宋　尉

(山東省臨沂市康復(fù)醫(yī)院檢驗(yàn)科　276000)

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·經(jīng)驗(yàn)交流·

ACL-7000血凝儀對(duì)兩種纖維蛋白原測(cè)定方法的評(píng)價(jià)及應(yīng)用

宋尉

(山東省臨沂市康復(fù)醫(yī)院檢驗(yàn)科276000)

目的比較ACL-7000血凝儀上Von Clauss法與PT-der法測(cè)定纖維蛋白原(FIB)的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法用Von Clauss法和PT-der法分別對(duì)147例標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果當(dāng)FIB水平為1.00～3.00 g/L時(shí)，兩種方法結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。當(dāng)FIB水平>3.00 g/L時(shí)，PT-der法所測(cè)結(jié)果明顯高于Von Clauss法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論P(yáng)T-der法無(wú)需單獨(dú)測(cè)定，節(jié)約成本，節(jié)省時(shí)間，而Von Clauss法準(zhǔn)確性高，特異性強(qiáng)。用ACL-7000血凝儀測(cè)定FIB時(shí)，可將兩種方法結(jié)合獲得準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)的FIB結(jié)果。

纖維蛋白原；全自動(dòng)血凝儀；Von Clauss法；PT-der法

纖維蛋白原(FIB)是一種由肝臟合成的具有凝血功能的蛋白質(zhì)，是纖維蛋白的前體,是目前15種凝血蛋白中含量最高的一種，正常參考值為2.0～4.0 g/L。FIB增高可見(jiàn)于糖尿病、急性心肌梗死、急性傳染病、結(jié)締組織病、急性腎炎、灼傷、多發(fā)性骨髓瘤、休克、大手術(shù)后、妊娠高血壓綜合征、急性感染、惡性腫瘤及血栓前狀態(tài)等，降低見(jiàn)于先天性低或無(wú)纖維蛋白原血癥、遺傳性纖維蛋白原異常、彌散性血管內(nèi)凝血、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎及肝硬化等。目前實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)血凝儀都有使用Von Clauss法與PT-der法測(cè)定FIB的功能。本文采用ACL-7000血凝儀對(duì)這兩種方法進(jìn)行比較評(píng)價(jià)，希望能夠在日常工作中對(duì)二者進(jìn)行合理應(yīng)用，找到適合本實(shí)驗(yàn)室的方法?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源本院門(mén)診及住院患者147例，標(biāo)本無(wú)溶血、黃疸、脂血等異常情況。

1.2儀器與試劑Backman Coulter公司ACL-7000血凝儀及配套試劑，凝血活酶(批號(hào)8469810，ISI值為0.87)，凝血酶(批號(hào)8469110)。

1.3方法

1.3.1分析前方法采集患者靜脈血1.8 mL加入含109 mmol/L的枸櫞酸鈉0.2 mL于配套真空采血管中，以3 000 r/min常溫離心10 min，分離血漿，2 h內(nèi)檢測(cè)完成。

1.3.2測(cè)定方法PT-der法和Von Clauss法，嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè)。

2　結(jié)　　果

2.1兩種方法測(cè)定結(jié)果的一致性分析對(duì)147例患者的血漿標(biāo)本分別用兩種方法同時(shí)測(cè)定FIB水平，根據(jù)PT-der法測(cè)得FIB的不同水平分成4組，與Von Clauss法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)及回歸分析。當(dāng)FIB水平為1.00～3.00 g/L時(shí)，PT-der法比Von Clauss法測(cè)定結(jié)果高，但兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),當(dāng)FIB水平>3.00 g/L時(shí)，兩種檢測(cè)方法測(cè)定的結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1　　FIB不同水平下兩種方法測(cè)定結(jié)果比較±s，g/L)

注：回歸方程中X為PT-der法測(cè)定值，Y為Von Clauss法測(cè)定值。

2.2回歸方程驗(yàn)證有差異的FIB結(jié)果分別隨機(jī)抽取PT-der法測(cè)得的FIB水平為3.00～4.00 g/L的標(biāo)本25例和>4.00 g/L的標(biāo)本25例，將其結(jié)果代入表1中相對(duì)應(yīng)組的回歸方程中，算出Von Clauss法的FIB計(jì)算值，并與該標(biāo)本Von Clauss法實(shí)測(cè)值進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)。當(dāng)PT-der法測(cè)定的FIB水平>3.00 g/L時(shí)，計(jì)算值與實(shí)測(cè)值結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2　　FIB回歸方程Von Clauss法計(jì)算值與實(shí)測(cè)值比較

3　討　　論

目前FIB測(cè)定的方法很多，可以分為功能測(cè)定法、免疫測(cè)定法和物理化學(xué)測(cè)定法3大類(lèi)。國(guó)內(nèi)還沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)方法出臺(tái)，但各臨床實(shí)驗(yàn)室配備的全自動(dòng)血凝儀上都具備Von Clauss法和PT-der法這兩種測(cè)定FIB的方法。Von Clauss法是美國(guó)國(guó)家臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)推薦的FIB常規(guī)測(cè)定方法[1]。Von Clauss法的原理是根據(jù)血漿中的FIB在過(guò)量凝血酶的作用下，由可溶的蛋白轉(zhuǎn)變成不可溶的聚合物，從而形成纖維蛋白凝塊。血漿的凝固時(shí)間和FIB水平呈反比。PT-der法的原理為當(dāng)血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定完成時(shí)全部FIB均變成纖維蛋白，根據(jù)產(chǎn)生的濁度直接衍算出FIB水平。Von Clauss法是用凝血酶試劑直接測(cè)得，此法具有準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好、影響因素小的特點(diǎn)，但價(jià)格昂貴。PT-der法操作簡(jiǎn)單，不需額外消耗試劑和反應(yīng)盤(pán)，能夠節(jié)省試劑成本，對(duì)于一些中小型醫(yī)院的臨床實(shí)驗(yàn)室，可以將其作為常規(guī)方法來(lái)使用，但其檢測(cè)結(jié)果容易受到標(biāo)本的乳糜顆粒、黃疸、溶血等因素影響，其結(jié)果常常偏高。目前國(guó)內(nèi)對(duì)兩種測(cè)定方法的比較有較多報(bào)道，有報(bào)道認(rèn)為PT-der法與Von Clauss法在正常范圍內(nèi)的結(jié)果較為接近，而不在正常范圍內(nèi)的結(jié)果相差較大[2]，也有報(bào)道認(rèn)為兩種測(cè)定結(jié)果無(wú)論正常及異常范圍均有明顯差異[3]。

本文對(duì)147例標(biāo)本的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較，當(dāng)FIB測(cè)定水平在1.00～3.00 g/L時(shí)，Von Clauss法和PT-der法結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，當(dāng)FIB測(cè)定水平>3.00 g/L時(shí)，兩種方法測(cè)定結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。因此在使用ACL-7000全自動(dòng)血凝儀進(jìn)行FIB測(cè)定時(shí)，可以先用PT-der法得出FIB水平，當(dāng)水平在1.00～3.00 g/L時(shí)可直接報(bào)告結(jié)果，當(dāng)水平>3.00 g/L時(shí)，再進(jìn)一步用Von Clauss法復(fù)查報(bào)告結(jié)果。但當(dāng)標(biāo)本存在脂濁、溶血及黃疸等影響因素時(shí)應(yīng)直接使用Von Clauss法。結(jié)合兩種方法的優(yōu)點(diǎn)，可以使FIB檢測(cè)既節(jié)省試劑成本又縮短測(cè)定時(shí)間，提高工作效率。

此外當(dāng)PT-der法測(cè)定的FIB水平>3.00 g/L時(shí)，本文利用相應(yīng)組的回歸方程算出了Von Clauss法的計(jì)算值，即把PT-der法的FIB值通過(guò)回歸方程來(lái)進(jìn)行了校正，Von Clauss法的計(jì)算值與實(shí)測(cè)值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。因?yàn)楫惓?biāo)本有限，沒(méi)有能夠進(jìn)行更多臨床標(biāo)本的驗(yàn)證，在實(shí)際工作中能否直接利用PT-der法和回歸方程來(lái)計(jì)算出FIB值，還需要其他臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行更加細(xì)致的驗(yàn)證[4]。如果此法具備臨床實(shí)用價(jià)值，會(huì)給FIB檢測(cè)提供極大的便利，適用于中小型醫(yī)院的臨床實(shí)驗(yàn)室。

[1]CLSI.H30-A Procedure for the determination of fibrinogen in plasma:Approved Guideline[S].Wanye，PA:CLSI,1999：99.

[2]馮彩蓮，康志君，李詩(shī)韻，等．Sysmex CA1500全自動(dòng)血凝儀纖維蛋白原兩種測(cè)定方法的應(yīng)用比較[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10(1)：43-44．

[3]戴慶忠，孫昌君，秦素娟．某全自動(dòng)血凝儀對(duì)兩種纖維蛋白原測(cè)定方法的評(píng)價(jià)[J]．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(2)：211-212．

[4]蘇奶助，溫燕芳．全自動(dòng)血液凝固分析儀兩種纖維蛋白原測(cè)定方法的評(píng)價(jià)及其應(yīng)用[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6(24)：2104-2105．

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.062

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1673-4130(2016)17-2493-02

2016-03-23

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