崔小健，張嘉懿，沈永明，管　衛(wèi)，司　萍

(天津市兒童醫(yī)院檢驗科　300000)

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·論著·

14 379例患兒呼吸道感染病原體的檢測結果分析

崔小健，張嘉懿，沈永明，管衛(wèi)，司萍△

(天津市兒童醫(yī)院檢驗科300000)

目的分析患兒常見呼吸道感染的病原體免疫球蛋白M(IgM)抗體及其感染特點。方法采用間接免疫熒光法檢測該院2015年3月至2016年2月14 379例患兒血清，分析不同性別、季節(jié)、年齡段、病種的呼吸道9項病原體感染情況。結果3 392例標本(23.59%)病原體IgM抗體檢測陽性，其中肺炎支原體(MP)的陽性率最高，為18.77%；混合感染361例，主要是2種病原體的混合感染。男性患兒呼吸道病原體IgM抗體陽性率(21．46%)顯著低于女性患兒(33．92%)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=274.73，P<0.05)。各年齡組(0～30 d、～6個月、～1歲、～3歲、～9歲、～18歲)的檢出率分別為0.2%、1.8%、15.36%、34.46%、39.73%、30.73%，各組間差異有統(tǒng)計學意義(χ2=1 407.87，P<0.05)。秋、冬季MP檢出率高(24.42%、23.01%)，春季乙型流感病毒(IFu B)檢出率最高(15.13%)，夏、秋季嗜肺軍團菌(LP)檢出率較高(0.78%、0.80%)；該院15個科室比較,耳鼻喉科患兒呼吸道病原體檢出率最高(43.9%)。結論呼吸道病原體的感染率與性別、季節(jié)、年齡段、病種相關，針對性地進行防范，具有臨床意義。

呼吸道感染；病原體；患兒；間接免疫熒光法

呼吸道感染(ARI)是兒科最常見的疾病之一。呼吸道病原體“九聯檢”主要檢測：5種病毒包括呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IFu A)、乙型流感病毒(IFu B)、副流感病毒(PIV)、腺病毒(ADV)；4種非典型病原體包括肺炎支原體(MP)、肺炎衣原體(CP)、嗜肺軍團菌型(LP)、Q熱立克次體(COX)。由于引起呼吸道感染的病原體種類繁多，且因不同國家、不同省市和地區(qū)而有所差異[1]。為了解天津地區(qū)呼吸道病原體感染情況,現檢測14 379例患兒9種呼吸道病原體免疫球蛋白M(IgM)抗體，并對結果進行統(tǒng)計分析，報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料該院2015年3月至2016年2月就診的門診及住院患兒14 379例，男8 725例，女5 654例；年齡0～18歲。所有患兒痰或咽拭培養(yǎng)為陰性，排除細菌性感染。

1.2儀器與試劑主要儀器為日本Olympus公司生產的BX51型熒光顯微鏡。采用9種呼吸道聯合檢測試劑(Pneumoslide IgM)，西班牙VIRCELL公司，檢測包括LP、MP、COX、CP、ADV、RSV、IFu A、IFu B、PIV等9項病原體的IgM 抗體。

1.3方法使用間接免疫熒光法檢測患者血清9種病原體的IgM 抗體，對標本的采集、保存及實驗人員的操作步驟均嚴格參照試劑說明書要求進行。抽取患兒靜脈血2～3 mL，2 h內分離血清，8:00之前收集的標本當天進行檢測，8:00之后收集的標本，2 h內分離血清后存放于2～8 ℃冰箱保存，次日進行檢測。應用免疫熒光顯微鏡觀察結果。9種病原體有1種病原體 IgM抗體陽性即判定為陽性標本；每次實驗都設立陽性和陰性對照，確認實驗結果的準確性和試劑盒的有效性。

1.4統(tǒng)計學處理采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行數據分析，計數資料以例數或百分率表示，組間比較使用χ2檢驗，P<0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結　　果

2.1呼吸道感染病原體IgM抗體檢測結果比較14 379例標本病原體抗體陽性3 392例，陽性率23.59%。MP陽性率最高，占18.77%，其次為IFu B，陽性率6.20%。見表1。

表1　　9種病原體檢測陽性結果比較

2.2呼吸道病原體合并感染檢測結果比較14 379例標本中，混合感染361 例，2種病原體合并感染為MP+IFu B最多(304例)，感染率為2.5%，其次為MP +LP、IFu B+ PIV，分別為0.14%、0.13%。MP和IFu B在合并感染中比較常見。見表2。

2.3不同性別患兒呼吸道感染病原體IgM抗體檢測結果比較14 379例標本中，男性患兒呼吸道感染病原體IgM抗體陽性檢出率為21.46%(1 872/87 25)，女性患兒為33.92%(1 918/5 654)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=274.73，P<0.05)。

2.4不同年齡患兒呼吸道病原體IgM抗體檢測結果比較14 379例標本中刪除47例年齡信息不全。14 332例標本的各年齡組(0～30 d、～6個月、～1歲、～3歲、～9歲、～18歲)的檢出率分別為0.2%、1.8%、15.36%、34.46%、39.73%、30.73%，各組間比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=1407.87，P<0.05)。各年齡組對不同的病原體的易感性不完全一致，但各組中MP的感染率均為最高。見表3。

表2　　14 379例標本病原體合并感染檢測結果比較

表3　　不同年齡組患兒病原體IgM陽性率檢測結果比較[n(%)]

表4　　不同季節(jié)患兒病原體IgM陽性率檢測結果比較[n(%)]

續(xù)表4　　不同季節(jié)患兒病原體IgM陽性率檢測結果比較[n(%)]

2.5不同季節(jié)患兒呼吸道病原體IgM抗體檢測結果比較春季IFu B檢出率最高(15.13%，χ2=680.43，P<0．05)，秋、冬季MP檢出率高(24.42%、23.01%)，夏、秋季LP檢出率最高(0.78%、0.80%)。見表4。

2.6不同病種患兒呼吸道病原體IgM抗體檢測結果比較14 379例標本排除42例病種信息不全。14 337例標本中，與門診、呼吸科、感染科、心臟內科、內分泌科、腎臟科、消化科、風濕免疫科、新生兒科、急救中心、燒傷科、血液科、神經科、普通外科比較，耳鼻喉科患兒呼吸道病原體檢出率最高，差異有統(tǒng)計學意義(45.6%,χ2=594.52，P<0.05)。見表5。

表5　　不同病種患兒病原體IgM陽性感染檢測結果比較(n)

續(xù)表5　　不同病種患兒病原體IgM陽性感染檢測結果比較(n)

3　討　　論

隨著環(huán)境污染和抗菌藥物的濫用，機體免疫力下降，兒童因其免疫機制的不完善更容易感染各類病原微生物，除常見的細菌、病毒感染外，還可感染非典型病原體，包括LP、MP、COX、CP等[2-3]。一種病原體可造成多種臨床表現，同一臨床表現又可由多種病原體引起[4]。本研究采用間接免疫熒光法同時檢測血清中9種呼吸道感染主要病原體的IgM抗體，其檢測的靈敏度和特異度良好，結果容易準確判讀，快速、方便，可較大縮短檢測周期[5-6]。為臨床診療提供有效依據，同時也為該院及該地區(qū)急性呼吸道疾病的預防、控制提供重要參考。

本研究結果表明，病原體感染陽性率以MP最高，達18.77%，與國外報道的5．5%～21．0%相一致[7]。混合感染以MP+IFuB為主，與東莞、武漢地區(qū)研究相似[8-9]。有學者認為MP陽性率較高，可能與廣譜抗菌藥物濫用有關，不合理使用，對不敏感的MP增加感染概率。

本研究結果顯示，14 379例患者中男8 725例，女5 654例，男女比例為1∶0.65，提示女性更易感染呼吸道病原體。與鄧楠等[10]報道的相一致。3～9歲兒童感染例數最多，陽性率為39.73%，與孫彬等[11]報道的北京地區(qū)4～14歲患者病原體檢出率最高相似?？赡芘c這部分患者均處于學齡前或學齡期，人群的密集接觸及相互傳染的概率較多相關。

呼吸道病原體的感染及流行與季節(jié)密切相關，本研究結果顯示，LP、MP、IFu B 在不同的季節(jié)里檢出率有明顯的差異，其中MP在秋季和冬季的感染率較其余2個季節(jié)高，與其流行病學冬季高發(fā)的特點相符。 MP是介于病毒與細菌之間的一種沒有細胞壁的病原體,對呼吸道上皮細胞有特殊的親和力,主要通過呼吸道飛沫傳播,發(fā)病機制是由于其穿過宿主呼吸道黏膜表面的黏液纖毛層,黏附于黏膜上皮細胞,釋放有毒代謝產物,導致纖毛運動減弱,細胞損傷,引起呼吸道相關癥狀[12]。IFu B在春季的感染率最高，主要是該地區(qū)春季天氣干燥,容易出現口干、咽干等現象,從而使呼吸道防御功能降低,導致病毒侵襲并迅速繁殖,引起呼吸道疾病。IFu B主要侵入呼吸道黏膜上皮細胞,引起細胞變性、壞死乃至脫落,造成黏膜充血、水腫和分泌物增加,從而產生鼻塞、流涕、咽喉疼痛、干咳，以及其他上呼吸道感染癥狀,當病毒蔓延至下呼吸道,則可能引起毛細支氣管炎和間質性肺炎[13]。該地區(qū)LP在夏、秋季的感染率較其余2個季節(jié)高，推測天津夏季很熱，秋季未供暖之前天氣較冷，這段時間空調軍團菌的孳生地的高頻率使用造成其陽性率增高，加之兒童的免疫功能低下極易被感染。LP是一種兼性細胞內致病菌,廣泛分布于天然淡水環(huán)境或人工水域中,在自然界長期存活,可感染人巨噬細胞,是引起社區(qū)獲得性肺炎和院內感染性肺炎的重要病原體,國內外常暴發(fā)流行。

該院為兒童?？漆t(yī)院，本組對各個病種分析顯示，與門診、呼吸科、感染科、心臟內科、內分泌科、腎臟科、消化內科、風濕免疫科、新生兒科、急救中心、燒傷科、血液科、神經科、普通外科比較，耳鼻喉科患兒呼吸道病原體總檢出率最高，為45.6%。原因可能為兒童期呼吸道感染疾患多伴有鼻竇炎、中耳炎、支氣管炎、肺炎等發(fā)生[14-15]。本研究結果說明，重點提示相應臨床進行有針對性的呼吸道9項病原體檢測，有助于患兒得到及時、有效的診治，避免病情延誤。

綜上所述，本研究利用一種目前高效、實用的病原體檢測技術，為該院呼吸道感染病原體在不同性別、不同年齡段、不同季節(jié)和不同疾病間的差異進行統(tǒng)計分析，為該地區(qū)呼吸道感染的病原學和流行病學研究提供大量的實驗數據，也為不同季節(jié)進行有效的病原體預防、控制提供理論依據，更為臨床診斷及抗感染治療提供重要的參考依據。

[1]王梅．小兒急性呼吸道感染的病原學研究[J]．中國兒童保健雜志，2003，11(2)：117-118．

[2]田愛麗，周力音．兒童呼吸道病毒感染的流行病研究[J]．醫(yī)學檢驗與臨床，2011，22(6)：66-67．

[3]馬紅玲，王和平，鄭躍杰，等．門診和住院患兒呼吸道病毒感染的比較研究[J]．國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33(12)：1509-1510．

[4]周一平，陸學東，陳小可，等．急性下呼吸道感染患者支氣管肺泡灌洗液非典型病原體與病毒檢測[J]．中華醫(yī)院感染學雜志，2007，17(8)：901-904．

[5]耿素珍．間接免疫熒光法對多種呼吸道病毒快速檢測方法[J]．包頭醫(yī)學院學報，2008，24(5)：477-478．

[6]陸學東，陸長東，周一平，等．呼吸道病毒感染多重、快速檢測技術[J]．中華微生物學和免疫學雜志，2006，26(8)：760-761．

[7]周新華，宋新民．呼吸道感染患兒病原學及血常規(guī)檢測的價值意義[J]．中國醫(yī)學工程，2012，20(1)：120-121．

[8]莫偉平，張泳儀．13 240例呼吸道感染患者9種呼吸道感染病原體IgM 抗體檢測結果分析[J]．國際檢驗醫(yī)學雜志，2015，36(17)：2577-2579．

[9]李長振，饒菁菁，黃永國，等．武漢地區(qū)12 125例呼吸道感染患兒非細菌病原體IgM抗體檢測結果分析[J]．臨床兒科雜志，2012，30(8)：749-752．

[10]鄧楠，李婭．1 821例呼吸道病原體感染種類及特點[J]．中國民族民間醫(yī)藥，2015，10(7)：127-129．

[11]孫彬，吳純，韓冰，等．9種呼吸道感染病原體的IgM抗體檢測結果分析[J]．標記免疫分析與臨床，2015，22(7)：604-607．

[12]孔麗梅，周立萍，李超，等．章丘地區(qū)下呼吸道感染兒童病原學檢測及CRP、hs-CRP、白細胞聯合測定的臨床意義[J]．當代醫(yī)學，2011，17(4)：30-32．

[13]吳茜，溫柏平，楊躍煌，等．住院兒童下呼吸道非典型病原體感染5年流行病學分析[J]．中國兒童保健雜志，2011，19(2)：131-133．

[14]Mizuta K,Abiko C,Aoki Y,et al.Analysis of monthly isolation of respiratory viruses from children by cell culture using a microplate method:a two-year study from 2004 to 2005 in yamagata,Japan[J].Jpn J Infect Dis,2008,61(3):196-201.

[15]曾攻，王曉紅，俞惠，等．上海地區(qū)兒童急性呼吸道病毒感染的流行特征[J]．中華傳染病雜志，2008，26(9)：527-532．

Analysis of IgM of pathogens of respiratory tract infection in 14 379 cases

CUIXiaojian，ZHANGJiayi，SHENYongming，GUANWei，SIPing△

(DepartmentofClinicalLaboratory,TianjinChildren′sHospital,Tianjin300000,China)

ObjectiveTo detect the IgM antibodies and epidemiology of pathogens of respiratory tract infection in children,and to provide the basis for clinical diagnosis and treatment.MethodsThe serum of 14 379 outpatient and inpatient cases in Tianjin Children′s Hospital from March 2015 to February 2016 were detected by indirect immunofluorescence,and the respiratory tract infections of different gender,season,age and pathogens were analyzed.ResultsTotally 3 392 specimens (23.59%) were positive for IgM antibody detection and the positive rate of MP with 18.77% was highest; 361 cases were mixed infection,mainly including two kinds of infection pathogens.The positive rate of respiratory pathogens in male with 21.46% was significantly lower than in female patients with 33.92% (χ2= 274.73,P<0.05).The positive rate in different ages groups (0-30 d，-6 months，-1 years，-3 years，-9 years，-18 years) were 0.2%,1.8%,15.36%,34.46%,39.73% and 30.73% respectively,the highest infection rate was found between 3 to 9 years old children,and the differences among groups were statistically significant (χ2=1 407.87，P<0.05).The highest rate of MP were found in autumn (24.42%) and winter (23.01%),the highest rate of Influenza B virus (IFu B) was found in spring (15.13%),the positive rate of Legionella pneumophila (LP) was high in summer (0.78%) and autumn (0.80%).Comparison with the 15 departments,the children of otolaryngology with the positive rate of 43.9% was the highest.ConclusionThe infection ratios of respiratory pathogens were related to gender,season,age and pathogen.These findings provided an important reference for clinical diagnosis and treatment in different seasons and population.

respiratory tract infection;pathogens;children;indirect immunofluorescence assay

崔小健,女，檢驗技師，主要從事臨床免疫學研究。

，E-mail：895917667@qq.com。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.002

A

1673-4130(2016)19-2663-04

2016-02-11

2016-04-11)