趙書潤(rùn)　孟琳

1山東省汶上縣人民醫(yī)院泌尿外科，山東　濟(jì)寧　272501

2濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科，山東　濟(jì)寧　272029

前列腺癌患者血清睪酮水平、前列腺雄激素受體表達(dá)與精索靜脈曲張相關(guān)研究

趙書潤(rùn)1#孟琳21

1山東省汶上縣人民醫(yī)院泌尿外科，山東濟(jì)寧272501

2濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科，山東濟(jì)寧272029

目的研究血清睪酮水平、前列腺雄激素受體（AR）表達(dá)與精索靜脈曲張的相關(guān)性，為臨床前列腺疾病診治提供一定理論依據(jù)。方法選取未經(jīng)藥物治療的64例前列腺癌患者，其中實(shí)驗(yàn)組為32例前列腺癌合并精索靜脈曲張患者，對(duì)照組為32例前列腺癌不伴精索靜脈曲張患者，記錄兩組患者一般情況，并行血清睪酮水平、前列腺雄激素受體檢測(cè)及病理組織學(xué)檢查。結(jié)果對(duì)照組血清睪酮水平為（5.89±1.32）ng/ml，實(shí)驗(yàn)組血清睪酮值為（6.07±1.16）ng/ml，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)組前列腺雄激素受體的陽(yáng)性表達(dá)率為62.5%，低于對(duì)照組84.4%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。AR的表達(dá)均與伴精索靜脈曲張前列腺癌分期呈負(fù)相關(guān)（r=-0.318，P＜0.05）。結(jié)論前列腺雄激素受體表達(dá)在前列腺癌精索靜脈曲張的發(fā)病及病情進(jìn)展中發(fā)揮了重要的作用。

睪酮；前列腺雄激素受體；前列腺癌；精索靜脈曲張

Oncol Prog，2016，14（7）

前列腺疾病已成為目前臨床上困擾中老年男性的常見(jiàn)疾病之一，前列腺癌的發(fā)病率也呈上升趨勢(shì)。流行病學(xué)調(diào)查顯示，前列腺癌發(fā)病率及病死率呈現(xiàn)明顯的地域差異性，西部地區(qū)要高于東部地區(qū)，亞洲人的發(fā)病率低于歐洲人［1］。睪酮是雄激素的主要組成部分，睪酮以被動(dòng)擴(kuò)散的方式通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中，血清睪酮水平的測(cè)定通常作為前列腺疾病的參考指標(biāo)［2］。血清睪酮進(jìn)入前列腺細(xì)胞后大部分被還原成5α-雙氫睪酮（5αdihydrotestosterone，DHT），而DHT通過(guò)結(jié)合一種稱為前列腺雄激素受體（AR）的蛋白發(fā)揮作用。有研究指出，合并精索靜脈曲張的前列腺癌患者中，雄激素受體發(fā)揮了重要作用［3］。而對(duì)于前列腺癌的診斷、分期及預(yù)后，目前臨床多依賴前列腺特異性抗原（prostate-specific antigen，PSA）的檢測(cè)。對(duì)于伴發(fā)精索靜脈曲張的前列腺癌患者的研究鮮有報(bào)道，本文探討分析血清睪酮水平、前列腺雄激素受體表達(dá)與伴精索靜脈曲張的前列腺癌診斷及分期的相關(guān)性并得出結(jié)論，具體報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2013年5月至2015年5月山東省汶上縣人民醫(yī)院泌尿外科收治的前列腺癌患者64例作為研究對(duì)象，其中實(shí)驗(yàn)組為32例前列腺癌合并精索靜脈曲張患者，對(duì)照組為32例前列腺癌不伴精索靜脈曲張患者，實(shí)驗(yàn)組患者平均年齡為（68±12.3）歲；對(duì)照組患者平均年齡為（63±13.2）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①依據(jù)2011版《中國(guó)泌尿外科疾病診斷治療指南》確診為前列腺癌；②術(shù)前均行血清睪酮、血清PSA檢測(cè)，及行前列腺核磁共振檢查、前列腺穿刺活檢術(shù)、骨掃描等檢查確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有其他嚴(yán)重心腦肺疾??；②簽署知情同意書者。前列腺癌臨床分期［4］根據(jù)患者影像學(xué)相關(guān)資料及直腸指檢，依據(jù)美國(guó)Jewett-whitmore-Prout體系進(jìn)行，A期7例，B期8例，C期40例，D期9例。兩組一般資料上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。研究均取得患者及其家屬同意，簽署知情同意書并取得醫(yī)院倫理委員會(huì)允許。

1.2方法

1.2.1血清睪酮檢測(cè)方法采用血清睪酮測(cè)定試劑盒，利用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行。所有患者均在早晨6點(diǎn)左右空腹抽取靜脈血5 ml，用Access自動(dòng)免疫分析儀自動(dòng)分析得出，本研究中血清睪酮值參考水平為0.8～7.5 ng/ml。

1.2.2前列腺雄激素受體的檢測(cè)B超指導(dǎo)下取疑似前列腺癌變組織活檢，進(jìn)行石蠟切片，于60℃下烤片4 h，脫蠟。3%過(guò)氧化氫浸泡10 min，水洗。0.4%胃蛋白酶30℃消化10 min，水洗。后置于0.01 mol/L檸檬酸緩沖液中并加熱到90℃，而后自然冷卻。0.05 M Tris緩沖液2 min，3次。依次加入正常羊血清20 min及兔抗AR單克隆抗體，置于4℃冰箱中過(guò)夜。0.05 M Tris緩沖液2 min，3次。于室溫條件下加入非生物素標(biāo)記的羊抗兔聚合物，靜置30 min。0.05 M Tris緩沖液2 min，3次。滴加Strept-peroxidsae室溫40 min。0.05 M Tris緩沖液2 min，3次。DAB顯色，鏡下控制。用蘇木素對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行再次染色，依次經(jīng)過(guò)脫水、透明及封片處理。使用Leica公司Q550CW圖像分析儀進(jìn)行分析，每張切片隨機(jī)選5個(gè)100×的視野，每個(gè)視野隨機(jī)選取20個(gè)細(xì)胞核檢測(cè)灰度值。

1.3觀察指標(biāo)

細(xì)胞核內(nèi)棕黃色顆粒即為AR陽(yáng)性顆粒；染色結(jié)果陰性（-）為：經(jīng)過(guò)上述處理后細(xì)胞核內(nèi)無(wú)淡黃色或棕黃色顆粒出現(xiàn)，或陽(yáng)性比例＜5%；AR陽(yáng)性表達(dá)（+）：腫瘤細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色顆粒占5%～25%；AR中等陽(yáng)性表達(dá)（++）：棕黃色顆粒占比例為26%～50%；AR強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)（+++）：棕黃色顆粒比例為50%以上。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

研究中所有數(shù)據(jù)均使用S-PSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜ 0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組患者血清睪酮及前列腺雄激素受體表達(dá)比較

兩組患者行血清睪酮及前列腺雄激素受體測(cè)定，對(duì)照組血清睪酮水平為（5.89±1.32）ng/ml低于實(shí)驗(yàn)組的（6.07±1.16）ng/ml，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；實(shí)驗(yàn)組前列腺雄激素受體陽(yáng)性率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表1）

表1　兩組患者血清睪酮值及前列腺雄激素受體表達(dá)情況比較

2.2兩組患者前列腺雄激素受體表達(dá)組織病理學(xué)圖像

組織病理切片染色顯示，前列腺癌組織中AR陽(yáng)性顆粒表達(dá)于前列腺上皮細(xì)胞細(xì)胞核內(nèi)。（圖1）

圖1　兩組患者前列腺雄激素受體表達(dá)組織病理學(xué)圖像

2.3AR表達(dá)與前列腺癌伴精索靜脈曲張患者臨床分期的相關(guān)性分析

前列腺癌伴精索靜脈曲張患者AR表達(dá)情況與臨床分期行Spearman相關(guān)性分析，得r=-0.318，P＜0.05，即AR的表達(dá)與伴精索靜脈曲張的前列腺癌臨床分期呈負(fù)相關(guān)。（表2）

表2　前列腺雄激素受體表達(dá)與實(shí)驗(yàn)組臨床分期相關(guān)性分析

3　討論

隨著人們平均壽命的延長(zhǎng)及飲食結(jié)構(gòu)的變化，前列腺疾病成為困擾中老年男性的一大疾?。?］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在美國(guó)男性所發(fā)腫瘤疾病中，前列腺癌的比例位居首位。對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)飲食結(jié)構(gòu)可能與前列腺癌的發(fā)生與預(yù)后有關(guān)，尤其食用富含動(dòng)物脂肪類食物的飲食習(xí)慣［6］。而前列腺疾病本身的臨床癥狀不典型，因此首診檢出率較低，其中大部分是以排尿異?；虿±硇怨钦燮鸩《驮\；精索靜脈曲張亦是目前中老年男性極常見(jiàn)的疾病，有研究報(bào)道其在前列腺癌的發(fā)病及發(fā)展中也有重要的促進(jìn)作用［7］。

睪酮屬于雄激素的一種，為血液循環(huán)中最主要的雄激素，95%由睪丸產(chǎn)生，僅5%來(lái)源于腎上腺［8］。睪酮在血液中極少部分游離存在，一半以上的睪酮與性激素結(jié)合蛋白結(jié)合成較穩(wěn)定復(fù)合物，40%左右的睪酮與白蛋白結(jié)合成不穩(wěn)定的復(fù)合物，這種不穩(wěn)定復(fù)合物的存在可以保證血清中始終有3%左右的睪酮為游離狀態(tài)而發(fā)揮生物學(xué)活性作用［9］。睪酮通過(guò)細(xì)胞內(nèi)外濃度差以被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)形式進(jìn)入前列腺細(xì)胞，在前列腺細(xì)胞內(nèi)大部分睪酮在一種叫做5a還原酶的催化下生成雙氫睪酮，雙氫睪酮通過(guò)與雄激素受體AR以配體結(jié)合方式形成AR-DHT復(fù)合物，該復(fù)合物能與細(xì)胞內(nèi)特定DNA片段結(jié)合引發(fā)基因復(fù)制蛋白質(zhì)合成，最終致前列腺組織的增生［10］。

本研究對(duì)比分析了是否伴發(fā)精索靜脈曲張的前列腺癌患者血清睪酮水平、前列雄激素受體的含量。所有患者行血清睪酮測(cè)定，前列腺癌不伴精索靜脈曲張組與前列腺癌伴精索靜脈曲張組的血清睪酮水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而兩組患者前列腺標(biāo)本均行組織病理學(xué)染色結(jié)果顯示前列腺癌伴精索靜脈曲張患者組前列腺雄激素受體的陽(yáng)性表達(dá)率低于單純前列腺癌組。由此可以說(shuō)明前列雄激素受體表達(dá)在前列腺癌精索靜脈曲張的發(fā)病及病情進(jìn)展中可能發(fā)揮了一定的作用，通過(guò)對(duì)前列腺癌伴精索靜脈曲張患者AR表達(dá)情況與臨床分期行Spearman相關(guān)性分析，我們得出AR的表達(dá)與伴發(fā)精索靜脈曲張的前列腺癌臨床分期呈負(fù)相關(guān)，與國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究結(jié)果相符［11～12］，提示AR可能與其他可溶性細(xì)胞因子介導(dǎo)的信號(hào)通路發(fā)生相互作用，對(duì)前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移產(chǎn)生影響。而AR也可能存在作為靶向治療靶點(diǎn)的重要價(jià)值，這有待于進(jìn)一步研究。

綜上所述，前列腺雄激素受體表達(dá)在前列腺癌精索靜脈曲張的發(fā)病及病情進(jìn)展中發(fā)揮了重要的作用，前列腺雄激素受體表達(dá)與患者的臨床分期呈負(fù)相關(guān)，可作為判斷伴發(fā)精索靜脈曲張前列腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)。

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Correlation between serum testosterone，expression of androgen receptors and varicocele in prostate cancer patients

ZHAO Shu-run1#MENG Lin2
1Department of Urology，the People's Hospital of Wenshang County，Jining 272501，Shandong，China
2Department of Urology，Affiliated Hospital of Jining Medical University，Jining 272029，Shandong，China

ObjectiveTo study the correlation between serum testosterone levels，expression of androgen receptor（AR）and varicocele，and discuss their role in clinical diagnosis and treatment of prostate cancer.Method64 cases of treatment-na?ve prostate cancer patients were included in the study，in which 32 cases with prostate cancer+varicocele and another 32 cases without varicocele were stratified into study group or control group，respectively.Patient's baseline characteristics，serum testosterone levels，prostate AR and pathological morphology were observed.Result The serum testosterone level was（5.89±1.32）ng/ml in control group，and（6.07±1.16）ng/ml in study group，with no significant difference observed（P＞0.05）.The positive expression rate of AR was 62.5%in study group，and was lower than of the control group at 84.4%（P＜0.05）.A negative correlation was observed between the expression level of AR and the clinical staging of prostate cancer（r=-0.318，P＜0.05）.ConclusionThe expression of androgen receptor plays an important role in the pathogenesis and progression of varicocele in prostate cancer.

testosterone；androgen receptors；prostate cancer；varicocele

R737.25

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.07.16

2016-03-04）

（corresponding author），郵箱：zsrauu@163.com