劉　君，蔣魯亞，王君雅，劉曉穎，范寶莉，王振英

（天津師范大學(xué)a.生命科學(xué)學(xué)院，b.天津市動(dòng)植物抗性重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 300387）

小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生體系的優(yōu)化

劉君，蔣魯亞，王君雅，劉曉穎，范寶莉，王振英

（天津師范大學(xué)a.生命科學(xué)學(xué)院，b.天津市動(dòng)植物抗性重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 300387）

為了建立和優(yōu)化小麥成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)和植株再生體系，以京411、Brock、春麥S10鑒-6和春麥津強(qiáng)5號(hào)4種小麥的成熟胚為外植體，進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)、分化及再生體系優(yōu)化的研究.結(jié)果表明：（1）京411在各種誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的平均出愈率高于其他3個(gè)品種；（2）京411在MS1（MS+2.0mg/L2，4-D+200mg/LCH+100mg/LMI+250mg/LGlu）培養(yǎng)基中的出愈率最高，因此將該培養(yǎng)基定為京411的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基；（3）同不切相比，采用縱全切的方式處理京411的成熟胚能夠獲得較高的出愈率和質(zhì)量較好的愈傷組織；（4）在分化培養(yǎng)基F7（MS+10mg/LZT+0.1mg/LIAA）中，京411成熟胚的愈傷組織分化率、出苗率和生根率最高，幼苗長(zhǎng)勢(shì)最好，因此該培養(yǎng)基可以用作京411成熟胚愈傷組織的分化培養(yǎng)基.

小麥；成熟胚；愈傷組織誘導(dǎo)；培養(yǎng)基；分化；再生

小麥?zhǔn)俏覈?guó)的主要糧食作物之一.在生產(chǎn)上，逆境脅迫和病蟲害是制約小麥產(chǎn)量和質(zhì)量的主要因素，培育抗逆、抗病、優(yōu)質(zhì)的小麥品種是解決這一問(wèn)題的有效途徑之一［1］.目前小麥育種的主要技術(shù)有基因工程育種、細(xì)胞工程育種、輪回選擇育種等，利用基因工程育種能夠打破種間隔離，縮短育種年限，對(duì)小麥進(jìn)行定向改良具有廣闊的應(yīng)用前景［2］.在方法上，轉(zhuǎn)基因技術(shù)可分為依賴和不依賴植物組織培養(yǎng)2類，依賴植物組織培養(yǎng)常見(jiàn)的轉(zhuǎn)基因方法有基因槍法和農(nóng)桿菌介導(dǎo)法［3］.與煙草、大豆和水稻等作物相比，小麥組織培養(yǎng)的再生率低，遺傳轉(zhuǎn)化難度大，這在很大程度上阻礙了轉(zhuǎn)基因技術(shù)在小麥育種中的應(yīng)用.優(yōu)化小麥愈傷組織再生體系，提高其植株再生率是小麥轉(zhuǎn)基因研究的重要基礎(chǔ)工作.

不同基因型小麥愈傷組織的再生能力差異很大，外植體的選擇對(duì)植株再生能力也具有很大影響［4］.目前小麥的幼胚［5］、成熟胚［6］、花藥［7］、幼穗［8］等多種材料均已被選作外植體進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)和植株再生研究.由于來(lái)源于幼胚的愈傷組織再生能力較強(qiáng)，因此多數(shù)研究都以幼胚為外植體進(jìn)行誘導(dǎo)［9-10］.但小麥幼胚的獲得受季節(jié)限制，而且幼胚的消毒程度不易控制，消毒力度小在后續(xù)的誘導(dǎo)培養(yǎng)中容易染菌，消毒力度大又會(huì)抑制愈傷組織生長(zhǎng)，降低誘導(dǎo)率［11］.與幼胚相比，成熟胚作為外植體具有易于消毒、取材方便、不受季節(jié)限制等優(yōu)點(diǎn)［12］，但再分化率較幼胚低［13］.

本研究以成熟胚為外植體，在種子消毒、成熟胚處理、激素濃度、誘導(dǎo)、分化、生根培養(yǎng)基的組成等方面進(jìn)行優(yōu)化，以期獲得高頻再生率的成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生體系，為小麥的遺傳轉(zhuǎn)化提供重要的基礎(chǔ)性材料.與已有的京411再生體系的報(bào)道［14-15］相比，本研究的植株再生率顯著提高.本研究建立的京411成熟胚組織培養(yǎng)及再生體系可以為后續(xù)的轉(zhuǎn)基因研究提供良好的受體材料.

1　材料與方法

1.1植物材料

栽培小麥（Triticum aestivum L.）京411為農(nóng)藝性狀優(yōu)良的華北地區(qū)當(dāng)家品種，易感白粉病；栽培小麥Brock作為抗銹病資源由本課題組從英國(guó)引進(jìn)；春麥S10鑒-6為強(qiáng)抗白粉病品種，春麥津強(qiáng)5號(hào)為易感白粉病品種，均由天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供.上述小麥品種現(xiàn)均種植于天津師范大學(xué)生物科技園內(nèi).

1.2培養(yǎng)基

誘導(dǎo)培養(yǎng)基：分別以MS和NB為基本培養(yǎng)基并添加蔗糖、瓊脂、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素.分化培養(yǎng)基：以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加蔗糖和瓊脂，并根據(jù)添加激素與否及激素不同配比構(gòu)成8種分化培養(yǎng)基.生根培養(yǎng)基：以1/2的MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加蔗糖和瓊脂.以上所有培養(yǎng)基均添加蔗糖30 g/L，瓊脂粉8.5 g/L，pH 5.8，在121℃下經(jīng)1.1 kg/cm2高壓濕熱滅菌20 min.

各種培養(yǎng)基的具體成分如表1所示.

1.3方法

1.3.1種子處理

選取色澤、大小均勻的小麥種子，用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液處理5 min，無(wú)菌水沖洗2～3次.用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%的次氯酸鈉溶液滅菌30 min，無(wú)菌水沖洗3次，4℃冷藏2 h后取出，再用無(wú)菌水沖洗1次.

表1　培養(yǎng)基的編號(hào)及成分Tab.1　Numbers and ingredients of mediums

1.3.2成熟胚的誘導(dǎo)

選取有胚乳支撐的成熟胚，將其縱全切（沿胚軸完全切開(kāi)至種臍），置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，每皿接種20個(gè).25℃下暗培養(yǎng)，在培養(yǎng)皿上標(biāo)明品種、培養(yǎng)基、日期和接種外植體數(shù)，培養(yǎng)10 d后統(tǒng)計(jì)出愈率.挑選胚性愈傷組織繼代，每周繼代1次，繼代4次后轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基進(jìn)行光照培養(yǎng)，光強(qiáng)2000Lux，每天光照16h，培養(yǎng)溫度為25℃，每15 d繼代1次，30 d后統(tǒng)計(jì)愈傷組織分化率及出苗率.待分化苗長(zhǎng)至3～4 cm時(shí)接入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，30 d后統(tǒng)計(jì)植株生根率.

1.3.3組培苗的管理

待組培苗的根生長(zhǎng)1個(gè)月后（根長(zhǎng)約4～5 cm）將其煉苗培養(yǎng)，煉苗營(yíng)養(yǎng)土為經(jīng)高壓蒸汽滅菌后的泥炭土、蛭石和珍珠巖，其比例為6∶3∶1.煉苗培養(yǎng)2周后將苗移栽至田間，定期管理，直至植株成熟收獲.

1.3.4數(shù)據(jù)處理與分析

應(yīng)用SPSS Statistics 17.0軟件完成所有統(tǒng)計(jì)分析.成熟胚的脫分化實(shí)驗(yàn)中，每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，數(shù)據(jù)分析采用t檢驗(yàn).愈傷組織分化培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)，采用單因素S-N-K檢驗(yàn)法分析數(shù)據(jù).

2　結(jié)果與分析

2.1基因型和誘導(dǎo)培養(yǎng)基對(duì)小麥成熟胚出愈率的影響

將4個(gè)品種的小麥接種在6種不同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，出愈率結(jié)果如表2所示.2個(gè)冬小麥品種，即京411和Brock在接種第3天時(shí)，就開(kāi)始有愈傷組織形成，但2個(gè)春麥品種，即春麥S10鑒-6和春麥津強(qiáng)5號(hào)接種6 d后才誘導(dǎo)出愈傷組織.由于冬麥和春麥材料出愈的時(shí)間不同，因此連續(xù)觀察了誘導(dǎo)15 d的出愈情況.結(jié)果發(fā)現(xiàn)，冬麥在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上誘導(dǎo)7 d時(shí)，愈傷組織長(zhǎng)勢(shì)良好，可以滿足繼代培養(yǎng)要求；而春麥需要10 d的誘導(dǎo)才能切下愈傷組織進(jìn)行繼代培養(yǎng)，因此在誘導(dǎo)培養(yǎng)第10天統(tǒng)計(jì)各培養(yǎng)基的愈傷組織出愈率并評(píng)定愈傷組織質(zhì)量.

表2　4個(gè)品種小麥的成熟胚在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上的出愈率Tab.2　Callus induction rate of mature embryos of four wheat genotypes in induction mediums %

統(tǒng)計(jì)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與其他3個(gè)品種相比，小麥京411成熟胚在6種誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的平均出愈率最高，且在MS1培養(yǎng)基上的出愈率高達(dá)95.50%；Brock成熟胚在各培養(yǎng)基中的平均出愈率居中，也是在MS1中的出愈率最高，達(dá)到了70.07%；春麥S10鑒-6成熟胚在各誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的平均出愈率僅次于Brock，其在NB2中的出愈率最高，達(dá)到了61.37%；春麥津強(qiáng)5號(hào)成熟胚在各誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的平均出愈率最低，僅為27.14%，其在NB2培養(yǎng)基中的出愈率最高，為34.40%.這說(shuō)明MS1培養(yǎng)基適用于冬麥品種京411和Brock，NB2培養(yǎng)基適用于春麥品種春麥S10鑒-6和春麥津強(qiáng)5號(hào)，冬麥品種比春夏品種更適合于進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo).結(jié)果還表明，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的6種誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，MS1培養(yǎng)基誘導(dǎo)愈傷的平均出愈率最高，其次是MS0和NB2培養(yǎng)基.4個(gè)小麥品種在MS1培養(yǎng)基上的出愈情況如圖1所示.

圖1　4個(gè)不同品種的小麥成熟胚在MS1培養(yǎng)基上的出愈情況Fig.1　Callus induction information of mature embryos of four different wheat genotypes in MS1

綜上所述，成熟胚基因型和培養(yǎng)基種類是出愈率的重要影響因素.由于4個(gè)品種中京411的平均出愈率最高且在MS1培養(yǎng)基上愈傷組織的出愈率達(dá)到了95.50%，因此選定MS1培養(yǎng)基作為京411的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，并對(duì)京411的愈傷組織進(jìn)行再生培養(yǎng)研究.

2.2不同處理方式對(duì)成熟胚形成愈傷組織的影響

以京411成熟胚為材料，比較縱全切（沿胚軸完全切開(kāi)至種臍）和不切2種處理方式對(duì)其脫分化及形成愈傷組織狀態(tài)的影響，2種方式各接種了約300顆種子于MS1培養(yǎng)基中，結(jié)果如圖2所示.

圖2　小麥京411成熟胚不切與縱全切的脫分化率Fig.2　Callus induction rate of mature embryos of jing411 with no cut or half longitudinal cut method

由圖2（a）可以看出，未切的成熟胚形成胚芽較多，愈傷組織相對(duì)較少，并且長(zhǎng)芽，胚因?yàn)殚L(zhǎng)芽而呈空苞狀，愈傷組織逐漸變小，出愈率僅為64.12%.縱全切胚的出愈效果較好，愈傷組織塊大、干燥、呈淡黃色，出愈率達(dá)到95.50%，如圖2（b）所示.這些結(jié)果表明，破壞胚的完整性能夠抑制其萌發(fā)，從而將更多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)用于愈傷組織的形成，提高了出愈率和愈傷組織的質(zhì)量.這2種處理方式脫分化率差異顯著，縱全切出愈效果較好，因此本實(shí)驗(yàn)采用縱全切方法處理京411的成熟胚.

2.3不同濃度2，4-D對(duì)小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)的影響

為篩選出最適宜京411成熟胚誘導(dǎo)愈傷組織的激素濃度，研究不同濃度的2，4-D對(duì)愈傷組織出愈率及質(zhì)量的影響.誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基（MS1）的2，4-D的質(zhì)量濃度分別設(shè)置為0.5、1.0、2.0、4.0 mg/L.每個(gè)濃度的培養(yǎng)基中接種100個(gè)外植體，誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d，重復(fù)3次.結(jié)果如表3和圖3所示.

表3　不同濃度2，4-D對(duì)小麥京411成熟胚愈傷組織出愈率的影響Tab.3　Effect of different concentrations of 2，4-D on callus induction rate of mature embryos of Jing 411　%

圖3　不同濃度2，4-D對(duì)小麥京411成熟胚誘導(dǎo)出的愈傷組織質(zhì)量的影響Fig.3　Effects of different concentrations of 2，4-D on callus quality of mature embryos of Jing 411

由表3可以看出，誘導(dǎo)培養(yǎng)基的2，4-D質(zhì)量濃度為2.0 mg/L時(shí)，愈傷組織出愈率最高達(dá)到95.50%，同其他濃度處理間的差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p≤0.01）.在該質(zhì)量濃度下，愈傷組織質(zhì)量較好，呈顆粒狀，如圖3（a）所示.2，4-D質(zhì)量濃度為4.0 mg/L時(shí)出愈率僅為78.67%，誘導(dǎo)出的愈傷組織大多為水浸狀，乳白色，呈松散狀態(tài)，甚至停止生長(zhǎng)，如圖3（b）所示.因此認(rèn)為，小麥成熟胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基2，4-D的質(zhì)量濃度以2.0 mg/L為宜，后續(xù)的誘導(dǎo)過(guò)程中誘導(dǎo)培養(yǎng)基中2，4-D的質(zhì)量濃度均采用2.0 mg/L.

2.4不同比例的激素KT、ZT和IAA對(duì)小麥成熟胚愈傷組織分化、出苗及生根的影響

將長(zhǎng)勢(shì)良好的愈傷組織繼代培養(yǎng)4次后轉(zhuǎn)移到不同的分化培養(yǎng)基上進(jìn)行再分化，愈傷組織的分化和出苗情況如表4和圖4所示.

表4　不同激素配比對(duì)小麥京411愈傷分化率、出苗率及生根率的影響Tab.4　Effects of hormone ratios on differentiation rate，emergence rate and root rate of mature embryo　%

圖4　京411的愈傷組織在不同培養(yǎng)基中的分化出苗情況Fig.4　Differentiation and plantlet of callus of Jing 411 in different mediums

由表4可以看出，F(xiàn)7（10 mg/L的ZT+0.1 mg/L的I AA）培養(yǎng)基中，京411愈傷組織的分化率最大，達(dá)到100%，出苗率和生根率也最高，分別為49.33%和92.00%.其次是F6（10 mg/L的KT+0.1mg/L的IAA）培養(yǎng)基，出苗率（23.33%）雖然只有F7培養(yǎng)基中的1/2，但也高于其他培養(yǎng)基中的愈傷組織出苗率，而且該培養(yǎng)基中愈傷組織的生根率也較高，達(dá)到了88.67%.不添加任何激素的F8培養(yǎng)基中，愈傷組織的分化率最低，僅為76.76%，出苗率和生根率也屬于較低水平.圖4也顯示京411愈傷組織在F7培養(yǎng)基中的分化和出苗情況最好，幼苗長(zhǎng)勢(shì)明顯好于在其他培養(yǎng)基中的情況.因此認(rèn)為，F(xiàn)7培養(yǎng)基最適合京411愈傷組織的再生，可以作為分化培養(yǎng)基.

2.5組培苗的煉苗、移栽及田間管理

愈傷組織繼代4次后轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基中進(jìn)行再分化，大部分愈傷組織在1周后開(kāi)始分化，長(zhǎng)出綠點(diǎn)，15 d后開(kāi)始出現(xiàn)植株幼苗，如圖5（a）所示，期間持續(xù)統(tǒng)計(jì)各培養(yǎng)基中愈傷組織的分化率及出苗率.25 d后，幼苗長(zhǎng)至3～4 cm高，如圖5（b）所示.此時(shí)接入1/2 MS生根培養(yǎng)基中，如圖5（c）所示.生根培養(yǎng)30 d后移栽煉苗，如圖5（d）和5（e）所示.田間煉苗2周后植株葉片開(kāi)始變壯，觀察根的生長(zhǎng)情況，如圖5（f）所示，發(fā)現(xiàn)根明顯比煉苗前粗壯，且長(zhǎng)度和數(shù)目都增加.將煉苗后的植株移栽至田間，如圖5（g）所示.為保證組培苗安全過(guò)冬，用一薄層蘆葦草覆蓋田間麥苗，翌年3月初組培苗正常返青，4月可發(fā)現(xiàn)植株分蘗，植株數(shù)量明顯增多，莖干粗壯，如圖5（h）所示.5月初植株開(kāi)始抽穗，如圖5（i）所示，待麥穗成熟后收割，如圖5（j）所示.平均每顆穗約收51粒種子，如圖5（k）所示.

圖5　小麥京411愈傷組織分化再生成苗、再生苗的生根培養(yǎng)、煉苗培養(yǎng)、移栽至成熟過(guò)程Fig.5　Callus differentiation into plantlet，plantlet rooting，acclimatization，transplant and mature of Jing 411

3　討論和結(jié)論

成熟胚作為外植體誘導(dǎo)愈傷組織過(guò)程中存在的主要問(wèn)題是再生成苗率較低.從目前的研究結(jié)果看，成熟胚誘導(dǎo)的愈傷組織再生植株效率總體在20%左右［19-22］，僅張東武在小麥西農(nóng)928中獲得了77.6%的高頻再生植株［19］，遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到遺傳轉(zhuǎn)化的需求.

本課題組對(duì)京411、Brock、春麥S10鑒-6和春麥津強(qiáng)5號(hào)共4個(gè)不同遺傳背景的小麥品種的再生體系進(jìn)行了研究.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了6種誘導(dǎo)培養(yǎng)基，用這6種培養(yǎng)基分別誘導(dǎo)培養(yǎng)4個(gè)小麥品種，發(fā)現(xiàn)基因型和誘導(dǎo)培養(yǎng)基的成分是影響小麥成熟胚出愈率的重要因素.本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，京411在6種培養(yǎng)基中的平均出愈率高于其他3個(gè)小麥品種的數(shù)值.京411是華北地區(qū)廣泛種植的小麥優(yōu)良品種，但對(duì)白粉菌敏感，建立京411成熟胚再生體系，對(duì)該品種進(jìn)行基因轉(zhuǎn)化、抗病基因聚集以及品種改良具有重要意義.葉興國(guó)等［14］以京411花藥為材料進(jìn)行再生研究，發(fā)現(xiàn)與其他材料相比，京411的花藥誘導(dǎo)愈傷組織較難，或很難再生植株；后猛［15］利用京411成熟胚誘導(dǎo)愈傷組織，其出苗率僅為7.25%.而本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建的誘導(dǎo)培養(yǎng)體系中，以京411成熟胚為外植體，用MS1培養(yǎng)基誘導(dǎo)愈傷組織、用添加10 mg/L的ZT+0.1 mg/L的IAA的MS培養(yǎng)基分化再生，最終能夠使京411成熟胚的再生出苗率高達(dá)49.33%.

張東武等［19］用縱半切、縱全切、橫切、刮碎的方式對(duì)小偃216成熟胚進(jìn)行脫分化培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)用縱半切全胚接種，幾乎完全抑制了胚萌發(fā)，形成的愈傷組織狀態(tài)最佳，優(yōu)于縱全切胚.本研究采用縱全切和不切2種方式處理成熟胚，并進(jìn)行脫分化培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)縱全切的脫分化率（95.50%），即出愈率顯著高于不切的脫分化率（64.12%），且愈傷組織質(zhì)量也有明顯差異，前者誘導(dǎo)的愈傷組織塊較大，顆粒明顯，胚芽生成較少，而后者愈傷組織塊較小，顆粒不明顯，胚芽生成較多.這表明縱全切處理具胚乳支撐的成熟胚能夠有效抑制胚芽分化，更多的營(yíng)養(yǎng)供給愈傷組織，有利于愈傷組織的形成，從而提高脫分化率.

李丕軍等［23］在用銀x新楊的葉外植體材料進(jìn)行研究時(shí)，比較了BA、ZT、KT、TDZ等激素對(duì)葉外植體再生的影響，發(fā)現(xiàn)作用效果為TDZ＞ZT＞BA＞KT.本研究采用7種含有不同種類和濃度激素的分化培養(yǎng)基對(duì)小麥京411成熟胚的愈傷組織進(jìn)行再生培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)在添加了10mg/L的ZT和0.1mg/L的IAA的MS培養(yǎng)基中，京411成熟胚的分化率、出苗率和生根率都高于其他培養(yǎng)基，證明ZT具有較好的誘導(dǎo)愈傷組織分化成苗的作用.

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（責(zé)任編校紀(jì)翠榮）

Optimization of regeneration culture system from wheat mature embryos

LIU Jun，JIANG Luya，WANG Junya，LIU Xiaoying，F(xiàn)AN Baoli，WANG Zhenying
（a.College of Life Sciences，b.Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance，Tianjin Normal University，Tianjin 300387，China）

To establish and optimize an induction and regeneration culture system for wheat mature embryos，the mature embryos of cultivar wheat Jing 411，Brock，spring wheat S10jian-6 and Jinqiang 5 were adopted as explants to study the optimization of induction，differentiation and regeneration system of callus.The results showed that：（1）Jing 411 had higher average callus induction rate than the other three varieties in all kinds of induction mediums；（2）The induction rate of Jing 411 in MS1 medium（MS+2.0 mg/L 2，4-D+200 mg/L CH+100 mg/L MI+250 mg/L Glu）was higher than that in the other mediums，so MS1 was taken as the best induction medium；（3）Compared with the mature embryos of Jing 411 treated with no cut method，the embryos treated with half longitudinal cut method can obtain higher induction rate and callus with better quality；（4）In F7 medium（MS+10 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA），the differentiation rate and the emergence rate of callus of Jing 411 were higher than those in the other mediums，and the seedlings grew better.So，F(xiàn)7 can be used as differentiation medium for the callus of mature embryos of Jing 411.

wheat；mature embryo；callus induction；medium；differentiation；regeneration

Q945

A

1671-1114（2016）02-0059-06

2015-11-23

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（31071671）；天津市科委青年基金資助項(xiàng)目（14JCQNJC14900）；天津市科技支撐重點(diǎn)資助項(xiàng)目（11ZCKFNC00700）.

劉君（1990—），女，碩士研究生．

王振英（1966—），女，教授，主要從事植物細(xì)胞遺傳學(xué)方面的研究.