餌或其他原因造成的鹽度變化，不定期對鹽度進(jìn)行調(diào)整，使鹽度保持穩(wěn)定。分析24、48、72 h時各鹽度組幼蟲的存活情況；每3 d記錄幼蟲生長、存活情況。幼蟲試驗共進(jìn)行21 d。1.2.2 蛤仔稚貝鹽度脅迫試驗 待未經(jīng)鹽度脅迫的幼蟲完全變態(tài)后，用篩絹收集等量且規(guī)格一致的稚貝（平均殼長為450μm），直接轉(zhuǎn)入各鹽度的試驗海水中，在顯微鏡下用目微尺（25×）隨機(jī)測量30個稚貝的殼長。繼續(xù)培養(yǎng)，每天根據(jù)攝食量的情況適量投餌3次，餌料為叉鞭金藻和小球藻Chlorella sp.，每天全量換水一次。不定期調(diào)整鹽度，使鹽度保持穩(wěn)定。連續(xù)監(jiān)測72 h稚貝的存活情況，分析24、48、72 h時各鹽度組中稚貝的存活情況；每5 d記錄稚貝的生長、存活情況。稚貝試驗周期為30 d。

1.2.3 蛤仔幼貝鹽度脅迫試驗 試驗用蛤仔幼貝為2014年8月繁育在海區(qū)吊養(yǎng)的一齡幼貝。篩選等量且規(guī)格一致的幼貝（殼長10 mm），直接轉(zhuǎn)入各鹽度的試驗海水中。試驗所用海水是用海水稀釋的餌料與海水晶、淡水配制而成。每天適量投餌3次，餌料為叉鞭金藻，每天全量換水一次。試驗過程中隨時對鹽度進(jìn)行檢測和調(diào)整。隨時挑出死亡蛤仔，避免對其他蛤仔產(chǎn)生影響，蛤仔死亡的評判標(biāo)準(zhǔn)為殼完全張開并對外界刺激沒有反應(yīng)。每5 d記錄幼貝的存活情況，幼貝試驗共進(jìn)行30 d。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用Excel和SPSS 19.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，使用單因素方差分析法對不同鹽度脅迫組測得的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析比較，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同發(fā)育時期蛤仔24、48、72 h的存活情況2.1.1 幼蟲 從表1可見：24 h時，鹽度5組蛤仔幼蟲存活率為78.05％，顯著低于其他各組（P＜0.05）；48 h時，對照組（鹽度32）和鹽度38、41組幼蟲存活率均為100％，鹽度5組幼蟲存活率最低，僅為41.05％，鹽度8組幼蟲存活率為73.01％，顯著低于鹽度11～47組（P＜0.05）；72 h時，蛤仔幼蟲存活率隨脅迫鹽度的降低或升高而降低，鹽度5組幼蟲的存活率為0，鹽度8組的存活率為52.16％，顯著低于11～47組（P＜0.05），鹽度38組幼蟲的存活率為97.87％，與對照組接近（P＞0.05），但顯著高于其他各組（P＜0.05）。2.1.2 稚貝 從表2可見：24 h時，鹽度5組稚貝的存活率為65.94％，而其他鹽度組的存活率均為100％；48 h時，蛤仔稚貝存活率隨脅迫鹽度的降低或升高呈降低趨勢，鹽度14、32、38組的存活率均為100％，其次為鹽度41組，存活率為96.75％，鹽度5組存活率最低（50.20％），顯著低于鹽度8～47組（P＜0.05）；72 h時，鹽度5組中稚貝全部死亡，鹽度8組存活率僅為30.50％，顯著低于鹽度11～47組（P＜0.05），鹽度32和38組的存活率最高，均為100％。

2.1.3 幼貝 從表3可見：24 h時，除鹽度5組（存活率為97.81％）外，其他各組中幼貝均沒有死亡；48 h時，各鹽度組幼貝的存活率為71.54％～100％，鹽度5組存活率最低；72 h時，鹽度5和8組幼貝存活率為0，鹽度11組為45.02％，顯著低于鹽度14～47組（P＜0.05），鹽度32、38、41組的存活率仍為100％。

表1 不同鹽度下蛤仔幼蟲24、48、72 h的存活率Tab.1 Survival rates of larvae M anila clam Ruditapes philippinarum at different salinities in 24，48 and 72 h％

表2 不同鹽度下蛤仔稚貝24、48、72 h的存活率Tab.2 Survival rates of juvenile M anila clam Ruditapes philippinarum at different salinities in 24，48 and 72 h％

2.2 不同發(fā)育時期蛤仔3～30 d時的存活情況

2.2.1 3～21 d幼蟲的存活率 從表4可見：鹽度脅迫6 d時，鹽度5和8組幼蟲全部死亡，鹽度47組存活率最低，為59.65％，除對照組外，存活率最高組為鹽度38和41組，分別為85.71％和85.35％，二者顯著高于鹽度11、14、47組（P＜0.05）；鹽度脅迫9 d時，鹽度47組幼蟲全部死亡，鹽度11和14組幼蟲存活率最低，分別為68.85％和70.36％，顯著低于鹽度32～44組（P＜0.05）；鹽度脅迫15 d時，蛤仔幼蟲出現(xiàn)大量死亡，鹽度8以下脅迫組，鹽度41以上脅迫組幼蟲全部死亡，對照組存活率最高（74.51％），顯著高于其他鹽度組（P＜0.05）；鹽度脅迫21 d時，僅剩鹽度38組和對照組，幼蟲存活率分別為50.27％和65.67％。

表3 不同鹽度下蛤仔幼貝24、48、72 h的存活率Tab.3 Survival rates of youth M anila clam Ruditapes philippinarum at different salinities in 24，48 and 72 h ％

2.2.2 5～30 d稚貝的存活率 從表5可見：鹽度脅迫5 d時，除對照組存活率為100％外，其他鹽度組均有死亡，其中鹽度5、8組稚貝全部死亡；鹽度脅迫10 d時，鹽度11組稚貝全部死亡，鹽度脅迫出現(xiàn)不同程度的死亡，鹽度47組的存活率最低（50.15％），顯著低于鹽度14～44組（P＜0.05）；鹽度脅迫20 d時，鹽度41和47組全部死亡，對照組稚貝的存活率最高（91.35％），其次為鹽度38組（80.39％），鹽度41組存活率最低（53.26％），顯著低于鹽度14～38組（P＜0.05）；鹽度脅迫30 d時，僅剩對照組和鹽度38組，稚貝存活率分別為78.96％和68.75％。

2.2.3 5～30 d幼貝的存活率 從表6可見：鹽度脅迫5 d時，鹽度5、8、11組幼貝全部死亡；鹽度脅迫10 d時，鹽度47組幼貝全部死亡；鹽度脅迫30 d時，除對照組（97.78％）外，僅有鹽度14、38組幼貝存活，存活率分別為94.36％和60.00％。

表4 蛤仔幼蟲在不同鹽度中的存活率Tab.4 Survival rates of larvae M anila clam Ruditapes philippinarum at different salinities％

表5 蛤仔稚貝在不同鹽度中的存活率Tab.5 Survival rates of juvenile M anila clam Ruditapes philippinarum at different salinities％

表6 蛤仔幼貝在不同鹽度中的存活率Tab.6 Survival rates of youth M anila clam Ruditapes philippinarum at different salinities％

2.3 不同鹽度中蛤仔幼蟲和稚貝的生長情況

從表7和表8可見：幼蟲和稚貝在鹽度5組中均未觀察到生長；幼蟲和稚貝日平均生長最快均出現(xiàn)在對照組中，且與各鹽度脅迫組有顯著性差異（P＜0.05）；幼蟲和稚貝的日平均生長量隨鹽度的升高或降低而減小（鹽度44組幼蟲除外）。

2.3.1 幼蟲生長 從表7可見：對照組幼蟲生長速度最快，殼長日平均生長量為（5.86±0.04）μm；鹽度38組生長速度慢于對照組，但顯著快于其他鹽度組（P＜0.05）；4個低鹽脅迫組中，幼蟲的日生長量隨鹽度的降低而降低，鹽度5、8組幼蟲生長速度緩慢，兩者無顯著性差異（P＞0.05），均顯著低于其他各組（P＜0.05）。

2.3.2 稚貝生長 從表8可見：在低鹽脅迫中，稚貝的日均生長量隨脅迫鹽度的降低而降低，而在高鹽脅迫組中，稚貝的日均生長量隨脅迫鹽度的升高而降低；對照組稚貝生長速度最快，殼長日平均生長量為（8.85±0.30）μm；鹽度38組生長速度慢于對照組，但顯著快于其他鹽度組（P＜0.05）；鹽度11組稚貝生長速度緩慢，顯著低于鹽度14～44組（P＜0.05）。

表7 不同鹽度中蛤仔幼蟲的殼長及日均生長量Tab.7 Shell length and daily grow th of larvae Manila clam Ruditapes philippinarum at different salinities

表8 不同鹽度中蛤仔稚貝的殼長及日均生長量Tab.8 Shell length and daily grow th of juvenile M anila clam Ruditapes philippinarum at different salinities

3 討論

3.1 蛤仔鹽度耐受性分析

鹽度是生態(tài)環(huán)境關(guān)鍵因素之一，會影響海洋生物的免疫反應(yīng)［15］、生理反應(yīng)［16-17］、胚胎發(fā)育［18-20］，以及幼蟲與稚貝的生長和存活［21-25］。水產(chǎn)動物能根據(jù)周圍海水的鹽度變化調(diào)節(jié)其自身的滲透壓，以利于攝食和生長［8］。但如果這種變化超出貝類的耐受范圍，則會嚴(yán)重影響其生長和存活，甚至導(dǎo)致其大量死亡。

蛤仔雖然是廣鹽性貝類，但不同海區(qū)產(chǎn)量并不相同，原因是所處海區(qū)的理化環(huán)境因子不同，其中鹽度是重要因素之一［11］。在自然海區(qū)中，由于海水鹽度的驟然變化導(dǎo)致的蛤仔死亡時有發(fā)生［26］。目前，研究水產(chǎn)動物對溫度、鹽度耐受性的方法主要有兩種：（1）將試驗動物從適宜條件突然轉(zhuǎn)入試驗條件，并記錄直到死亡所經(jīng)歷的時間；（2）以一個上升率標(biāo)準(zhǔn)增加溫度或鹽度，直至出現(xiàn)死亡［27］。通常情況下，第一種方法常用于貝類對溫度、鹽度變化的耐受性［28-30］，而國內(nèi)學(xué)者常用第二種方法研究魚類對溫度的耐受性［31-35］，兩種方法均有其實際意義。本研究中，采用第一種方法，即以鹽度突變的方式來對蛤仔進(jìn)行脅迫，所設(shè)置的鹽度脅迫在適宜范圍之外。試驗結(jié)果表明，高鹽或低鹽脅迫對蛤仔的生長和存活均有顯著的影響。在顯微鏡下觀察幼蟲面盤纖毛擺動減慢，聚集在桶底，面盤畸形或無法收縮，幾乎不攝食；稚貝腮纖毛擺動減慢，足部伸縮速度下降，攝食減少或幾乎不攝食。幼蟲在鹽度5組中幾乎不生長，在鹽度8和11組中日生長量僅為（1.54±0.37）μm和（1.60± 0.15）μm；稚貝在鹽度5和鹽度8兩個處理組中幾乎不生長，而鹽度11組日均生長量僅為（0.11±1.66）μm，稚貝在鹽度38組中的生長表現(xiàn)為先慢后快，這可能是由于鹽度突變導(dǎo)致了蛤仔的不適應(yīng)，后期其適應(yīng)鹽度后生長逐漸加快。林筆水等［11］通過鹽度脅迫蛤仔生長的研究表明：在3.5、7.5和14.0鹽度脅迫組中，蛤仔幼蟲和稚貝幾乎沒有生長，此結(jié)論與本研究結(jié)果相符合。本研究中，高鹽脅迫蛤仔幼蟲和稚貝的生長較低鹽明顯，在林筆水等［11］的研究中也得到了類似的結(jié)論。

本試驗結(jié)果表明，鹽度脅迫72 h時，幼蟲在對照組中存活率為100％，稚貝在對照組和鹽度38組中的存活率為100％，而幼貝在對照組、鹽度38和41組中的存活率為100％，說明隨著蛤仔的生長，蛤仔的抗高鹽能力逐漸增強(qiáng)；幼蟲和稚貝均在鹽度38組中的存活時間最長，而幼貝在鹽度38組中的存活時間短于鹽度14組，說明隨著蛤仔的生長發(fā)育，蛤仔對鹽度的耐受性有向低鹽方向發(fā)展的趨勢。本試驗的鹽度變化方式為突變，試驗剛開始的幾天蛤仔在低鹽中幾乎沒有攝食，僅靠自身貯存的能量來維持新陳代謝，而在高鹽中的攝食量較低鹽中要好些，這也說明了雖然在適宜的鹽度中，蛤仔更適合在低鹽中生存，但在不適宜的鹽度中，蛤仔在高鹽中的耐受性要比低鹽中強(qiáng)。王軍等［12］的研究表明，高于或低于適宜鹽度范圍會使蛤仔生長停滯或大量死亡，曹伏君等［36］對文蛤的鹽度耐受性研究中也有相同的結(jié)論。

3.2 鹽度馴化潛能及應(yīng)用前景

目前，關(guān)于鹽度對海洋雙殼類動物影響的機(jī)制尚未完全探明。一些研究報道表明，海洋雙殼類動物滲透壓調(diào)節(jié)中，其對鹽度的調(diào)節(jié)起主要作用［37-43］。章啟忠等［9］對華貴櫛孔扇貝稚貝的研究發(fā)現(xiàn)，鹽度變化一旦超出了自身滲透壓調(diào)節(jié)能力，則會導(dǎo)致其大量死亡。尤仲杰等［7］研究發(fā)現(xiàn)，墨西哥灣扇貝幼蟲和稚貝在不適的鹽度下，心跳減慢，代謝緩慢或停止，易死亡。Li等［44］在對南美白對蝦Litopenaeus vannamei的研究中發(fā)現(xiàn)，新陳代謝的能量是恒定的，用于維持滲透壓調(diào)節(jié)多，則用于維持免疫系統(tǒng)及機(jī)體生長的能量就減少。Malagoli等［4］對紫貽貝的研究發(fā)現(xiàn)，不同應(yīng)激因子（高溫、極鹽等）均可以阻礙其免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)。稅春等［45］對梭魚Liza haematocheila幼魚的研究發(fā)現(xiàn)，不同鹽度中梭魚幼魚的攝食率、血清滲透壓不同。郭文學(xué)［46］研究發(fā)現(xiàn)，高鹽環(huán)境中，生物體內(nèi)的滲透壓開始升高，當(dāng)達(dá)到一定閾值后，即超過了自身調(diào)節(jié)能力，則會出現(xiàn)死亡。貝類對鹽度的耐受力與遺傳因素及個體的生理狀態(tài)有關(guān)。在現(xiàn)有的研究中，大部分受試動物對環(huán)境因子漸變的能力均強(qiáng)于突變［47-50］。郭文學(xué)［46］對中國蛤蜊Mactra chinensis的研究發(fā)現(xiàn)，幼蟲適應(yīng)鹽度漸變的能力較突變強(qiáng)。施剛等［49］對褐點石斑魚Epinephelus fuscoguttatus的研究表明，鹽度漸變后魚苗的鹽度耐受范圍較突變變廣。王沖等［50］對三疣梭子蟹Portunus trituberculatus的研究發(fā)現(xiàn)，幼蟹適應(yīng)鹽度漸變的能力強(qiáng)于適應(yīng)突變；但突變的意義在于能在鹽度突變中存活下來的蛤仔是對環(huán)境突然變化具有高抗逆性的部分，具有進(jìn)一步篩選的必要。Hosoi等［51］報道了甘氨酸、脯氨酸等氨基酸對細(xì)胞內(nèi)滲透壓起主要作用。另外，Palacios等［47］在對蝦后期幼體的鹽度脅迫研究中發(fā)現(xiàn)，通過鹽度脅迫測試，可以提高其對鹽度的耐受范圍。Rupp等［48］對扇貝的研究表明，通過溫度和鹽度脅迫馴化可能突破其品種的耐受極限。

本研究意義在于，能在鹽度突變中存活下來的蛤仔是具有鹽度耐受性群體，可以作為耐鹽蛤仔基礎(chǔ)選育群體，但對其后代進(jìn)行馴化及耐鹽性的遺傳機(jī)理，也需要進(jìn)一步進(jìn)行驗證。同時，各時期蛤仔在不同鹽度中的存活時間可以作為后期蛤仔抗逆選育的標(biāo)準(zhǔn)，并為后期蛤仔抗逆品系篩選打下基礎(chǔ)。經(jīng)過系統(tǒng)的鹽度馴化和定向選育可以得到耐鹽品系，為鹽堿地、河口區(qū)灘涂的綜合利用提供了新的方向。

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Influence of salinity stress on grow th and survival of M anila clam Ruditapes philippinarum at various developmental stages

FAN Chao，WEN Zi-chuan，HUO Zhong-ming，YANG Feng，YAN Xi-wu

（College of Fisheries and Life Science，Engineering Research Center of Shellfish Culture and Breeding in Liaoning Province，Dalian Ocean University，Dalian 116023，China）

The growth and survival of larvae，juvenile，and 1-year old youth（shell length 10 mm）of Manila clam Ruditapes philippinarum were studied ata salinity of5，8，11，14，32（control），38，41，44，and 47 atwater temperature of 20℃.The results showed that there were significant effects of salinity stress on growth and survival of the clam，with themaximal survival rates（97.87％±3.69％，100％，and 100％）in 72 h in the three stages at salinity of 38（P＜0.05）and mortality at salinity of 5.The best daily growth was observed in larvae（4.83μm±0.03 μm）and juveniles（6.81μm±0.11μm）at a salinity of38，poorer than that in the control group and significantly better than that in the other groups（P＜0.05）.Itwas found that the range of salinity tolerancewas decreased as the clam developed，with survival rate of（50.27±3.76）％in 21 day old larvae at a salinity of38，significantly lower than that in the other groups（P＜0.05），even mortality in the other groups.In 30 days salinity stress，however，the juveniles had survival rate of（68.75±5.25）％in a salinity of38，without significantly different from that in the control group（P＞0.05），evenmortality in the other groups.Therewas survival rate of（94.36±2.03）％ata salinity of 14，without significant difference compared to that in the control group（P＞0.05），and survival rate of（60.00±14.53）％at a salinity of 38，significantly lower than that in the control group（P＜0.05），in the youth clam exposed to salinity stress for 30 days.The findings provided a theoretical basis for eco-breeding of resistant clam strains.

Ruditapes philippinarum；salinity；growth；survival

Q954.4

A

10.16535/j.cnki.dlhyxb.2016.05.005

2095-1388（2016）05-0497-08

2016-01-14

國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項（CARS-48）；國家“863”計劃項目（2012AA10AA400）

范超（1989—），男，碩士研究生。E-mail：616621402@qq.com

霍忠明（1983—），男，博士，講師。E-mail：houzm@dlou.edu.cn